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罗伊氏乳杆菌Q35的基因组测序、益生性分析和草酸降解能力改造(英文)

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中国生物化学与分子生物学报 2024年

作者：牛冬玉孔令慧刘向勇秦加阳滨州医学院药学院

罗伊氏乳杆菌（Limosilactobacillus reuteri）是一类与人类和动物机体健康密切相关的微生物，然而菌株应用于人类和动物前需要对其安全性和益生性进行评估。本研究旨在对一株高产罗伊菌素的罗伊氏乳杆菌Q35进行了全基因组测序、益生性... 详细信息

罗伊氏乳杆菌（Limosilactobacillus reuteri）是一类与人类和动物机体健康密切相关的微生物，然而菌株应用于人类和动物前需要对其安全性和益生性进行评估。本研究旨在对一株高产罗伊菌素的罗伊氏乳杆菌Q35进行了全基因组测序、益生性分析和草酸降解能力改造。全基因组测序结果显示，该菌株完整基因组序列长度为2 145 158 bp，GC含量为38.91%，有2 121个基因。本文对基因组中抗生素抗性、毒力因子和毒素编码基因进行了鉴定和分析，并通过抗生素耐药性、急性口服毒理学和溶血测试等研究证实，该菌株具有较高的安全水平。基因组上发现粘附和应激耐受相关基因的存在，经人工胃液和胆汁盐胁迫后菌株存活率较高，抗氧化能力测试结果显示，该菌株对羟自由基具有较强的清除能力。以上结果表明，罗伊氏乳杆菌Q35具有特殊的益生菌特性。此外，本文在菌株Q35基因组上鉴定到3个短的草酰辅酶A脱羧酶基因oxc1、oxc2和oxc3，通过过量表达这3个基因使菌株降解草酸铵的能力由29.5%提高到48.8%。本研究结果表明，罗伊氏乳杆菌Q35具有良好的安全性和益生性，该菌株在高草酸尿症等代谢疾病的治疗中具有一定的应用潜力。

关键词：罗伊氏乳杆菌基因组测序安全性益生性草酸降解

甲基丙烯酰明胶水凝胶作为细胞三维培养支架在骨组织工程中的应用

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中国组织工程研究 2024年第22期28卷 3576-3582页

作者：王赛楠王晓菲张莉滨州医学院山东省滨州市256600 滨州医学院附属医院口腔科山东省滨州市256600

背景:骨缺损的治疗一直是临床医生亟待解决的临床难题,用甲基丙烯酰明胶进行细胞体外3D培养,可以为大面积骨缺损的治疗提供新的方向。目的:文章综述了甲基丙烯酰明胶作为3D细胞培养支架在骨组织工程中的研究进展,以期为临床骨缺损修复... 详细信息

背景:骨缺损的治疗一直是临床医生亟待解决的临床难题,用甲基丙烯酰明胶进行细胞体外3D培养,可以为大面积骨缺损的治疗提供新的方向。目的:文章综述了甲基丙烯酰明胶作为3D细胞培养支架在骨组织工程中的研究进展,以期为临床骨缺损修复提供进一步的参考。方法:应用计算机检索中国知网及PubMed数据库1986年1月至2023年8月收录的文献,中英文检索词分别为“骨缺损,骨组织工程,生物支架材料,水凝胶,光交联水凝胶,甲基丙烯酰明胶,三维培养,细胞培养”和“Bone defect,Bone tissue engineering,Biomaterial scaffold,Hydrogel,Methylacrylyl photocrosslinked hydrogel,Three-dimensional culture;Cell culture”,最终纳入68篇文献进行综述分析。结果与结论:①同二维培养相比,3D培养可以在无菌条件下,构建立体三维空间,更好地模拟体内环境,为细胞提供合适的温度、酸碱度及足够的营养,使细胞能够在体外正常生长增殖并保持其正常结构与功能,具有独特优势。②在骨组织工程生物支架材料的选择中,水凝胶因其良好的生物相容性、可降解性及具有立体三维网络结构等优点,已被广泛应用于骨再生的研究。③甲基丙烯酰明胶的物理及生物性能受到浓度、光照时间及光引发剂种类以及反应体系等因素的影响,而这些性能均能对细胞的黏附、生长及增殖,甚至细胞形态及功能产生一定的影响。④甲基丙烯酰明胶因具有良好的生物相容性、物理可调节性、可注射性及光敏性能,已被广泛应用于3D细胞封装、3D生物打印及基于数字光处理的立体光刻技术等细胞3D培养体系中。⑤应用各类复合甲基丙烯酰明胶进行细胞的3D培养,可以更好地促进血管形成及骨再生,为临床骨缺损的治疗提供更多可能。⑥目前甲基丙烯酰明胶的来源、合成的方法以及安全性尚没有健全的标准,需要进一步加强研究,对甲基丙烯酰明胶在3D细胞培养领域的应用进行更深入的完善。

关键词：骨缺损骨组织工程生物支架材料水凝胶光交联水凝胶甲基丙烯酰明胶二维培养三维培养细胞培养

HMGB1-TLR4-IL-23-IL-17A轴在寻常型银屑病患者血清中的表达水平及临床意义

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中国免疫学杂志 2024年第7期40卷 1479-1483页

作者：朱小凤林雅雯窦越王静胡海友高昱马蕾滨州医学院附属医院滨州256603

目的:探讨HMGB1-TLR4-IL-23-IL-17A轴在寻常型银屑病患者血清中的表达水平及临床意义。方法:采用ELISA检测60例中重度寻常型银屑病患者和30例健康志愿者血清中HMGB1、TLR4、IL-23、IL-17A的表达水平,比较各细胞因子表达差异及其与疾病... 详细信息

目的:探讨HMGB1-TLR4-IL-23-IL-17A轴在寻常型银屑病患者血清中的表达水平及临床意义。方法:采用ELISA检测60例中重度寻常型银屑病患者和30例健康志愿者血清中HMGB1、TLR4、IL-23、IL-17A的表达水平,比较各细胞因子表达差异及其与疾病严重程度评分(PASI)的相关性。检测并比较IL-17A抑制剂诱导期治疗后皮损改善率达PASI75及以上的22例中重度寻常型银屑病患者血清HMGB1-TLR4-IL-23-IL-17A轴表达水平的变化。结果:寻常型银屑病患者血清HMGB1、TLR4、IL-23、IL-17A表达水平显著高于健康对照组,重度患者表达水平高于中度患者,并与PASI评分呈正相关。IL-17A抑制剂诱导期后,银屑病患者血清中HMGB1-TLR4-IL-23-IL-17A轴表达水平显著降低。结论:寻常型银屑病患者血清中HMGB1-TLR4-IL-23-IL-17A轴高表达,且与疾病严重程度相关,该信号轴参与了寻常型银屑病的疾病过程,为银屑病免疫治疗提供了新的思路。

关键词：银屑病 HMGB1 TLR4 IL-23 IL-17A

高压氧治疗对神经病理性疼痛大鼠疼痛行为及脊髓胶质细胞活化的影响

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中华航海医学与高气压医学杂志 2024年第2期31卷 229-232页

作者：王万胜奚海艳李伟冯真真滨州医学院附属医院康复医学科滨州256603 滨州医学院附属医院妇科滨州256603

目的探究高压氧(HBO)治疗对坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)所致神经病理性疼痛大鼠疼痛行为及脊髓胶质细胞活化的影响。方法选取36只成年雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为假手术组(S组)、CCI组和CCI+HBO组,每组12只。CCI+HBO组大鼠于造模... 详细信息

目的探究高压氧(HBO)治疗对坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)所致神经病理性疼痛大鼠疼痛行为及脊髓胶质细胞活化的影响。方法选取36只成年雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为假手术组(S组)、CCI组和CCI+HBO组,每组12只。CCI+HBO组大鼠于造模后第1天开始给予HBO治疗,1 h/d,连续10 d。所有大鼠在造模前1 d及造模后第1、3、7、10天检测机械反射阈值(WMT)和热反射潜伏期(TWL)。第10天HBO治疗结束后,运用免疫荧光技术和RT-qPCR技术检测各组大鼠L4~L5节段脊髓组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合衔接分子1(Iba-1)的表达水平。结果造模后第10天,与S组比较,CCI组大鼠的MWT明显降低、TWL明显缩短,脊髓GFAP和Iba-1表达水平明显增加(P<0.05);与CCI组比较,CCI+HBO组大鼠的MWT明显增高、TWL值明显延长,脊髓GFAP和Iba1表达水平明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论HBO治疗可减轻CCI大鼠的神经病理性疼痛,可能是通过抑制大鼠脊髓胶质细胞的活化来实现的。

关键词：高压氧神经病理性疼痛小胶质细胞星形胶质细胞

动脉自旋标记联合扩散张量成像对腮腺肿瘤的鉴别诊断价值

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磁共振成像 2024年第3期15卷 50-55页

作者：周金亮崔运福张迪鸣任瑞狄宁宁沈善昌姜兴岳王山山滨州医学院附属医院放射科滨州256600 滨州医学院附属医院门诊部滨州256600

目的探讨应用动脉自旋标记(arterial spin labeling,ASL)和扩散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)评价多参数MRI在鉴别腮腺肿瘤中的临床价值。材料与方法回顾性分析滨州医学院附属医院2019年6月至2023年11月66名经手术病理证实的... 详细信息

目的探讨应用动脉自旋标记(arterial spin labeling,ASL)和扩散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)评价多参数MRI在鉴别腮腺肿瘤中的临床价值。材料与方法回顾性分析滨州医学院附属医院2019年6月至2023年11月66名经手术病理证实的腮腺肿瘤患者,术前均行3D ASL和DTI,并测量肿瘤最大血流量(maximum tumor blood flow,TBFmax)和最小表观扩散系数(minimum apparent diffusion coefficient,ADCmin)、各向异性分数(fraction anisotropy,FA)。使用Mann-Whitney U检验或Kruskal-Wallis检验比较良性肿瘤(benign tumors,BT)和恶性肿瘤(malignant tumors,MT)的各参数值。使用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析评估各参数和联合有差异的参数对腮腺肿瘤的诊断效能。结果66例腮腺肿瘤患者中,BT 55例[其中Warthin瘤(Warthin tumors,WT)15例,多形性腺瘤(pleomorphic adenomas,PA)23例,其他17例],MT11例。BT的FA值低于MT(0.13±0.06 vs.0.18±0.04,P=0.003)。PA的TBFmax值[(43.72±37.64)mL/(100 g·min^(-1))]低于MT[(92.56±58.26)mL/(100 g·min^(-1))](P<0.001)和WT[(145.26±64.54)mL/(100 g·min^(-1))](P=0.016)。PA的ADCmin值[(1.55±0.51)×10^(-3)mm^(2)/s]高于MT[(1.11±0.28)×10^(-3)mm^(2)/s](P=0.016)和WT[(1.03±0.53)×10^(-3)mm^(2)/s](P<0.001)。MT的FA值(0.18±0.05)高于PA(0.11±0.04)(P<0.001)和WT(0.12±0.02)(P=0.015)。FA鉴别腮腺BT与MT的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.78,敏感度、特异度分别为81.82%、70.18%。FA区分WT、PA与MT的AUC分别为0.85、0.87,敏感度分别为72.73%、100.00%,特异度分别为94.12%、65.22%。TBFmax、ADCmin鉴别WT与PA的AUC分别为0.90、0.85,敏感度分别为94.12%、95.65%,特异度分别为91.30%、82.35%。三者联合鉴别PA与MT的AUC可提高至0.98,敏感度为100.00%,特异度为86.96%。结论ASL联合DTI有助于鉴别诊断腮腺良恶性肿瘤,综合运用多参数各优势有助于区分WT、PA和MT。联合有差异的参数可显著提高区分PA与MT的诊断效能。

关键词：腮腺肿瘤 Warthin瘤多形性腺瘤恶性肿瘤动脉自旋标记成像扩散张量成像磁共振成像

达芬奇机器人治疗后纵隔神经鞘瘤并发脑脊液漏1例

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中华胸心血管外科杂志 2024年第7期40卷 414-415页

作者：李昀泽黄海波滨州医学院第二临床医学院烟台264100 烟台业达医院胸外科烟台264006 烟台毓璜顶医院胸外科烟台264000

73岁女性患者, 体检发现纵隔肿物20天。胸椎核磁共振检查示胸10椎体左侧旁占位。完善检查, 行达芬奇机器人手术切除。术后出现脑脊液漏, 因纵隔肿物与椎间孔关系密切, 术中机械臂的牵拉力度控制不佳, 引起硬脊膜撕裂所致。患者卧床保守... 详细信息

73岁女性患者, 体检发现纵隔肿物20天。胸椎核磁共振检查示胸10椎体左侧旁占位。完善检查, 行达芬奇机器人手术切除。术后出现脑脊液漏, 因纵隔肿物与椎间孔关系密切, 术中机械臂的牵拉力度控制不佳, 引起硬脊膜撕裂所致。患者卧床保守治疗3周后痊愈。

关键词：纵隔神经鞘瘤纵隔肿物

一次离心法制备兔贫白细胞富血小板血浆的离心条件研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第2期38卷 183-188页

作者：张克凡张晨晨任强王德宁孙力王鑫王耀敏石辉滨州医学院附属医院骨关节与运动医学科山东滨州256603 滨州医学院附属医院手术室山东滨州256603 南阳市中心医院骨科河南南阳473009

目的探究使用一次离心法制备兔贫白细胞富血小板血浆(leukocyte-poor platelet-rich plasma,LPPRP)的最佳离心条件。方法取16只3~4月龄健康新西兰兔,于兔耳背中央动脉采集15 mL抗凝血,分别于1、2个月后重复取血步骤。将所取血液标本于... 详细信息

目的探究使用一次离心法制备兔贫白细胞富血小板血浆(leukocyte-poor platelet-rich plasma,LPPRP)的最佳离心条件。方法取16只3~4月龄健康新西兰兔,于兔耳背中央动脉采集15 mL抗凝血,分别于1、2个月后重复取血步骤。将所取血液标本于离心半径16.7 cm分别以转速1200、1300、1400、1500 r/min(对应离心力分别为269×g、315×g、365×g、420×g)下离心2、3、4、5 min,共计16组。各组离心后采集分离平面1.5 mL以上的血浆,计算并比较不同离心条件下各组LP-PRP的体积、血小板富集系数及血小板回收率。结果所有离心条件下获得的LP-PRP体积范围为1.8~7.6 mL。相同离心转速时,随离心时间延长,LP-PRP体积显著增大,同时LP-PRP血小板富集系数呈降低趋势。离心2 min时,1200、1300 r/min转速下LP-PRP体积2.0,其中1200 r/min转速下离心2 min能够获得最高的LP-PRP血小板富集系数。1200 r/min转速下离心4、5 min与1400 r/min转速下离心5 min获得的LP-PRP血小板回收率均>60%,1200 r/min转速下离心4、5 min组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用一次离心法制备兔LP-PRP时,采集15 mL血液以离心半径16.7 cm、1200 r/min转速下离心4 min即可制备体积>2.0 mL、血小板富集系数>2.0且血小板回收率>60%的LP-PRP,在最短时间达到LP-PRP的最佳作用参数。

关键词：一次离心法贫白细胞富血小板血浆离心条件兔

丹参酮Ⅱ通过干预PSMD14表达影响结直肠癌细胞放疗敏感性的机制研究

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中药材 2024年 1253-1259页

作者：成植温王滨宫凯凯马静董宁霞滨州医学院附属医院肿瘤科滨州医学院附属医院药学部滨州医学院附属医院医学研究中心

目的:探讨丹参酮ⅡA对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响及其对PSMD14表达的调控作用。方法:将结肠癌HCT116细胞为空白对照组、放疗（4Gy照射）组、放疗+丹参酮ⅡA低浓度（0.01 mg/L）组、放疗+丹参酮ⅡA高浓度（0.02 mg/L）组、放疗+丹参酮... 详细信息

目的:探讨丹参酮ⅡA对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响及其对PSMD14表达的调控作用。方法:将结肠癌HCT116细胞为空白对照组、放疗（4Gy照射）组、放疗+丹参酮ⅡA低浓度（0.01 mg/L）组、放疗+丹参酮ⅡA高浓度（0.02 mg/L）组、放疗+丹参酮ⅡA高浓度组+过表达PSMD14（pc-PSMD14）组。MTT实验检测细胞的增殖活力;Hoechst333258染色实验检测细胞凋亡率;流式细胞仪检测细胞周期;彗星实验检测细胞的DNA损伤;免疫组化检测细胞中CDK3、CyclinD1蛋白表达;免疫荧光检测细胞中DNA-PK、γ-H2AX蛋白表达; PCR检测细胞中PSMD14、CyclinD1、CDK3、DNA-PK、γ-H2AX、Bcl-2 mR NA表达;Western Blot检测细胞中PSMD14、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:射线照射能显著降低结肠癌HCT166细胞的增殖,阻滞其细胞周期,诱导其DNA损伤,提高其细胞凋亡率,而丹参酮ⅡA可显著增强细胞对射线的敏感性,过表达PSMD14可部分逆转丹参酮ⅡA的增敏作用。结论:丹参酮ⅡA能显著增强细胞的放疗敏感性,其机制可能与抑制细胞中PSMD14表达有关。

关键词：丹参酮Ⅱ 结直肠癌放疗敏感性 26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基14

黄芪多糖对白血病Jurkat细胞增殖、凋亡及周期的影响

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世界中医药 2024年第16期19卷 2413-2417页

作者：尹宝慧耿雪静姜吉祥李有杰孙允霄滨州医学院烟台附属医院烟台264100 滨州医学院烟台264003

目的:研究黄芪多糖对白血病细胞(Jurkat)增殖、凋亡、周期的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:不同浓度黄芪多糖(0、100、200、400μg/mL)作用于Jurkat细胞,细胞计数(CCK-8)法检测各组细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组细胞周期及细... 详细信息

目的:研究黄芪多糖对白血病细胞(Jurkat)增殖、凋亡、周期的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:不同浓度黄芪多糖(0、100、200、400μg/mL)作用于Jurkat细胞,细胞计数(CCK-8)法检测各组细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组细胞周期及细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(Real Time PCR)法及蛋白印迹法检测细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期素E(CyclinE)、胱天蛋白酶3(Caspase3)、胱天蛋白酶8(Caspase 8)的mRNA及蛋白表达。结果:不同浓度黄芪多糖(100、200、400μg/mL)均有效抑制Jurkat细胞增殖,呈剂量及时间依赖性(P<0.05);流式细胞术检测各组细胞周期及细胞凋亡情况,随黄芪多糖浓度增加,G_(0)/G_(1)期细胞逐渐增多,G_(2)/M期细胞逐渐减少,细胞凋亡率逐渐增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);黄芪多糖处理组细胞中CyclinD1、CyclinE mRNA及蛋白表达下降、Caspase3、Caspase8mRNA及蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪多糖能有效抑制白血病Jurkat细胞增殖,促进其凋亡,发挥抗白血病作用。其作用机制与调控CyclinD1、CyclinE表达,阻滞细胞周期于G_(0)/G_(1)期,促进凋亡相关基因Caspase3、Caspase8表达有关。

关键词：黄芪多糖急性淋巴细胞白血病增殖凋亡周期儿童细胞周期素凋亡通路