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邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对睾丸的毒性作用及机制

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生物化学与生物物理进展 2024年第3期51卷 555-563页

作者：冯安妮孙任任肖玉波曾昭明莫中成谢远杰桂林医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室桂林541199 湖南医药学院公共卫生与检验医学院怀化418000 桂林医学院-明舜制药慢性病防治研究联合实验室邵东422800

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)是目前使用最广泛的增塑剂之一,DEHP具有毒性,长期暴露会对机体的多个系统产生损害,特别是对雄性生殖系统的毒性作用更为明显。DEHP通过诱导氧化应激、调控细胞自噬,促进生精细胞和睾丸间质细胞凋亡、... 详细信息

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)是目前使用最广泛的增塑剂之一,DEHP具有毒性,长期暴露会对机体的多个系统产生损害,特别是对雄性生殖系统的毒性作用更为明显。DEHP通过诱导氧化应激、调控细胞自噬,促进生精细胞和睾丸间质细胞凋亡、抑制睾酮合成、破坏血-睾屏障、诱导睾丸支持细胞铁死亡以及影响子代雄性的表观遗传等,造成生殖器官的病理损伤。本文就DEHP对睾丸的毒性作用及机制进行综述,拟为男性生殖障碍的防治研究提供新思路。

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基) 酯睾丸生殖毒性氧化应激铁死亡

基于HPLC指纹图谱与一测多评法结合的桑黄品质评价研究

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中国药学杂志 2024年第6期59卷 531-540页

作者：彭思源邓元辉丁婵孟俊华崔培梧湖南中医药大学药学院菌物药研究室长沙410208 国家中医药管理局中药药性与药效三级科研实验室长沙410208 长沙时代基因医学检验实验室长沙410000

目的基于HPLC特征图谱,建立同时测定桑黄中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、紫萁酮和牛奶树碱5种成分含量的一测多评方法(quantitative analysis of multi-components with a single-marker,QAMS),对不同来源的桑黄药材进行品质评价研究。... 详细信息

目的基于HPLC特征图谱,建立同时测定桑黄中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、紫萁酮和牛奶树碱5种成分含量的一测多评方法(quantitative analysis of multi-components with a single-marker,QAMS),对不同来源的桑黄药材进行品质评价研究。方法收集了3个种源地共10个批次的桑黄药材样品,采用Wondasil C_(18)Superb色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,进样量20μL,采用变波长程序,建立内参物原儿茶醛与原儿茶酸、咖啡酸、紫萁酮、牛奶树碱的相对校正因子并进行了相对校正因子的耐用性考察。采用外标法(external standard method,ESM)和QAMS法分别测定不同来源共10批桑黄药材中该5种成分的含量以验证QAMS法的准确性。结果采用SPSS与Origin Pro进行主成分分析、相似度分析和聚类分析。结果显示,5种成分专属性、精密度、重复性、稳定性、线性范围(r2>0.9990)均良好、平均加样回收率99.74%~102.78%,RSD 1.34%~2.92%。以原儿茶醛为内参物,原儿茶酸、咖啡酸、紫萁酮、牛奶树碱的平均相对校正因子分别为0.8519、1.4469、1.6157、0.7747;t检验结果表明,ESM法与QAMS法测定结果差异不显著。通过统计学分析实现了数据集的可视化,聚类分析发现西藏和广东产地的桑黄样品呈现一定的地域差异,但也发现了源于广东和长白山的个别桑黄样品与源于西藏的桑黄样品聚为一类的现象,意味着不能仅仅依据产地评价桑黄品质优劣,因为可能存在基源不清或品种混淆的状况。不同桑黄样品中牛奶树碱、原儿茶醛、紫萁酮的含量差异较大,且此3类成分对主成分的贡献较多,可能为桑黄的主要质量标志物。结论该研究基于HPLC指纹图谱建立的QAMS法简单、经济、实用,可以实现对桑黄中主要成分的快速、科学分析,也为其种质资源的品质评价提供了一定的科学依据。

关键词：桑黄指纹图谱一测多评法外标法相对校正因子质量评价

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞System Xc-/GSH/GPX4铁死亡通路的表达及其对炎症因子分泌的影响

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安徽医科大学学报 2024年第1期59卷 64-70页

作者：刘灿马武开陈昌明安阳蒋总黄海贵州医科大学医学检验学院临床生物化学与分子生物学教研室贵阳550004 贵州中医药大学第二附属医院风湿免疫科贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床检验中心贵阳550004

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)胱氨酸/谷氨酸逆转运体(System Xc-)/谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)铁死亡通路中相关基因与蛋白的表达及其对炎症因子分泌的影响。方法纳入RA患者及同期健康体检者各30例... 详细信息

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)胱氨酸/谷氨酸逆转运体(System Xc-)/谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)铁死亡通路中相关基因与蛋白的表达及其对炎症因子分泌的影响。方法纳入RA患者及同期健康体检者各30例,采用Ficoll-hypaque密度梯度离心法分离PBMC,将细胞分为健康对照、RA、铁死亡抑制剂、铁死亡诱导剂组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞术FerroOrange荧光探针检测细胞内Fe 2+相对荧光强度、DHE荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)阳性细胞比例,蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR(qPCR)检测核转录因子红系2相关因子(Nrf2)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、GPX4蛋白与mRNA的表达,流式细胞术检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1、IL-6的含量。结果与健康对照组比较,RA组PBMC内Fe 2+浓度和ROS水平升高,Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA的表达降低,PBMC上清液中TNF-α、IL-1、IL-6的含量升高,差异均有统计学意义。与RA组比较,铁死亡抑制剂组PBMC内Fe 2+浓度和ROS水平降低,SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA的表达升高,Nrf2蛋白的表达升高,PBMC上清液中IL-6的含量降低、TNF-α的含量升高,差异均有统计学意义。与RA组比较,铁死亡诱导剂组PBMC内ROS水平升高,SLC7A11蛋白和mRNA的表达降低,Nrf2蛋白的表达降低、GPX4蛋白的表达升高,PBMC上清液中TNF-α、IL-1的含量升高,差异有统计学意义。与铁死亡诱导剂组比较,RA患者PBMC细胞活力降低,差异有统计学意义(P<0.0001)。结论RA患者PBMC中存在铁死亡,抑制或诱导RA患者PBMC铁死亡,将抑制或促进炎性因子分泌。抑制RA患者PBMC铁死亡可能有助于治疗RA。

关键词：类风湿关节炎外周血单个核细胞铁死亡 System Xc-/GSH/GPX4

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没食子酸与氯硝柳胺联合灭螺作用研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第2期42卷 251-258页

作者：郑涛刘佳豪李彬李佳珊聂娟熊涛湖南中医药大学医学院病原生物学教研室长沙410006

目的本研究旨在探讨具有交替氧化酶(AOX)抑制活性的中药单体分子没食子酸和氯硝柳胺的联合灭螺效果及其灭螺机制。方法阴性钉螺采自湖北省公安县,随机分为7组,空白对照组(H_(2)O),实验组分别为氯硝柳胺(N1组:0.06 mg/L,N2组:0.1 mg/L)... 详细信息

目的本研究旨在探讨具有交替氧化酶(AOX)抑制活性的中药单体分子没食子酸和氯硝柳胺的联合灭螺效果及其灭螺机制。方法阴性钉螺采自湖北省公安县,随机分为7组,空白对照组(H_(2)O),实验组分别为氯硝柳胺(N1组:0.06 mg/L,N2组:0.1 mg/L)和没食子酸(G1组:0.8 g/L,G2组:1.6 g/L)单独使用,及联合使用(M1组:0.06 mg/L氯硝柳胺+0.8 g/L没食子酸,M2组:0.06 mg/L氯硝柳胺+1.6 g/L没食子酸)。检测各组钉螺经药物浸杀12、24和48 h后的存活率,液氮包埋后切片并染色,光学显微镜下观察并定量分析,检测钉螺软体切片中细胞色素C氧化酶(CCO)和乳酸脱氢酶(LDH)的相对酶活力值,以平均光密度值表示。钉螺匀浆后离心、取上清,DCFH-DA探针共孵育,用BCA蛋白定量试剂盒测定总蛋白含量,多功能酶标仪检测荧光强度,ROS值以样品测得的荧光强度(FI)除以蛋白质浓度(μg)的值表示,用总超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒测定SOD水平。钉螺死亡率的差异分析采用卡方检验;CCO活性和氧化应激水平的数据用Levene’s Test确定方差齐性后,用Tukey HSD的多重比较方法进行不同组间的两两比较。结果G1和G2组浸杀后未表现出显著的灭螺效应。M1组和M2组在浸杀48 h后的钉螺死亡率分别达到70.0%(56/80)和84.2%(101/120),均高于N1组(44.4%,32/72)(χ2=9.13、32.52,均P0.05)。N1和N2组钉螺的LDH活性呈下降趋势;M1组和M2组钉螺体内CCO和LDH活性均降低(均P<0.05),48 h后M1组的LDH活性在肌肉组织和肝脏分别为0.152±0.002和0.172±0.016,CCO活性分别为0.180±0.022和0.335±0.014;M2组的LDH活性为0.166±0.008和0.173±0.022,CCO活性为0.199±0.009和0.294±0.015,与空白对照组LDH活性(0.229±0.006和0.227±0.010)、CCO活性(0.259±0.008和0.428±0.024)的差异均有统计学意义(均P<0.05)。M1组在处理后24 h的SOD活性为(5.56±0.91)UI/g,高于空白对照组的(5.26±0.08)UI/g(P<0.05);M2组的SOD活性在处理后12、24和48 h呈现先升高后降低的趋势[(2.40±0.45)、(8.14±0.15)、(1.60±0.21)UI/g],与空白对照组在相应时间点的(3.54±0.94)、(5.26±0.08)、(5.10±0.87)UI/g相比,变化趋势显著(均P<0.05)。M1组在处理后24 h和48 h的ROS水平分别为(1619.00±168.25)FI/μg和(1866.65±211.79)FI/μg,M2组在48 h后的ROS水平达到(2451.29±195.91)FI/μg,均高于空白对照组在相应时间点的(802.37±114.69)、(1393.81±86.12)FI/μg(均P<0.05)。结论没食子酸显著增强了低浓度氯硝柳胺的灭螺效果,其灭螺机制为通过阻断AOX的代偿上调,进一步加重了钉螺能量代谢失衡和氧化应激压力。

关键词：湖北钉螺没食子酸氯硝柳胺灭螺效果葡萄糖代谢酶活性氧化应激水平

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强化立德树人的组织学与胚胎学课程思政探索

右江医学 2024年第7期52卷 660-662页

作者：姚志勇张雪梅湖南医药学院基础医学院组织学与胚胎学教研室湖南怀化418000

立德树人是教育的根本任务,更是高校的立身之本[1]。党的十八大以来,习近平总书记多次强调了立德树人的重要性。习近平总书记指出:大学是立德树人、培养人才的地方,要把立德树人的成效作为检验学校一切工作的根本标准,真正做到以文化人... 详细信息

立德树人是教育的根本任务,更是高校的立身之本[1]。党的十八大以来,习近平总书记多次强调了立德树人的重要性。习近平总书记指出:大学是立德树人、培养人才的地方,要把立德树人的成效作为检验学校一切工作的根本标准,真正做到以文化人、以德育人[2]。课程思政是以其他非思政课程为载体,在传授知识的同时进行思想和价值引领,实现思想政治教育与知识体系教育的有机统一,在润物细无声中立德树人[3]。医学教育的特殊性在于培养的学生肩负着救死扶伤、维系人类健康的神圣使命[4]。医学院校要培养出符合时代需要的社会主义医卫人才,要求在传授理论知识和实践技能的同时更应该关注医学生德育培养[5]。因此,在医学专业课程教学中融入课程思政,是贯彻落实立德树人根本任务的重要途径。

关键词：立德树人组织学与胚胎学课程思政

保和丸对泄泻食滞胃肠证小鼠小肠段微生物和微生物活度的影响

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时珍国医国药 2024年第8期35卷 1890-1893页

作者：邵好青王丽萍刘娅薇邓娜谭周进湖南医药学院康复医学与保健学院湖南怀化418000 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 中医方证研究转化医学湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的研究泄泻食滞胃肠证小鼠小肠段微生物和微生物活度的变化和保和丸对其的干预作用。方法 25只SPF级昆明系雄性小鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(n=15),采用病因造模法以自食高蛋白高热量饲料联合灌胃植物油的方式模拟饮食不节制备... 详细信息

目的研究泄泻食滞胃肠证小鼠小肠段微生物和微生物活度的变化和保和丸对其的干预作用。方法 25只SPF级昆明系雄性小鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(n=15),采用病因造模法以自食高蛋白高热量饲料联合灌胃植物油的方式模拟饮食不节制备泄泻食滞胃肠证小鼠模型。造模成功后,将模型小鼠随机分入中药干预组(n=5)和模型自愈组(n=5),中药干预组给予6.63 g/(Kg·d)保和丸煎液灌胃,同期以小鼠繁殖用常规饲料和等量无菌水做对照。利用传统微生物培养技术(选择性培养基结合稀释涂布平板菌落计数)检测各组实验小鼠的小肠段可培养微生物(乳酸菌、双歧杆菌和大肠杆菌)的生物量,利用荧光素二乙酸酯法分析各组的小肠段总微生物活度。结果与对照组相比,模型组小肠段腔内容物中可培养的大肠杆菌数(P=0.006)、双歧杆菌数(P=0.115)和乳酸菌数(P=0.006)均有减少,腔内容物中微生物活度下降(P=0.007),而黏膜中微生物活度升高(P=0.000)。与模型自愈组相比,中药干预组小肠段腔内容物可培养的大肠杆菌数和双歧杆菌数减少(P_(大肠杆菌数)=0.222,P_(双歧杆菌数)=0.006),乳酸菌数增加(P=0.001),腔内容物中微生物活度下降(P=0.001),黏膜中微生物活度升高(P=0.007)。结论泄泻食滞胃肠证小鼠小肠段微生态发生改变,保和丸可通过促进小肠段腔内容物中可培养的乳酸菌生长、抑制可培养的大肠杆菌和双歧杆菌生长,并下调内容物中微生物活度、上调黏膜中微生物活度,从而调节小鼠的小肠微生态。

关键词：保和丸泄泻食滞胃肠证肠道微生物微生物活度

PBL + CBL + TBL + RBL混合式教学模式在公共营养学教学中的应用

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教育进展 2024年第9期14卷 176-182页

作者：罗顺莉卢星军张志军孙素霞湖南医药学院公共卫生与检验医学院食品卫生与营养学教研室湖南怀化南方医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系广东广州

公共营养学课程涉及面广,且实践性非常强,所以单纯以传统的讲授式教学法(Lecture-Based Leaning, LBL)很难达到人才培养目标。在公共营养学课程教学中将以问题为中心的教学法(Problem-Based Learning, PBL)、以病例为基础的教学法(Case-... 详细信息

公共营养学课程涉及面广,且实践性非常强,所以单纯以传统的讲授式教学法(Lecture-Based Leaning, LBL)很难达到人才培养目标。在公共营养学课程教学中将以问题为中心的教学法(Problem-Based Learning, PBL)、以病例为基础的教学法(Case-Based Learning, CBL)、基于任务驱动的教学法(Task-Based Leaning, TBL)和以研究为基础的教学法(Research-Based learning, RBL)进行整合,取长补短,可以最大限度地发挥学生的主观能动性,并提升学生发现、分析、解决问题、理论联系实践、与人沟通的能力,也可培养学生的科学素养和科普志愿服务意识,并增强学生的团队意识。Public Nutrition courses encompass a diverse array of topics and emphasize practical application, making it challenging to effectively cultivate talent solely through traditional Lecture-Based Learning (LBL) methods. In Public Nutrition course teaching, Problem-Based Learning (PBL), Case-Based Learning (CBL), Task-Based Leaning (TBL) and Research-Based learning (RBL) will be adopted. The integration of PBL, CBL, TBL and RBL can maximize students’ subjective initiative and improve students’ ability to discover, analyze, solve problems, connect theory with practice, and communicate with others. It can also cultivate students’ scientific literacy and consciousness of volunteer service for science popularization, and enhance students’ sense of teamwork.

关键词：公共营养学以问题为中心的教学法以病例为基础的教学法基于任务驱动的教学法研究为基础的教学法

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GPX4缺失介导的铁死亡与精子发生

生命的化学 2024年第2期44卷 314-320页

作者：孙任任肖玉波冯安妮曾昭明莫中成谢远杰桂林医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室桂林541199 湖南医药学院公共卫生与检验医学院怀化418000 桂林医学院-明舜制药慢性病防治研究联合实验室邵阳422800

铁死亡是一种不同于坏死和凋亡的程序性细胞死亡,其特征为铁依赖性的脂质过氧化物及活性氧蓄积。铁死亡可影响生精细胞分裂分化、血睾屏障及睾酮分泌,从而影响精子发生,导致男性不育。谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GP... 详细信息

铁死亡是一种不同于坏死和凋亡的程序性细胞死亡,其特征为铁依赖性的脂质过氧化物及活性氧蓄积。铁死亡可影响生精细胞分裂分化、血睾屏障及睾酮分泌,从而影响精子发生,导致男性不育。谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)作为将脂质过氧化物还原为醇的唯一关键还原酶,在铁死亡中发挥着关键作用,并与氧化应激、炎症、焦亡、自噬等病理生理过程密切相关。本文就GPX4缺失介导睾丸细胞铁死亡调控氧化应激、炎症、焦亡、自噬等影响精子发生的相关研究进展进行综述,以期为男性生精障碍的防治提供理论参考。

关键词：谷胱甘肽过氧化物酶4 铁死亡氧化应激炎症焦亡自噬精子发生

过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型的建立

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生物学杂志 2024年第4期41卷 24-29页

作者：徐菁何柳周芳婷潘勤陈姗罗靓湖北中医药大学、药学院、药物分析教研室武汉430071 武汉大学泰康医学院(基础医学院)人体解剖学与组织胚胎学系武汉430071 武汉市蔡甸区人民医院检验科武汉430100

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳... 详细信息

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳定表达TLR2分子的Nalm-6细胞(TLR2^(+))。利用倒置荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光表达情况,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测相关蛋白表达水平,采用CCK-8以及流式细胞术检测细胞存活率和细胞增殖水平。结果显示:倒置荧光显微镜下可见成功转染慢病毒的Nalm-6细胞表达绿色荧光和嘌呤霉素抗性。Western Blot检测到TLR2在Nalm-6细胞中成功表达,且TLR2信号的激活明显增强PI3K-AKT信号轴分子的磷酸化水平。CCK-8和流式细胞术发现TLR2活化可提升细胞存活率,促进细胞增殖。研究成功构建了过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型,并在此基础上验证TLR2活化不仅能够增强B细胞PI3K-AKT信号通路传导,还可促进细胞增殖。此模型为进一步探究TLR2通路对B细胞抗感染免疫功能的影响奠定基础。

关键词： TLR2 慢病毒载体 B淋巴细胞 PI3K-AKT信号通路细胞增殖