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miR-362-3p调控垂体肿瘤转化基因1抑制口腔鳞状细胞癌侵袭及增殖的研究

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华西口腔医学杂志 2024年第1期42卷 46-55页

作者：丁啸陈嘉雯曲鹏宇孙晨雨李洪利胡温庭范欣潍坊医学院附属医院口腔科潍坊261000 潍坊医学院口腔医学院潍坊261053 潍坊医学院医学研究实验中心潍坊261053

目的探讨垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在miR-362-3p作用下对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞Cal-27、HN-30侵袭以及增殖能力的影响。方法生物信息学在线数据库查询PTTG1在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达。蛋白质印迹法(Western blot)实验检测PT... 详细信息

目的探讨垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在miR-362-3p作用下对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞Cal-27、HN-30侵袭以及增殖能力的影响。方法生物信息学在线数据库查询PTTG1在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达。蛋白质印迹法(Western blot)实验检测PTTG1在Cal-27、HN-30以及HOK细胞系中的表达。划痕愈合实验、Transwell侵袭实验及5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)细胞增殖实验检测PTTG1对Cal-27、HN-30细胞迁移、侵袭、增殖的影响。生物信息学在线数据库预测PTTG1的上游miRNA,双荧光素酶实验检测结合情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测该miRNA在组织中的表达。结果ENCORI数据库结果显示PTTG1在OSCC组织中表达上调;Western blot实验显示Cal-27、HN-30细胞中PTTG1表达量较HOK细胞中高。转染Si-PTTG1质粒的Cal-27、HN-30细胞的迁移能力、侵袭能力和细胞增殖能力均较对照组降低(P<0.05)。通过网站预测出PTTG1的上游miRNA为miR-362-3p,双荧光素酶实验检测出PTTG1与miR-362-3p存在结合位点;qRT-PCR检测结果显示miR-362-3p在OSCC肿瘤组织中相对于正常组织表达下调(P<0.05);并且敲低miR-362-3p的表达后能够促进敲低PTTG1后的Cal-27、HN-30侵袭和增殖。结论miR-362-3p可通过靶向PTTG1抑制Cal-27、HN-30细胞侵袭、增殖。

关键词：口腔鳞状细胞癌垂体肿瘤转化基因1 微小RNA 侵袭增殖

PRMT6抑制剂调控Bnip3选择性剪切改善氧糖剥夺/再灌注诱导的神经元细胞凋亡

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中国老年学杂志 2024年第14期 3458-3464页

作者：东方玥罗士元李银娇罗艳潍坊医学院麻醉学院上海交通大学医学院附属瑞金医院麻醉科

目的观察蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMT)6抑制剂EPZ020411对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的小鼠海马神经元细胞系HT22细胞凋亡的作用，并探讨其可能的机制。方法体外培养HT22神经元，构建OGD/R诱导的HT22细胞损伤模型。利用PRMT6抑制剂EPZ... 详细信息

目的观察蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMT)6抑制剂EPZ020411对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的小鼠海马神经元细胞系HT22细胞凋亡的作用，并探讨其可能的机制。方法体外培养HT22神经元，构建OGD/R诱导的HT22细胞损伤模型。利用PRMT6抑制剂EPZ020411抑制PRMT6酶活性，将对数期生长的HT22神经元随机分为对照组、EPZ组、OGD/R组、OGD/R+EPZ组，CCK-8法检测细胞存活率，乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞毒性，Western印迹检测凋亡相关蛋白Cleaved-胱天蛋白酶(Caspase)3表达，JC-1染色检测线粒体膜电位改变，活性氧检测氧化应激水平，实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Bnip3不同剪切异构体水平。结果 OGD/R处理后，HT22神经元细胞活率显著降低，细胞毒性显著加重(P<0.05);同时，Cleaved-Caspase3显著升高(P<0.05),活性氧水平升高，线粒体膜电位下降。EPZ020411改善OGD/R诱导的HT22细胞损伤，抑制Cleaved-Caspase3蛋白表达，提高线粒体膜电位水平并减少活性氧生成。EPZ020411显著升高Bnip3剪切异构体Bnip3ΔExon3表达水平(P<0.05)。结论 PRMT6抑制剂EPZ020411改善OGD/R诱导的HT22神经元损伤，其机制可能是通过调控Bnip3 mRNA前体的选择性剪切过程，上调Bnip3剪切异构体Bnip3ΔExon3表达水平，抑制氧化应激，从而减轻OGD/R诱导的细胞凋亡。

关键词：蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMT)6 神经元氧糖剥夺/再灌注选择性剪切细胞凋亡

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藜麦麸皮黄酒和普通黄酒的品质比较

食品工业科技 2024年第6期45卷 254-264页

作者：姜学敏张虹高慧蔡雨情赵雷薛鹏潍坊医学院公共卫生学院山东潍坊261053 潍坊医学院公共卫生检测检验中心山东潍坊261053

为探究加入藜麦麸皮是否会对发酵黄酒的物质组成、风味及其生物活性产生影响。利用传统自制陈伏曲发酵黄酒,设置普通黄酒组和藜麦麸皮黄酒组,利用原子吸收分光光度计测定两组酒样当中的重金属含量,采用液相色谱-质谱联用技术(High-Perfo... 详细信息

为探究加入藜麦麸皮是否会对发酵黄酒的物质组成、风味及其生物活性产生影响。利用传统自制陈伏曲发酵黄酒,设置普通黄酒组和藜麦麸皮黄酒组,利用原子吸收分光光度计测定两组酒样当中的重金属含量,采用液相色谱-质谱联用技术(High-Performance Liquid Chromatography Mass Spectrometer,HPLC-MS)和气相色谱-质谱联用技术(Gas Chromatography-Mass Spectrometer,GC-MS)分析比较两组黄酒的基本理化指标、差异化合物和风味物质,并对黄酒的抗氧化活性进行分析。结果表明,藜麦麸皮黄酒中的总皂苷以及总酚酸含量明显优于普通黄酒,且铅含量低于普通黄酒,两组黄酒中均未检测到黄曲霉毒素B1。两种黄酒中共有48种差异化合物,其中数量最多的为醇类和酰胺类物质,均为10种,其次为酸类物质4种以及糖类物质2种。GC-MS测得挥发性物质共有19种,直接进样有12种,顶空进样有12种,利用外标法一共标定出四种物质,在普通黄酒中的物质为甲酸丁酯、乙酸和丁酸含量分别为5.10±1.10、4.40±1.70、10.80±2.20μg/mL。在藜麦麸皮黄酒中的物质为甲酸丁酯、正丁醇、乙酸和丁酸含量分别是9.00±1.80、7.40±2.10、4.50±1.00、9.50±2.10μg/mL。抗氧化活性方面,藜麦麸皮黄酒和普通黄酒的Fe2+螯合率分别为45.79%和6.51%,酪氨酸酶抑制率分别为94.84%和71.11%,藜麦麸皮黄酒要明显优于普通黄酒。自制藜麦麸皮黄酒和普通黄酒相比,酒体中非挥发性物质以及挥发性的风味物质含量上升,抗氧化性提高。

关键词：黄酒藜麦麸皮差异化合物挥发性风味物质抗氧化活性

附子理中丸联合美沙拉嗪通过影响AMPK/NF-κB信号通路治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎

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中药药理与临床 2024年

作者：谷金华李文文代洪生李光彩史立宏张小茜潍坊医学院附属医院消化内一科潍坊医学院临床医学院潍坊医学院康复医学院

目的：观察附子理中丸联合美沙拉嗪肠溶片对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎（UC）的疗效并探究其作用机制。方法：将潍坊医学院附属医院消化内科于2020年12月-2022年6月收治的70例脾肾阳虚型UC患者随机分成治疗组（36例）和对照组（34例）。对... 详细信息

目的：观察附子理中丸联合美沙拉嗪肠溶片对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎（UC）的疗效并探究其作用机制。方法：将潍坊医学院附属医院消化内科于2020年12月-2022年6月收治的70例脾肾阳虚型UC患者随机分成治疗组（36例）和对照组（34例）。对照组予美沙拉嗪肠溶片进行治疗，治疗组在美沙拉嗪基础上联合附子理中丸治疗，疗程均为3月。观察两组患者治疗前后中医证候积分、改良Mayo评分、IBDQ量表积分变化并对比远期复发率。酶联免疫吸附法（ELISA）检测治疗前后血清白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10含量的变化。免疫组化与蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测治疗前后两组患者溃疡性结肠炎组织样本磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）、磷酸化UNC-51样激酶（p-ULK1）、磷酸化P65（p-P65）的表达情况。结果：治疗组的总有效率为97.2％，对照组为79.4％，治疗组的疗效显著优于对照组（P＜0.05）。两组血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量较治疗前明显降低，IL-10含量明显升高，且治疗组降低/升高水平显著优于对照组（P＜0.05）。治疗后，与对照组比较，治疗组p-AMPK、p-ULK1表达水平明显上调，p-P65表达明显下调（P＜0.05），且治疗组远期复发率明显降低（P＜0.05）。结论：附子理中丸联合美沙拉嗪肠溶片对脾肾阳虚型UC的疗效显著优于单纯使用美沙拉嗪肠溶片。附子理中丸联合美沙拉嗪能明显改善临床症状和预后，同时抑制炎症因子表达，潜在的机制可能与激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、抑制核因子κB（NF-κB）有关。

关键词：附子理中丸溃疡性结肠炎脾肾阳虚腺苷酸活化蛋白激酶核因子κB

组织蛋白酶B/NLRP3通路对LPS诱导巨噬细胞M1/M2极化的影响

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中国免疫学杂志 2024年

作者：王宜博代玉婷蔡江晓李忠林秦伟伟孙立新韩伟潍坊医学院麻醉学院青岛市市立医院麻醉科青岛市市立医院呼吸与危重症科

目的评价组织蛋白酶B（CTSB）/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）通路对LPS诱导巨噬细胞极化的影响。方法体外培养生长状态良好的RAW264.7小鼠单核巨噬细胞系，根据随机数字表法分为3组（n=6），对照组（C组），LPS组（L组），... 详细信息

目的评价组织蛋白酶B（CTSB）/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）通路对LPS诱导巨噬细胞极化的影响。方法体外培养生长状态良好的RAW264.7小鼠单核巨噬细胞系，根据随机数字表法分为3组（n=6），对照组（C组），LPS组（L组），LPS+CA074-me（CTSB抑制剂）组（B组）。C组常规培养24h，L组加入LPS浓度为1μg/ml的培养基培养24h，B组在LPS诱导前予以CTSB抑制剂CA074-me30μmol/L预处理1h后在含LPS1μg/ml的培养基中共培养24h。24小时后通过显微镜观察细胞形态变化，通过采用ELISA法测定上清液IL-1β、IL-18的浓度，Westernblot法检测细胞中组织蛋白酶B前体（pro-CTSB）、成熟组织蛋白酶B（mature-CTSB）、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）的表达，采用qRT-PCR法检测细胞CD32、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（Arg-1）、CD206 mRNA表达水平，流式细胞术检测M1型巨噬细胞表面标记物CD86和M2型巨噬细胞表面标记物CD206阳性表达率。结果与C组相比，L组和B组细胞形态均改变，细胞变大并出现伪足，细胞上清液中IL-1β、IL-18浓度均上升，pro-CTSB、mature-CTSB、NLRP3、ASC和caspase-1表达升高，CD32、iNOS mRNA表达上调，CD86阳性率、CD206阳性率均上升（P＜0.01），B组Arg-1、CD206 mRNA表达上调（P＜0.01）；与L组相比，B组细胞伪足减少，形态更接近C组，细胞上清液中IL-1β、IL-18浓度下降，mature-CTSB、NLRP3、ASC和caspase-1表达降低，CD32、iNOS mRNA及CD86阳性率下降，pro-CTSB表达、Arg-1、CD206 mRNA表达及CD206阳性率升高（P＜0.01）。结论抑制CTSB/NLRP3通路能够减轻炎症反应，减少LPS诱导RAW264.7细胞向M1型巨噬细胞极化，促进其向M2型巨噬细胞极化。

关键词：组织蛋白酶B NLR家族,热蛋白结构域包含蛋白3 脂多糖类巨噬细胞

人类精子代谢和表观遗传调控通过影响精子活力导致男性不育的研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2024年第5期44卷 548-555页

作者：孙非凡张茂翔姜昱王纳任发乔鹏云潍坊医学院附属医院(临床医学院) 潍坊261042 潍坊医学院附属医院生殖医学中心潍坊261041

精子作为男性体内高度分化的单倍体生殖细胞,是生命遗传信息传递的重要载体,其结构完整是正常受精的条件,也是正常代谢产生能量和完成表观遗传的基础。精子代谢被认为是精子运动的“供能站”,保证精子发生、成熟、过活化和精卵结合等生... 详细信息

精子作为男性体内高度分化的单倍体生殖细胞,是生命遗传信息传递的重要载体,其结构完整是正常受精的条件,也是正常代谢产生能量和完成表观遗传的基础。精子代谢被认为是精子运动的“供能站”,保证精子发生、成熟、过活化和精卵结合等生命活动正常进行,代谢异常会直接影响精子活力造成男性不育。而精子表观遗传是一种通过父系遗传来影响后代胚胎发育和繁殖的过程,包括DNA甲基化、染色质重塑和精子携带的小RNA等多种调控方式,它们可在一定程度上影响能量产生,进而导致精子活力和男性生育力下降。因此,精子代谢和表观遗传在维持精子活力方面有着不可分割的联系,本文就人类精子结构、代谢和表观遗传调控方面进行综述,以期为与它们相关的精子活力异常导致的男性不育症相关研究提供理论参考。

关键词：氧化磷酸化活性氧组蛋白 DNA甲基化精子代谢

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脐带来源间充质干细胞抑制巨噬细胞M1极化

中国免疫学杂志 2024年第4期40卷 673-679页

作者：王晓旭李超然王惠杨春娟刘凤霞徐栋花潍坊医学院临床医学院潍坊261053 潍坊医学院第一附属医院中心实验室潍坊261041 潍坊医学院第一附属医院过敏反应科潍坊261041 潍坊医学院第一附属医院风湿免疫科潍坊261041

目的:探究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对巨噬细胞M1/M2极化的作用。方法:将hUC-MSCs与佛波酯(PMA)诱导分化的巨噬细胞样细胞(pTHP-1巨噬细胞)共培养后进行转录组测序分析,筛选差异表达基因,进一步进行GO及KEGG富集分析。细胞增殖实验(... 详细信息

目的:探究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对巨噬细胞M1/M2极化的作用。方法:将hUC-MSCs与佛波酯(PMA)诱导分化的巨噬细胞样细胞(pTHP-1巨噬细胞)共培养后进行转录组测序分析,筛选差异表达基因,进一步进行GO及KEGG富集分析。细胞增殖实验(CCK-8和EdU)分析hUC-MSCs对pTHP-1细胞增殖的影响。流式细胞术检测hUC-MSCs对LPS刺激的pTHP-1巨噬细胞炎症因子TNF-α表达及抑炎因子IL-10表达的影响。qRT-PCR及流式细胞术探究hUC-MSCs对pTHP-1巨噬细胞M1/M2相关分子表型的作用。结果:转录组测序数据分析发现hUC-MSCs与pTHP-1细胞共培养后M1相关基因TNF-α(P<0.05)、HLA-DRA(P<0.01)明显下调,M2相关基因ARG1(P<0.05)明显上调,提示hUC-MSCs抑制巨噬细胞向M1表型极化。GO和KEGG富集分析提示这些表达失调的基因参与调控炎症与免疫应答。hUC-MSCs抑制pTHP-1巨噬细胞增殖,且抑制TNF-α表达(P<0.001),促进IL-10表达(P<0.001)。qRT-PCR及流式细胞术分析发现,hUC-MSCs共培养后,pTHP-1细胞HLA-DRA(P<0.05)和CD68(P<0.01)mRNA表达明显下调,且CD14+CD11c+M1型细胞比例下调,而CD163(P<0.001)和CD206(P<0.001)mRNA表达及CD14+CD163+M2型细胞比例明显上调。结论:hUC-MSCs体外抑制巨噬细胞向M1促炎表型极化,诱导向M2抗炎表型极化。

关键词：脐带间充质干细胞 pTHP-1 转录组测序巨噬细胞极化

结核分枝杆菌潜伏相关蛋白Rv2204c的生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2024年第1期19卷 32-35,41页

作者：王文涛姜吉亮王晓强隽中乾付玉荣伊正君潍坊医学院医学检验学院山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院

目的应用生物信息学方法分析结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)潜伏相关蛋白Rv2204c的结构及功能。方法从NCBI数据库中搜索Rv2204c蛋白的氨基酸序列,运用ProtParam, Signal 6.0 Server, ProtScale, TMHMM Server v.2.0,ProtCompB,NetNGlyc-1.0及NetPhos-3.1预测蛋白的理化性质、疏水性、信号肽、跨膜螺旋区、亚细胞定位及糖基化和磷酸化位点;运用SOPMA、SWISS-MODEL预测蛋白的二、三级结构;运用IEDB预测蛋白的B细胞抗原表位;采用SYFPEITHI,RANKPEP,NetMHC和NetCTL预测其细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗原表位;采用SYFPEITHI、RANKPEP预测其辅助性T(Th)淋巴细胞表位;利用MEGA构建Rv2204c蛋白进化树;运用STRING蛋白相互作用数据库预测Rv2204c相互作用蛋白。结果 Rv2204c蛋白氨基酸总数为118,为亲水性稳定蛋白;该蛋白无信号肽,无跨膜螺旋区;亚细胞定位主要为细胞质;无糖基化位点,含5个磷酸化位点;二级结构中α-螺旋(Hh)占23.73%,β-转角(Tt)占10.17%,无规则卷曲(Cc)占39.83%;含多个优势T、B细胞表位;其互作蛋白为Rv0398c, Rv0883c, pyrD(Rv2139),Rv1465,Rv1463,Rv2205c, ppiA(Rv0009),mmsA(Rv0753c),kgd(Rv1248c)和lipA(Rv2218),参与固氮、脂酸盐合成等多个生物过程。结论 Rv2204c为亲水性稳定蛋白,具有多个T、B细胞抗原表位,可能在潜伏结核感染过程中发挥重要作用,可作为结核病诊断的候选蛋白和治疗新靶点。

关键词：结核分枝杆菌结核潜伏感染 Rv2204c 生物信息学

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重复外周磁刺激治疗慢性肌骨疼痛的研究进展

中国康复医学杂志 2024年第2期39卷 294-299页

作者：潘佳欣贾延兵刘晓艳沈蓁管廷凤刘浩赣南医学院康复学院江西省赣州市341000 潍坊医学院康复医学院潍坊医学院智能康复研究院潍坊市脑康复与功能重塑重点实验室潍坊医学院附属医院潍坊医学院第一附属医院

疼痛是临床常见的症状,国际疼痛学会将其定义为一种与实际或潜在的组织损伤相关的不愉快的感觉和情绪情感体验,或与此相似的经历[1]。慢性疼痛是指持续存在3个月或以上的疼痛[2]。世界卫生组织(World Health Organization)在2018年最新... 详细信息

疼痛是临床常见的症状,国际疼痛学会将其定义为一种与实际或潜在的组织损伤相关的不愉快的感觉和情绪情感体验,或与此相似的经历[1]。慢性疼痛是指持续存在3个月或以上的疼痛[2]。世界卫生组织(World Health Organization)在2018年最新国际疾病分类(International Classification of Diseases,ICD-11)中将持续或者反复发作超过3个月的疼痛作为慢性疼痛纳入独立的疾病分类,其中慢性肌骨疼痛(chronic musculoskeletal pain,CMP)分为原发性和继发性两种类型[2]。

关键词：国际疾病分类慢性疼痛组织损伤国际疼痛学会