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MiR-525-5p通过靶向结合围脂滴蛋白3调控胶质瘤细胞的迁移、侵袭与增殖

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第6期39卷 821-830页

作者：左伟贾丽艳罗栋梁李洪利尹崇高刘清华刘伟潍坊医学院附属医院潍坊医学院基础医学院潍坊医学院护理学院潍坊医学院山东潍坊261053

颅内恶性肿瘤中最常见的是胶质瘤。虽然目前的治疗手段是手术、放疗和化疗,但胶质瘤患者的预后并不乐观。因此,找到有效的处理办法就变得十分关键。文献显示,在肿瘤发生和发展过程中,微RNA(microRNA,miRNA)发挥了重要作用。基于此,本研... 详细信息

颅内恶性肿瘤中最常见的是胶质瘤。虽然目前的治疗手段是手术、放疗和化疗,但胶质瘤患者的预后并不乐观。因此,找到有效的处理办法就变得十分关键。文献显示,在肿瘤发生和发展过程中,微RNA(microRNA,miRNA)发挥了重要作用。基于此,本研究旨在探究miR-525-5p在调控胶质瘤细胞的迁移、侵袭与增殖的分子机制。利用TCGA数据库识别出在正常组织与胶质瘤组织中差异表达的围脂滴蛋白3(PLIN3),并利用CGGA与GEPIA数据库查询到高表达的PLIN3与胶质瘤患者预后不良相关,且Western印迹结果揭示了PLIN3在胶质瘤细胞中高度表达(P<0.05)。细胞划痕(wound healing)实验和Transwell侵袭实验结果显示,敲除和过表达PLIN3分别抑制或者促进胶质瘤细胞的迁移和侵袭(P<0.05)。使用在线数据库反向选择能与PLIN3靶向相结合的miR-525-5p。双荧光素酶结果证实,PLIN3能与miR-525-5p靶向结合。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)显示,miR-525-5p在胶质瘤细胞LN229、U251中的表达要比人星形胶质细胞(Human astrocyte,HA)中低(P<0.05)。Transwell实验和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2-deoxyuridine,EdU)细胞增殖结果表明,下调和上调miR-525-5p可逆转过表达和敲除PLIN3对胶质瘤细胞LN229的抑制作用(P<0.05)。综上所述,通过靶向结合PLIN3,miR-525-5p能够调节胶质瘤细胞的迁移、侵袭和增殖。

关键词：胶质瘤 miR-525-5p 围脂滴蛋白3 增殖侵袭

当归乙醇提取物抑制黑色素瘤B16-F10细胞增殖、诱导凋亡的作用及机制研究

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中国临床药理学与治疗学 2025年第1期 51-60页

作者：柯佳杰沈煜洲许雅苹陈煜沛陈培元吴黉坦厦门医学院公共卫生与医学技术学院厦门医学院基础医学院厦门大学附属成功医院皮肤病科

目的：探究当归乙醇提取物（EEA）对黑色素瘤细胞B16-F10细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法：噻唑蓝（MTT）法评价细胞存活率；细胞克隆形成法检测细胞增殖能力；倒置显微镜观察细胞汇合度及形态变化；Hoechst 33342染色法检测细... 详细信息

目的：探究当归乙醇提取物（EEA）对黑色素瘤细胞B16-F10细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法：噻唑蓝（MTT）法评价细胞存活率；细胞克隆形成法检测细胞增殖能力；倒置显微镜观察细胞汇合度及形态变化；Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡；流式细胞术（FCM）检测细胞周期和凋亡；透射电镜（TEM）观察细胞线粒体形态结构变化；免疫印迹法（Western blot）检测细胞周期、凋亡、线粒体生物发生和动力学相关蛋白的表达情况。结果：与空白对照组相比，10～400μg/mL EEA处理24 h和48 h后，细胞存活率降低（P神经萎缩蛋白1(OPA1)蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01），动力相关蛋白1(DRP1)和Fission 1蛋白（FIS1）表达升高（P<0.05,P<0.01）。结论：EEA对B16-F10细胞具有显著抑制作用，其机制可能与诱导细胞G1/S期阻滞，激活内源性线粒体途径细胞凋亡，破坏线粒体生物发生与动力学平衡有关。

关键词：当归乙醇提取物 B16-F10细胞细胞周期凋亡线粒体生物发生与动力学

间充质干细胞及其外泌体对肿瘤影响的研究进展

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中国肺癌杂志 2022年第5期25卷 351-357页

作者：崔舒悦汤帅丁晓玲丁刚潍坊医学院口腔医学院潍坊261053

在我国,无论城市还是农村,恶性肿瘤都是我国居民死亡的主要原因。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有多向分化潜能、自我更新能力和良好的免疫调节特性。而外泌体作为MSCs旁分泌的重要物质,在肿瘤微环境中介导细胞间的信息... 详细信息

在我国,无论城市还是农村,恶性肿瘤都是我国居民死亡的主要原因。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有多向分化潜能、自我更新能力和良好的免疫调节特性。而外泌体作为MSCs旁分泌的重要物质,在肿瘤微环境中介导细胞间的信息交流与传递,影响肿瘤的发生发展。有研究报道了MSCs及其来源的外泌体对肿瘤的影响具有相互矛盾的发现,一方面MSCs及其外泌体具有肿瘤趋向性,能够靶向特定部位抑制肿瘤生长;另一方面也有证据表明MSCs具有致瘤性,作为肿瘤微环境的一部分影响肿瘤的生长和迁移。本文将综述MSCs及其外泌体与肿瘤发生发展的关系以及MSCs及其外泌体如何在肿瘤发生发展中扮演不同角色,以期为肿瘤的诊断、预后和精准治疗提供有益的帮助。

关键词：间充质干细胞外泌体肿瘤癌症

多模态MRI观察电针治疗大鼠脑缺血再灌注后脑白质损伤

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中国医学影像技术 2023年第11期39卷 1619-1625页

作者：李宸刘洋张海默高啸天李振刘晨萌巩平肖培伦王晓莉潍坊医学院医学影像学院山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院山东潍坊261053 潍坊医学院附属医院影像中心山东潍坊261031

目的基于多模态MRI动态观察电针治疗大鼠脑缺血再灌注后脑白质损伤。方法将35只大鼠分为假手术(Sham)组(n=5)、脑缺血再灌注损伤(CIRI)组(n=15)及电针组(n=15)并分别予以相应处理;于其后24 h、72 h及5 d采集颅脑T2WI、弥散加权成像及... 详细信息

目的基于多模态MRI动态观察电针治疗大鼠脑缺血再灌注后脑白质损伤。方法将35只大鼠分为假手术(Sham)组(n=5)、脑缺血再灌注损伤(CIRI)组(n=15)及电针组(n=15)并分别予以相应处理;于其后24 h、72 h及5 d采集颅脑T2WI、弥散加权成像及弥散张量成像,重建获取各向异性分数(FA)、Colored FA图。处死大鼠对脑组织行鼠抗髓鞘碱性蛋白(MBP)/兔抗神经丝蛋白200(NF200)、鼠抗增殖细胞核抗原(PCNA)/兔抗神经胶质抗原2(NG2)免疫荧光双标染色,观察电针对CIRI大鼠脑白质损伤及脑组织内源性少突胶质祖细胞增殖的影响。结果 24 h、72 h及5 d后,电针组脑梗死体积明显小于CIRI组(P均<0.05);CIRI组及电针组缺血侧纹状体及胼胝体区相对表观弥散系数(rADC)、相对FA(rFA)均低于Sham组(P均<0.05);电针组纹状体及胼胝体区rADC、rFA均高于CIRI组(P均<0.05)。5 d后CIRI组及电针组大鼠缺血侧纹状体和胼胝体区MBP、NF200荧光强度(FI)、纹状体区PCNA及NG2均(+)细胞数均小于Sham组(P均<0.05),电针组缺血侧纹状体和胼胝体区FIMBP、FINF200、纹状体区PCNA及NG2均(+)细胞数均大于CIRI组(P均<0.05)。结论电针治疗可减轻CIRI大鼠脑白质损伤、促进PCNA及NG2生成。

关键词：大鼠再灌注损伤白质电针磁共振成像

microRNA调控结核分枝杆菌感染巨噬细胞凋亡的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2021年第2期41卷 143-148页

作者：王方璐王文涛伊正君付玉荣潍坊医学院临床医学院 261053 潍坊医学院医学检验学系 261053

细胞凋亡对于机体抑制或清除胞内结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)尤为重要,Mtb感染巨噬细胞后,往往会诱导机体启动一系列机制调控巨噬细胞凋亡。在Mtb感染的巨噬细胞内存在差异表达的microRNAs(miRNAs),miRNA可直接结合... 详细信息

细胞凋亡对于机体抑制或清除胞内结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)尤为重要,Mtb感染巨噬细胞后,往往会诱导机体启动一系列机制调控巨噬细胞凋亡。在Mtb感染的巨噬细胞内存在差异表达的microRNAs(miRNAs),miRNA可直接结合凋亡基因的3′UTR(3′-untranslated region)非翻译区结合位点,通过调控凋亡基因表达参与线粒体或死亡受体途径调控巨噬细胞凋亡。本文综述了现阶段与Mtb感染巨噬细胞凋亡的相关miRNAs及其调控巨噬细胞凋亡的主要机制。

关键词： microRNA 结核分枝杆菌巨噬细胞细胞凋亡

华中地区家庭医生团队内部互动网络对工作满意度的影响

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中国全科医学 2025年

作者：陈怡翔唐尚锋南阳市中心医院组织人事科华中科技大学同济医学院医药卫生管理学院

背景家庭医生签约服务是转变基层医疗卫生服务模式的重要途径，也是实现分级诊疗的关键和突破口。如何加强家庭医生团队建设，进而提高工作满意度成为亟待解决的问题。目的从团队层面探究家庭医生团队内部互动网络结构特征与工作满意... 详细信息

背景家庭医生签约服务是转变基层医疗卫生服务模式的重要途径，也是实现分级诊疗的关键和突破口。如何加强家庭医生团队建设，进而提高工作满意度成为亟待解决的问题。目的从团队层面探究家庭医生团队内部互动网络结构特征与工作满意度的关系，为加强家庭医生团队建设提供参考。方法于2021年10月—2023年12月采用便利抽样法和整群随机抽样法对湖北省潜江市、湖南省长沙县和河南省南阳市的家庭医生团队开展实地调研，使用家庭医生团队成员基本情况调查表、家庭医生团队内部互动网络调查表和家庭医生团队工作满意度量表收集数据，并采用层次线性回归分析验证家庭医生团队内部互动网络密度和网络中心势对工作满意度的影响。结果家庭医生团队转化过程呈现出明显的低密度（0.29±0.11）、高中心势（0.88±0.19）的网络结构特征；家庭医生团队工作满意度平均得分为（20.30±2.42）分，呈中等偏上水平；层次线性回归分析结果显示，转化过程网络中心势正向影响工作满意度（β=0.576,t=7.091,P<0.001）；转化过程网络密度正向影响工作满意度（β=0.228,t=2.478,P<0.05）；执行过程网络密度正向影响工作满意度（β=0.324,t=2.624,P<0.01）；人际过程网络密度正向影响工作满意度（β=0.368,t=3.549,P<0.001）。结论华中地区家庭医生团队内部互动存在优化空间，家庭医生团队内部互动网络密度和网络中心势对工作满意度具有积极作用。建议完善家庭医生团队内部协作机制、优化集权网络结构。

关键词：家庭医学家庭医生团队过程社会网络满意度

盐酸小檗碱/叶酸-壳聚糖纳米粒的制备及其对CNE-1细胞的抑制作用

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中草药 2016年第20期47卷 3594-3601页

作者：温宝芳李文涛庄宝祥张维芬赵立民潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053 潍坊医学院药学院山东潍坊261053 潍坊医学院附属医院耳鼻喉头颈外科山东潍坊261031

目的制备载盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BH)的叶酸(folic acid,FA)偶联壳聚糖(chitosan,CTS)纳米粒(BH/FA-CTS-NPs),优化制备工艺并考察BH/FA-CTS-NPs的理化特性及其对CNE-1细胞的抑制作用。方法利用FA活性酯与CTS分子上的氨基反应,制得FA偶联CTS(FA-CTS);BH为模型药物,通过离子交联法制备BH/FA-CTS-NPs。考察其形态、粒径、包封率、载药量及体外释放等理化特性;分别通过MTT法、划痕实验和Annexin-V-FITC单染法进行检测,验证BH/FA-CTS-NPs对CNE-1细胞的抑制作用、抗增殖侵袭能力以及诱导凋亡作用。结果透射电镜下观察所得BH/FA-CTS-NPs形态外观圆整,大小均匀,无粘连,平均粒径为(282.4±4.5)nm;包封率为(89.82±2.91)%;载药量为(9.16±1.01)%;5 h内累积释药率为(80.32±3.24)%,随后缓慢释放,24 h内累积释药率为(90.92±5.21)%。CNE-1细胞实验显示,BH/FA-CTS-NPs能够显著抑制CNE-1细胞的生存和增殖能力,诱导细胞CNE-1凋亡,具有剂量和时间依赖性。结论离子交联法成功制备具有体外缓释作用的BH/FA-CTS-NPs,形态圆整,粒径大小均一,对抑制CNE-1细胞增殖及促进凋亡效果好,为开发抗肿瘤给药系统提供了理论依据。

关键词：叶酸壳聚糖盐酸小檗碱纳米粒偶联离子交联法 MTT法划痕实验 Annexin—V-FITC单染法抗肿瘤抗增殖侵袭能力:凋亡

miR-30b-3p通过靶向调控COX6B1抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭

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中国肺癌杂志 2022年第8期25卷 567-574页

作者：陈琳陈新璐刘璐赵燕乔左伟尹崇高李洪利潍坊医学院病理学教研室潍坊261053 潍坊医学院附属医院潍坊261053 潍坊医学院护理学院潍坊261053 潍坊医学院医学研究实验中心潍坊261053

背景与目的肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)是当前最常见的肺癌亚型,微小RNA(micro RNAs,mi RNAs)是一类非编码小RNA,在细胞活动中发挥核心作用。mi R-30b-3p在许多类型的癌症中均起到了关键作用,但关于其在肺腺癌中如何发挥作用的研... 详细信息

背景与目的肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)是当前最常见的肺癌亚型,微小RNA(micro RNAs,mi RNAs)是一类非编码小RNA,在细胞活动中发挥核心作用。mi R-30b-3p在许多类型的癌症中均起到了关键作用,但关于其在肺腺癌中如何发挥作用的研究仍然很少。本研究通过探索mi R-30b-3p在肺腺癌增殖和侵袭中的作用和机制,以期为临床上抑制肺腺癌的增殖和侵袭拓展新的方向。方法利用NCBI生物数据库查找肺腺癌中差异表达明显的mi RNA,并查询其差异表达及生存曲线;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测mi R-30b-3p在各肺腺癌细胞系中的表达;5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Ed U)细胞增殖实验和Transwell实验检测各组A549细胞增殖和侵袭能力的变化;使用在线预测数据网站确定mi R-30b-3p的靶蛋白;Western blot验证COX6B1在不同组肺腺癌细胞中的表达情况;双荧光素酶实验证实mi R-30b-3p与COX6B1是否存在结合位点。结果mi R-30b-3p在肺腺癌组织和细胞中表达下调(P<0.05),低表达水平的mi R-30b-3p与肺腺癌患者的不良预后有关(P=0.005,8);过表达mi R-30b-3p能够抑制肺腺癌细胞的增殖与侵袭能力(P<0.05);双荧光素酶实验证明mi R-30b-3p和COX6B1存在结合位点(P<0.05);Western blot实验表明在肺腺癌细胞A549中,过表达mi R-30b-3p能够下调COX6B1的表达(P<0.05);Ed U细胞增殖实验和Transwell侵袭实验表明,mi R-30b-3p的过表达能够逆转上调COX6B1对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的促进作用(P<0.05)。结论mi R-30b-3p在肺腺癌中起到了抑癌基因的作用,并能够通过调控COX6B1的表达来抑制肺腺癌的增殖和侵袭。

关键词：肺肿瘤 miR-30b-3p 细胞色素C氧化酶6B1亚基增殖侵袭

IGF1R敲除通过AMPK减轻AngⅡ诱导的小鼠心肌炎症及细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2022年第10期38卷 1765-1772页

作者：朱家峰李倩方柳姚倩张侍玉张兰娥潍坊医学院护理学院山东潍坊261053 潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053

目的:探讨胰岛素生长因子1受体(IGF1R)敲除对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心肌炎症和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建杂合子IGF1R敲除(Igf1r^(+/-))小鼠。将野生型(WT)和Igf1r^(+/-)小鼠各20只按... 详细信息

目的:探讨胰岛素生长因子1受体(IGF1R)敲除对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心肌炎症和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建杂合子IGF1R敲除(Igf1r^(+/-))小鼠。将野生型(WT)和Igf1r^(+/-)小鼠各20只按照随机数字表法各分为2组,共4组,即WT+saline组、WT+AngⅡ组、Igf1r^(+/-)+saline组和Igf1r^(+/-)+AngⅡ组,每组10只。AngⅡ各组小鼠皮下注射AngⅡ(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))2周构建心肌损伤模型,而saline各组小鼠皮下注射等体积的生理盐水2周。通过心脏指数检查心脏功能;ELISA方法检测心肌组织中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6水平;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;RT-qPCR和免疫印迹分析检测相关mRNA和蛋白的水平。结果:AngⅡ诱导的WT小鼠心功能显著下降且心脏损伤标志物和IGF1R表达显著升高(P<0.01);AngⅡ诱导的Igf1r^(+/-)小鼠心脏损伤标志物和IGF1R表达下降,心功能改善(P<0.05)。AngⅡ诱导的WT小鼠心肌炎症因子和细胞凋亡率均显著升高,磷酸化AMP活化蛋白激酶(p-AMPK)/AMPK比值显著下降(P<0.05);AngⅡ诱导的Igf1r^(+/-)小鼠心肌炎症因子水平和细胞凋亡率均显著降低,p-AMPK/AMPK比值显著上升(P<0.05)。结论:IGF1R敲除通过促进AMPK磷酸化抑制心肌炎症和细胞凋亡,从而减轻AngⅡ诱导的小鼠心肌损伤。

关键词：胰岛素生长因子1受体心肌炎症细胞凋亡 AMP活化蛋白激酶