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不同静电纺丝膜上骨髓间充质干细胞的黏附、增殖与成血管平滑肌分化

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中国组织工程研究 2025年第4期29卷 661-669页

作者：孙现娟王秋花张锦艺杨杨杨王文双张晓晴滨州医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室生物材料与组织再生国际合作联合实验室山东省烟台市264003 烟台毓璜顶医院妇科山东省烟台市264000

背景:临床上迫切需要小口径人工血管来治疗冠状动脉和外周动脉疾病,目前,血管组织工程已成为制备小口径人工血管的主要方法,选择合适的生物材料和细胞来源是小口径组织工程血管构建成功的关键因素。目的:观察4种静电纺丝膜材料对骨髓间... 详细信息

背景:临床上迫切需要小口径人工血管来治疗冠状动脉和外周动脉疾病,目前,血管组织工程已成为制备小口径人工血管的主要方法,选择合适的生物材料和细胞来源是小口径组织工程血管构建成功的关键因素。目的:观察4种静电纺丝膜材料对骨髓间充质干细胞增殖、黏附及分化为血管平滑肌细胞的影响。方法:分离提取SD大鼠骨髓间充质干细胞。将骨髓间充质干细胞分别接种于聚己内酯(PCL)、聚己内酯-透明质酸(PCL-HA)、聚己内酯-丝素蛋白(PCL-SF)、聚己内酯-明胶(PCL-GEL)静电纺丝膜材料上,培养1,3,7 d后,扫描电镜下观察材料上的细胞排布,鬼笔环肽染色观察材料上的细胞增殖与黏附,qRT-PCR检测材料上细胞分泌的CD90、Meflin、转化生长因子βmRNA表达;向血管平滑肌细胞诱导分化7 d后,qRT-PCR检测材料上细胞ɑ-平滑肌肌动蛋白mRNA表达。结果与结论:①扫描电镜下可见骨髓间充质干细胞在4种静电纺丝膜上均沿着静电纺丝膜的纤维走向排列;②鬼笔环肽染色显示,骨髓间充质干细胞在4种静电纺丝膜上分布规律,均沿着纤维走向呈现平行分布,并且PCL-HA、PCL-SF、PCL-GEL静电纺丝膜较PCL静电纺丝膜更有利于骨髓间充质干细胞的增殖、黏附,PCL-SF静电纺丝膜相较于PCL-HA、PCL-GEL静电纺丝膜更有利于骨髓间充质干细胞的增殖、黏附;③qRT-PCR检测显示,4种静电纺丝膜材料均可维持骨髓间充质干细胞CD90和Meflin的mRNA表达,组间比较差异无显著性意义(P>0.05);PCL-HA、PCL-SF、PCL-GEL组培养1,7 d的转化生长因子βmRNA表达高于PCL组(P<0.05),PCL-SF组培养3,7 d的转化生长因子βmRNA表达高于其他3组(P<0.05),PCL-HA组培养7 d的转化生长因子βmRNA表达高于PCL-GEL组(P<0.05);④qRT-PCR检测显示,PCL-SF组ɑ-平滑肌肌动蛋白mRNA表达高于其他3组(P<0.05),PCL-HA组ɑ-平滑肌肌动蛋白mRNA表达高于PCL组(P<0.05);⑤结果表明:相较于PCL、PCL-HA、PCL-GEL静电纺丝膜,PCL-SF静电纺丝膜与骨髓间充质干细胞结合更适合制备小口径组织工程血管。

关键词：骨髓间充质干细胞小口径组织工程血管静电纺丝聚己内酯聚己内酯-透明质酸聚己内酯-丝素蛋白聚己内酯-明胶

miR-451通过调控NLRP3/CCND1细胞焦亡抑制乳腺癌侵袭及转移

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中国老年学杂志 2025年第1期 153-157页

作者：马维昌张淑鹏李文杰陈政华滨州医学院烟台附属医院甲状腺乳腺外科滨州医学院烟台附属医院重症医学科

目的探讨miR-451抑制乳腺癌细胞侵袭与转移的分子生物学机制。方法采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)及乳腺癌(MDA-MB-231,MCF-7)细胞中miR-451、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3、细胞... 详细信息

目的探讨miR-451抑制乳腺癌细胞侵袭与转移的分子生物学机制。方法采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)及乳腺癌(MDA-MB-231,MCF-7)细胞中miR-451、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3、细胞周期蛋白(CCN)D1 mRNA表达；将MDA-MB-231细胞分为空白1组、阴性对照(NC)1组、miR-451 mimic组，利用瞬时转染技术将空白质粒、miR-451过表达质粒转染到MDA-MB-231细胞中，噻唑蓝(MTT)法、Transwell侵袭实验检测各组细胞生长、侵袭；Western印迹检测各组细胞NLRP3、CCND1表达的影响。MDA-MB-231细胞分为空白2组、阴性对照(NC)2组、si-NLRP3组、si-CCND1组、miR-451 mimic+si-NLRP3+si-CCND1组，利用小分子干扰技术沉默MDA-MB-231细胞中NLRP3、CCND1基因表达，MTT、Transwell侵袭实验检测各组细胞生长、侵袭情况；Western印迹检测各组细胞半胱氨酸蛋白酶(caspase)-1、剪切后的(cleaved)caspase-1、GasderminD蛋白(GSDMD)表达。结果与正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)比较，乳腺癌(MDA-MB-231,MCF-7)细胞中miR-451 mRNA表达明显降低，NLRP3、CCND1 mRNA表达明显升高(P<0.01);与空白1组、NC1组比较，miR-451 mimic组MDA-MB-231细胞增殖明显受到抑制，细胞侵袭能力明显降低，NLRP3、CCND1蛋白表达明显降低(P<0.01);与空白2组、NC2组比较，si-NLRP3组、si-CCND1组miR-351 mimic+si-NLRP3+si-CCND1组MDA-MB-231细胞侵袭能力明显降低，焦亡相关蛋白caspase-1、cleaved caspase-1、GSDMD表达明显升高(P<0.01)。结论 miR-451能够通过调控NLRP3/CCND1介导的细胞焦亡途径抑制乳腺癌细胞的侵袭与转移。

关键词： miR-451 乳腺癌转移核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3 细胞周期蛋白(CCN)D1 细胞焦亡

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锌离子与牛血清白蛋白相互作用的研究

光谱实验室 2011年第1期28卷 256-258页

作者：李凤荣先国滨州医学院烟台校区分析实验室

用荧光光谱法研究了锌离子(Zn2+)与牛血清白蛋白(BSA)的作用机制。实验表明,Zn2+对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭。求出了猝灭常数、结合常数及结合位点数。利用同步荧光光谱研究了Zn2+对BSA分子荧光光谱的影响。

关键词： Zn2+ 牛血清白蛋白荧光光谱静态猝灭

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纳米银的制备及吸收光谱分析

化学试剂 2010年第12期32卷 1114-1116,1126页

作者：荣先国张怀斌刘文波滨州医学院烟台校区分析实验室山东烟台264003 滨州医学院烟台校区化学教研室山东烟台264003 滨州医学院烟台校区实验中心山东烟台264003

制备出了具有纳米尺寸的纳米银,探讨了在电解质和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)环境中纳米银的吸收光谱。实验发现:电解质对纳米银的吸收光谱均有不同程度的影响,而且对纳米银特征峰的影响是阴阳粒子共同作用的结果;Cl-对纳米银的影响比Br-、I-大... 详细信息

制备出了具有纳米尺寸的纳米银,探讨了在电解质和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)环境中纳米银的吸收光谱。实验发现:电解质对纳米银的吸收光谱均有不同程度的影响,而且对纳米银特征峰的影响是阴阳粒子共同作用的结果;Cl-对纳米银的影响比Br-、I-大;二价阳离子比一价阳离子对纳米银吸收光谱的影响要大的多;PVP会影响纳米银粒子的光谱性质。

关键词：纳米银吸收光谱电解质

哮喘大鼠淋巴液与血液CD4^+CD25^+Treg及IL-10、TGF-β水平比较和地塞米松干预的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第3期26卷 238-241页

作者：赵志旭冯学斌石涛杨成张立霞滨州医学院儿科学教研室山东滨州256603 滨州医学院实验室中心山东烟台264003

目的:观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞、IL-10、TGF-β在哮喘大鼠淋巴液与血液中的水平,以及地塞米松干预的影响,探讨其与哮喘发病的关系。方法:建立大鼠哮喘模型,收集激发后0、24、48 h淋巴液、血液中淋巴细胞,采用流式细胞术(FCM)检... 详细信息

目的:观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞、IL-10、TGF-β在哮喘大鼠淋巴液与血液中的水平,以及地塞米松干预的影响,探讨其与哮喘发病的关系。方法:建立大鼠哮喘模型,收集激发后0、24、48 h淋巴液、血液中淋巴细胞,采用流式细胞术(FCM)检测淋巴液及血液中CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率;采用ELISA方法检测血浆及淋巴液中IL-10、TGF-β水平。结果:哮喘组淋巴液和血液的CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率水平、血浆IL-10和TGF-β浓度在各时间点均低于对照组和治疗组(P0.05)。结论:哮喘大鼠淋巴液中存在CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量以及功能失调,且淋巴液中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平显著高于其血液水平,地塞米松可能通过影响CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量以及功能而发挥治疗作用。

关键词：哮喘调节性T细胞白细胞介素10 转化生长因子β

IFN-γ对人胎盘源间充质干细胞上PDL2表达及诱导外周血CD8^＋IL-10^＋T细胞亚群分化的调节作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第9期34卷 691-696页

作者：李恒王国艳王炜玮王斐斐刘冉冉栾希英滨州医学院免疫教研室烟台264003 滨州医学院组胚教研室烟台264003

目的：探讨IFN-γ对人胎盘源间充质干细胞（humanplacentamesenchymalstemcells，hPMSCs）上程序性死亡配体2（programmeddeathligand2，PDL2）的表达及诱导外周血CD8＋IL-10＋T细胞亚群分化的调节作用。方法应用酶消化法分离hPMSCs；RT-PCR和FCM分析hPMSCs上PDL2的表达，以及IFN-γ对PDL2表达的影响；Ficoll密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞（PBMC），并用E花环法纯化T细胞；FCM分别检测PDL2单克隆抗体（McAb）阻断及IFN-γ刺激条件下，hPMSCs对PHA和CD3/CD28McAb活化的T细胞中CD8＋IL-10＋T细胞亚群变化。结果hPMSCs高表达PDL2，IFN-γ能够上调hPMSCs上PDL2的表达；FCM分析结果显示，hPMSCs可诱导CD8＋IL-10＋T细胞亚群的分化，在PHA和CD3/CD28McAb活化条件下，外周血T细胞中CD8＋IL-10＋T细胞亚群比例在有hPMSCs存在组明显高于无hPMSCs存在组（P＜0．01）；阻断PDL2的表达后，hPMSCs对T细胞向CD8＋IL-10＋T细胞亚群诱导分化能力明显下降；IFN-γ刺激后的hPMSCs对外周血中CD8＋IL-10＋T细胞亚群的诱导作用明显上调。结论hPMSCs能够诱导外周血中T细胞向CD8＋IL-10＋T细胞亚群分化，PDL2能够协同hPMSCs诱导CD8＋IL-10＋T细胞亚群形成；IFN-γ通过上调hPMSCs对PDL2的表达，促进hPMSCs对外周血T细胞向CD8＋IL-10＋T细胞亚群转化的调节作用。

关键词：胎盘间充质干细胞 PDL2 CD8^+IL-10^+T细胞 IFN-γ

注射用头孢美唑钠与牛血清白蛋白相互作用的研究

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光谱实验室 2011年第1期28卷 136-139页

作者：张洪芹张怀斌滨州医学院烟台校区组织胚胎学教研室滨州医学院烟台校区化学教研室

荧光光谱法研究了注射用头孢美唑钠(Cefmetazole Sodium for Injection,CS)与牛血清白蛋白(BSA)的作用机制。结果表明,头孢美唑钠对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭,求出了猝灭常数、结合常数及结合位点数。研究了Zn2+对头孢... 详细信息

荧光光谱法研究了注射用头孢美唑钠(Cefmetazole Sodium for Injection,CS)与牛血清白蛋白(BSA)的作用机制。结果表明,头孢美唑钠对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭,求出了猝灭常数、结合常数及结合位点数。研究了Zn2+对头孢美唑钠与BSA作用的影响,Zn2+的加入使得头孢美唑钠与BSA的结合常数与结合位点数减小。

关键词：头孢美唑钠牛血清白蛋白荧光光谱 Zn2+

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柠檬酸钠与牛血清白蛋白的相互作用

光谱实验室 2011年第5期28卷 2659-2661页

作者：黄玉玲张怀斌滨州医学院烟台校区化学教研室

用荧光光谱法研究了柠檬酸钠与牛血清白蛋白(BSA)的作用机制。实验表明,柠檬酸钠对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭,并求出了猝灭常数、结合常数及结合位点数。

关键词：柠檬酸钠牛血清白蛋白荧光猝灭

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核黄素与牛血清白蛋白相互作用的研究

光谱实验室 2010年第6期27卷 2387-2390页

作者：李嘉霖张怀斌滨州医学院烟台校区化学教研室

运用荧光光谱法研究了核黄素(Riboflavin,Rf)与牛血清白蛋白(BSA)的作用机制。结果表明:Rf对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭,求出了猝灭常数、结合常数及结合位点数。还研究了Zn^(2+)对核黄素与BSA作用的影响,Zn^(2+)的加入... 详细信息

运用荧光光谱法研究了核黄素(Riboflavin,Rf)与牛血清白蛋白(BSA)的作用机制。结果表明:Rf对BSA具有荧光猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭,求出了猝灭常数、结合常数及结合位点数。还研究了Zn^(2+)对核黄素与BSA作用的影响,Zn^(2+)的加入使得核黄素与BSA的结合常数与结合位点数减小。

关键词：核黄素牛血清白蛋白荧光光谱锌离子