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四君子汤对胃癌肿瘤干细胞标志物活性及TFAP4蛋白的作用机制

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中国老年学杂志 2024年第7期44卷 1739-1744页

作者：冯金华刘亚江颜慧玲王姿雅郴州市第一人民医院湖南郴州423000 郴州市第二人民医院郴州市桂阳县第一人民医院

目的探讨四君子汤对胃癌肿瘤干细胞标志物活性及转录因子激活增强子结合蛋白(TFAP)4蛋白的作用机制。方法 SGC-7901干细胞分为A组(SGC-7901干细胞)、B组(SGC-7901干细胞在75μl 2.5%大鼠四君子汤含药血清中培养)、C组(SGC-7901干细胞... 详细信息

目的探讨四君子汤对胃癌肿瘤干细胞标志物活性及转录因子激活增强子结合蛋白(TFAP)4蛋白的作用机制。方法 SGC-7901干细胞分为A组(SGC-7901干细胞)、B组(SGC-7901干细胞在75μl 2.5%大鼠四君子汤含药血清中培养)、C组(SGC-7901干细胞在75μl 5%大鼠四君子汤含药血清中培养)、D组(SGC-7901干细胞在75μl 7.5%大鼠四君子汤含药血清中培养)及E组(SGC-7901干细胞+含有1 mg/ml的5-氟尿嘧啶培养基中培养)。采用倒置显微镜观察SGC-7901干细胞形态;比较SGC-7901细胞及SGC-7901干细胞及集落形成能力;CCK-8检测各组细胞活性;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;Western印迹检测各组干细胞标志物CD44及CD133蛋白,B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2及TFAP4蛋白。结果 SGC-7901干细胞随着生长周期的延长,球体逐渐增大,3 d时体积较小结构松散,4 d时细胞呈现椭圆形生长,5 d时细胞结构更致密,形态更加接近球形,且一个球体所包含细胞数目可达到数十个;SGC-7901及SGC-7901干细胞的细胞集落数组间比较存在显著差异(P0.05)。结论四君子汤含药血清可以显著抑制胃癌肿瘤干细胞标志物活性,通过抑制Bcl-2表达激活Bax加快胃癌干细胞凋亡,研究机制可能与抑制TFAP4活性相关。

关键词：胃癌四君子汤肿瘤干细胞转录因子激活增强子结合蛋白4

急性脑梗死患者溶栓后网膜素1水平对早期神经功能恶化的评估价值

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第4期26卷 409-412页

作者：张扬南李晓芳彭玉凤郴州市第一人民医院检验医学中心 423000 郴州市第一人民医院输血科

目的探讨急性脑梗死患者溶栓后外周血网膜素1表达对早期神经功能恶化(early neurological deterioration,END)的评估价值。方法选取2021年2月至2022年2月郴州市第一人民医院神经内科明确诊断为急性脑梗死并行溶栓治疗的患者210例,根据... 详细信息

目的探讨急性脑梗死患者溶栓后外周血网膜素1表达对早期神经功能恶化(early neurological deterioration,END)的评估价值。方法选取2021年2月至2022年2月郴州市第一人民医院神经内科明确诊断为急性脑梗死并行溶栓治疗的患者210例,根据溶栓后网膜素1水平分为低水平组70例(网膜素1200μg/L),比较3组END发生情况。采用Pearson相关性分析网膜素1与END的相关性,用Cox回归分析发生END的影响因素,ROC曲线分析网膜素1对END的预测价值。结果210例急性脑梗死患者发生END 60例(28.6%)。低水平组、中水平组、高水平组END发生率比较,差异有统计学意义(45.7%vs 25.7%vs 14.3%,P<0.01),其中高水平组END发生率明显低于低水平组和中水平组,差异有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,网膜素1与END发生呈负相关(r=-0.635,P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,发病至溶栓时间、糖尿病、白细胞计数、网膜素1与急性脑梗死患者溶栓后发生END独立相关(P<0.05,P<0.01)。ROC曲线分析显示,网膜素1预测END发生的截断值为162.36μg/L,曲线下面积为0.868(95%CI:0.811~0.925),敏感性和特异性分别为73.3%、88.0%。结论急性脑梗死患者溶栓后外周血网膜素1水平与END的发生密切关联,网膜素1可作为评估END发生的生物标志物。

关键词：脑梗死血栓溶解疗法预测网膜素1 神经病学表现早期神经功能恶化

柴胡疏肝散在抗抑郁治疗中的药效物质与作用机制研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第10期30卷 246-257页

作者：林洁筠段阳龙淼青李超亚邓曼菲曾鹏南华大学衡阳医学院基础医学院湖南衡阳421001 郴州市第一人民医院湖南郴州423000

抑郁症是一种复杂的神经精神疾病,目前主要采取西药治疗的方式,但由于抗抑郁西药存在不良反应与患者个体化差异的综合影响导致疗效欠佳。抑郁症属中医的“郁证”,其治疗原则为疏肝解郁。中医经典名方柴胡疏肝散治疗抑郁症历史悠久、疗... 详细信息

抑郁症是一种复杂的神经精神疾病,目前主要采取西药治疗的方式,但由于抗抑郁西药存在不良反应与患者个体化差异的综合影响导致疗效欠佳。抑郁症属中医的“郁证”,其治疗原则为疏肝解郁。中医经典名方柴胡疏肝散治疗抑郁症历史悠久、疗效确切。临床上,柴胡疏肝散加减方灵活,但有效成分性质性能模糊、机制作用不清。为阐明柴胡疏肝散药效基础、抗抑郁机制作用机制,该文综述了柴胡疏肝散药效物质基础、抗抑郁的临床研究与机制研究进展。临床上柴胡疏肝散可以治疗原发性抑郁、卒中后抑郁、产后抑郁等多种抑郁。汇总了柴胡疏肝散的32种主要成分,其中芍药苷内酯、阿魏酸、柚皮苷、橙皮苷、柴胡皂苷A、甘草次酸、桔皮素、橙皮内酯水合物、川陈皮素、甘草酸是柴胡疏肝散发挥抗抑郁作用的中药质量标志物(Q-Marker)。柴胡疏肝散抗抑郁作用机制复杂,包括调控单胺类神经递质、下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)、神经营养因子、炎症反应、细胞损伤相关通路、氧化应激等。该文有助于深入理解柴胡疏肝散治疗抑郁的药效基础与作用机制,为柴胡疏肝散抗抑郁的临床应用与抗抑郁药物研发提供了理论依据。

关键词：柴胡疏肝散抑郁症药效基础中药质量标志物(Q-Marker) 作用机制

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枞酸在顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移中的作用及分子机制

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第3期38卷 188-194,199页

作者：袁艳艳蓝苑钊崔毅侯明华唐金勇文浩杰郴州市第一人民医院耳鼻咽喉头颈外科湖南郴州423000 南方医科大学第一临床学院

目的探讨枞酸在顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用及分子机制。方法①药物浓度递增法构建顺铂耐药鼻咽癌C666/DDP细胞株。②枞酸对C666/DDP细胞增殖、侵袭及迁移的影响研究:CCK-8法、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(MMP)水平检测及... 详细信息

目的探讨枞酸在顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用及分子机制。方法①药物浓度递增法构建顺铂耐药鼻咽癌C666/DDP细胞株。②枞酸对C666/DDP细胞增殖、侵袭及迁移的影响研究:CCK-8法、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(MMP)水平检测及裸鼠皮下成瘤实验检测枞酸对C666/DDP细胞体外、体内增殖及凋亡能力的影响;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力。③Western blot及IHC法检测PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达情况。结果①顺铂对C666-1细胞毒性IC50约为25μmol/L。RI=25μmol/L/4μmol/L=6.25,获得耐药性,C666-1-DDP耐药株构建成功。②枞酸可促进C666/DDP细胞凋亡,抑制其增殖,且表现为G2/M期阻滞;Transwell显示枞酸抑制C666/DDP细胞迁移及侵袭能力,提高C666/DDP细胞ROS水平并使MMP降低。③动物实验显示枞酸在体内呈浓度梯度抑制顺铂耐药鼻咽癌的增殖,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结论枞酸可抑制顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭及迁移,其机制与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

关键词：枞酸鼻咽肿瘤顺铂耐药分子机制

槲皮素联合铁死亡抑制药对草酸钙诱导的HK-2细胞损伤的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第14期40卷 2028-2032页

作者：聂丙飞陈煌辉谭群杰杜宇峰郴州市第一人民医院泌尿外科湖南郴州423000 宜章县第二人民医院泌尿外科湖南郴州423000

目的探究槲皮素联合铁死亡抑制剂Ferrostain-1对草酸钙诱导的HK-2细胞损伤的影响。方法将HK-2细胞随机分为对照组(正常培养的细胞)、模型组(0.5 mmol·L^(-1)的草酸钙结晶)、槲皮素组(0.5 mmol·L^(-1)的草酸钙结晶+100μmol·L^(-1)槲... 详细信息

目的探究槲皮素联合铁死亡抑制剂Ferrostain-1对草酸钙诱导的HK-2细胞损伤的影响。方法将HK-2细胞随机分为对照组(正常培养的细胞)、模型组(0.5 mmol·L^(-1)的草酸钙结晶)、槲皮素组(0.5 mmol·L^(-1)的草酸钙结晶+100μmol·L^(-1)槲皮素)、抑制剂组(0.5 mmol·L^(-1)的草酸钙结晶+8μmol·L^(-1) Ferrostain-1)、联合组(0.5 mmol·L^(-1)的草酸钙结晶+100μmol·L^(-1)槲皮素+8μmol·L^(-1) Ferrostain-1)。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测细胞存活率,用蛋白质印迹实验检测细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)等铁死亡相关蛋白表达,用流式细胞术和Tunel实验检测细胞凋亡,用试剂盒法检测细胞铁离子及抗氧化指标水平。结果对照组、模型组、槲皮素组、抑制剂组、联合组的细胞存活率分别为(100.00±2.55)%、(54.49±4.11)%、(64.26±6.30)%、(58.03±3.04)%和(79.37±4.29)%,GPX4蛋白表达水平分别为0.98±0.11、0.33±0.05、0.56±0.05、0.78±0.07和1.11±0.11,细胞凋亡率分别为(4.15±0.28)%、(23.12±2.49)%、(17.28±1.07)%、(15.08±1.41)%和(8.95±0.75)%,Fe2+水平分别为(100.00±0.87)%、(162.55±14.70)%、(149.09±9.50)%、(144.95±11.12)%和(131.76±12.18)%,超氧化物歧化酶(SOD)水平分别为(58.67±3.46)、(21.56±1.32)、(33.60±2.03)、(35.15±3.02)和(44.27±3.89)U·mL^(-1);模型组的上述指标与对照组比较,槲皮素组、抑制剂组、联合组的上述指标与模型组比较,联合组的上述指标与槲皮素组、抑制剂组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论铁死亡抑制剂可增强槲皮素体外对草酸钙诱导的肾小管上皮细胞损伤的抑制作用。

关键词：槲皮素草酸钙肾结石铁死亡细胞损伤细胞凋亡

妊娠期糖尿病对新生小鼠脑组织形态结构及miRNA表达谱的影响

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中国儿童保健杂志 2024年第2期32卷 154-158,180页

作者：黄婉仪张又祥欧巧群刘元春郭家雨广州市第一人民医院儿科广东广州510180

目的研究妊娠期糖尿病(GDM)对新生小鼠脑组织形态结构及微小核糖核苷酸(miRNAs)表达谱的影响,为GDM子代神经发育异常预防和治疗提供新的研究靶点。方法将妊娠鼠分为模型组和对照组各10只,模型组小鼠通过注射链脲佐菌素建立GDM模型,测... 详细信息

目的研究妊娠期糖尿病(GDM)对新生小鼠脑组织形态结构及微小核糖核苷酸(miRNAs)表达谱的影响,为GDM子代神经发育异常预防和治疗提供新的研究靶点。方法将妊娠鼠分为模型组和对照组各10只,模型组小鼠通过注射链脲佐菌素建立GDM模型,测量不同时间的空腹血糖(FPG)和随机血糖(GLU)。造模成功小鼠随机分为模型A组和模型C组,对照组小鼠分为对照B组和对照D组,每组各5只。其中A、B组新生小鼠用于进行海马组织基因芯片检测及大脑形态结构观察;C、D组新生小鼠用于qRT-PCR检测海马组织的表达差异,以验证基因芯片筛选所得miRANs差异表达基因。新生小鼠脱颈处死,剥离脑组织观察整体形态结构,HE显色显微镜下观察海马组织结构变化。基因芯片检测小鼠海马组织miRNA表达谱,筛选差异miRNAs并预测其靶基因,对靶基因进行GO分析及信号转导通路分析。以qRT-PCR验证筛选的miRNAs相对表达量。结果与对照组比较,模型组自给药后第3天起GLU显著上升(P<0.01)。肉眼观察对照B组小鼠脑形态结构正常,外形结构光滑,脑回清晰,海马组织细胞结构排列紧密,染色均匀,结构完整;模型A组脑沟变浅,脑回增宽,海马组织细胞数量减少,排列疏松,核固缩深染。miRNA芯片初筛,对照组和模型组海马组织有11个差异表达miRNAs,全部为下调miRNAs,包括let-7b-5p、miR-130b-3p、miR-181c-5p、miR-181d-5p、miR-3099-3p、miR-3470a、miR-3473a、miR-3473b、miR-500-3p、miR-532-5p、miR-7047-5p(P<0.05)。靶基因预测和GO分析筛选出2个miRNAs(miR-3473b、miR-7047-5p),和5个与神经营养素信号通路相关的靶基因(MAPK3、MAPK11、MAPK14、CALM3、AKT3)。模型C组的miR-3473b及miR-7047-5p相对表达量均低于对照D组(t=19.13、6.24,P<0.05),验证结果与芯片检测结果相符。结论与正常妊娠小鼠子代相比,GDM子代小鼠存在脑结构发育异常和海马神经细胞损伤,且海马组织存在miRNAs异常表达,差异表达miRNA可作为GDM子代神经发育异常预防和治疗的研究靶点。

关键词：妊娠期糖尿病微小核糖核苷酸脑组织形态结构基因表达谱

运动预处理对脑缺血再灌注大鼠脑缺血区VEGF/VEGFR2/Dock6信号通路的影响

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中国康复医学杂志 2024年第2期39卷 170-177页

作者：孙晓莹周璐唐丽亚刘锦灿蒋心如瞿启睿艾坤湖南中医药大学针灸推拿与康复学院湖南省长沙市410208 郴州市第一人民医院康复医学科

目的:从VEGF/VEGFR2/Dock6信号途径探索运动预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧脑组织血管新生的影响。方法:采用随机数字表法将SD雄性大鼠分为假手术组、模型组和运动预处理组,每组18只。造模前,假手术组与模型组不给予任何处理,运动... 详细信息

目的:从VEGF/VEGFR2/Dock6信号途径探索运动预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧脑组织血管新生的影响。方法:采用随机数字表法将SD雄性大鼠分为假手术组、模型组和运动预处理组,每组18只。造模前,假手术组与模型组不给予任何处理,运动预处理组大鼠给予适应性跑步训练3d,电动跑台坡度为0°,速度10m/min,每天1次,每次20min。适应性训练结束后,运动预处理组给予为期3周的正式跑步训练,每周连续训练6d,休息1d,电动跑台坡度为0°,速度15m/min,30min/d。模型组和运动预处理组采用Koizumi栓线法加以改良制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,假手术组仅切开皮肤,不插栓线。采用Zea-Longa评分和改良神经严重程度评分(mNSS)法进行神经功能缺损评估;TTC染色法检测脑梗死体积百分比,HE染色观察缺血侧大脑皮质组织形态学改变;免疫组化法观察缺血侧大脑皮质CD31表达水平;蛋白质免疫印迹测定VEGFA、VEGFR2、Dock6蛋白表达水平。结果:①Zea-Longa评分:再灌注麻醉清醒后,与假手术组相比,其余2组大鼠Zea-Longa评分均增高(P一步升高。⑥VEGF、VEGFR2、Dock6蛋白质免疫印迹:与假手术组相比,模型组大鼠缺血侧大脑皮质VEGF(P一步升高。结论:运动预处理可有效促进脑缺血后血管新生,减轻脑缺血再灌注以后的神经功能缺损表现,这一作用可能与其激活VEGF/VEGFR2/Dock6信号途径有关。

关键词：缺血再灌注运动预处理血管新生血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体-2 细胞分裂蛋白6

肺泡灌洗液中CCL20和CD200R对儿童迁延性细菌性支气管炎的诊断价值

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检验医学与临床 2024年第13期21卷 1905-1909页

作者：陈淑华何秀张碧清曾艳芳欧书腾湖南省郴州市第一人民医院儿科湖南郴州423000

目的研究肺泡灌洗液(BALF)中CC趋化因子配体20(CCL20)、细胞表面分子CD200受体(CD200R)对迁延性细菌性支气管炎(PBB)的诊断价值。方法选取2019年1月至2021年2月该院收治的136例PBB患儿作为PBB组。另选取同期在该院因支气管异物进行支气... 详细信息

目的研究肺泡灌洗液(BALF)中CC趋化因子配体20(CCL20)、细胞表面分子CD200受体(CD200R)对迁延性细菌性支气管炎(PBB)的诊断价值。方法选取2019年1月至2021年2月该院收治的136例PBB患儿作为PBB组。另选取同期在该院因支气管异物进行支气管镜检查的60例儿童作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测BALF及血清中CCL20、CD200R水平。比较两组BALF及血清中CCL20、CD200R水平。根据PBB患儿是否存在复发难治性PBB,将PBB组患儿分为普通性组和复发难治性组,分析两组患儿的临床特征及BALF中CCL20、CD200R的水平。采用多因素Logistic回归分析复发难治性PBB发生的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析BALF中CCL20、CD200R对复发难治性PBB的诊断价值。结果PBB组BALF中CCL20水平明显高于对照组BALF中CCL20水平,BALF中CD200R水平明显低于对照组BALF中CD200R水平,差异均有统计学意义(P0.05)。82例患儿纳入普通性组,54例患儿纳入复发难治性组。复发难治性组PBB患儿咳嗽持续时间、白细胞计数、C反应蛋白水平及BALF中CCL20、CD200R水平明显高于普通性组,差异均有统计学意义(P0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,咳嗽持续时间长、BALF中CCL20水平升高、CD200R水平降低是复发难治性PBB发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,CCL20、CD200R二者联合检测诊断复发难治性PBB的曲线下面积为0.925,明显高于CCL20、CD200R单独检测的0.866、0.875(Z=3.724、3.418,P<0.05)。结论PBB患儿BALF中CCL20水平升高、CD200R水平降低是复发难治性PBB发生的独立危险因素,二者联合检测有助于诊断复发难治性PBB。

关键词：儿童迁延性细菌性支气管炎肺泡灌洗液 CC趋化因子配体20 细胞表面分子CD200受体诊断

阿仑膦酸钠促进兔快速下颌骨牵张成骨的作用机制

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中国组织工程研究 2024年第23期28卷 3642-3647页

作者：叶芝魁张志明崔琳娜蒋校文南方医科大学口腔医学院附属郴州市第一人民医院口腔科&南华大学转化研究所湖南省郴州市423000

背景:有研究发现局部应用阿仑膦酸钠能够促进成骨,但少见其在牵张成骨过程中的尝试及探讨。目的:观察阿仑膦酸钠对快速兔下颌骨牵张成骨的促进作用并探讨其机制。方法:36只新西兰雄性白兔在经过3 d的滞留期后以1.5 mm/12 h(3 d)的牵张... 详细信息

背景:有研究发现局部应用阿仑膦酸钠能够促进成骨,但少见其在牵张成骨过程中的尝试及探讨。目的:观察阿仑膦酸钠对快速兔下颌骨牵张成骨的促进作用并探讨其机制。方法:36只新西兰雄性白兔在经过3 d的滞留期后以1.5 mm/12 h(3 d)的牵张速率进行快速牵张,随后实验动物被随机分为A、B和C组,每组12只。在固定期第1,3和7天,A组动物牵张间隙注射200μg/kg阿仑膦酸钠,B组动物牵张间隙注射100μg/kg阿仑膦酸钠,C组动物作为对照组。在固定期第4,8周,进行CT和双能量X射线骨密度测量。在第4周完成核素扫描后处死部分动物收集标本进行Western Blotting及抗酒石酸酸性磷酸酶染色;在第8周处死剩余动物后进行三点弯曲力学试验。结果与结论:①CT结果发现B组兔牵张间隙新生骨质明显优于A、C组;②在第4周时B组的骨密度计数为(0.092±0.010)g/cm^(2),是A组的1.26倍(P<0.001)、C组的1.28倍(P<0.001);在第8周时B组的骨密度为(0.175±0.029)g/cm^(2),是A组的1.38倍(P<0.001)、C组的1.45倍(P<0.001);③抗酒石酸酸性磷酸酶染色发现C组切片破骨样细胞计数是A组的2.83倍(P<0.001)、B组的2.21倍(P<0.001);④C组牵张间隙核浓集强度高于A、B组;⑤Western Blotting结果发现B组成骨信号蛋白Runx2表达明显强于A、C组;⑥B组牵张间隙的最大力学负载(158.48±23.21)N是A组的1.26倍(P=0.007)、C组的1.31倍(P=0.003);⑦结果表明低浓度阿仑膦酸钠可能通过抑制破骨信号来促进兔下颌骨快速牵张成骨。

关键词：牵张成骨阿仑膦酸钠兔下颌骨抗酒石酸酸性磷酸酶破骨细胞