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尿石素C对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第4期50卷 908-916页

作者：于国兴张鑫杜恒玮崔冰洁高娜刘翠兰杜静滨州医学院附属医院血液内科山东滨州256603 滨州医学院附属医院医学研究中心山东滨州256603 滨州医学院附属医院妇科山东滨州256603

目的:探讨尿石素C(UC)对急性髓系白血病(AML)HL-60细胞增殖、凋亡和自噬的影响,阐明其相关作用机制。方法:HL-60细胞分为不同浓度(0、20、40、60、80及100μmol·L^(-1))尿石素A(UA)、尿石素B(UB)和UC组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活... 详细信息

目的:探讨尿石素C(UC)对急性髓系白血病(AML)HL-60细胞增殖、凋亡和自噬的影响,阐明其相关作用机制。方法:HL-60细胞分为不同浓度(0、20、40、60、80及100μmol·L^(-1))尿石素A(UA)、尿石素B(UB)和UC组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,光学显微镜观察不同浓度UC组细胞形态表现;HL-60细胞分为不同浓度(0、20、40及80μmol·L^(-1))UC组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合不同浓度(0、20、40及80μmol·L^(-1))UC组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性。HL-60细胞分为对照组和不同浓度(20、40及80μmol·L^(-1))UC组,采用活/死细胞染色法检测各组死细胞率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,细胞自噬染色检测试剂盒[单丹磺酰戊二胺(MDC)法]检测各组细胞自噬情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中苄氯素1(Beclin 1)、自噬相关蛋白9(ATG9)和自噬相关蛋白7(ATG7)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3)、微管相关蛋白1轻链3(LC-3)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)和磷酸化AMPK(p-AMPK)蛋白表达水平。结果:CCK-8法,培养24、48和72 h,分别与0μmol·L^(-1) UA、UB和UC组比较,不同浓度UA、UB和UC组细胞增殖活性均降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度和时间依赖性;48 h时,与UA和UB比较,UC半数抑制浓度(IC50)最低。细胞形态表现,与对照组比较,随着UC浓度升高,细胞间连接和细胞数量减少,细胞碎片增加。CCK-8法,与40和80μmol·L^(-1) UC组比较,3-MA联合40和80μmol·L^(-1) UC组细胞增殖活性升高(P<0.05或P<0.01)。活/死细胞染色,与对照组比较,40和80μmol·L^(-1) UC组死细胞率升高(P<0.01)。流式细胞术,与对照组比较,80μmol·L^(-1) UC组细胞凋亡率升高(P<0.01)。MDC法,与对照组比较,随着UC浓度升高,不同浓度UC组细胞绿色荧光逐渐增强。RT-qPCR法,与对照组比较,80μmol·L^(-1) UC组细胞中Beclin 1、ATG9和ATG7 mRNA表达水平升高(P<0.01)。Western blotting法,与对照组比较,20、40和80μmol·L^(-1) UC组细胞中Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.01),80μmol·L^(-1) UC组细胞中膜型LC3/胞浆型LC3(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)比值升高(P<0.05),40和80μmol·L^(-1) UC组细胞中p-AMPK/AMPK及p-ERK/ERK比值升高(P<0.01)。结论:UC可抑制人AML HL-60细胞增殖,诱导其细胞凋亡和自噬,并可提高细胞中ERK和AMPK蛋白磷酸化水平。

关键词：尿石素C 白血病细胞细胞增殖细胞凋亡细胞自噬

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青岛市使用男同社交软件的男男性行为者HIV暴露后预防使用现状及影响因素分析

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中国艾滋病性病 2024年第9期 935-939页

作者：李天莹罗倩倩崔田雨巩路遥滨州医学院

目的了解青岛市使用男同社交软件的MSM HIV nPEP使用情况，并分析相关影响因素。方法于2023年8-12月，通过山东省青岛市某社会公益组织招募年龄≥18周岁、生理性别为男性、开展调查前6个月内发生过男男性行为、自报HIV感染状态为阴性... 详细信息

目的了解青岛市使用男同社交软件的MSM HIV nPEP使用情况，并分析相关影响因素。方法于2023年8-12月，通过山东省青岛市某社会公益组织招募年龄≥18周岁、生理性别为男性、开展调查前6个月内发生过男男性行为、自报HIV感染状态为阴性或未知、使用过男同社交软件的MSM作为研究对象，利用自行设计的电子调查问卷收集研究对象的一般人口学信息、HIV检测史、nPEP使用史、高危性行为史等资料，采用非条件Logistic回归模型分析nPEP使用的影响因素，利用限制性立方样条（RCS）进一步分析男同社交软件使用频次（天/周）与使用nPEP的剂量-反应关系。结果共收集有效问卷315份，12.7%(40/315)的研究对象使用过nPEP。非同性性向（OR=4.95,95%CI:1.37～17.84）、nPEP知识得分越高（OR=1.36,95%CI:1.04～1.77）、使用过PrEP(OR=8.51,95%CI:2.90～24.95)是nPEP使用的促进因素；不方便获取nPEP相关药品（OR=0.24,95%CI:0.06～0.93）是nPEP使用的阻碍因素。男同社交软件使用频次越高（OR=1.03,95%CI:0.85～1.27），研究对象使用nPEP的可能性越高。结论青岛市使用男同社交软件的MSM nPEP使用率较低，未来应重点关注男同社交软件在促进MSM HIV生物学预防措施利用方面的作用机制及效果。

关键词：艾滋病病毒男同社交软件男男性行为者非职业暴露后预防

磁共振髓鞘探针Gd-DTDAS在多发性硬化大鼠髓鞘损伤模型中的实验研究

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磁共振成像 2024年第2期15卷 122-128页

作者：刘彩云邵翠杰翁娜李国栋黄丹琪刘珈宾莉王旭滨州医学院附属医院核医学科滨州256600 滨州医学院附属医院医学研究中心滨州256600

目的探讨MRI对比剂Gd-DTDAS在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)大鼠髓鞘损伤模型中的应用价值。材料与方法细胞实验中,将少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OLN-93)随机分为对照组2(n=3)和溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)组(n=3),LPC组细胞置于无菌共聚焦培养皿中与1 mL 800μM LPC溶液共孵育30 min。通过噻唑蓝比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)评价细胞毒性,计算OLN-93与Gd-DTDAS共孵育24 h后的吸光度和存活率;细胞摄取实验中,对照组2和LPC组对比,定量两组细胞对Gd-DTDAS的摄取值以及相应荧光强度的变化。动物实验中,将6~8周龄SD大鼠随机分为对照组(n=12)与实验组(n=18),实验组大鼠左侧胼胝体注射1%LPC溶液(1%LPC溶于PBS)。造模后(1、3、7 d)进行行为学观察,并在注射后7天进行T1WI及T2WI序列扫描。根据MRI异常信号部位进行大鼠脑组织Gd-DTDAS染色(n=6)以及浸泡(n=6),评估Gd-DTDAS与髓鞘部位的结合情况,其中,染色实验分组命名为对照组3与实验组3,浸泡实验分组命名为对照组4与实验组4;通过尾静脉注射Gd-DTDAS,MR评估实验组(n=6)注射Gd-DTDAS前后大脑髓鞘变化。结果细胞毒性实验中,当Gd-DTDAS浓度增加到400μM时,OLN-93细胞的存活率约为95%,细胞存活率差异无统计学意义(t=4.20,P>0.05)。细胞摄取实验中,两组细胞均能摄取Gd-DTDAS,LPC组摄取量显著低于对照组2,差异具有统计学意义(t=31.75,P<0.01)。动物体外实验中,与对照组3比较,Gd-DTDAS染色的实验组3脑组织切片荧光强度显著下降,差异有统计学意义(U=9,P<0.01);Gd-DTDAS浸泡中,对照组4(n=6)与实验组4(n=6)脑组织切片浸泡后MRI分辨率显著升高,差异有统计学意义(对照组4,t=8.76,P<0.01)(实验组4,t=2.89,P<0.01)。体内实验中,与尾静脉注射前比较,注射后胼胝体区域MRI T1maps弛豫性显著降低(t=14.46,P<0.01)。结论髓鞘探针Gd-DTDAS能够更好地结合髓磷脂丰富的区域,髓鞘靶向MRI显像更佳,能特异性显示多发性硬化髓鞘损伤部位。

关键词：自身免疫性疾病多发性硬化髓鞘探针分子成像磁共振成像

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胆管癌细胞外泌体对自然杀伤细胞功能影响

中华肿瘤防治杂志 2024年第11期31卷 670-676页

作者：王新月王蔚琛张帆曹璋任乐彬王楠胡凤爱刘乃国高洪莲周洁柏雪莲滨州医学院附属医院医学研究中心山东滨州256603 滨州医学院附属医院检验科山东滨州256603 滨州医学院附属医院肝胆外科山东滨州256603 滨州医学院附属医院病理科山东滨州256603 滨州医学院附属医院产前诊断中心山东滨州256603

目的探究胆管癌细胞来源的外泌体(RBE-Exos)对自然杀伤(NK)细胞功能的影响及其内在机制。方法采用免疫组化染色对比分析NK细胞在胆管癌组织和癌旁组织中的浸润数量;通过超速离心法从胆管癌细胞中分离出外泌体,透射电镜(TEM)观察RBE-Exo... 详细信息

目的探究胆管癌细胞来源的外泌体(RBE-Exos)对自然杀伤(NK)细胞功能的影响及其内在机制。方法采用免疫组化染色对比分析NK细胞在胆管癌组织和癌旁组织中的浸润数量;通过超速离心法从胆管癌细胞中分离出外泌体,透射电镜(TEM)观察RBE-Exos的形态特征,蛋白质印迹实验鉴定RBE-Exos的蛋白标志物;纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)检测RBE-Exos粒径分布。NK-92细胞与RBE-Exos共培养后,荧光染色示踪RBE-Exos进入细胞;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹实验检测黏附分子的表达水平。LDH法检测NK-92细胞的杀伤功能变化。结果免疫组化染色显示,与癌旁组织相比,表达CD56(t=2.977,P=0.008)和NKp46(t=4.530,P<0.001)特异性标志分子的NK细胞在癌组织中的浸润数量减少。RBE-Exos电镜下呈酒窝或杯状,特异性表达CD63和HSP70。NTA结果显示RBE-Exos平均直径为(102.90±7.00)nm。荧光染色显示,培养24 h后RBE-Exos进入NK-92细胞。RBE-Exos处理后,NK-92细胞失去了正常的聚团现象而呈现分散的状态。qRT-PCR结果显示,RBE-Exos处理组黏附分子CD11a(t=4.999,P=0.038)、CD18(t=9.225,P=0.012)和CD54(t=12.050,P=0.007)在转录水平上的表达较PBS组均降低。蛋白质印迹实验结果表明,RBE-Exos处理组较PBS组黏附分子CD11a(t=5.140,P=0.007)、CD18(t=7.177,P=0.002)和CD54(t=8.713,P<0.001)蛋白表达均减少。LDH检测显示,RBE-Exos减弱NK-92细胞对靶细胞的杀伤功能(20∶1,t=3.975,P=0.017;10∶1,t=5.776,P=0.005)。结论胆管癌可能通过释放外泌体抑制NK细胞黏附分子表达从而抑制其在肿瘤部位的浸润。

关键词：胆管癌外泌体自然杀伤细胞肿瘤微环境免疫逃逸黏附分子

冬凌草甲素对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移和凋亡的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第4期50卷 917-924页

作者：梁超代娟娟周宁王丹丹赵杰安迪武艳滨州医学院附属医院医学研究中心山东滨州256600 滨州医学院附属医院肿瘤科山东滨州256600 滨州医学院附属医院耳鼻咽喉头颈外科山东滨州256600

目的:探讨冬凌草甲素对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移、上皮-间质转化(EMT)和凋亡的影响,阐明其相关抗肿瘤机制。方法:鼻咽癌HONE-1细胞经不同浓度(0、5、10、20、40、80和160 mg·L^(-1))冬凌草甲素处理48 h后,采用CCK-8法检测各组细... 详细信息

目的:探讨冬凌草甲素对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移、上皮-间质转化(EMT)和凋亡的影响,阐明其相关抗肿瘤机制。方法:鼻咽癌HONE-1细胞经不同浓度(0、5、10、20、40、80和160 mg·L^(-1))冬凌草甲素处理48 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率,确定后续实验的用药浓度。HONE-1细胞分为对照组、3 mg·L^(-1)冬凌草甲素组和6 mg·L^(-1)冬凌草甲素组,培养24和48 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法检测各组细胞中EdU阳性细胞率,克隆形成实验检测各组细胞中克隆形成数,Transwell小室实验和细胞划痕实验检测各组细胞中迁移细胞数和划痕愈合率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)和细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)和多腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)蛋白表达水平。结果:CCK-8法确定冬凌草甲素48 h半数抑制浓度(IC50)为12.18 mg·L^(-1),以1/4 IC50和1/2 IC50值为后续实验用药浓度。与对照组比较,24和48 h时3和6 mg·L^(-1)冬凌草甲素组细胞增殖活性降低(P<0.05或P<0.01),EdU阳性细胞率降低(P<0.05或P<0.01),细胞中克隆形成数和迁移细胞数减少(P<0.05或P<0.01),划痕愈合率降低(P<0.05或P<0.01),细胞中CDK1和CDK4 mRNA表达水平降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin、Caspase-3和PARP1蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:冬凌草甲素可通过抑制细胞周期相关蛋白的表达及EMT,进而抑制人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、克隆形成和迁移能力,促进细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用。

关键词：冬凌草甲素鼻咽肿瘤细胞周期上皮-间质转化细胞凋亡

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巨噬细胞极化调控纤维化机制的研究进展

吉林大学学报（医学版） 2024年第5期50卷 1465-1473页

作者：陈潭陈艳滨州医学院附属医院消化内科山东滨州256603 滨州医学院附属医院消化病研究所山东滨州256603

纤维化导致的器官结构破坏和功能减退乃至衰竭严重威胁人类健康及生命。巨噬细胞是存在于组织和器官中的重要免疫细胞。在转化生长因子β1 (TGF-β1)、Toll样受体4 (TLR4)/核因子κB(NF-κB)、Janus激酶(JAK)/信号换能器和转录激活器(ST... 详细信息

纤维化导致的器官结构破坏和功能减退乃至衰竭严重威胁人类健康及生命。巨噬细胞是存在于组织和器官中的重要免疫细胞。在转化生长因子β1 (TGF-β1)、Toll样受体4 (TLR4)/核因子κB(NF-κB)、Janus激酶(JAK)/信号换能器和转录激活器(STAT)、Notch信号通路、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)和环磷腺苷响应性元件结合蛋白(CREB)等众多因子及通路独自或相互串扰下,巨噬细胞可发生极化。在内脏器官纤维化中,单一或多种因子与通路构成的巨噬细胞极化信号网络是调节纤维化的重要机制之一。巨噬细胞极化后产生趋化因子和基质金属蛋白酶(MMP)等促纤维化相关因子,导致纤维化发生发展。目前国内外研究多聚焦于巨噬细胞在感染、肿瘤和纤维化中的作用,对巨噬细胞极化在纤维化中机制的研究较少。现对巨噬细胞极化涉及的相关通路进行综述,并总结巨噬细胞极化在器官纤维化中的机制,为纤维化的靶向治疗提供依据。

关键词：纤维化巨噬细胞极化 M1巨噬细胞 M2巨噬细胞信号通路

紫草素及其衍生物在口腔软硬组织再生中的潜力

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中国组织工程研究 2024年第17期28卷 2747-2752页

作者：卞志鸿张云涛李泽铭侯玉东滨州医学院山东省滨州市256600 滨州医学院附属医院山东省滨州市256600 滨州医学院口腔医学院山东省烟台市264010

背景:研究表明,紫草素具有促进骨缺损修复、治疗骨质疏松的作用。目的:总结紫草素及其衍生物在口腔软硬组织再生中的应用潜力方法:检索PubMed、Web of Science、万方、中国知网、维普数据库2002-2023年收录的相关文献,中文检索词为“紫... 详细信息

背景:研究表明,紫草素具有促进骨缺损修复、治疗骨质疏松的作用。目的:总结紫草素及其衍生物在口腔软硬组织再生中的应用潜力方法:检索PubMed、Web of Science、万方、中国知网、维普数据库2002-2023年收录的相关文献,中文检索词为“紫草素,口腔,牙周炎,抗菌,成骨分化,破骨细胞,骨质疏松,毒理学”,英文检索词为“shikonin,oral cavity,periodontitis,antibacterial,bone formation,Osteoclast,osteoporosis,toxicology”。结果与结论:紫草素及其衍生物具有抗炎、抑制牙龈卟啉单胞菌等牙周致病菌、促进牙周创面愈合以及牙槽骨组织再生的生物活性。紫草制剂可以治疗口腔阿弗他溃疡、口腔念珠菌病等口腔黏膜疾病。这些证据表明紫草素及其衍生物在治疗牙周病、防治口腔疾病和促进牙周软硬组织再生方面表现出良好的前景。如何将紫草素与组织工程相结合,从而实现更快的口腔软硬组织愈合还有待研究。

关键词：紫草素口腔疾病牙周炎抗菌成骨破骨

锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗SandersⅡ型和Ⅲ型跟骨骨折

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中国修复重建外科杂志 2024年第4期38卷 432-437页

作者：张洋赵永杰杜瑞刘颖孙广超滨州医学院附属医院足踝外科山东滨州256603

目的探讨锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折的临床效果。方法回顾分析2019年3月—2022年4月收治且符合选择标准的128例SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折患者临床资料。其中65例采用锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗(研... 详细信息

目的探讨锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折的临床效果。方法回顾分析2019年3月—2022年4月收治且符合选择标准的128例SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折患者临床资料。其中65例采用锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗(研究组),63例采用单纯锁定钢板治疗(对照组)。两组患者性别、年龄、骨折侧别及Sanders分型、致伤原因、受伤至手术时间等基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。记录并比较两组患者手术时间、术中出血量、住院时间、骨折愈合时间;术前及术后12个月采用美国矫形足踝协会(AOFAS)评分(包括总分、疼痛评分、功能评分、力线评分)评价患者足部功能恢复情况,并于X线片上测量跟骨宽度、跟骨高度、跟骨长度、Böhler角、Gissane角等影像学指标。结果所有患者均随访至术后12个月。两组患者手术时间、术中出血量、住院时间和骨折愈合时间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组和对照组分别出现1例和2例切口愈合不良。术后12个月,两组间跟骨长度、跟骨高度、Gissane角及Böhler角手术前后差值比较,差异无统计学意义(P>0.05);但研究组跟骨宽度手术前后差值显著高于对照组(P研究组患者AOFAS评分总分手术前后差值显著高于对照组,差异有统计学意义(P研究组疼痛和功能评分手术前后差值明显高于对照组(P0.05)。结论与单纯锁定钢板固定相比,锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折,可以更加有效地改善跟骨距下关节面宽度,避免腓骨长短肌撞击,减轻患者疼痛,增加距下关节活动度,临床效果较好。

关键词：跟骨骨折锁定钢板空心螺钉内固定

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数字化三维重建在胎盘植入性疾病中的应用

中华围产医学杂志 2024年第2期27卷 166-169页

作者：王俊芳刘瀛孟凡婕张磊磊滨州医学院附属医院妇产科滨州256600

胎盘植入性疾病是造成患者不良妊娠结局的重要原因之一。因常用的辅助检查手段有一定局限性,易造成漏诊或误诊,从而导致不良结局。数字化三维重建是基于原始数据所构建的三维图像,可视化结构之间的立体空间关系,弥补二维图像的不足。数... 详细信息

胎盘植入性疾病是造成患者不良妊娠结局的重要原因之一。因常用的辅助检查手段有一定局限性,易造成漏诊或误诊,从而导致不良结局。数字化三维重建是基于原始数据所构建的三维图像,可视化结构之间的立体空间关系,弥补二维图像的不足。数字化三维重建作为新的辅助诊断工具,有极大的个体化精准医疗发展潜力。本文就近年来超声及MRI的三维重建在胎盘植入性疾病中的应用及研究进行综述。

关键词：侵入性胎盘成像,三维精准医学超声检查,产前磁共振成像