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干细胞抗卵巢颗粒细胞衰老的作用机制及进展

中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5414-5421页

作者：林美玉赵玺龙高景赵晶阮光萍解放军联勤保障部队第九二〇医院基础医学实验室云南省昆明市650032 干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程研究中心云南省昆明市650032 云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省昆明市650032

背景:干细胞疗法作为一种新兴的治疗手段,有望改善卵巢环境,延缓卵巢颗粒细胞的衰老,为高龄妊娠女性带来新的希望。目的:综述干细胞抗卵巢颗粒细胞衰老的机制及研究进展。方法:检索中国知网和PubMed数据库中关于干细胞抗卵巢颗粒细胞衰... 详细信息

背景:干细胞疗法作为一种新兴的治疗手段,有望改善卵巢环境,延缓卵巢颗粒细胞的衰老,为高龄妊娠女性带来新的希望。目的:综述干细胞抗卵巢颗粒细胞衰老的机制及研究进展。方法:检索中国知网和PubMed数据库中关于干细胞抗卵巢颗粒细胞衰老的文献,以“干细胞,卵巢颗粒细胞,衰老”为中文检索词,以“stem cells,ovary granulosa cells,aging”为英文检索词,最终纳入67篇文献进行分析。结果与结论:①总结了5种卵巢颗粒细胞衰老的机制:DNA损伤和修复能力下降、氧化应激、线粒体功能受损、炎症反应、激素水平变化;②整理了当前干细胞治疗卵巢颗粒细胞衰老的5种机制:促进增殖和抑制凋亡、分化潜能及再生能力、分泌因子、抗氧化、抗炎症反应和免疫调节;③目前有多种类型的干细胞可通过多种方式协同治疗卵巢颗粒细胞衰老,干细胞疗法在恢复女性生育能力方面具有广阔前景。

关键词：干细胞卵巢颗粒细胞衰老机制氧化应激抑制凋亡细胞因子抗氧化抗炎症反应

干扰和过表达端粒酶卡哈尔体蛋白1小鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性对比

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6616-6624页

作者：林书倩赵玺龙高景潘兴华李自安阮光萍解放军联勤保障部队第九二〇医院基础医学实验室云南省昆明市650032 干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程研究中心云南省昆明市650032 云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省昆明市650032

背景:随着年龄的增长,骨髓间充质干细胞的功能逐渐降低,延缓骨髓间充质干细胞自身衰老成为一项重要课题。目的:通过改变端粒酶卡哈尔体蛋白1(telomerase cajal body protein 1,TCAB1)基因的表达,探讨延缓骨髓间充质干细胞衰老的途径。方... 详细信息

背景:随着年龄的增长,骨髓间充质干细胞的功能逐渐降低,延缓骨髓间充质干细胞自身衰老成为一项重要课题。目的:通过改变端粒酶卡哈尔体蛋白1(telomerase cajal body protein 1,TCAB1)基因的表达,探讨延缓骨髓间充质干细胞衰老的途径。方法:细胞贴壁法培养小鼠骨髓间充质干细胞,应用重组慢病毒技术过表达或干扰骨髓间充质干细胞中的TCAB1基因,采用qPCR检测衰老相关基因P16、P21、P53、P27的表达,qPCR检测Telomere的表达判断端粒的相对长度;Western blot检测衰老蛋白P16、P21、P53、P27的表达;CCK-8法检测细胞增殖情况;Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况。结果与结论:过表达TCAB1基因骨髓间充质干细胞中衰老相关基因及蛋白的表达量下降,端粒相对长度增加,细胞增殖能力较强,细胞凋亡数量较少,细胞呈现年轻状态;干扰TCAB1基因骨髓间充质干细胞中衰老相关基因及蛋白的表达量上升,端粒相对长度缩短,细胞增殖能力较弱,细胞凋亡数量较多,细胞呈现衰老状态。以上结果表明,在适当范围内增加TCAB1的表达量,可以延缓细胞衰老的速度。

关键词：骨髓间充质干细胞端粒酶卡哈尔体蛋白1 衰老过表达干扰细胞增殖细胞凋亡工程化干细胞

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年轻和老年小鼠脂肪来源干细胞生物学特性对比

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4063-4068页

作者：林美玉姚翔高景赵玺龙潘兴华阮光萍解放军联勤保障部队第九二〇医院基础医学实验室云南省昆明市650032 干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程研究中心云南省昆明市650032 云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省昆明市650032

背景:脂肪来源干细胞具有抗衰老的作用,但来自不同年龄供者的脂肪来源干细胞是否有区别,还需深入研究。目的:对比老年和年轻小鼠脂肪来源干细胞的生物学特性。方法:分别从8周龄、14周龄C57BL小鼠脂肪组织中提取脂肪来源干细胞,对比分析... 详细信息

背景:脂肪来源干细胞具有抗衰老的作用,但来自不同年龄供者的脂肪来源干细胞是否有区别,还需深入研究。目的:对比老年和年轻小鼠脂肪来源干细胞的生物学特性。方法:分别从8周龄、14周龄C57BL小鼠脂肪组织中提取脂肪来源干细胞,对比分析老年和年轻小鼠脂肪来源干细胞的细胞周期、凋亡、增殖能力的差异,定量PCR和Western blot检测老年和年轻小鼠脂肪来源干细胞衰老相关P21、P27基因和蛋白的表达。结果与结论:与老年小鼠脂肪来源干细胞相比,年轻小鼠脂肪来源干细胞更有活力,形态更规则,凋亡更少,增殖更快,衰老相关P21、P27基因和蛋白表达量更低,说明年轻小鼠脂肪来源干细胞具有更好的抗衰老作用。

关键词：脂肪来源干细胞脂肪组织年轻老年小鼠抗衰老

脑机接口联合不同疗法治疗脑卒中患者肢体功能障碍：效果与机制分析

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中国组织工程研究 2025年

作者：王雪淞汪月徐岩曾雯慧卢文明唐兴坤陈文杰叶俊松赣南医科大学第一附属医院干细胞临床转化分中心赣南医科大学康复学院赣州市干细胞与再生医学重点实验室赣南医科大学护理学院江西省干细胞与再生医学重点实验室心脑血管疾病防治教育部重点实验室

背景：近年来，脑机接口技术在脑卒中患者的肢体功能障碍康复方面取得了可喜的成果。随着研究的不断深入以及临床上的广泛使用，脑机接口联合其他康复疗法改善患者的肢体功能障碍成为研究热点。目的：分析和总结脑机接口联合不同疗法对... 详细信息

背景：近年来，脑机接口技术在脑卒中患者的肢体功能障碍康复方面取得了可喜的成果。随着研究的不断深入以及临床上的广泛使用，脑机接口联合其他康复疗法改善患者的肢体功能障碍成为研究热点。目的：分析和总结脑机接口联合不同疗法对脑卒中患者肢体功能障碍的有效性，探讨不同联合策略在临床上的应用价值。方法：以“脑机接口，BCI，脑卒中，中风”为中文检索词，以“Brain-computer interface,BCI,Brain-computer interaction,Brain-machine interface,BMI,Stroke”为英文检索词，在中国知网、万方、维普数据库及PubMed、Embase、Web of Science等中英文数据库进行文献检索，检索时限为各数据库建库起至2024年9月。最终共检索到3 054篇文献，经过筛选后纳入75篇文献进行归纳总结。结果与结论：目前，临床上除可以单独使用脑机接口技术治疗脑卒中患者肢体功能障碍外，还可以通过联合其他治疗方式获得更好的疗效，如联合中医疗法、康复疗法或物理因子治疗等。然而综合已有的研究发现，脑机接口联合经颅直流电疗法治疗患者上肢及下肢功能障碍的有效性存在争议。当前，研究人员逐渐认识到联合治疗的可行性，但由于治疗机制探索不足，无规范化规则以及样本量过小等因素，导致目前该策略还不具有普遍适用性。因此未来研究应集中于探究脑机接口与其他疗法结合后发挥增益效果的机制，并且规范临床试验的标准，以推动临床上的广泛应用。

关键词：脑机接口脑卒中功能障碍联合治疗神经可塑性康复工程运动想象视觉稳态唤起电位

高活性脐带间充质干细胞干预老年树鼩衰老脾脏的作用与机制

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4000-4010页

作者：叶丽田川赵晓娟陈梦蝶叶倩倩李强廖珠银李晔朱向情阮光萍何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学基础医学院免疫学教研室组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明市干细胞与再生医学重点实验室基础医学实验室云南省昆明市650032 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作... 详细信息

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作用及机制。方法:从剖腹产的新生树鼩脐带组织中分离、培养和获得高活性脐带间充质干细胞,三系分化试剂盒检测成脂、成骨、成软骨分化能力,流式细胞术检测细胞周期和表面标志物。以感染复数值分别为100,120,140,160,180,200的吉凯基因绿色荧光蛋白转染第2代高活性脐带间充质干细胞,筛选最佳转染条件;转染后的第4代高活性脐带间充质干细胞尾静脉输注给老年治疗组树鼩,青年对照组和老年模型组不予特殊处理,治疗4个月时取脾脏组织,苏木精-伊红染色观察脾脏组织结构;β-半乳糖苷酶染色检测衰老相关半乳糖苷酶活性;免疫组织化学染色检测p21和p53蛋白表达水平;Ki67和PCNA免疫荧光染色检测细胞增殖活性;免疫荧光染色检测脾脏自噬蛋白分子Beclin1和APG5L/ATG5表达水平;活性氧荧光染色检测脾脏组织的活性氧含量;CD3免疫荧光染色检测总T淋巴细胞比例变化;酶联免疫吸附实验检测脾脏组织白细胞介素1β和转化生长因子β1分泌水平;DAPI复染细胞核观察绿色荧光蛋白标记的高活性脐带间充质干细胞在脾脏组织的分布情况。结果与结论:①高活性脐带间充质干细胞呈核小短梭形、鱼群样生长,G_(0)/G_(1)期占比大,具有向成脂、成骨和成软骨分化潜能。②感染复数为140且转染72 h为吉凯基因绿色荧光蛋白标记树鼩高活性脐带间充质干细胞的最佳条件。③与老年模型组相比,老年治疗组树鼩脾脏组织细胞排列紧密,白髓面积增加(P中心占比无显著差异(P>0.05),脾脏组织衰老相关半乳糖苷酶活性水平降低(P细胞比例增加(P细胞介素1β分泌水平降低(P0.05)。与青年对照组相比,以上检测指标在老年治疗组中均有显著差异(P细胞。结果表明:静脉输注高活性脐带间充质干细胞可迁移至脾脏组织,抑制活性氧产生,下调衰老相关蛋白分子表达,诱导细胞自噬,促进细胞增殖,降低慢性炎症,进而改善脾脏组织结构和功能。

关键词：高活性脐带间充质干细胞树鼩脾脏衰老免疫自噬炎症

基于网络药理学和实验验证探讨黄芪耐缺氧的作用机制

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山西大学学报(自然科学版) 2025年

作者：李爱平张星星朱云峰但春凤李犇秦雪梅山西大学中医药现代研究中心

采用网络药理学探讨黄芪耐缺氧的潜在作用机制。利用中药系统药理学数据库（TCMSP）结合大量文献获取黄芪的主要化学成分及其靶点；通过OMIM、GeneCards、DrugBank和Uniprot数据库筛选耐缺氧相关靶点；利用功能蛋白关联（STRING）网络... 详细信息

采用网络药理学探讨黄芪耐缺氧的潜在作用机制。利用中药系统药理学数据库（TCMSP）结合大量文献获取黄芪的主要化学成分及其靶点；通过OMIM、GeneCards、DrugBank和Uniprot数据库筛选耐缺氧相关靶点；利用功能蛋白关联（STRING）网络进行蛋白质相互作用（PPI）分析筛选关键靶点；采用Metascape数据库分析其参与的生物过程及通路；利用分子对接和实验进行验证。结果显示，黄芪有24个主要有效成分，238个作用靶点，整合多个数据库得出耐缺氧靶点1 013个，两者相交靶点137个。GO功能富集分析包含生物过程（BP）1 916个，细胞组成（CC）102个，分子功能（MF）176个，KEGG通路获得199条。筛选得到黄芪耐缺氧核心靶点有VEGFA、HIF-1α、IL-6等，反推黄芪潜在的活性成分有黄酮和皂苷类成分如槲皮素和黄芪甲苷等。分子对接验证槲皮素、山奈酚、黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和黄芪甲苷与VEGFA、HIF-1α均展现出良好的结合作用。ELISA确证黄芪可通过下调核心靶基因VEGFA的表达发挥抗缺氧作用，果蝇实验进一步表明黄芪具有耐缺氧作用。本研究初步阐明黄芪中黄酮和皂苷类成分如黄芪甲苷、槲皮素等可通过调控关键靶点HIF-1α、VEGFA发挥抗缺氧的作用，研究结果有望为黄芪在典型作业环境（如高原低氧）中的开发应用提供依据。

关键词：网络药理学分子对接黄芪耐缺氧 VEGF

白细胞介素10工程化修饰人脐带间充质干细胞优效治疗炎症性肠病

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4878-4887页

作者：冯乙芮高天芸王亚萍黄亚红王斌南京大学医学院附属鼓楼医院临床干细胞研究室南京大学生命科学学院江苏省南京市210008 南京大学医学院附属鼓楼医院临床干细胞研究室江苏省南京市210008 临床干细胞研究室南京鼓楼医院南京中医药大学鼓楼临床医学院江苏省南京市210008 南京大学生命科学学院江苏省南京市210008

背景:间充质干细胞来源广泛、易体外增殖,并可分泌一系列免疫调节因子抑制炎症、促进组织修复再生,广泛应用于各种疾病治疗研究。但是对于多种疾病,间充质干细胞的治疗效果有限。针对疾病特定发病机制或者干预靶点进行工程化修饰间充质... 详细信息

背景:间充质干细胞来源广泛、易体外增殖,并可分泌一系列免疫调节因子抑制炎症、促进组织修复再生,广泛应用于各种疾病治疗研究。但是对于多种疾病,间充质干细胞的治疗效果有限。针对疾病特定发病机制或者干预靶点进行工程化修饰间充质干细胞是未来细胞治疗的重要发展方向。目的:白细胞介素10是一种典型的抗炎细胞因子,有助于调节免疫反应并诱导巨噬细胞向抗炎表型极化,该研究探讨白细胞介素10基因工程化修饰人脐带间充质干细胞对炎症性肠病的治疗效果。方法:通过电转染建立稳定过表达人白细胞介素10基因的人脐带间充质干细胞,并基于细胞治疗产品标准筛选出临床级细胞。给予C57BL/6J小鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠盐水溶液建立急性结肠炎模型,分别在造模前1 d(尾静脉途径)与造模后第4天(腹腔途径)注射空质粒转染的人脐带间充质干细胞或过表达人白细胞介素10基因的人脐带间充质干细胞(1×10~6个/只)。在造模后第6天取结肠组织进行苏木精-伊红染色评估组织学变化,免疫荧光染色检测增殖细胞核抗原与CD31的表达。结果与结论:构建的稳定过表达白细胞介素10的工程化人脐带间充质干细胞,满足临床级人脐带间充质干细胞质量标准;人脐带间充质干细胞对小鼠急性结肠炎具有修复效果,过表达白细胞介素10基因的人脐带间充质干细胞的治疗效果更加优效,更显著地抑制急性结肠炎小鼠的体质量下降(P细胞介素10基因人脐带间充质干细胞组结肠组织切片中增殖细胞核抗原阳性细胞与CD31阳性细胞显著多于人脐带间充质干细胞组,表明过表达白细胞介素10基因的人脐带间充质干细胞可能通过显著促进肠组织细胞增殖和血管再生进而促进结肠组织修复。

关键词：白细胞介素10 人脐带间充质干细胞工程化修饰间充质干细胞炎症性肠病再生修复细胞增殖肠再生

ZjERF098鉴定及其提高冬枣黑斑病抗病性的效果研究

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食品与发酵工业 2025年第1期 55-63页

作者：张暄陈鸥王文军刘摇曾凯芳西南大学食品科学学院国家柑桔工程技术研究中心西南大学食品贮藏与物流研究中心

克隆并鉴定冬枣转录因子ZjERF098明确其分子特性，验证ZjERF098瞬时过表达对枣果实黑斑病的抑制效果，为枣果实抗病机制研究奠定基础。对ZjERF098进行系统发育树构建、同源序列比对、结构域分析、蛋白质结构预测、启动子顺式作用元件分... 详细信息

克隆并鉴定冬枣转录因子ZjERF098明确其分子特性，验证ZjERF098瞬时过表达对枣果实黑斑病的抑制效果，为枣果实抗病机制研究奠定基础。对ZjERF098进行系统发育树构建、同源序列比对、结构域分析、蛋白质结构预测、启动子顺式作用元件分析，克隆并构建了pEAQ-ZjERF098等多个重组载体，在烟草上进行亚细胞定位和转录激活活性分析，在冬枣果实上进行瞬时过表达。结果显示，ZjERF098的开放阅读框包含426个碱基对，编码141个氨基酸，与拟南芥中的AtERF098序列相似度最高，同属于ERF转录因子亚家族，只有1个AP2结构域，不含信号肽与跨膜结构域。启动子区域含有与植物防御反应相关的脱落酸响应元件、茉莉酸响应元件等响应元件。ZjERF098具有转录激活活性，主要定位在细胞核上，同时在细胞质膜也有GFP荧光信号。同时，ZjERF098瞬时过表达能够增强枣果实对黑斑病的抗病性，显著降低枣果实的发病率与病斑直径，表明ZjERF098是在枣果实对黑斑病抗病性中起到重要作用的转录因子。

关键词：冬枣 ZjERF098 链格孢菌黑斑病基因克隆抗病性

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肝脏类器官在肝脏疾病模型与移植治疗中的应用潜力

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中国组织工程研究 2025年第8期29卷 1684-1692页

作者：袁维勃刘婵余丽梅遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州省遵义市563003 遵义医科大学教育部省部共建组织损伤修复与再生医学协同创新中心贵州省遵义市563000 遵义医科大学附属医院贵州省干细胞临床应用与新药研发工程研究中心贵州省遵义市563003 遵义医科大学附属医院贵州省生物治疗人才基地贵州省遵义市563003 遵义医科大学附属医院遵义市干细胞与再生医学工程研究中心贵州省遵义市563003

背景:肝脏类器官对阐明肝脏疾病的确切病理机制及对肝脏疾病的治疗具有重要的意义。目的:总结目前国内外该领域的基础研究,回顾以往肝脏类器官的构建、疾病建模和移植治疗的重要研究进展,探讨肝脏类器官联合组织工程技术的应用前景。方... 详细信息

背景:肝脏类器官对阐明肝脏疾病的确切病理机制及对肝脏疾病的治疗具有重要的意义。目的:总结目前国内外该领域的基础研究,回顾以往肝脏类器官的构建、疾病建模和移植治疗的重要研究进展,探讨肝脏类器官联合组织工程技术的应用前景。方法:检索PubMed数据库及中国知网数据库收录的相关文献,英文检索词为“liver,organoids,liver diseases”,中文检索词为“肝,类器官,肝脏疾病”,主要检索时限为2018年4月至2024年4月,通过人工阅读排除重复文献等,最终纳入94篇文献进行归纳分析。结果与结论:①肝脏类器官构建的种子细胞主要集中于成体细胞和多能干细胞,通过辅助各种细胞因子参与信号引导作用和细胞外基质提供3D微环境,促进类器官的产生,但是整体成熟度不高,有望通过结合组织工程技术改善这一问题;②体外疾病建模方面主要在简单疾病和单基因遗传病领域研究较多,类器官高度保留患者遗传特性,有望通过结合CRISPR-Cas9基因矫正和其他新兴技术模拟更复杂的肝脏疾病并阐明更深层次的病理机制;③体内移植治疗方面,肝脏类器官能够安全有效的植入,表现出惊人的肝功能替代潜力及组织再生能力,并且还可能通过与其他组织工程材料结合达到治疗目的。

关键词：肝脏类器官干细胞种子细胞肝脏疾病疾病建模体内移植综述