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茯苓多糖通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控肝癌细胞自噬、化疗耐药的机制

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食品工业科技 2024年

作者：陈永芳李艳珂张淑静漯河医学高等专科学校

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰... 详细信息

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰序列)、pcDNA组(转染2 μg pcDNA)、pcDNA3.1-HCG11组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11)、PCP组(30 μg/mL)和PCP+pcDNA3.1-HCG11 组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11+30 μg/mL PCP)。MTT检测肝癌细胞耐药情况和抑制率，Western blot检测Beclin-1、LC3 I和LC3 II水平，实时荧光定量PCR(Real time quantitative PCR，qRT-PCR)检测细胞株中LncRNA HCG11和miR-539-3p的水平，双荧光素酶报告实验检测LncRNA HCG11和miR-539-3p的靶向关系，裸鼠成瘤实验验证体内瘤体的瘤重、瘤体积及自噬相关蛋白水平。结果：4-128 μg/mL PCP抑制HepG-2/DDP细胞增殖，7.5、15、30 μg/mL的PCP能显著降低HepG-2/DDP细胞中MRP1、P-gp、Beclin-1、LC3II的水平，下调HCG11水平，增加miR-539-3p的表达水平(P组比较，HCG11 siRNA 组HepG-2/DDP细胞HCG11相对表达水平、IC50(顺铂)、Beclin-1、LC3 II/ LC3 I比值显著降低，miR-539-3p水平和抑制率(顺铂)显著增加(P组比较，PCP+pcDNA3.1-HCG11处理组HCG11相对表达水平显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I比值显著增加(P组比较，PCP+pcDNA3.1+ HCG11 组抑制率显著降低(P组比较，PCP+ HCG11 shRNA 组肿瘤体积和肿瘤重量显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I水平显著下调(P<0.05)。结论：PCP能通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控耐药和自噬，并影响肝癌细胞的增殖。

关键词：茯苓多糖 LncRNA HCG11 miR-539-3p 化疗耐药性自噬

苦杏仁苷对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第7期40卷 1019-1023页

作者：闫萌萌徐林丽刘岩岩张艳沧州医学高等专科学校内科教研室河北沧州061000 沧州医学高等专科学校外科教研室河北沧州061000 沧州医学高等专科学校儿科教研室河北沧州061000 沧州医学高等专科学校科技实验中心河北沧州061000

目的研究苦杏仁苷对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾小管上皮细胞损伤及腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(AMPK/mTOR)通路的影响。方法将SD大鼠分为空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组(3mg·kg^(-1))、苦杏仁苷高剂量组(10mg·kg^(-1))... 详细信息

目的研究苦杏仁苷对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾小管上皮细胞损伤及腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(AMPK/mTOR)通路的影响。方法将SD大鼠分为空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组(3mg·kg^(-1))、苦杏仁苷高剂量组(10mg·kg^(-1))、CompoundC组(2.5mg·kg^(-1)AMPK抑制药CompoundC)、苦杏仁苷高剂量+CompoundC组(10mg·kg^(-1)苦杏仁苷+2.5mg·kg^(-1)/CompoundC),每组10只。除空白组外,其余各组大鼠用连续喂养高脂高糖饲料+腹腔注射60mg·kg^(-1)1%链脲佐菌素(STZ)方法进行DKD造模,造模成功后第2天给予相应药物处理,每天1次,持续给予8周,空白组、模型组均给予等体积0.9%NaCl。用二喹啉甲酸(BCA)法检测大鼠24h尿蛋白含量,用血糖仪检测大鼠空腹血糖,用全自动生化分析仪检测大鼠血肌酸酐和血尿素氮水平,用原位末端标记法(TUNEL)染色检测大鼠肾组织细胞凋亡情况,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平,用蛋白质印迹(WesternBlot)法测定大鼠肾组织AMPK/mTOR通路、自噬及凋亡蛋白的表达水平。结果空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组、苦杏仁苷高剂量组、Compound C组和苦杏仁苷高剂量+CompoundC组的肾小管损伤评分分别为(0.43±0.05)、(3.26±0.24)、(1.92±0.14)、(0.73±0.06)、(3.81±0.29)和(1.78±0.12)分,细胞凋亡率分别为(5.23±0.41)%、(26.35±2.17)%、(16.76±1.42)%、(6.13±0.53)%(35.68±3.08)%和(15.92±1.15)%,磷酸化mTOR(p-mTOR)/mTOR分别为0.31±0.03、0.80±0.08、0.60±0.06、0.38±0.04,0.92±0.08和0.69±0.07,磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK分别为0.91±0.08、0.39±0.04、0.56±0.06、0.88±0.07、0.23±0.02和0.52±0.05。模型组的上述指标与空白组、苦杏仁苷低剂量组、苦杏仁苷高剂量组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P组的上述指标与苦杏仁苷高剂量+CompoundC组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论苦杏仁苷可通过激活AMPK/mTOR信号通路,从而减轻DKD大鼠肾小管上皮细胞损伤。

关键词：苦杏仁苷腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物西罗莫司靶蛋白糖尿病肾病肾小管上皮细胞

桃叶珊瑚苷对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响及机制

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中国药房 2024年第8期35卷 918-924页

作者：司运辉蒋凯钱立全陈永顺别会杰商丘医学高等专科学校解剖与组胚教研室河南商丘476000 商丘医学高等专科学校生理学教研室河南商丘476000 商丘医学高等专科学校药理学教研室河南商丘476000

目的探讨桃叶珊瑚苷(Auc)调节周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)/周期蛋白B1(CCNB1)/Polo样激酶1(PLK1)信号通路对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法以人乳腺癌细胞MCF-7为对象,将其分为对照组,Auc低、中、高浓度组(Auc-L、Auc-M、Auc-H组... 详细信息

目的探讨桃叶珊瑚苷(Auc)调节周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)/周期蛋白B1(CCNB1)/Polo样激酶1(PLK1)信号通路对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法以人乳腺癌细胞MCF-7为对象,将其分为对照组,Auc低、中、高浓度组(Auc-L、Auc-M、Auc-H组,20、40、80μmol/L的Auc),Auc-H+pcDNA-NC组(80μmol/L的Auc+转染pcDNA-NC质粒),Auc-H+pcDNA-CDK1组(80μmol/L的Auc+转染pcDNA-CDK1质粒),检测各组细胞的增殖、克隆形成、侵袭、迁移能力,凋亡情况及周期分布,凋亡、上皮-间充质转化(EMT)、CDK1/CCNB1/PLK1信号通路相关蛋白的表达情况。以BALB/c裸鼠为对象,通过皮下接种MCF-7细胞悬液建立移植瘤模型,并将其分为对照组和Auc组(每组12只),检测各组裸鼠肿瘤体积、质量及肿瘤组织中CDK1/CCNB1/PLK1信号通路相关蛋白的表达情况。结果与对照组细胞相比,Auc各浓度组的细胞克隆形成数、增殖率、细胞侵袭数、划痕愈合率、G1/G0期和S期细胞占比以及B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、神经钙黏素、纤维连接蛋白、CDK1、CCNB1、PLK1蛋白的表达水平均显著降低(P组细胞相比,Auc-H组细胞上述指标的差异均无统计学意义(P>0.05),而Auc-H+pcDNA-CDK1组细胞上述指标则显著逆转(P组裸鼠相比,Auc组裸鼠肿瘤体积、质量以及肿瘤组织中CDK1、CCNB1、PLK1蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05)。结论Auc能抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,诱导细胞周期阻滞,抑制EMT进程,该作用可能与抑制CDK1/CCNB1/PLK1信号通路激活有关。

关键词：桃叶珊瑚苷乳腺癌恶性生物学行为 CDK1/CCNB1/PLK1信号通路

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3-Pyrrolyl BODIPY的绿色生物合成、光物理性质及应用研究

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有机化学 2024年第1期44卷 216-223页

作者：马翠云罗海澜张福华郭丹陈树兴王飞漯河医学高等专科学校河南省营养与健康工程研究中心河南漯河462002 中原食品实验室河南漯河462333

3-吡咯基氟硼二吡咯(3-Pyrrolyl BODIPYs)荧光染料的绿色合成与应用是值得进一步研究的重要问题.到目前为止,在所有的合成方法中,都无法避免使用有毒的吡咯类有机化合物作为反应底物.本研究使用一种微生物源天然色素,沙雷氏菌y2的次级... 详细信息

3-吡咯基氟硼二吡咯(3-Pyrrolyl BODIPYs)荧光染料的绿色合成与应用是值得进一步研究的重要问题.到目前为止,在所有的合成方法中,都无法避免使用有毒的吡咯类有机化合物作为反应底物.本研究使用一种微生物源天然色素,沙雷氏菌y2的次级代谢产物灵菌红素,来合成目标化合物.利用灵菌红素天然的吡咯基甲川基结构,合成了一种新的3-pyrrolyl BODIPY.光物理性质实验表明其具有荧光成像的性能,然后使用SW480细胞进行细胞染色探索.激光共聚焦显微镜荧光成像结果显示其可在三通道中发射出不同强度的荧光,Z-stack结果揭示其红色通道与绿色通道中细胞穿透性可以达到266μm.细胞毒性实验也说明3-pyrrolyl BODIPY具有良好的生物相容性,是一种值得开发的荧光染料.

关键词：沙雷氏菌y2 灵菌红素绿色生物合成 3-吡咯基氟硼二吡咯荧光成像

灰树花多糖通过LncRNA HULC/miR-186-5p轴调控胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭

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食品工业科技 2024年第14期45卷 335-343页

作者：于静段子朋徐松涛漯河医学高等专科学校河南漯河462002

目的:分析灰树花多糖(Grifola frondose polysaccharide,GFP)对胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:将对数期GBC-SD细胞随机分组:对照组、GFP组(0.5、1、2µg/mL GFP)、shNC组、shHULC组、miR-NC组、miR-186-5p mimics组、GFP+pcDNA组、GFP+pcDNA-HULC组。CCK-8法检测细胞抑制率;Transwell小室法检测GBC-SD细胞迁移和侵袭;Western Blot印迹检测Cyclin D1、P21、MMP-2、MM-9蛋白水平;qRT-PCR检测LncRNA HULC和miR-186-5p的水平;Starbase在线软件预测HULC与miR-186-5p的结合位点,双荧光素酶报告实验检测LncRNA HULC和miR-186-5p的靶向关系。裸鼠移植瘤实验检测GFP对GBC-SD细胞移植瘤体内生长的影响。结果:0.25~8µg/mL GFP对胆囊癌GBC-SD细胞具有一定的抑制作用;与对照组比较,0.5、1、2µg/mL的GFP(极)显著(P组比较,miR-186-5p mimics组HULC-WT的荧光素酶活性极显著降低(P0.05);与shNC组比较,shHULC组HULC相对表达水平极显著(P组比较,GFP+pcDN-HULC组抑制率显著降低(P组比较,GFP+pcDN-HULC给药组瘤体体积、质量极显著增加(P<0.01),miR-186-5p水平极显著下调(P<0.01)。结论:GFP可抑制胆囊癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制与调控LncRNA HULC/miR-186-5p有关。

关键词：灰树花多糖 LncRNA HULC miR-186-5p 胆囊癌增殖迁移侵袭

基于生物信息分析去势抵抗性前列腺癌关键基因

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中国老年学杂志 2024年第11期44卷 2679-2683页

作者：朱宝安张军要张印坡漯河高等医学专科学校生物化学教研室漯河高等医学专科学校病理学教研室

目的基于生物信息分析去势抵抗性前列腺癌的关键基因，进而找到有效的诊断靶标和治疗方法。方法通过GEO数据库、Oncomine数据库联合分析发现潜在的关键基因受体型酪氨酸磷酸酶(PTPR)J;采用免疫组化检测去势敏感性前列腺癌和去势抵抗... 详细信息

目的基于生物信息分析去势抵抗性前列腺癌的关键基因，进而找到有效的诊断靶标和治疗方法。方法通过GEO数据库、Oncomine数据库联合分析发现潜在的关键基因受体型酪氨酸磷酸酶(PTPR)J;采用免疫组化检测去势敏感性前列腺癌和去势抵抗性前列腺癌患者肿瘤组织中PTPRJ表达水平；shRNA沉默去势抵抗性前列腺癌细胞系DU-145细胞中PTPRJ蛋白表达；采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、细胞流式、Transwell检测沉默PTPRJ基因表达对DU-145细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果通过GEO数据库生物信息学分析，发现577个基因出现差异性表达，可能与CRPC发生发展密切相关的74个基因表达上调，17个基因表达下调。使用Oncomine联合分析，与原位癌相比，PTPRJ在转移性前列腺患者中的表达显著增加(P高等级前列腺癌中的PTPRJ表达显著上调(P组织中PTPRJ蛋白表达显著高于去势敏感性前列腺癌(P<0.01);沉默PTPRJ可抑制DU-145细胞迁移和侵袭(P<0.01)。结论 PTPRJ在CRPC中高表达，PTPRJ能促进DU-145细胞迁移和侵袭；PTPRJ可能在CRPC发生发展过程中发挥重要作用，为CRPC的治疗提供潜在的治疗靶点。

关键词：生物信息分析前列腺癌受体型酪氨酸磷酸酶J

miR-26a靶向调控FGFR4对胆囊癌细胞生物学活性的影响及相关机制

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中国老年学杂志 2024年第12期 2837-2840页

作者：王景马永超赫欣徐松涛漯河医学高等专科学校医疗系漯河医学高等专科学校教务处

目的探讨微小RNA(miR)-26a靶向调控成纤维细胞生长因子受体(FGFR)4对胆囊癌细胞生物学活性的影响及相关机制。方法培养人胆囊癌细胞系(SGC-996细胞)、人肝内胆管上皮细胞(HIBEpic细胞),反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两种细胞miR-26a... 详细信息

目的探讨微小RNA(miR)-26a靶向调控成纤维细胞生长因子受体(FGFR)4对胆囊癌细胞生物学活性的影响及相关机制。方法培养人胆囊癌细胞系(SGC-996细胞)、人肝内胆管上皮细胞(HIBEpic细胞),反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两种细胞miR-26a及FGFR4 mRNA表达水平，Western印迹检测两种细胞FGFR4蛋白表达水平；使用Targetscan7.2软件预测FGFR4的目标mRNA,并通过双荧光素酶检测二者的结合情况。将SGC-996细胞分为空白对照组(常规培养基培养)、miR-26a过表达组(转染miR-26a mimic)、miR-26a抑制剂组(转染miR-26a inhibitor),检测细胞增殖能力、迁移能力及侵袭细胞数；Western印迹检测Wnt/β-连环蛋白(catenin)通路相关蛋白表达。结果胆囊癌细胞中miR-26a表达水平明显低于正常胆囊细胞(P组胆囊癌细胞miR-26a表达水平明显高于空白对照组，miR-26a抑制剂组明显低于空白对照组(P组FGFR4 mRNA和蛋白表达水平明显低于空白对照组，miR-26a抑制剂组明显高于空白对照组(P组胆囊癌细胞增殖率、细胞迁移率、侵袭细胞数明显低于空白对照组(P组胆囊癌细胞信号通路Wnt5a抗体(Wnt5a)、β-catenin、细胞周期素(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)2蛋白表达水平明显低于空白对照组(P组均明显高于空白对照组(P<0.01)。结论 miR-26a靶向调控FGFR4可能通过抑制Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达在胆囊癌中发挥抑癌作用。

关键词：胆囊癌微小RNA(miR)-26a 成纤维细胞生长因子受体4 SGC-996细胞 Wnt/β-catenin通路

睡眠、心理状态对老年慢性病患者认知功能的影响

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中国老年学杂志 2024年第4期44卷 988-991页

作者：张琳徐琳陈永芳段阳妹漯河医学高等专科学校河南漯河462000

目的分析睡眠、心理状态对老年慢性病患者认知功能的影响。方法纳入162例老年慢性病患者,采用蒙特利尔认知评估(MoCA)量表评估患者认知功能,并依据MoCA评分分为认知障碍组(MoCA评分<26分)与认知正常组(Mo-CA评分≥26分)。统计并比较两... 详细信息

目的分析睡眠、心理状态对老年慢性病患者认知功能的影响。方法纳入162例老年慢性病患者,采用蒙特利尔认知评估(MoCA)量表评估患者认知功能,并依据MoCA评分分为认知障碍组(MoCA评分组(Mo-CA评分≥26分)。统计并比较两组人口学资料、睡眠时长、心理状态〔采用汉密尔顿焦虑(HAMA)量表评估焦虑程度,采用汉密尔顿抑郁(HAMD)量表评估抑郁程度〕,重点分析睡眠、心理状态对老年慢性病患者认知功能的影响。结果162例老年慢性病患者MoCA评分为19~30分,平均得分(24.85±2.77)分,其中79例患者MoCA评分组饮酒史、每日运动时间组,有配偶占比低于认知正常组,差异有统计学意义(P组睡眠时间短于认知正常组,焦虑、抑郁评分高于认知正常组,差异有统计学意义(P<0.05);双变量Pearson相关性检验结果显示,老年慢性病患者认知功能(MoCA评分)与睡眠时间(X1)呈正相关关系(r=0.337,P<0.05),与心理状态〔HAMA评分(X2)、HAMD评分(X3)〕均呈负相关关系(r=-0.391、-0.382,P<0.05);构建线性回归模型,得到线性回归方程:Y=26.007+0.352X1-0.168X2-0.272X3,结果显示,睡眠时间、心理状态均对老年慢性病患者认知功能有明显影响(P<0.05)。结论老年慢性病患者普遍存在认知功能下降,部分患者存在认知障碍,可能受睡眠时间、心理状态的影响。

关键词：慢性病睡眠时间心理状态认知功能

长链非编码RNA GNAQ-ASI在高雄激素多囊卵巢综合征中的机制研究

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中国临床药理学杂志 2024年第8期40卷 1170-1174页

作者：李冰刘琳赫欣漯河医学高等专科学校医疗系河南漯河462000

目的探讨长链非编码RNA GNAQ-AS1介导miRNA-20b-5p靶向调控细胞分裂周期与凋亡调节蛋白2(CDCD2)在高雄激素多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠中的作用及其机制。方法在细胞水平上,分别通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测LncRNA GNAQ-AS1和miRNA-... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA GNAQ-AS1介导miRNA-20b-5p靶向调控细胞分裂周期与凋亡调节蛋白2(CDCD2)在高雄激素多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠中的作用及其机制。方法在细胞水平上,分别通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测LncRNA GNAQ-AS1和miRNA-20b-5p的最佳抑制浓度,以Transwell小室检测细胞的迁移情况,并通过流式细胞术检测细胞周期。在动物水平上,将大鼠随机分为4组,分别为对照组、模型组、lncRNA GNAQ-AS1 siRNA组、miRNA-20b-5p mimics组,每组10只。模型组连续灌服溶于1%羧甲基纤维素的来曲唑1 mg·kg^(-1)·d^(-1),共3周,每周3次;lncRNA GNAQ-AS1 siRNA组在模型建立的基础上,用siRNA沉默lncRNA GNAQ-AS1表达,每周注射1次,共3周;miRNA-20b-5p mimics组在模型建立的基础上,用miRNA-20b-5p mimics过表达miRNA-20b-5p,尾静脉注射给药,给药量为1 mg·kg^(-1),每周注射1次,共3周。对照组注射等体积的0.9%NaCl。用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测血清促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、血清抗缪勒管激素(AMH)、促卵泡生长激素(FSH)表达水平,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测卵巢组织中lncRNA GNAQ-AS1、miRNA-20b-5p和CDCD2的表达情况,用蛋白质印迹法检测CDCD2蛋白表达水平。结果 CCK-8检测结果表明,当给予5μmol·L^(-1)lncRNA GNAQ-AS1 siRNA时,对照组和lncRNA GNAQ-AS1组的细胞存活率分别为(38.25±0.62)%和(86.14±3.13)%,当给予10μmol·L^(-1)miRNA-20b-5p mimics时,对照组和miRNA-20b-5p mimics组的细胞增殖抑制率分别为(40.70±0.32)%和(85.35±2.13)%,表明KGN细胞给予10μmol·L^(-1)miRNA-20b-5p mimics时细胞活力明显降低。在动物水平上,RT-qPCR结果显示:模型组的lncRNA GNAQ-AS1、miRNA-20b-5p和CDCD2 mRNA的表达分别为1.72±0.37、0.59±0.10和2.47±0.13,表明lncRNA GNAQ-AS1、CDCD2的表达水平在模型组中明显上调,miRNA-20b-5p表达水平较于对照组下调(P组相比,模型组大鼠血清LH、T和AMH水平明显升高,FSH和E2水平明显降低(均P组相比,lncRNA GNAQ-AS1 siRNA组和miRNA-20b-5p mimics组LH、T和AMH水平显著降低,FSH和E2水平显著升高。与模型组相比,CDCD2蛋白表达水平在lncRNA GNAQ-AS1 siRNA组和miRNA-20b-5p mimics组均显著升高。结论 LncRNA GNAQ-AS1介导miRNA-20b-5p靶向调控CDCD2在PCOS中发挥重要作用。

关键词：长链非编码RNA 鸟嘌呤核苷酸结合蛋白q多肽-反义RNA1 高雄激素多囊卵巢综合征分子机制