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胆管癌细胞外泌体对自然杀伤细胞功能影响

中华肿瘤防治杂志 2024年第11期31卷 670-676页

作者：王新月王蔚琛张帆曹璋任乐彬王楠胡凤爱刘乃国高洪莲周洁柏雪莲滨州医学院附属医院医学研究中心山东滨州256603 滨州医学院附属医院检验科山东滨州256603 滨州医学院附属医院肝胆外科山东滨州256603 滨州医学院附属医院病理科山东滨州256603 滨州医学院附属医院产前诊断中心山东滨州256603

目的探究胆管癌细胞来源的外泌体(RBE-Exos)对自然杀伤(NK)细胞功能的影响及其内在机制。方法采用免疫组化染色对比分析NK细胞在胆管癌组织和癌旁组织中的浸润数量;通过超速离心法从胆管癌细胞中分离出外泌体,透射电镜(TEM)观察RBE-Exo... 详细信息

目的探究胆管癌细胞来源的外泌体(RBE-Exos)对自然杀伤(NK)细胞功能的影响及其内在机制。方法采用免疫组化染色对比分析NK细胞在胆管癌组织和癌旁组织中的浸润数量;通过超速离心法从胆管癌细胞中分离出外泌体,透射电镜(TEM)观察RBE-Exos的形态特征,蛋白质印迹实验鉴定RBE-Exos的蛋白标志物;纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)检测RBE-Exos粒径分布。NK-92细胞与RBE-Exos共培养后,荧光染色示踪RBE-Exos进入细胞;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹实验检测黏附分子的表达水平。LDH法检测NK-92细胞的杀伤功能变化。结果免疫组化染色显示,与癌旁组织相比,表达CD56(t=2.977,P=0.008)和NKp46(t=4.530,P<0.001)特异性标志分子的NK细胞在癌组织中的浸润数量减少。RBE-Exos电镜下呈酒窝或杯状,特异性表达CD63和HSP70。NTA结果显示RBE-Exos平均直径为(102.90±7.00)nm。荧光染色显示,培养24 h后RBE-Exos进入NK-92细胞。RBE-Exos处理后,NK-92细胞失去了正常的聚团现象而呈现分散的状态。qRT-PCR结果显示,RBE-Exos处理组黏附分子CD11a(t=4.999,P=0.038)、CD18(t=9.225,P=0.012)和CD54(t=12.050,P=0.007)在转录水平上的表达较PBS组均降低。蛋白质印迹实验结果表明,RBE-Exos处理组较PBS组黏附分子CD11a(t=5.140,P=0.007)、CD18(t=7.177,P=0.002)和CD54(t=8.713,P<0.001)蛋白表达均减少。LDH检测显示,RBE-Exos减弱NK-92细胞对靶细胞的杀伤功能(20∶1,t=3.975,P=0.017;10∶1,t=5.776,P=0.005)。结论胆管癌可能通过释放外泌体抑制NK细胞黏附分子表达从而抑制其在肿瘤部位的浸润。

关键词：胆管癌外泌体自然杀伤细胞肿瘤微环境免疫逃逸黏附分子

磁共振髓鞘探针Gd-DTDAS在多发性硬化大鼠髓鞘损伤模型中的实验研究

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磁共振成像 2024年第2期15卷 122-128页

作者：刘彩云邵翠杰翁娜李国栋黄丹琪刘珈宾莉王旭滨州医学院附属医院核医学科滨州256600 滨州医学院附属医院医学研究中心滨州256600

目的探讨MRI对比剂Gd-DTDAS在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)大鼠髓鞘损伤模型中的应用价值。材料与方法细胞实验中,将少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OLN-93)随机分为对照组2(n=3)和溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)组(n=3),LPC组细胞置于无菌共聚焦培养皿中与1 mL 800μM LPC溶液共孵育30 min。通过噻唑蓝比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)评价细胞毒性,计算OLN-93与Gd-DTDAS共孵育24 h后的吸光度和存活率;细胞摄取实验中,对照组2和LPC组对比,定量两组细胞对Gd-DTDAS的摄取值以及相应荧光强度的变化。动物实验中,将6~8周龄SD大鼠随机分为对照组(n=12)与实验组(n=18),实验组大鼠左侧胼胝体注射1%LPC溶液(1%LPC溶于PBS)。造模后(1、3、7 d)进行行为学观察,并在注射后7天进行T1WI及T2WI序列扫描。根据MRI异常信号部位进行大鼠脑组织Gd-DTDAS染色(n=6)以及浸泡(n=6),评估Gd-DTDAS与髓鞘部位的结合情况,其中,染色实验分组命名为对照组3与实验组3,浸泡实验分组命名为对照组4与实验组4;通过尾静脉注射Gd-DTDAS,MR评估实验组(n=6)注射Gd-DTDAS前后大脑髓鞘变化。结果细胞毒性实验中,当Gd-DTDAS浓度增加到400μM时,OLN-93细胞的存活率约为95%,细胞存活率差异无统计学意义(t=4.20,P>0.05)。细胞摄取实验中,两组细胞均能摄取Gd-DTDAS,LPC组摄取量显著低于对照组2,差异具有统计学意义(t=31.75,P统计学意义(U=9,P统计学意义(对照组4,t=8.76,P<0.01)(实验组4,t=2.89,P<0.01)。体内实验中,与尾静脉注射前比较,注射后胼胝体区域MRI T1maps弛豫性显著降低(t=14.46,P<0.01)。结论髓鞘探针Gd-DTDAS能够更好地结合髓磷脂丰富的区域,髓鞘靶向MRI显像更佳,能特异性显示多发性硬化髓鞘损伤部位。

关键词：自身免疫性疾病多发性硬化髓鞘探针分子成像磁共振成像

冬凌草甲素对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移和凋亡的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第4期50卷 917-924页

作者：梁超代娟娟周宁王丹丹赵杰安迪武艳滨州医学院附属医院医学研究中心山东滨州256600 滨州医学院附属医院肿瘤科山东滨州256600 滨州医学院附属医院耳鼻咽喉头颈外科山东滨州256600

目的:探讨冬凌草甲素对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移、上皮-间质转化(EMT)和凋亡的影响,阐明其相关抗肿瘤机制。方法:鼻咽癌HONE-1细胞经不同浓度(0、5、10、20、40、80和160 mg·L^(-1))冬凌草甲素处理48 h后,采用CCK-8法检测各组细... 详细信息

目的:探讨冬凌草甲素对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移、上皮-间质转化(EMT)和凋亡的影响,阐明其相关抗肿瘤机制。方法:鼻咽癌HONE-1细胞经不同浓度(0、5、10、20、40、80和160 mg·L^(-1))冬凌草甲素处理48 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率,确定后续实验的用药浓度。HONE-1细胞分为对照组、3 mg·L^(-1)冬凌草甲素组和6 mg·L^(-1)冬凌草甲素组,培养24和48 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法检测各组细胞中EdU阳性细胞率,克隆形成实验检测各组细胞中克隆形成数,Transwell小室实验和细胞划痕实验检测各组细胞中迁移细胞数和划痕愈合率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)和细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)和多腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)蛋白表达水平。结果:CCK-8法确定冬凌草甲素48 h半数抑制浓度(IC50)为12.18 mg·L^(-1),以1/4 IC50和1/2 IC50值为后续实验用药浓度。与对照组比较,24和48 h时3和6 mg·L^(-1)冬凌草甲素组细胞增殖活性降低(P<0.05或P<0.01),EdU阳性细胞率降低(P<0.05或P<0.01),细胞中克隆形成数和迁移细胞数减少(P<0.05或P<0.01),划痕愈合率降低(P<0.05或P<0.01),细胞中CDK1和CDK4 mRNA表达水平降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin、Caspase-3和PARP1蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:冬凌草甲素可通过抑制细胞周期相关蛋白的表达及EMT,进而抑制人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、克隆形成和迁移能力,促进细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用。

关键词：冬凌草甲素鼻咽肿瘤细胞周期上皮-间质转化细胞凋亡

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新型钩匙状解剖锁定板与常规外踝解剖锁定钢板治疗Danis-Weber A型外踝骨折疗效比较

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中国修复重建外科杂志 2024年第4期38卷 438-443页

作者：崔程程付炳金杨伟强刘颖朱晓东滨州医学院附属医院足踝外科山东滨州256603

目的探讨新型钩匙状解剖锁定板治疗Danis-Weber A型外踝骨折的临床疗效。方法回顾分析2020年11月—2022年11月收治且符合选择标准的45例Danis-Weber A型外踝骨折患者临床资料。依据手术方式分为观察组(采用新型钩匙状解剖锁定板治疗,23... 详细信息

目的探讨新型钩匙状解剖锁定板治疗Danis-Weber A型外踝骨折的临床疗效。方法回顾分析2020年11月—2022年11月收治且符合选择标准的45例Danis-Weber A型外踝骨折患者临床资料。依据手术方式分为观察组(采用新型钩匙状解剖锁定板治疗,23例)和对照组(采用常规外踝解剖锁定钢板治疗,22例)。两组患者性别、年龄、致伤原因、骨折Danis-Weber分型、受伤至手术时间及合并韧带损伤等基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。记录并比较两组患者手术时间、术后部分负重时间、返回工作时间和术后并发症发生情况。采用术后1、3个月及末次随访时踝关节背伸、跖屈、内翻、外翻活动度及疼痛视觉模拟评分(VAS),术后3个月及末次随访时美国矫形足踝协会(AOFAS)评分,对患者踝关节功能及疼痛情况进行评估。结果两组患者均获随访,随访时间10~18个月,平均15.1个月。两组手术时间差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后部分负重时间和返回工作时间均早于对照组(P统计学意义(P>0.05)。随术后时间延长,两组患者踝关节跖屈、背伸、内翻、外翻活动度和VAS评分均逐渐改善,各时间点间差异均有统计学意义(P统计学意义(P>0.05)。末次随访与术后3个月的AOFAS评分差值观察组优于对照组(P<0.05)。结论与常规外踝解剖锁定钢板相比,采用新型钩匙状解剖锁定板固定治疗Danis-Weber A型外踝骨折更牢靠,有利于踝关节早期功能锻炼,使患者更早负重,尽早返回工作岗位,且手术时间无显著延长,临床效果满意。

关键词：外踝骨折踝关节内固定新型钩匙状解剖锁定板外踝解剖锁定钢板

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锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗SandersⅡ型和Ⅲ型跟骨骨折

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中国修复重建外科杂志 2024年第4期38卷 432-437页

作者：张洋赵永杰杜瑞刘颖孙广超滨州医学院附属医院足踝外科山东滨州256603

目的探讨锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折的临床效果。方法回顾分析2019年3月—2022年4月收治且符合选择标准的128例SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折患者临床资料。其中65例采用锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗(研... 详细信息

目的探讨锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折的临床效果。方法回顾分析2019年3月—2022年4月收治且符合选择标准的128例SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折患者临床资料。其中65例采用锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗(研究组),63例采用单纯锁定钢板治疗(对照组)。两组患者性别、年龄、骨折侧别及Sanders分型、致伤原因、受伤至手术时间等基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。记录并比较两组患者手术时间、术中出血量、住院时间、骨折愈合时间;术前及术后12个月采用美国矫形足踝协会(AOFAS)评分(包括总分、疼痛评分、功能评分、力线评分)评价患者足部功能恢复情况,并于X线片上测量跟骨宽度、跟骨高度、跟骨长度、Böhler角、Gissane角等影像学指标。结果所有患者均随访至术后12个月。两组患者手术时间、术中出血量、住院时间和骨折愈合时间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组和对照组分别出现1例和2例切口愈合不良。术后12个月,两组间跟骨长度、跟骨高度、Gissane角及Böhler角手术前后差值比较,差异无统计学意义(P>0.05);但研究组跟骨宽度手术前后差值显著高于对照组(P研究组患者AOFAS评分总分手术前后差值显著高于对照组,差异有统计学意义(P研究组疼痛和功能评分手术前后差值明显高于对照组(P统计学意义(P>0.05)。结论与单纯锁定钢板固定相比,锁定钢板联合空心螺钉垂直加压治疗SandersⅡ、Ⅲ型跟骨骨折,可以更加有效地改善跟骨距下关节面宽度,避免腓骨长短肌撞击,减轻患者疼痛,增加距下关节活动度,临床效果较好。

关键词：跟骨骨折锁定钢板空心螺钉内固定

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小切口关节外微创截骨治疗踇外翻的临床疗效

中国修复重建外科杂志 2024年第7期38卷 855-861页

作者：张洋袁艳荣关国锋刘颖孙广超滨州医学院附属医院足踝外科山东滨州256603

目的比较小切口关节外微创截骨与传统Chevron截骨术治疗踇外翻的临床疗效。方法回顾分析2019年4月—2022年6月收治且符合选择标准的58例(58足)踇外翻患者临床资料,其中28例采用小切口关节外微创截骨(微创组),30例采用传统Chevron截骨术... 详细信息

目的比较小切口关节外微创截骨与传统Chevron截骨术治疗踇外翻的临床疗效。方法回顾分析2019年4月—2022年6月收治且符合选择标准的58例(58足)踇外翻患者临床资料,其中28例采用小切口关节外微创截骨(微创组),30例采用传统Chevron截骨术截骨(传统组)。两组患者年龄、性别、病程、Mann分型及术前第1、2跖骨间角(inter metatarsal angle,IMA)、踇外翻角(hallux valgus angle,HVA)、跖骨远端关节面角(distal metatarsal articular angle,DMAA)、前足宽度、胫侧籽骨位置(tibial sesamoid position,TSP)评分、美国矫形足踝协会(AOFAS)前足评分、疼痛视觉模拟评分(VAS)、健康调查12项简表的心理评分(SF-12 MCS评分)和生理评分(SF-12PCS评分)及跖趾关节活动度(range of motion,ROM)等基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。记录并比较两组患者切口长度、手术时间、术中出血量、术中透视次数、负重行走时间、骨折愈合时间及并发症发生情况,末次随访时各影像学指标与术前比较的变化值,术前、术后6周及末次随访时临床评分以及跖趾关节ROM。结果所有患者均获随访,随访时间11~31个月,平均22个月。微创组患者切口长度、术中出血量小于传统组,术中透视次数、手术时间大于传统组,差异均有统计学意义(P统计学意义(P>0.05)。微创组出现1例皮肤损伤,传统组出现3例切口愈合不良;所有患者截骨处愈合良好,无感染、神经损伤及跖骨头坏死等并发症发生。末次随访时两组患者各影像学指标均较术前显著改善(P统计学意义(P>0.05)。术后6周及末次随访时,两组患者各临床评分及跖趾关节ROM均较术前显著改善(P统计学意义(P<0.05)。结论与传统Chevron截骨术相比,小切口关节外微创截骨不仅可有效改善HVA、IMA、前足宽度,矫正足部畸形,且创伤小,能更好地纠正第1跖骨旋前畸形及恢复籽骨解剖位置,临床疗效更佳。

关键词：踇外翻微创手术关节外截骨术

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数字化三维重建在胎盘植入性疾病中的应用

中华围产医学杂志 2024年第2期27卷 166-169页

作者：王俊芳刘瀛孟凡婕张磊磊滨州医学院附属医院妇产科滨州256600

胎盘植入性疾病是造成患者不良妊娠结局的重要原因之一。因常用的辅助检查手段有一定局限性,易造成漏诊或误诊,从而导致不良结局。数字化三维重建是基于原始数据所构建的三维图像,可视化结构之间的立体空间关系,弥补二维图像的不足。数... 详细信息

胎盘植入性疾病是造成患者不良妊娠结局的重要原因之一。因常用的辅助检查手段有一定局限性,易造成漏诊或误诊,从而导致不良结局。数字化三维重建是基于原始数据所构建的三维图像,可视化结构之间的立体空间关系,弥补二维图像的不足。数字化三维重建作为新的辅助诊断工具,有极大的个体化精准医疗发展潜力。本文就近年来超声及MRI的三维重建在胎盘植入性疾病中的应用及研究进行综述。

关键词：侵入性胎盘成像,三维精准医学超声检查,产前磁共振成像

两种数字化转移方法定位后上颌牙列三维位置的比较

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中华口腔医学杂志 2024年第1期59卷 80-84页

作者：彭体武马腾杨志康张敏迪任光辉滨州医学院附属烟台市口腔医院咬合门诊烟台264001 滨州医学院口腔医学院烟台264003

目的探讨两种数字化转移方法定位后上颌牙列三维位置的差异,以期为临床提供参考。方法2023年3—5月获取滨州医学院附属烟台市口腔医院15名实习医学生的上颌牙列数字化模型及石膏模型。使用解剖式面弓(AFB组)和下颌运动分析仪(JMA组)转... 详细信息

目的探讨两种数字化转移方法定位后上颌牙列三维位置的差异,以期为临床提供参考。方法2023年3—5月获取滨州医学院附属烟台市口腔医院15名实习医学生的上颌牙列数字化模型及石膏模型。使用解剖式面弓(AFB组)和下颌运动分析仪(JMA组)转移上颌牙列位置至虚拟架,通过exocad义齿设计软件的虚拟架模块测量两组平面倾斜角度、上颌左侧中切牙近中切点至虚拟架双侧髁球外侧中心点的距离、上颌双侧第一磨牙近中颊尖点至虚拟架同侧髁球外侧中心点的距离以及两组上颌牙列相同标志点(上颌左侧中切牙近中切点、上颌双侧第一磨牙近中颊尖点)间距离,并计算3点间均方根误差。结果AFB组平面倾斜角度(9.11°±3.85°)显著大于JMA组(4.94°±2.69°)(t=10.45,P统计学意义(t=10.45,P<0.001)。结论使用两种方法(解剖式面弓和下颌运动分析仪)转移上颌牙列位置至虚拟架中的三维空间位置存在差别。

关键词：牙架牙模型成像,三维计算机辅助设计义齿修复术

3D-CT指导单孔分体脊柱内镜精准切除钩状突减压颈神经的安全性研究

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中国疼痛医学杂志 2024年第7期30卷 515-521页

作者：刘昌震王红艳孙兆忠孙宁冯志萌李洒李岳飞滨州医学院附属医院脊柱外科滨州256600 滨州医学院附属医院疼痛科滨州256600

目的:观测钩状突尖端(uncinate process tip,UPT)、椎弓根峡部和颈神经之间的位置关系,为单孔分体脊柱内镜辅助颈椎前路椎间盘切除减压融合术中钩状突精准切除实现颈神经彻底减压提供临床数据参考。方法:选取2016年8月至2021年1月滨州... 详细信息

目的:观测钩状突尖端(uncinate process tip,UPT)、椎弓根峡部和颈神经之间的位置关系,为单孔分体脊柱内镜辅助颈椎前路椎间盘切除减压融合术中钩状突精准切除实现颈神经彻底减压提供临床数据参考。方法:选取2016年8月至2021年1月滨州医学院附属医院的26例神经根型颈椎病病人资料,并在Mimics21.0上观测C3~4至C7~T1相关参数:UPT分别至UPT所在矢状面的颈神经前缘前后距离(a)、UPT所在矢状面的颈神经下缘垂直距离(b)、颈神经起点上缘左右距离(c)、颈神经起点上缘垂直距离(d)、颈神经起点下缘垂直距离(e)、椎弓根峡部外侧缘前后距离(f)、椎弓根峡部外侧缘左右距离(g)、颈神经外展角(∠A)、前倾角(∠B)。结果:C_(3~4)至C_(7)~T_(1),同节段不同性别、不同侧别之间差异无统计学意义;同节段b、e之间差异无统计学意义,表明减压UPT所在矢状面的颈神经下缘即可实现颈神经起点下缘减压;随着C_(3~4)至C_(7)~T_(1)节段降低,a逐渐减小;b、d、e、g、∠A、∠B逐渐增加;c、f先增加后减小(P<0.05)。结论:以UPT作为重要骨性标志点,明确颈神经减压范围并精准切除钩状突。UPT向前(0.9±0.5)mm至(2.3±1.3)mm至椎弓根峡部外侧缘,向外磨透钩状突,可完成UPT至椎弓根区出口处颈神经腹侧减压;向上(5.5±2.1)mm至(8.0±3.0)mm、向内(1.1±0.5)mm至(1.9±0.9)mm分别磨除部分上位椎体和钩状突后外侧壁增生骨赘,可显露硬脊膜外侧缘和颈神经起点上缘,完成UPT至颈神经起点减压,为手术精准切除钩状突安全减压颈神经提供理论依据。

关键词： 3D-CT 单孔分体脊柱内镜颈椎前路椎间盘切除减压融合术钩状突尖端