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PRC1靶向调控Hippo通路促进肾癌细胞增殖和迁移能力

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武汉大学学报(医学版) 2025年第01期 36-40页

作者：万梓宇王霞郑张节王豪阿尔斯·马旦也提彭建平武汉大学中南医院泌尿外科

目的：研究胞质分裂蛋白1(PRC1)对肾癌细胞的增殖和迁移能力的影响并探讨其在肾癌中的作用。方法：使用Gepia2数据库分析PRC1在肾癌中的差异表达和预后。在Caki-1细胞系中使用CRISPR/Cas9技术敲低PRC1的表达。设置对照组和PRC1敲低组（K... 详细信息

目的：研究胞质分裂蛋白1(PRC1)对肾癌细胞的增殖和迁移能力的影响并探讨其在肾癌中的作用。方法：使用Gepia2数据库分析PRC1在肾癌中的差异表达和预后。在Caki-1细胞系中使用CRISPR/Cas9技术敲低PRC1的表达。设置对照组和PRC1敲低组（KO1#、KO2#）,通过CCK-8增殖实验、平板克隆实验、Transwell实验分别观察PRC1对肾癌细胞增殖、迁移能力的影响。通过皮下荷瘤实验评估PRC1在体内的致瘤能力。对PRC1敲除的Caki-1细胞进行RNA-seq测序分析PRC1在肾癌中潜在的致癌机制。结果：PRC1在肾癌组织的表达明显高于癌旁组织（P<0.05）。PRC1高表达的肾癌患者预后更差(P<0.05)，在敲低PRC1后,CCK-8结果显示,PRC1敲低后肾癌细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。平板克隆形成实验结果显示,PRC1敲低后细胞集落形成能力显著下降(P<0.05)。Transwell实验显示，PRC1敲低后细胞迁移能力显著下降(P<0.05)。此外，敲低PRC1的表达抑制了体内荷瘤的致瘤能力。通过对敲除PRC1的Caki-1细胞进行RNA测序，我们发现了Hippo通路是PRC1在肾癌中潜在的作用靶点。结论：PRC1在肾癌组织中表达显著增加，显示出与肾癌不良预后的关联。PRC1通过调控Hippo通路来促进肾癌细胞的增殖和迁移。

关键词：肾癌 PRC1 Hippo通路

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人尿源性干细胞的分离培养及诱导分化为平滑肌细胞

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4076-4082页

作者：陈佳汇戴晓琪徐彦钢李远超黄妹詹一飞杜宇轩李鎏强郭耀川卞军赖德辉广州医科大学附属第五医院泌尿外科广东省广州市510000 广州市中西医结合医院泌尿外科广东省广州市510000 广州中医药大学临床针灸康复学院广东省广州市510000

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞... 详细信息

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞诱导方案效能的对比研究仍较为匮乏。目的:旨在分离、培养及鉴定人尿源性干细胞,并比较两种不同成平滑肌诱导方案的效果。方法:采用多次离心法从11份健康成人志愿者尿液中分离提取尿源性干细胞,使用流式细胞仪进行表面标志物的鉴定,通过成骨、成脂诱导分化来验证尿源性干细胞的多向分化潜能。尿源性干细胞分别在含转化生长因子β1以及转化生长因子β1联合血小板衍生生长因子的成平滑肌细胞诱导分化培养基中诱导分化14 d,采用免疫荧光染色和Western blot检测平滑肌特异性蛋白(α-SMA、SM22)的表达差异。结果与结论:①成功从8份健康人尿液中分离出尿源性干细胞,细胞呈“米粒”样,具有很好的分裂增殖能力;②尿源性干细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD73、CD90和CD44,极低表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45,不表达CD19、CD105和HLA-DR;③经成骨和成脂诱导分化后,可见明显的钙结节和脂滴形成,茜素红染色和油红O染色结果呈阳性;④成平滑肌诱导培养14 d,免疫荧光染色显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组尿源性干细胞成平滑肌诱导分化率显著高于转化生长因子β1组(P<0.005);⑤成平滑肌诱导培养14 d,Western blot检测显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组α-SMA和SM22蛋白表达量显著高于转化生长因子β1组(P<0.005)。结果表明:尿源性干细胞可以通过多次离心法无创分离获取;相较于单纯转化生长因子β1,转化生长因子β1/血小板衍生生长因子联合应用能显著提高尿源性干细胞诱导分化为平滑肌细胞的效率。

关键词：尿源性干细胞诱导分化平滑肌细胞转化生长因子β1 血小板衍生生长因子组织工程

伴及不伴精索静脉曲张的无精子、严重少精子症患者Y染色体微缺失对比研究

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中华男科学杂志 2016年第4期22卷 325-329页

作者：高佃军陈韵高逸文柳港祝增军张红赵惠潍坊医学院附属医院泌尿外科山东潍坊261031 潍坊医学院附属医院儿科山东潍坊261031

目的:比较精索静脉曲张(VC)无精子症和严重少精子症与不伴VC无精子症和严重少精子症患者Y染色体微缺失发生率,探讨他们不育的内在原因。方法:A组为VC无精子症和严重少精子症的患者137例,其中无精子症70例(A1组),严重少精子症67例(A2组);... 详细信息

目的:比较精索静脉曲张(VC)无精子症和严重少精子症与不伴VC无精子症和严重少精子症患者Y染色体微缺失发生率,探讨他们不育的内在原因。方法:A组为VC无精子症和严重少精子症的患者137例,其中无精子症70例(A1组),严重少精子症67例(A2组);B组为不伴有VC的特发性无精子症和严重少精子症患者135例,其中无精子症69例(B1组),严重少精子症66例(B2组)。C组(对照组)为30例正常生育男性。采用多重PCR技术对受试者进行Y染色体微缺失检测。结果:1 A组137例中有23例检测到Y染色体微缺失,缺失率16.8%。B组135例中有23例检测到Y染色体微缺失,缺失率17.0%;C组未检测到Y染色体微缺失;2 A1组、A2组、B1组和B2组Y染色体微缺失率分别为为22.9%、10.4%、20.3%和13.6%;3严重少精子症A2组和B2组共133例中16例检测出Y染色体微缺失,发生率为12.0%;4A组与B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Y染色体微缺失发生率在伴有及不伴有精索静脉曲张的无精子、严重少精子症患者中无显著差异,Y染色体微缺失是精索静脉曲张伴有的无精子、严重少精子症病因之一。

关键词：精索静脉曲张无精子症严重少精子症 Y染色体微缺失

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儿童感染性腹泻病原学特征分析

中国病原生物学杂志 2025年第2期 206-210页

作者：任浩蒋悰赵晓莹南阳医学高等专科学校第一附属医院儿科六病区南阳医学高等专科学校第一附属医院泌尿外科

目的对儿童感染性腹泻的病原学特征进行深入探讨，以期为临床诊断和治疗提供科学依据。方法对本院收诊的375例儿童感染性腹泻病例进行病原体分离培养和鉴定，分析其流行病学特点、沙门菌的血清分型及其对抗生素的敏感性。对比细菌感... 详细信息

目的对儿童感染性腹泻的病原学特征进行深入探讨，以期为临床诊断和治疗提供科学依据。方法对本院收诊的375例儿童感染性腹泻病例进行病原体分离培养和鉴定，分析其流行病学特点、沙门菌的血清分型及其对抗生素的敏感性。对比细菌感染与病毒感染患儿的腹泻严重程度及性别、年龄分布特点。结果 375例感染性腹泻患儿中，细菌性感染占56.53%(212例),病毒性感染占43.47%(163例)。细菌性感染中，主要病原菌为沙门菌(50.94%)、致泻性大肠埃希菌(36.32%)等；病毒性感染中，主要病原菌为轮状病毒(35.58%)、诺如病毒(31.90%)等。108株沙门菌中检出9种血清型，鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、伤寒沙门菌占最高，分别为53.7%、24.07%、9.26%。伦敦沙门菌、斯坦利沙门菌、病牛沙门菌、德尔卑沙门菌、婴儿沙门菌、纽波特沙门菌占较低。沙门菌对氨苄西林、复方新诺明耐药率高，对头孢吡肟、左氧氟沙星、阿米卡星耐药率低，未对美罗培南、亚胺培南耐药。细菌感染性患儿平均腹泻天数(6.95±3.07)d,平均腹泻次数(8.63±2.91)次，轻度脱水10.38%(22/212),中度脱水4.72%(10/212),重度脱水3.77%(8/212),全身症状88.21%(187/212)。病毒感染性患儿平均腹泻天数(4.88±2.72)d,平均腹泻次数(6.38±2.85)次，轻度脱水26.38%(43/163),中度脱水18.4%(30/163),重度脱水2.45%(4/163),全身症状60.12%(98/163)。两组患儿腹泻天数、腹泻次数、出现脱水病例数占及出现全身症状病例数差异有统计学意义(P6～12个月婴儿，病毒感染则多见于0～6个月小婴儿。

关键词：感染性腹泻病原学特征沙门菌耐药性

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体外冲击波碎石后结石高复发原因的实验研究

中华泌尿外科杂志 2002年第4期23卷 238-240页

作者：郭振家谭保斌林桂亭刘海涛潍坊医学院附属医院泌尿外科 261031

目的　探讨上尿路结石体外冲击波碎石 (ESWL)术后结石高复发的原因。　方法　构建羊肾盂结石动物模型 ,对模型动物行ESWL ,分期观察羊肾并行组织形态学检查。　结果　碎石后1周肾盂粘膜均有不同程度的损伤 ,粘膜内有结石微小颗粒嵌入 ,... 详细信息

目的　探讨上尿路结石体外冲击波碎石 (ESWL)术后结石高复发的原因。　方法　构建羊肾盂结石动物模型 ,对模型动物行ESWL ,分期观察羊肾并行组织形态学检查。　结果　碎石后1周肾盂粘膜均有不同程度的损伤 ,粘膜内有结石微小颗粒嵌入 ,肾小盏内有弥散的小结石颗粒嵌入 ;2周后肾盂粘膜开始修复 ,4周基本恢复正常 ,但粘膜内嵌入的微小结石仍然存在 ,且周围出现纤维化包裹。　结论　ESWL术后结石复发与碎石所产生的微小颗粒粘膜嵌入肾盏及粘膜损伤有关。

关键词：体外冲击波碎石结石高复发原因实验研究尿结石复发

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胎肝滤液诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化

解剖学报 2009年第6期40卷 923-927页

作者：王晓萃蒋吉英吴金生丁洁于树娜魏德全王宝松姜栋栋潍坊医学院人体解剖学教研室潍坊医学院附属医院泌尿外科山东潍坊261053

目的探讨胚胎肝组织滤液定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为肝细胞的诱导条件,为肝组织工程提供新的种子细胞来源。方法在体外培养体系中加入胎肝滤液,模拟体内肝脏微环境,诱导BMSCs向肝细胞定向分化,以免疫细胞化学检测肝细胞... 详细信息

目的探讨胚胎肝组织滤液定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为肝细胞的诱导条件,为肝组织工程提供新的种子细胞来源。方法在体外培养体系中加入胎肝滤液,模拟体内肝脏微环境,诱导BMSCs向肝细胞定向分化,以免疫细胞化学检测肝细胞标志物;PAS检测糖原表达;靛青绿染色检测转化细胞的分化程度;测定细胞培养上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)的含量以检测其功能状态。结果BMSCs经胎肝滤液诱导14d时细胞呈现多角形、卵圆形或圆形细胞的特征性改变;甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)免疫反应、PAS反应和吲哚靛青绿(ICG)摄入实验及上清液中ALT、AST、ALP等酶均在诱导的第7天开始出现,AFP和ALB免疫反应在21d时达高峰;PAS反应和ICG摄入实验随着时间的延长而增强;上清液中的各个酶在14d达高峰,之后呈下降趋势。结论胎肝滤液可诱导BMSCs形成具有肝细胞形态和功能特点的细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞胎肝滤液肝细胞诱导免疫组织化学大鼠

精索静脉曲张男性不育患者Y染色体微缺失检测

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中华男科学杂志 2012年第11期18卷 973-977页

作者：高佃军李江松孙宝刚柳港祝增军刘伟光潍坊医学院附属医院泌尿外科潍坊医学院泌尿外科研究室山东潍坊261031

目的:探讨精索静脉曲张(varicocele,VC)不育患者Y染色体微缺失特点及其与临床表型的关系,为评价VC不育患者是否行手术治疗或ICSI提供依据。方法:VC不育患者174例,分为3组,A组:无精子症47例;B组:严重少精子症57例;C组:轻度少精子症70例;... 详细信息

目的:探讨精索静脉曲张(varicocele,VC)不育患者Y染色体微缺失特点及其与临床表型的关系,为评价VC不育患者是否行手术治疗或ICSI提供依据。方法:VC不育患者174例,分为3组,A组:无精子症47例;B组:严重少精子症57例;C组:轻度少精子症70例;设立正常生育的健康志愿者男性28例作为对照组(D组)。抽取外周血提取DNA,选取Y染色体上AZFa、AZFb、AZFc区共6个序列标签位点,应用多重PCR进行扩增;已生育女性26例作为阴性对照,分别运用琼脂糖凝胶电泳分离,对照阅读扩增产物,判定有无缺失存在以及缺失类型。结果:174例男性不育患者中有22例检测到Y染色体微缺失,缺失率12.64%;A组11例存在微缺失,B组11例存在微缺失,C组未检测到微缺失。A组与C组、B组与C组比较,差异均有显著性。A组缺失病例中有6例为AZFc区缺失,1例为AZFa缺失,2例为AZFb区缺失,2例为AZFb、AZFc区共同缺失;B组缺失病例中有8例为AZFc缺失,2例为AZFb缺失,1例为AZFb、AZFc区共同缺失。结论:①精液异常VC不育与Y染色体微缺失有关;②VC不育患者特别是无精子症和严重少精子症患者,应该进行Y染色体微缺失的检测。

关键词：精索静脉曲张男性不育 Y染色体微缺失无精子因子

诱导大鼠间充质干细胞形成的神经元样细胞的形态特征

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解剖学报 2007年第1期38卷 107-110页

作者：王晓萃吴金生付文玉邢海霞潍坊医学院组织学与胚胎学教研室潍坊261042 潍坊医学院附属医院泌尿外科潍坊261031

目的研究诱导大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）形成的神经元样细胞的形态特征。方法通过贴壁法培养鉴定大鼠骨髓MSCs，体外培养扩增纯化后加入新生鼠脑匀浆上清诱导48h。倒置显微镜和透射电镜下观察诱导前后细胞的形态结构变化，免疫细... 详细信息

目的研究诱导大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）形成的神经元样细胞的形态特征。方法通过贴壁法培养鉴定大鼠骨髓MSCs，体外培养扩增纯化后加入新生鼠脑匀浆上清诱导48h。倒置显微镜和透射电镜下观察诱导前后细胞的形态结构变化，免疫细胞化学方法鉴定诱导后细胞的性质。结果倒置显微镜下可见MSCs呈纺锤形和多角形，核居中，有1或2个核仁，诱导后细胞呈神经元样，细胞伸出较长的轴突样和树突样突起；免疫组织化学方法显示NSE、NF阳性，GFAP阴性。透射电镜下可见诱导前MSCs胞质较丰富，有较多的细胞器，细胞核呈圆形或椭圆形，也可见不规则形核，核染色质较疏松，有明显核仁，多为1个。有的MSCs表面可见较多的微绒毛。诱导后细胞胞质丰富，细胞核多为不规则形，染色质疏松，核仁较大，1～3个不等，细胞表面有发达的微绒毛。结论 MSCs是一种多分化潜能的细胞，诱导后分化成为具有成熟细胞器的神经元。

关键词：间充质干细胞超微结构分化骨髓细胞培养大鼠

精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡与caspase-3蛋白的表达

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中华男科学杂志 2006年第1期12卷 53-56页

作者：潘连军高佃军张鹤鹏王希友潍坊医学院附属医院泌尿外科山东潍坊261042

目的:探讨caspase-3在精索静脉曲张大鼠生精细胞中的表达及其与生精细胞凋亡的关系。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组(SOG)、30 d术后组(PG1)、60 d术后组(PG2),每组8只。建立左精索静脉曲张模型,TUNEL法检测生精细胞凋亡,免疫组... 详细信息

目的:探讨caspase-3在精索静脉曲张大鼠生精细胞中的表达及其与生精细胞凋亡的关系。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组(SOG)、30 d术后组(PG1)、60 d术后组(PG2),每组8只。建立左精索静脉曲张模型,TUNEL法检测生精细胞凋亡,免疫组化SABC法检测caspase-3表达。结果:SOG、PG1、PG2大鼠左、右侧睾丸每生精小管截面caspase-3阳性细胞数分别为0.117 5±0.012 9、0.246 3±0.042 1、0.293 8±0.051 1及0.165 0±0.019 2、0.253 8±0.021 9、0.277 5±0.034 3。与SOG相比,PG1和PG2组大鼠双侧睾丸生精细胞caspase-3表达均增加,差异有显著性(P=0.011 5及P=0.014 4)。结论:精索静脉曲张可能是大鼠生精细胞caspase-3表达增加且生精细胞凋亡增多的机制之一。

关键词：精索静脉曲张生精细胞凋亡蛋白酶caspase-3