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南极莫氏黑粉菌热激蛋白70家族启动子鉴定及活性比较

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微生物学通报 2024年第8期51卷 2934-2946页

作者：张聪郭利桃董国云李毅李新文张政兵林宇丰侯春生李智敏中国农业科学院麻类研究所湖南长沙410205 张家界市农业科学技术研究所湖南张家界427000 湖南省农业农村厅植保植检站湖南长沙410005

【背景】南极莫氏黑粉菌(Moesziomyces antarcticus)由于能够产生优良的生物表面活性剂和脂酶而被深入研究,但目前仍缺乏遗传操作相关的基因表达元件。【目的】检测南极莫氏黑粉菌热激蛋白70超家族全部7个基因的启动子表达活性,明确该... 详细信息

【背景】南极莫氏黑粉菌(Moesziomyces antarcticus)由于能够产生优良的生物表面活性剂和脂酶而被深入研究,但目前仍缺乏遗传操作相关的基因表达元件。【目的】检测南极莫氏黑粉菌热激蛋白70超家族全部7个基因的启动子表达活性,明确该菌中不同热激蛋白70家族成员的启动子活性差异,并筛选出可用于调控南极莫氏黑粉菌基因表达的强启动子。【方法】通过基因组数据库获得南极莫氏黑粉菌JCM10317菌株中7个热激蛋白70家族成员的基因信息,利用生物信息学方法进行热激蛋白70家族进化分析并预测热激蛋白70启动子(P_(Hsp70))序列中的关键顺式作用元件,然后构建7个热激蛋白70启动子连接增强型绿色荧光蛋白基因的重组表达载体,通过测定阳性转化子荧光值和荧光显微观察比较不同热激蛋白70家族成员启动子的活性差异。【结果】蛋白进化分析表明7个热激蛋白70家族成员分别属于不同亚家族,并且各成员启动子中的顺式作用元件种类和数量也具有明显差异。此外,以P_(Hsp701)、P_(Hsp702)、P_(Hsp703)、P_(Hsp704)、P_(Hsp705)、P_(Hsp706)和P_(Hsp707)构建的重组质粒转化菌株BDH3-1所获得的阳性转化子平均荧光值分别为对照的12.8、1.6、2.9、5.8、4.6、5.0和1.5倍,与荧光显微观察结果一致。【结论】根据生物信息学分析及绿色荧光蛋白表达结果发现,南极莫氏黑粉菌热激蛋白70家族不同成员间的启动子活性差异显著,其中PHsp701的活性最高,是南极莫氏黑粉菌中的强启动子,P_(Hsp704)、P_(Hsp705)、P_(Hsp706)启动子活性次之,可作为备选启动子用于后续研究。

关键词：南极莫氏黑粉菌热激蛋白70家族启动子活性遗传转化增强型绿色荧光蛋白

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长沙县粮食生产“四高”试验示范区的创建经验

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农业科技通讯 2024年第2期 34-37页

作者：柳意能李诚王少希钱艳杰李胜军湖南省长沙县农业农村局湖南长沙410100 长沙市农业技术推广中心湖南长沙410399

为深入贯彻党的二十大精神和国家粮食安全战略,全方位夯实粮食安全根基,促进农业增效、农民增收,在总结2022年试验示范经验的基础上,进一步提质、扩面建设长沙县粮食“四高”试验示范区,形成“千亩核心示范片+万亩综合试验区+10万亩辐... 详细信息

为深入贯彻党的二十大精神和国家粮食安全战略,全方位夯实粮食安全根基,促进农业增效、农民增收,在总结2022年试验示范经验的基础上,进一步提质、扩面建设长沙县粮食“四高”试验示范区,形成“千亩核心示范片+万亩综合试验区+10万亩辐射带动区”的农业科技成果示范推广新格局,全面提升长沙县粮食生产水平。

关键词：粮食生产示范区创建做法经验长沙县

草地贪夜蛾解毒代谢酶对阿魏酸的解毒功能研究

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湖南农业大学学报（自然科学版） 2024年第3期50卷 62-68页

作者：史智英贺华良王建田陈杰林宇峰李有志湖南农业大学植物保护学院湖南长沙410128 国家植物药用功能成分利用工程技术研究中心湖南长沙410128 湖南省隆回县农业农村局湖南隆回422299 常德市鼎城区农业农村局湖南常德415009 湖南省农业农村厅植保植检站湖南长沙410005

用1、5、10 mg/g阿魏酸添饲草地贪夜蛾初孵幼虫,观察记录幼虫生活历期,测量幼虫体长、虫体质量,统计化蛹率和羽化率。采用转录组测序结合RNA干扰探究草地贪夜蛾解毒代谢酶对阿魏酸的解毒功能。结果表明:与添饲丙酮和清水对照相比,10mg/... 详细信息

用1、5、10 mg/g阿魏酸添饲草地贪夜蛾初孵幼虫,观察记录幼虫生活历期,测量幼虫体长、虫体质量,统计化蛹率和羽化率。采用转录组测序结合RNA干扰探究草地贪夜蛾解毒代谢酶对阿魏酸的解毒功能。结果表明:与添饲丙酮和清水对照相比,10mg/g阿魏酸处理的幼虫发育历期延长了1.6倍;蛹质量仅为对照的34%;化蛹率和羽化率分别降低了80.4%和77.7%;阿魏酸处理激活草地贪夜蛾多个解毒代谢酶基因表达,沉默解毒酶基因细胞色素氧化还原酶基因SfCYP6B6、甘肽尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶基因(SfUGT2B15)可显著增强阿魏酸对草地贪夜蛾的致死效果;与添饲丙酮对照相比,阿魏酸对沉默SfCYP6B6和SfUGT2B15的草地贪夜蛾幼虫的72 h致死率分别提高了36.7%和52.6%。

关键词：阿魏酸草地贪夜蛾解毒机制转录组解毒代谢酶

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几种杀虫剂对水稻二化螟的田间防治效果

湖南农业科学 2024年第5期 79-81页

作者：钟乐荣梁中卫黄蕊张亚芳聂奔涟源市植保植检站湖南涟源417199 长沙市农业农村局湖南长沙410000

为了筛选防治水稻抗性二化螟的有效药剂,于2023年在湖南省涟源市开展了环丙氟虫胺、阿维菌素、金龟子绿僵菌、杀虫单和乙基多杀菌素对水稻二化螟田间防治效果试验。结果表明:参试药剂对二化螟的防治效果存在明显差异,在药后第14、21天,... 详细信息

为了筛选防治水稻抗性二化螟的有效药剂,于2023年在湖南省涟源市开展了环丙氟虫胺、阿维菌素、金龟子绿僵菌、杀虫单和乙基多杀菌素对水稻二化螟田间防治效果试验。结果表明:参试药剂对二化螟的防治效果存在明显差异,在药后第14、21天,10%环丙氟虫胺DC600 mL/hm^(2)和25%乙基多杀菌素WG180 g/hm^(2)的防效最佳,显著高于其他处理,说明环丙氟虫胺和乙基多杀菌素均对水稻二化螟具有良好的防效,但二者都具有速效性不高但持效性较好的特点,可与起效快的药剂复配使用,达到更好的防治效果。

关键词：二化螟杀虫剂抗药性防治效果

一起羊巴氏杆菌与链球菌混合感染的实验室诊断

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青海畜牧兽医杂志 2024年第2期54卷 13-16页

作者：何凯长沙县农业农村局湖南长沙410100

羊多杀性巴氏杆菌病又称为出血性败血症,是一种高度接触性传染病,其病流行会给羊场造成重大的经济损失。羊链球菌感染可引起患畜出现发热、下颌及咽喉部肿胀、纤维素性肺炎等症状,甚至导致死亡。2023年3月中旬,湖南省浏阳市某羊场发生疫... 详细信息

羊多杀性巴氏杆菌病又称为出血性败血症,是一种高度接触性传染病,其病流行会给羊场造成重大的经济损失。羊链球菌感染可引起患畜出现发热、下颌及咽喉部肿胀、纤维素性肺炎等症状,甚至导致死亡。2023年3月中旬,湖南省浏阳市某羊场发生疫情,部分羊群出现发热、咳嗽和呼吸困难等症状,且病死率高。为确诊病因,采集组织病料送至湖南中科基因检测公司进行病原诊断。结果发现,送检病料样品中未检测出相关病毒核酸,但分离出了羊巴氏杆菌和羊链球菌。经药敏试验发现,羊巴氏杆菌对链霉素、头孢噻呋、庆大霉素、阿莫西林、四环素、头孢他啶、头孢曲松、恩诺沙星和复方新诺明等抗菌药敏感;链球菌对阿奇霉素、头孢噻呋、磺胺甲氧嘧啶、头孢他啶和头孢曲松高度敏感。实验室诊断结果表明,该场羊群发生疫情是羊巴氏杆菌和链球菌混合感染引起的,且不同病原菌对抗菌谱存在差异,其结果为羊场疾病的治疗与防控提供了参考。

关键词：羊巴氏杆菌链球菌混合感染实验室诊断区

枯草芽孢杆菌Y25对龙牙百合生长及其根际土壤微生物群落的影响

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江苏农业科学 2024年第7期52卷 214-223页

作者：涂镜杨谢斌魏宝阳赵鑫魏林付威杨媛茹汪洪鹰易永健曾粮斌中国农业科学院麻类研究所湖南长沙410205 湖南农业大学生物科学技术学院湖南长沙410125 湖南省农业科学院植物保护研究所湖南长沙410125 湖南省岳阳市岳阳县植保植检站湖南长沙414100

为明确芽孢杆菌Y25灌根对百合连作根际土壤微生物群落结构的影响,为减轻百合连作障碍提供技术和理论依据。以湖南省邵阳市隆回县百合种植基地连作3年以上进行3种不同处理,不种植百合空白处理(BG);种植百合但不用菌剂灌根处理(CK);种植... 详细信息

为明确芽孢杆菌Y25灌根对百合连作根际土壤微生物群落结构的影响,为减轻百合连作障碍提供技术和理论依据。以湖南省邵阳市隆回县百合种植基地连作3年以上进行3种不同处理,不种植百合空白处理(BG);种植百合但不用菌剂灌根处理(CK);种植百合且用Y25菌剂灌根处理(Y25)。探究3种不同处理对土壤理化性质和微生物群落结构的影响,同时对百合进行病情调查,统计分析不灌根与灌根处理对百合病情和生长的影响。与对照组(CK)相比,芽孢杆菌灌根处理后龙牙百合的株高、茎粗、鲜重以及产量均有提高,且百合枯萎病防治效果高达65.86%。此外,根际土壤中总磷、铵态氮、硝态氮、速效钾、速效磷、有机磷含量均显著增加。PCoA结果显示,施用芽孢杆菌后细菌群落结构发生显著变化,而真菌群落结构未发生显著变化。Y25菌剂灌根处理后根际土壤微生物的相对丰度也发生变化,其中拟杆菌门、绿弯菌门、放线菌门的相对丰度提高,疣微菌门、壶菌门相对丰度显著降低,γ-变形菌纲(未确定)以及芽孢杆菌属的相对丰度显著增加。枯草芽孢杆菌Y25可以改善土壤理化性质,使得根际土壤有益微生物的相对丰度增加,进而促进龙牙百合生长及有效防治病害。

关键词：枯草芽孢杆菌龙牙百合防病促生长微生物群落结构

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鸡精液稀释液的筛选

家禽科学 2024年第4期46卷 40-48页

作者：柳嘉毅刘启红彭先杨慧邱美珍曾一鸣燕海峰长沙县农业农村局湖南长沙410199 湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131

为筛选出效果较好的B系列鸡精液稀释液,以稀释后冷藏保存不同时长精子活力、受精率与孵化率为检测指标进行研究,结果表明:1)稀释冷藏30 min后,EL、EH组的精子活力显著优于B1组(P<0.05);冷藏24 h后,EH、EL组的精子活力显著高于P组(P<0.05... 详细信息

为筛选出效果较好的B系列鸡精液稀释液,以稀释后冷藏保存不同时长精子活力、受精率与孵化率为检测指标进行研究,结果表明:1)稀释冷藏30 min后,EL、EH组的精子活力显著优于B1组(P<0.05);冷藏24 h后,EH、EL组的精子活力显著高于P组(P<0.05);B1组和P组在各时间点均无显著性差异;2)稀释后立即输精,EL组的受精率比B1组高4.9%,但受精蛋孵化率降低5.5%,最终B1组入孵蛋孵化率比EL组高0.7%;稀释冷藏10 h后输精,EL组受精率比B1组高7%,但受精蛋孵化率比B1组低11%。B1组入孵蛋孵化率比EL组高5%,但比原精组低3%;3)稀释湘黄鸡精液冷藏运输70 km后输精,6个家系平均受精率为83.7%,受精蛋孵化率为89.8%,入孵蛋孵化率为75.2%;4)稀释液实际应用方面:B1、B2液输精效果较好,但B2液成本较低,孵化结果优于B1液与鸡场自配稀释液。综上所述,单纯降低B系列稀释液中TES含量(B1液)不利于精子生存,而等比例降低各组分,将渗透压调整为280 mOsm/kg(B2液)时,孵化效果较好。

关键词：鸡精液稀释液精子活力受精率孵化率

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拮抗两种辣椒病害的菌株鉴定及生防潜力评价

微生物学通报 2024年第7期51卷 2450-2462页

作者：秦菁菁曹璐付威王吐虹邓稳桥宋志强程毅李魏湖南农业大学植物保护学院湖南长沙410128 湖南农业大学园艺学院湖南长沙410128 中国农业科学院麻类研究所湖南长沙410205 岳阳县植保植检站湖南岳阳414100 长沙市农业科学院湖南长沙410003

【背景】由齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)引起的辣椒白绢病和辣椒疫霉(Phytophthora capsici)引起的辣椒疫病,严重影响了辣椒的产量及品质。【目的】获得两种辣椒病害的高效拮抗生防细菌,为生防菌剂开发提供理论基础。【方法】从前期... 详细信息

【背景】由齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)引起的辣椒白绢病和辣椒疫霉(Phytophthora capsici)引起的辣椒疫病,严重影响了辣椒的产量及品质。【目的】获得两种辣椒病害的高效拮抗生防细菌,为生防菌剂开发提供理论基础。【方法】从前期保存的微生物资源库中筛选到一株对两种病原菌均有良好抑制效果的菌株SEC-197。对菌株进行形态、生理生化和分子鉴定,分析其产胞外酶和植物促生特性,通过PCR扩增检测抑菌促生相关基因,并进一步通过盆栽试验评价该菌株的生防效果和促生作用。【结果】菌株SEC-197对齐整小核菌和辣椒疫霉的平板抑制率分别为76.59%±0.59%和74.85%±0.35%。经鉴定菌株SEC-197为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),该菌株可以形成生物膜,并且具有分泌蛋白酶、纤维素酶、溶解有机磷和无机磷、产铁载体以及固氮的能力,经测定菌株具有srfAB、fenB和ysnE等抑菌促生基因,盆栽试验显示该菌株对辣椒白绢病和辣椒疫病的防效分别达72.08%和70.42%,且该菌株发酵液能显著提高辣椒植株的茎宽、鲜重和干重等生长指标。【结论】菌株SEC-197对辣椒白绢病和辣椒疫病均具有显著的拮抗活性且促生效果良好。该研究结果为辣椒的生产应用提供了理论依据与试验基础。

关键词：贝莱斯芽孢杆菌辣椒白绢病辣椒疫病抑菌活性生防效果

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山苍子油对猕猴桃溃疡病菌的抑菌活性及应用研究

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湖南农业科学 2024年第5期 72-78页

作者：颜志豪董卫国左仁芳杨欣朋李晓刚湖南农业大学植物保护学院湖南长沙410128 湖南农业有害生物预警与防控工程研究中心湖南长沙410128 泸溪县农业农村局植保植检站湖南泸溪416100 凤凰县农业农村局植保植检站湖南凤凰416200

采用室内平板抑制试验评价抑菌效果的方法,检测出山苍子油对猕猴桃溃疡病菌表现明显的抑制作用;对分离纯化的湘西地区猕猴桃溃疡病病原菌分子生物学鉴定为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种;通过乳化剂筛选,找到最佳复配乳化剂组合SK-33SC:YUS... 详细信息

采用室内平板抑制试验评价抑菌效果的方法,检测出山苍子油对猕猴桃溃疡病菌表现明显的抑制作用;对分离纯化的湘西地区猕猴桃溃疡病病原菌分子生物学鉴定为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种;通过乳化剂筛选,找到最佳复配乳化剂组合SK-33SC:YUS-D935=1∶1(质量比),并配制出25%山苍子油EW;采用比浊法测定25%山苍子油EW对猕猴桃溃疡病菌的EC_(50)值为8.581mg/L,回归方程为y=-2.21+2.38x,相关系数为0.965;田间试验结果表明,25%山苍子油EW 200倍稀释液对猕猴桃溃疡病秋季防效达到82.69%、春季防效达到78.92%,且较2%春雷霉素水剂(加收米)以400倍液喷雾的秋季防效高60.91%、春季防效高38.30%。

关键词：猕猴桃溃疡病山苍子油乳化剂