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儿童肾母细胞瘤相关的易感综合征筛查与相应的肾母细胞瘤治疗进展

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中华小儿外科杂志 2024年第2期45卷 164-169页

作者：孙中文王富强徐青雨王慧智池成涛马志牡丹江医学院牡丹江157011 河南宏力医院心胸外科新乡453499 牡丹江医学院附属红旗医院小儿外科牡丹江157011 牡丹江医学院附属红旗医院妇产科牡丹江157011

肾母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一,约占儿童肿瘤的7%。其中10%~17%的肾母细胞瘤与肿瘤易感综合征(cancer predisposition syndrome,CPS)有关,此类肾母细胞瘤发病更早,恶性度及双侧发病率更高。目前非易感型综合征的肾母细胞瘤的治... 详细信息

肾母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一,约占儿童肿瘤的7%。其中10%~17%的肾母细胞瘤与肿瘤易感综合征(cancer predisposition syndrome,CPS)有关,此类肾母细胞瘤发病更早,恶性度及双侧发病率更高。目前非易感型综合征的肾母细胞瘤的治疗生存率可达90%以上,治疗方案包括手术及联合放化疗,而易感型综合征肾母细胞瘤治愈成功率较低,为了保留肾单位、改善预后,其治疗也各不相同。与肾母细胞瘤相关的CPS有WAGR综合征、Denys-Drash综合征和Beckwith-Wiedemann综合征等。目前国内医师缺少对肾母细胞瘤相关的易感综合征预防及诊断的认识,本文通过回顾相关文献,对肾母细胞瘤相关的易感综合征的筛查和相应的肾母细胞瘤治疗方法进行综述。

关键词：肾母细胞瘤综合征筛查治疗

异钩藤碱调节EGFR/FAK信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-FU耐药性的影响

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药物评价研究 2024年第6期47卷 1267-1274页

作者：李海燕栗昭生赵龙金春花张鼐鹏牡丹江医学院附属红旗医院药学部牡丹江医学院第一临床医学院牡丹江医学院附属红旗医院神经内科牡丹江医学院附属红旗医院普外二科

目的探讨异钩藤碱调节表皮生长因子受体（EGFR）/局部黏着斑激酶（FAK）信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药性的影响。方法取对数生长期的HepG2细胞，分为对照组，异钩藤碱低、中、高浓度(32.5、65.0、130.0μmol... 详细信息

目的探讨异钩藤碱调节表皮生长因子受体（EGFR）/局部黏着斑激酶（FAK）信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药性的影响。方法取对数生长期的HepG2细胞，分为对照组，异钩藤碱低、中、高浓度(32.5、65.0、130.0μmol·L-1)组，异钩藤碱(130μmol·L-1)+EGFR激活剂NSC228155(2μmol·L-1)组；对数生长期的5-FU耐药肝癌细胞系HepG2/5-FU分为对照组、异钩藤碱(130μmol·L-1)组、5-FU(60μmol·L-1)组、异钩藤碱(130μmol·L-1)+5-FU(60μmol·L-1)组、异钩藤碱(130μmol·L-1)+5-FU(60μmol·L-1)+NSC228155(2μmol·L-1)组。给药处理24 h，对照组不给药。EdU染色、CCK-8检测HepG2或HepG2/5-FU细胞增殖；划痕实验检测HepG2或HepG2/5-FU细胞迁移；Western blotting检测细胞中细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、迁移侵袭增强子因子1（MIEN1）、P-糖蛋白（P-gp）、p-EGFR、p-FAK蛋白表达。结果与对照组相比，异钩藤碱低、中、高浓度组EdU阳性率、吸光度(A450)值、划痕愈合率、CyclinD1、MIEN1、p-EGFR、p-FAK蛋白表达显著降低，且呈浓度相关性（P<0.05）；与异钩藤碱130.0μmol·L-1组相比，异钩藤碱+NSC228155组HepG2细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、 CyclinD1、 MIEN1、 p-EGFR、 p-FAK蛋白表达显著升高（P<0.05）。与对照组相比，5-FU组HepG2/5-FU细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK蛋白表达显著降低（P<0.05）；与异钩藤碱组、5-FU组相比，异钩藤碱+5-FU组HepG2/5-FU细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK蛋白表达降低（P<0.05）；与异钩藤碱+5-FU组相比，异钩藤碱+5-FU+NSC228155组HepG2/5-FU细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK蛋白显著上调（P<0.05）。结论异钩藤碱抑制HepG2细胞增殖、迁移及降低5-FU耐药性的机制可能与阻断EGFR/FAK通路有关。

关键词：异钩藤碱肝癌表皮生长因子受体/局部黏斑激酶(EGFR/FAK)通路增殖迁移 5-FU耐药性 P-糖蛋白(P-gp)

基于NF-κB/CREB/RUNX2通路探讨蒲公英水提物对肾结石大鼠肾脏的保护作用

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中草药 2024年第14期55卷 4796-4802页

作者：闫本纯李宏伟郭青鑫房小淇代启杨南锡浩张智慧邸彦橙田河牡丹江医学院附属红旗医院泌尿外科黑龙江牡丹江157000 牡丹江医学院第一临床医学院黑龙江牡丹江157011

目的基于核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(cyclic adenosine monophosphate response element blinding protein,CREB)/核心结合蛋白因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX2)通路探讨蒲公英水提物对肾结石大鼠肾脏的保护作用。方法通过向饮用水中加入2%氯化铵、1%乙二醇制备肾结石大鼠,将造模大鼠随机分为模型组、蒲公英水提物(低、高剂量100、200 mg/kg)组、排石颗粒(100 mg/kg)组和蒲公英水提物(200 mg/kg)+NF-κB激活剂(佛波酯,5 mg/kg)组,并以正常大鼠为对照组。给予药物干预后,检测大鼠肾功能指标[尿素氮(urea nitrogen,BUN)、血肌酐(blood creatinine,Scr)]、尿生化指标(尿蛋白、Ca^(2+))、肾脏指数、血清中炎性因子[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6、IL-1β)]、肾组织中氧化应激指标[丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)]水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理变化;TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡情况;Western blotting检测肾组织中NF-κB/CREB/RUNX2通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中BUN、Scr、尿蛋白、Ca^(2+)、IL-6、IL-1β水平以及肾脏指数、肾组织MDA水平、细胞凋亡率、肾组织p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-CREB/CREB、RUNX2表达均显著升高(P<0.05),肾组织SOD活性显著降低(P<0.05)。与模型组比较,蒲公英水提物各剂量组和排石颗粒组血清中BUN、Scr、尿蛋白、Ca^(2+)、IL-6、IL-1β水平以及肾指数、肾组织MDA水平、细胞凋亡率、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-CREB/CREB、RUNX2表达显著降低(P<0.05),肾组织SOD活性显著升高(P<0.05)。给予NF-κB激活剂后,蒲公英水提物对以上指标的作用均被显著逆转(P<0.05)。结论蒲公英水提物可通过调节NF-κB/CREB/RUNX2通路保护肾结石大鼠肾脏。

关键词：蒲公英水提物芦丁总黄酮 NF-κB/CREB/RUNX2通路肾结石肾脏

水蛭素调节RhoA/ROCK信号通路对脑梗死大鼠神经元细胞凋亡和炎症反应的影响

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中国免疫学杂志 2024年第08期 1640-1645页

作者：那丽莎曲娜于雪栗昭生牡丹江医学院附属红旗医院药学部牡丹江医学院附属红旗医院神经内科

目的：探讨水蛭素（HRD）调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（ROCK）信号通路对脑梗死大鼠神经元细胞凋亡和炎症反应的影响。方法：将SD大鼠分为Ct组、Model组、低剂量HRD组（HRD-L组，13.33 mg/kg）、高剂量... 详细信息

目的：探讨水蛭素（HRD）调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（ROCK）信号通路对脑梗死大鼠神经元细胞凋亡和炎症反应的影响。方法：将SD大鼠分为Ct组、Model组、低剂量HRD组（HRD-L组，13.33 mg/kg）、高剂量HRD组（HRD-H组，26.66 mg/kg）、阳性对照尼莫地平组（NMDP组，40 mg/kg）、U-46619(RhoA激动剂，0.03 mg/kg)组、HRD-H+U-46619组（26.66 mg/kg+0.03 mg/kg），每组24只。除Ct组外，其他组大鼠均利用改良线栓法构建脑梗死模型，Ct组大鼠仅暴露血管，不进行切口和插线栓。建模成功1 h后，进行给药处理。给药1次/d，持续4周。Zea-Longa法评估大鼠神经功能；干湿重法检测大鼠脑组织含水量；2,3,5-三苯基四唑氯化物（TTC）染色测定大鼠脑梗死体积；TUNEL染色检测大鼠海马CA1区神经元凋亡；ELISA检测大鼠海马组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平；Western blot检测大鼠海马组织中裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达。结果：与Ct组比较，Model组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积百分比、神经元凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、Cleaved-Caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达升高（P<0.05）；与Model组比较，HRD-L组、HRD-H组、NMDP组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积百分比、神经元凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、Cleaved-Caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达降低，而U-46619组对应指标变化呈相反趋势（P<0.05）；与HRD-H组比较，HRD-H+U-46619组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积百分比、神经元凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、Cleaved-Caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达升高（P<0.05）。结论：HRD可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路抑制脑梗死大鼠神经元凋亡及炎症反应。

关键词：水蛭素脑梗死炎症 Ras同源基因家族成员A/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶信号通路细胞凋亡

异钩藤碱对急性脑梗死大鼠认知障碍的影响及机制研究

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中国脑血管病杂志 2024年第7期21卷 444-454页

作者：那丽莎陈毅超张凯栗昭生牡丹江医学院附属红旗医院药学部 157000 牡丹江医学院附属红旗医院神经内科 157000

目的探讨异钩藤碱对急性脑梗死大鼠认知障碍的影响及相应机制。方法将144只SD大鼠按照随机数字表法随机分为假手术组、急性脑梗死组、异钩藤碱低剂量组、异钩藤碱高剂量组、尼莫地平组、异钩藤碱高剂量+干扰素基因刺激蛋白(STING)激动剂... 详细信息

目的探讨异钩藤碱对急性脑梗死大鼠认知障碍的影响及相应机制。方法将144只SD大鼠按照随机数字表法随机分为假手术组、急性脑梗死组、异钩藤碱低剂量组、异钩藤碱高剂量组、尼莫地平组、异钩藤碱高剂量+干扰素基因刺激蛋白(STING)激动剂(ADU-S100)组,每组24只。除假手术组外,其他各组大鼠均采用线栓闭塞大脑中动脉法构建急性脑梗死大鼠模型,假手术组仅游离右侧颈外动脉、颈总动脉和颈内动脉,不做插入线栓处理。建模成功后立即给药,异钩藤碱低剂量组和异钩藤碱高剂量组大鼠分别灌胃5 mg/kg、20 mg/kg异钩藤碱,且均需腹腔注射等量的等渗盐水;尼莫地平组大鼠需灌胃30 mg/kg尼莫地平,且还需腹腔注射等量的等渗盐水;异钩藤碱高剂量+ADU-S100组大鼠需灌胃20 mg/kg异钩藤碱且腹腔注射20 mg/kg ADU-S100;假手术组、急性脑梗死组大鼠均需灌胃10 ml/kg与腹腔注射10 ml/kg的等渗盐水。给药1次/d,持续2周。末次给药处理24 h后,采用Zela-Longa法对所有大鼠进行神经功能评分,并进行Morris水迷宫实验,记录大鼠的逃避潜伏期及原平台象限停留次数。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;检测各组大鼠脑组织含水量;采用2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色测定各组大鼠脑梗死体积;采用伊文思蓝检测各组大鼠血-脑屏障通透性;采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大鼠脑组织中闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)信使核糖核酸(mRNA)表达;采用免疫印迹检测大鼠脑组织中STING、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)蛋白表达,并进行组间比较。结果(1)与假手术组相比,急性脑梗死组末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.96±0.32)分比0分]、脑组织含水量[(86.9±3.2)%比(71.8±3.1)%]、血清TNF-α[(86.7±3.5)ng/L比(35.6±1.7)ng/L]、IL-6[(167.8±6.1)ng/L比(50.2±2.2)ng/L]、脑梗死体积[(28.6±1.3)mm 3比0 mm 3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.57±0.13)g/L比(0.96±0.08)g/L]及STING[(1.83±0.16)比(0.86±0.08)]、p-TBK1[(0.89±0.07)比(0.41±0.03)]、p-IRF3[(0.67±0.05)比(0.13±0.01)]蛋白表达均升高,脑组织中ZO-1 mRNA[(0.45±0.04)比(1.00±0.00)]、occludin mRNA[(0.23±0.02)比(1.00±0.00)]表达均降低,逃避潜伏期延长[(33.6±1.6)s比(12.3±0.5)s],原平台象限停留次数减少[(5.9±0.2)次比(15.7±0.4)次],组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。(2)与急性脑梗死组比较,异钩藤碱低剂量组、异钩藤碱高剂量组、尼莫地平组大鼠末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.37±0.21)、(1.14±0.17)、(1.18±0.13)分比(2.96±0.32)分]、脑组织含水量[(81.8±3.0)%、(74.9±3.0)%、(74.3±2.9)%比(86.9±3.2)%]、血清TNF-α[(71.1±1.4)、(43.4±2.0)、(41.5±1.9)ng/L比(86.7±3.5)ng/L]、IL-6[(129.8±5.4)、(81.2±3.8)、(80.0±3.6)ng/L比(167.8±6.1)ng/L]、脑梗死体积[(21.7±1.0)、(10.5±0.5)、(10.7±0.5)mm 3比(28.6±1.3)mm 3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.39±0.12)、(1.16±0.10)、(1.18±0.19)g/L比(1.57±0.13)g/L]及STING[(1.50±0.14)、(1.02±0.11)、(1.01±0.09)比(1.83±0.16)]、p-TBK1[(0.75±0.05)、(0.54±0.04)、(0.52±0.05)比(0.89±0.07)]、p-IRF3[(0.51±0.05)、(0.25±0.02)、(0.27±0.02)比(0.67±0.05)]蛋白表达均降低,脑组织中ZO-1 mRNA[(0.58±0.05)、(0.87±0.07)、(0.89±0.09)比(0.45±0.04)]、occludin mRNA[(0.36±0.03)、(0.71±0.06)、(0.69±0.05)比(0.23±0.02)]表达均升高,逃避潜伏期缩短[(28.6

关键词：异钩藤碱干扰素基因刺激蛋白/TANK结合激酶1/干扰素调节因子3信号通路急性脑梗死认知障碍

利拉鲁肽调控Nrf2/ARE介导的焦亡通路减轻2型糖尿病大鼠心肌损伤的机制研究

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中国免疫学杂志 2024年第2期40卷 256-260页

作者：庄天微帅天姣郭长秀谢伟王彤彤牡丹江医学院附属红旗医院内分泌科牡丹江157000 牡丹江医学院附属红旗医院眼科牡丹江157000 黑龙江省牡丹江林业中心医院骨科牡丹江157011

目的:探究利拉鲁肽调控核因子E2相关转录因子2(Nrf2)、抗氧化反应原件(ARE)对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌细胞焦亡的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、T2DM组、利拉鲁肽低、中、高剂量组、高剂量+Nrf2抑制组,10只/组;给予高糖高脂饲... 详细信息

目的:探究利拉鲁肽调控核因子E2相关转录因子2(Nrf2)、抗氧化反应原件(ARE)对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌细胞焦亡的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、T2DM组、利拉鲁肽低、中、高剂量组、高剂量+Nrf2抑制组,10只/组;给予高糖高脂饲料,腹腔注射链脲佐菌素建立T2DM大鼠模型,对照组大鼠给予基础饲料,注射等剂量柠檬酸缓冲液,造模成功后,各处理组腹腔注射相应剂量药物,对照组及T2DM组注射等量生理盐水(共12周);血糖仪检测空腹血糖水平;ELISA检测大鼠血清IL-1β、IL-18水平;HE染色观察心肌组织病理学情况;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况;Western blot检测心肌中焦亡相关蛋白、Nrf2、血红素氧化酶1(HO-1)表达水平。结果:相较于对照组,T2DM组大鼠空腹血糖、血清IL-18及IL-1β水平、心肌组织病理学程度、心肌细胞凋亡水平、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1β、IL-18表达显著升高,Nrf2、HO-1表达水平显著降低(P<0.05);相较于T2DM组,中、高剂量组大鼠空腹血糖、血清IL-18及IL-1β水平、心肌组织病理学程度、心肌细胞凋亡水平、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18表达水平显著降低,Nrf2、HO-1表达水平显著升高(P<0.05);相较于高剂量组,高剂量+Nrf2抑制组大鼠空腹血糖、血清IL-18及IL-1β水平、心肌组织病理学程度、心肌细胞凋亡水平、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18表达水平显著升高,Nrf2、HO-1表达水平显著降低(P<0.05)。结论:利拉鲁肽通过调控Nrf2/ARE通路,促进Nrf2、HO-1蛋白表达,抑制ASC蛋白表达,从而改善T2DM大鼠心肌细胞焦亡。

关键词：利拉鲁肽核因子E2相关转录因子2 抗氧化反应原件心肌细胞焦亡 2型糖尿病

大动脉粥样硬化与脑小血管病影像学关系的研究进展

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第7期26卷 852-854页

作者：李男梁晏铭孙维洋史晓航许珈铭赵金义李洪义邢健牡丹江医学院 157011 牡丹江医学院附属红旗医院磁共振科

大动脉粥样硬化(LAA)是脑血管病发生的重要原因,与认知障碍及脑卒中复发密切相关[1]。临床发现LAA与脑小血管病(CSVD)常同时存在,脑大血管与小血管虽然解剖结构和生理功能不同,但是二者共同构成了脑循环血管网具有结构上的连续性,大血... 详细信息

大动脉粥样硬化(LAA)是脑血管病发生的重要原因,与认知障碍及脑卒中复发密切相关[1]。临床发现LAA与脑小血管病(CSVD)常同时存在,脑大血管与小血管虽然解剖结构和生理功能不同,但是二者共同构成了脑循环血管网具有结构上的连续性,大血管血流动力学改变可能导致下游小血管受损。因此,从理论上来说,二者在疾病发生发展中可能有一定的相关性。我们将阐述颅内外LAA性狭窄和斑块特征与CSVD影像学标志关系的研究现状,旨在帮助认识LAA与CSVD的病理过程和发病机制,为临床防治CSVD提供更多的参考。

关键词：大脑小血管疾病动脉粥样硬化颅内动脉粥样硬化性狭窄磁共振血管成像

雌激素对绝经期2型糖尿病女性患者血糖波动的影响

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中国老年学杂志 2024年第14期 3349-3352页

作者：栾双宇郭长秀王信毕娜娜刘艳王德平牡丹江医学院牡丹江医学院附属红旗医院内分泌代谢科

目的探讨雌激素(E)对绝经期2型糖尿病女性患者血糖波动的影响。方法选取2型糖尿病合并围绝经期情绪障碍女性患者60例，首先进行血糖波动影响因素的相关性分析；然后进行E替代治疗，随机分成对照组和治疗组各30例，两组均给予常规治疗... 详细信息

目的探讨雌激素(E)对绝经期2型糖尿病女性患者血糖波动的影响。方法选取2型糖尿病合并围绝经期情绪障碍女性患者60例，首先进行血糖波动影响因素的相关性分析；然后进行E替代治疗，随机分成对照组和治疗组各30例，两组均给予常规治疗方案，在此情况下，对照组给予复合维生素B进行安慰剂治疗；治疗组给予替勃龙(商品名称：利维爱；华润紫竹药业有限公司)口服，2.5 mg/次，1次/d。随访3个月后对两组患者进行疗效分析。结果血糖波动与E水平呈负相关，与体质量指数(BMI)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)呈独立正相关(P0.05)。结论 E水平是引起绝经期2型糖尿病女性患者血糖波动增加的独立危险因素，且患者的BMI、LDL-C也会影响血糖波动；E替代治疗可改善患者围绝经期情绪障碍及血糖波动水平，且不会产生明显的不良反应。

关键词：血糖波动雌激素(E) E替代治疗

环状RNA_PLEKHM3通过miR-320/KLF4轴调控宫颈癌细胞上皮间质转化

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安徽医科大学学报 2024年第3期59卷 403-412页

作者：张亚男崔莹王天娇杜忠蕾牡丹江医学院附属红旗医院妇产科妇科病区牡丹江157000

目的探讨环状RNA含普列克底物蛋白同源域的家族M3成员(PLEKHM3)(circRNA_PLEKHM3)通过调控微小RNA-320(miR-320)/畸变样因子4(KLF4)轴在宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)行为中的作用与机制。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌细胞H... 详细信息

目的探讨环状RNA含普列克底物蛋白同源域的家族M3成员(PLEKHM3)(circRNA_PLEKHM3)通过调控微小RNA-320(miR-320)/畸变样因子4(KLF4)轴在宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)行为中的作用与机制。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌细胞Hela和CaSki中circRNA_PLEKHM3的表达水平;RNA荧光原位杂交检测circRNA_PLEKHM3在人宫颈癌上皮细胞CaSki中的定位;双荧光素酶报告基因实验检测circRNA_PLEKHM3和miR-320的靶向关系,以及miR-320和KLF4的靶向关系;对CaSki细胞过表达circRNA_PLEKHM3;另外设置三组,分别为在过表达circRNA_PLEKHM3的基础上过表达miR-320、沉默KLF4,以及在过表达miR-320的基础上沉默KLF4。qRT-PCR检测CaSki中miR-320的表达水平;Western blot检测CaSki细胞中KLF4和EMT标志物上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达;Transwell实验检测细胞迁移数和侵袭细胞数。结果circRNA_PLEKHM3在Hela和CaSki中的表达均降低(P<0.05),其主要定位在细胞质中;双荧光素酶报告基因实验显示miR-320和circRNA_PLEKHM3存在靶向关系,KLF4和miR-320存在靶向关系;过表达circRNA_PLEKHM3抑制miR-320和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9的蛋白表达,上调E-cadherin的蛋白表达,减少细胞迁移和侵袭数(P<0.05);在过表达circRNA_PLEKHM3的基础上过表达miR-320或沉默KLF4均能够促进miR-320和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达,上调E-cadherin蛋白的表达,减少迁移和侵袭细胞数(P<0.05);然而在过表达miR-320的基础上沉默KLF4,KLF4和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达受到抑制,E-cadherin蛋白的表达上调,细胞迁移和侵袭数减少(P<0.05)。结论circRNA_PLEKHM3过表达可能通过miR-320/KLF4轴调控宫颈癌细胞的EMT。

关键词： cirRNA_PLEKHM3 miRNA-320 畸变样因子4 宫颈癌细胞上皮间质转化迁移侵袭