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一株羊源巨大芽孢杆菌BM24的分离鉴定及安全性评价

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动物营养学报 2024年

作者：贾盛候萌陈伟丽戴宗茂彭啟敏石蕊王旭翔谢怀茹肖莹王金泉新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐县农产品质量安全检测中心

本试验旨在评估一株从健康细毛羊粪便中分离得到的巨大芽孢杆菌BM24的体外益生潜力及体内安全性。采集饲养过程中没有添加抗生素的健康新疆细毛羊的新鲜粪便,先通过形态学鉴定、生化鉴定、16S rRNA测序,初步获得羊源芽孢杆菌菌株,后续... 详细信息

本试验旨在评估一株从健康细毛羊粪便中分离得到的巨大芽孢杆菌BM24的体外益生潜力及体内安全性。采集饲养过程中没有添加抗生素的健康新疆细毛羊的新鲜粪便,先通过形态学鉴定、生化鉴定、16S rRNA测序,初步获得羊源芽孢杆菌菌株,后续通过对酸和高浓度胆盐环境的耐受性,以及菌株的体外抗菌能力、耐药性、溶血活性和生长曲线等方面的检测,初步判断分离出的芽孢杆菌菌株的体外安全性,最后进行小鼠体内试验,评估其安全性。结果表明:1)初步分离得到1株羊源芽孢杆菌,结合生化鉴定和测序结果确定为巨大芽孢杆菌,将其命名为巨大芽孢杆菌BM24;2)该菌株可在pH=1.0条件下存活,0.3%胆盐培养4 h后存活率为49%,在15种常见抗生素中对12种抗生素高度敏感,对常见腹泻致病菌沙门氏菌和大肠杆菌抑制效果较好,无溶血活性;3)该菌株在37℃培养2 h后进入生长对数期,6 h后进入生长平稳期;4)灌胃该菌株后小鼠无死亡、体重变化正常,剖检体腔脏器无眼观病理现象,对肝脏、肾脏、脾脏指数及血细胞指标均无显著影响(P>0.05);腹腔注射该菌株,小鼠体征正常、无死亡现象,体腔脏器无眼观病理变化。综上可知,本试验分离得到的羊源巨大芽孢杆菌BM24具有良好的体外益生潜力,且无急性毒性作用,可作为羊源益生菌的候选菌株。

关键词：巨大芽孢杆菌益生菌细毛羊分离鉴定安全性

基于CRISPR/Cas的生物传感器在食源性病原菌检测中的应用进展

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分析化学 2024年第4期52卷 469-480页

作者：张孝渊姚志豪何开雨王洪梅徐霞红吴祖芳王柳宁波大学食品与药学学院浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所

食源性病原菌严重威胁食品安全及消费者的健康，因此，对食源性病原菌快速、准确的检测方法对保障食品安全尤为重要。规则成簇的短回文重复序列（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）/CRISPR相关系统（... 详细信息

食源性病原菌严重威胁食品安全及消费者的健康，因此，对食源性病原菌快速、准确的检测方法对保障食品安全尤为重要。规则成簇的短回文重复序列（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）/CRISPR相关系统（CRISPR-associated systems, Cas）生物传感器是在引导核糖核酸（RNA）的作用下，使Cas蛋白与RNA形成RNA复合体，并对靶标基因进行特异性识别，从而将靶标信号转化为可检测的物理和化学信号。CRISPR/Cas生物传感器具有特异性好、可编程以及使用简便等优势，在病原菌检测领域具有广阔的应用前景。本文根据Cas蛋白的种类和作用机制不同，分别介绍了不同CRISPR/Cas系统的作用原理和特点，概述了基于不同CRISPR/Cas的生物传感的信号识别、信号放大、信号输出策略及其在食源性病原菌检测中的应用进展，讨论了基于CRISPR/Cas的多重生物传感器的构建原理及其在多病原菌同时检测中的应用，分析了基于CRISPR/Cas的生物传感器在病原菌快速检测中面临的挑战及未来的发展趋势。

关键词：食源性病原菌 CRISPR/Cas 生物传感器评述

我国华南地区家禽配合饲料中3种真菌毒素污染现状分析

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动物营养学报 2024年第1期36卷 672-680页

作者：曾睿陈佩榕王琼珊王富华赵亚荣广东省农业科学院农业质量标准与监测技术研究所广州510640 农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(广州) 广州510640 农业农村部农产品质量安全检测与评价重点实验室广州510640 广东省农产品质量安全风险评估重点实验室广州510640 广东食品药品职业学院广州510520

本试验旨在通过分析我国华南地区家禽配合饲料中柄曲霉素(STC)、赭曲霉毒素A(OTA)、玉米赤霉烯酮(ZEA)的污染情况,为真菌毒素风险评估提供数据支撑。从华南地区(广东省、海南省、广西壮族自治区)采集家禽配合饲料样品232份,经含20%水的... 详细信息

本试验旨在通过分析我国华南地区家禽配合饲料中柄曲霉素(STC)、赭曲霉毒素A(OTA)、玉米赤霉烯酮(ZEA)的污染情况,为真菌毒素风险评估提供数据支撑。从华南地区(广东省、海南省、广西壮族自治区)采集家禽配合饲料样品232份,经含20%水的甲醇提取,氯化钠和无水硫酸镁盐析后,加入N-丙基乙二胺(PSA)和C 18吸附杂质,上清液过膜后进行高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)分析,通过基质标准曲线进行定量。分别采用卡方检验和非参数检验比较不同地区家禽配合饲料中STC、OTA、ZEA的检出率和含量。结果显示:3种真菌毒素在各自线性范围内线性关系良好,相关系数≥0.99,检出限和定量限分别为0.02~0.18μg/kg和0.07~0.59μg/kg,在低、中、高3个加标水平下,3种真菌毒素的平均回收率为83.0%~98.9%,精密度为0.8%~8.2%,日间差和日内差均省样品中STC的检出率显著高于其他地区(P检测分析;我国华南地区家禽配合饲料尽管总体污染水平较低,但真菌毒素污染情况普遍,应引起重视。

关键词：真菌毒素饲料华南地区 HPLC-MS/MS

磁性“一步法”-液相色谱-串联质谱法测定水产品中28种有机磷农药残留

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分析化学 2024年第3期52卷 419-439页

作者：金慧玲刘真真范晓民葛梦圆王娇王新全丁立建齐沛沛宁波大学食品科学与工程学院省部共建农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所省部共建农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室宁波大学医学部李达三海洋生物医药研究中心

基于磁性纳米材料建立了磁性“一步法”前处理技术，结合液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法，实现了水产品中28种有机磷农药残留的精准定量分析。针对水产品富含蛋白质、脂肪和脂肪酸的特点，选择磁性聚合物（聚二乙烯基苯-吡咯烷酮，F... 详细信息

基于磁性纳米材料建立了磁性“一步法”前处理技术，结合液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法，实现了水产品中28种有机磷农药残留的精准定量分析。针对水产品富含蛋白质、脂肪和脂肪酸的特点，选择磁性聚合物（聚二乙烯基苯-吡咯烷酮，Fe3O4-PLS）为净化剂，通过疏水作用、氢键和π-π键等相互协同作用高效吸附基质干扰组分，净化样品。优化了萃取溶剂类型及用量、盐析与除水剂、Fe3O4-PLS和C18用量等实验条件。在最佳样品前处理条件下，28种有机磷农药的方法检出限（MLOD）为0.03～0.85μg/kg，方法定量限（MLOQ）为0.50～2.00μg/kg；不同添加浓度水平下目标物的平均回收率为60.1%～119.0%，相对标准偏差（RSDs）为0.8%～19.0%，方法的灵敏度和准确度高。与QuEChERS方法对比，本方法在萃取溶剂、盐析与除水剂和净化剂用量以及分析效率等方面均展现出明显的优势。采用本方法检测不同种类水产品中有机磷农药残留，结果表明，本方法具有良好的实用性，可为水产品中有机磷农药残留的快速分析提供新的方法依据。

关键词： Fe3O4-PLS 磁性“一步法” 液相色谱-串联质谱水产品有机磷农药

胶体金免疫层析法快速检测蔬菜中3种农药残留

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河南农业科学 2024年第6期53卷 79-90页

作者：魏茂琼王丽兰珊珊刘振环沙凌杰林昕李俊普娅丽刘宏程云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所云南昆明650222 农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(昆明) 云南昆明650223 元江县农产品质量安全检测站云南元江653300

基于胶体金免疫层析原理研制吡虫啉、丙溴磷及克百威快速检测试纸条,评价其在大蒜、白菜检测中的应用效果。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,用胶体金颗粒标记吡虫啉、丙溴磷及克百威单克隆抗体作为检测探针,以硝酸纤维素膜为固相载体,... 详细信息

基于胶体金免疫层析原理研制吡虫啉、丙溴磷及克百威快速检测试纸条,评价其在大蒜、白菜检测中的应用效果。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,用胶体金颗粒标记吡虫啉、丙溴磷及克百威单克隆抗体作为检测探针,以硝酸纤维素膜为固相载体,包被吡虫啉-BSA、丙溴磷-BSA及克百威-BSA偶联物为检测线,羊抗鼠IgG抗体为质控线,制备胶体金免疫层析试纸条,并对金标抗体用量、标记抗体浓度、检测线包被浓度等参数条件进行优化,评价试纸条的灵敏度、特异性、稳定性和准确性。以大蒜、白菜为对象,优化了样品前处理方法,并对这2种蔬菜样品进行阴性检测及添加标准品农药检测。结果表明,优化后的工艺参数中吡虫啉、丙溴磷、克百威的最适标记抗体质量浓度分别为9.6、8.4、9.6μg/mL,抗原的包被质量浓度均是0.3 mg/mL,检测用时约15 min。吡虫啉、丙溴磷及克百威的检出限分别为20、3000、20 ng/mL,符合国标对2种蔬菜的限量规定。检测与吡虫啉、丙溴磷及克百威功能和结构相似的其他药物时无交叉反应,特异性较好。克百威和吡虫啉农药的最适提取剂分别为4 mL乙酸乙酯和4 mL甲醇,样品用量均为2 g,上清液3 mL;丙溴磷农药的最适提取剂是9 mL乙酸乙酯,样品用量3 g,上清液8 mL,上清液用氮气吹干。50份蔬菜阴性样品和加标样品的检测结果显示,假阳性率为6%,假阴性率为0。可见,研制的试纸条适用于大蒜、白菜现场快速检测以及基层实验室中大量样本的筛查,可为大蒜、白菜中农药残留控制提供有效监管手段。

关键词：大蒜白菜胶体金快速检测吡虫啉丙溴磷克百威

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云南元江县农产品质量安全监管现状与建议

农业工程技术 2024年第1期44卷 107-108页

作者：倪艳琴普娅丽杨晓隆元江县农产品质量安全检测站云南元江653300

该文阐述了农药残留检测的意义,解释了云南元江县农产品质量安全监测现状,分析了工作中存在的问题,针对性提出加强农产品生产科普、加大农民培训力度、提高检测队伍的业务水平、提高监管效率等建议,以期推动元江县农产品质量安全监管工... 详细信息

该文阐述了农药残留检测的意义,解释了云南元江县农产品质量安全监测现状,分析了工作中存在的问题,针对性提出加强农产品生产科普、加大农民培训力度、提高检测队伍的业务水平、提高监管效率等建议,以期推动元江县农产品质量安全监管工作有序开展,保障农产品质量安全。

关键词：农产品质量安全监管农药残留元江县

液相色谱-串联质谱法测定土壤、沉积物和水中3种新型除草剂残留

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色谱 2024年第3期42卷 256-263页

作者：何红梅徐玲英张昌朋方楠蒋金花王祥云俞建忠赵学平省部共建农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室农业农村部农药残留检测重点实验室浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所浙江杭州310021

除草剂在杂草和有害植物防控上发挥着重要的作用,但其有效利用率低,大量除草剂进入环境中,对生态环境和人类健康构成了潜在威胁,因此建立环境样品中除草剂的残留分析方法尤为重要。该文采用电喷雾正离子源模式,建立了液相色谱-串联质谱... 详细信息

除草剂在杂草和有害植物防控上发挥着重要的作用,但其有效利用率低,大量除草剂进入环境中,对生态环境和人类健康构成了潜在威胁,因此建立环境样品中除草剂的残留分析方法尤为重要。该文采用电喷雾正离子源模式,建立了液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定土壤、沉积物和水中异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺残留量的方法。土壤和沉积物样品经乙腈振荡提取、盐析后经C18固相萃取小柱净化,水样过滤后经C_(18)固相萃取小柱净化;再用LC-MS/MS测定样品中异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺的残留量。实验优化了仪器检测和前处理条件,考察了方法的线性关系、基质效应、检出限和定量限,并选取4种土壤、2种沉积物和水样进行了方法验证。在0.0005~0.02 mg/L范围内,异噁唑草酮、吡唑草胺、苯嘧磺草胺的线性关系均良好,r≥0.9961。3种除草剂在土壤、沉积物和水中的基质效应为-10.1%~16.5%。异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺的检出限分别为0.05、0.02、0.01μg/kg,定量限分别为0.2、0.05、0.05μg/kg。异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺在土壤、沉积物和水样中3个水平(0.005、0.1、2.0 mg/kg)下的加标回收率分别为77.2%~101.9%、77.9%~105.1%、80.8%~107.1%;相对标准偏差(RSD)分别为1.4%~12.8%、1.2%~7.7%、1.5%~11.5%。结果表明:本方法操作简单,方法稳定,定量准确,实用性强,可用于土壤、沉积物和水中异噁唑草酮、吡唑草胺和苯嘧磺草胺残留量的检测。

关键词：固相萃取液相色谱-串联质谱除草剂土壤沉积物水

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荔波山地枇杷园农药残留检测质量控制措施

农村经济与科技 2024年第10期35卷 79-82页

作者：金延玉龙玉宁荔波县农产品质量安全检测站贵州荔波558400

为了提高农药残留检测结果准确性、促进荔波县枇杷产业的健康发展,基于荔波县山地枇杷园环境条件、针对枇杷果实的特点,结合农药残留检测各种方法实际应用情况,分析了胶体金免疫层析法、酶抑制速测法、气相色谱法3种常用检测方法的影响... 详细信息

为了提高农药残留检测结果准确性、促进荔波县枇杷产业的健康发展,基于荔波县山地枇杷园环境条件、针对枇杷果实的特点,结合农药残留检测各种方法实际应用情况,分析了胶体金免疫层析法、酶抑制速测法、气相色谱法3种常用检测方法的影响因素,总结出适用于荔波山地枇杷园的3种农药残留检测方法质量控制措施。

关键词：枇杷园农药残留胶体金免疫层析技术气相色谱法检测质量控制措施荔波县

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古浪县马铃薯高效栽培技术要点

河北农机 2024年第7期 148-150页

作者：张小丽武威市古浪县农产品质量安全检测站

马铃薯适用性强,营养丰富全面,粮菜兼用[1],还可以作为工业原料,经济效益好,古浪县立足资源优势,大力推广马铃薯品种更新、全膜垄作技术、测土配方施肥技术,积极引入种薯繁育和商品薯加工企业,这对提升马铃薯产业发展水平,保障粮食供给... 详细信息

马铃薯适用性强,营养丰富全面,粮菜兼用[1],还可以作为工业原料,经济效益好,古浪县立足资源优势,大力推广马铃薯品种更新、全膜垄作技术、测土配方施肥技术,积极引入种薯繁育和商品薯加工企业,这对提升马铃薯产业发展水平,保障粮食供给和粮食安全,加快建设三大特色产业带、发展“8+N”现代农业优势主导产业,实现农业提质增效,助推乡村振兴,增加农民收入意义重大。本文主要介绍了古浪县马铃薯产业发展的现状,以种薯选择、种植方法及田间管理、病虫害防治等技术为主要依托,浅析了马铃薯高效栽培技术。其目的是指导生产实践,提高马铃薯产量,增加生产效益,提高马铃薯种植者的经济效益。

关键词：马铃薯古浪县栽培技术