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益气扶正解毒汤联合化疗对口腔癌术后患者免疫功能的影响

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中国处方药 2022年第4期20卷 145-147页

作者：李蔚蒋曼王任炜肖婷周慧熊晔胡革湖南中医药大学第一附属医院耳鼻喉头颈外科长沙410000

目的探讨益气扶正解毒汤联合化疗对于口腔癌术后患者免疫功能的影响。方法将2019年8月~2021年8月收治的86例口腔癌术后患者按随机数表法分为观察组(n=43)与对照组(n=43),对照组患者给予化疗药物治疗,观察组在对照组的基础上加服益气扶... 详细信息

目的探讨益气扶正解毒汤联合化疗对于口腔癌术后患者免疫功能的影响。方法将2019年8月~2021年8月收治的86例口腔癌术后患者按随机数表法分为观察组(n=43)与对照组(n=43),对照组患者给予化疗药物治疗,观察组在对照组的基础上加服益气扶正解毒汤,持续治疗3个月(90 d)。检查两组患者治疗前后T细胞亚群的变化,并观察其中医临床证候积分、实体瘤疗效、血清中肿瘤标志物等评测疗效。结果治疗前两组患者的T淋巴细胞亚群比例差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后对照组患者的CD4^(+)细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)均低于治疗前,并且CD8^(+)的细胞比例显著高于治疗前,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后观察组的CD4^(+)细胞比例与CD4^(+)/CD8^(+)相较于治疗前均有所升高,而CD8^(+)细胞比例相较于治疗前有所降低,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者在治疗后,观察组的总有效率为83.72%,对照组的总有效率为65.12%,观察组的实体瘤疗效显著高于对照组,差异具有统计学意义(P中医症候评分均无显著性差异(P>0.05),治疗后观察组的症候评分显著低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后的CEA、NSE、CA19-9等指标的表达水平显著低于治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者治疗后的CEA、NSE、CA19-9等指标的表达水平显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论益气扶正解毒汤联合化疗能减少口腔癌术后患者身体免疫功能缺陷,提高临床疗效,缓解口腔癌临床症状,减少肿瘤复发率。

关键词：益气扶正解毒汤化疗口腔癌术后免疫功能

基于铁死亡探讨慢性肾脏病的发病机制及中医药干预进展

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2629-2639页

作者：杨璧英刘相胡爽彭亚军张伟宁刘丙龙何泽云湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410021

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)起病隐匿,因其发病率高、知晓率低、诊断率低、预后差和医疗费用高等特点,已成为危害人类健康的重要公共卫生问题。目前已有多项研究表明CKD在其发生发展过程中会出现不同程度的铁死亡特征,而中... 详细信息

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)起病隐匿,因其发病率高、知晓率低、诊断率低、预后差和医疗费用高等特点,已成为危害人类健康的重要公共卫生问题。目前已有多项研究表明CKD在其发生发展过程中会出现不同程度的铁死亡特征,而中药可以通过靶向铁代谢、脂质过氧化及抗氧化系统等抑制铁死亡来延缓CKD的进展,铁死亡干预机制逐渐成为CKD研究的重点领域之一。中医药宝库集数千年传统中医经验与智慧于一身,注重人体功能的整体调节,能够激发人体的抗病和康复能力,对治疗CKD具有一定优势,但目前尚缺乏中医药干预铁死亡治疗CKD及铁死亡与CKD发病机制的总结性综述。该文汇总国内外最新研究进展,简述铁死亡主要的作用机制,对铁死亡与CKD发病机制的最新研究进展进行了系统综述,融合了与CKD铁死亡相关的“虚”“瘀”“痰浊”“毒”等中医理论,总结了中药活性成分、中药复方干预铁死亡治疗CKD的研究现状,以期从铁死亡角度为中医药防治CKD提供新靶点和新方向。

关键词：铁死亡慢性肾脏病铁代谢脂质过氧化抗氧化系统中药活性成分中药复方

桃红四物汤调控Nrf2/Keap1/HO-1信号通路介导的铁死亡在膝骨关节炎中的作用机制

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中药药理与临床 2024年

作者：段航曾凡王林华邝高艳卢敏湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学

目的：桃红四物汤调控核因子E2相关因子（Nrf2）/Kelch样ECH关联蛋白1（Keap1）/血红素氧合酶-1（HO-1）信号通路介导的铁死亡在膝骨关节炎（KOA）中的作用机制。方法：40只SD大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、桃红四物汤9 g/kg... 详细信息

目的：桃红四物汤调控核因子E2相关因子（Nrf2）/Kelch样ECH关联蛋白1（Keap1）/血红素氧合酶-1（HO-1）信号通路介导的铁死亡在膝骨关节炎（KOA）中的作用机制。方法：40只SD大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、桃红四物汤9 g/kg组、双醋瑞因胶囊0.0045 g/kg组，每组各10只；各组均采用内侧半月板失稳手术造模，造模成功1 w后各组给予相应的药液灌胃或无菌水灌胃，给药8 w，1次/d。干预完成后，检测各组大鼠血清白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-18（IL-18）含量及关节软骨组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力、活性氧（ROS）水平；透射电镜观察各组大鼠软骨线粒体数量、形态、结构及分布情况；Western Blot法检测大鼠关节软骨组织Keap1、Nrf2、HO-1、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、肿瘤抑制蛋白53（P53）、溶质载体家族7成员11重组蛋白（SLC7A11）蛋白的表达。结果：与假手术对照组比较，模型对照组Mankin和OARSI病理评分升高，IL-1β、TNF-α、IL-18、MDA、ROS含量显著升高，Keap1、P53蛋白表达显著上调，SOD活力显著降低，Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11蛋白表达显著下调（P<0.01）；与模型对照组比较，桃红四物汤组Mankin和OARSI病理评分降低，IL-1β、TNF-α、IL-18、MDA、ROS含量，Keap1、P53蛋白表达显著下调，SOD活力显著升高，Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11蛋白表达显著上调（P<0.01）。结论：桃红四物汤可能通过激活Nrf2/Keap1/ HO-1信号通路抑制大鼠关节软骨铁死亡。

关键词：桃红四物汤核因子E2相关因子铁死亡膝骨关节炎氧化应激谷胱甘肽过氧化物酶4

基于代谢组学和网络药理学研究五虎汤干预RSV诱导哮喘的效应物质及作用机制

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中国中药杂志 2024年

作者：姚冰刘靖雷王孟清罗银河谢静荀春铮李凡黄婷曾庆佳湖南中医药大学湖南中医药大学第一附属医院

探讨五虎汤治疗呼吸道合胞病毒（RSV）诱发哮喘的效应物质及作用机制。使用超高效液相串联高分辨质谱仪确定五虎汤的入血成分；借助数据库对入血成分作用于哮喘的靶点进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析及基因本体（GO）功... 详细信息

探讨五虎汤治疗呼吸道合胞病毒（RSV）诱发哮喘的效应物质及作用机制。使用超高效液相串联高分辨质谱仪确定五虎汤的入血成分；借助数据库对入血成分作用于哮喘的靶点进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析及基因本体（GO）功能分析。同时将靶点蛋白及代谢物-靶点-通路等信息导入STRING数据库，构建蛋白互作网络，明确五虎汤核心成分及关键通路。体内实验部分使用RSV联合鸡卵清蛋白（OVA）建立哮喘模型，通过肺功能、苏木精-伊红（HE）染色、酶联免疫吸附实验（ELISA）、蛋白免疫印迹法及免疫组织化学法验证五虎汤对RSV诱导哮喘小鼠的干预作用。结果显示，五虎汤入血成分以黄酮类、苯丙素类、木脂素类、萜类等化合物为主，作用于儿童哮喘的核心成分有(－)-表没食子儿茶素、山柰素、异甘草素、香叶木素、桦木酸、熊果酸、瑞香素、七叶素等，钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用、NOD样受体信号通路、T细胞受体信号通路、Toll样受体信号通路等是其靶点主要作用通路。体内实验结果表明，五虎汤能够改善肺功能指标，下调白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17((IL-17)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，并且能够降低肺组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)、核因子-κB亚基1（NFKB1）等蛋白的表达，减轻中性粒细胞炎症浸润及肺淤血。结果表明，五虎汤通过多组分、多靶点、多途径的协同作用干预病毒诱发哮喘，体内实验证明其能抑制NOD样受体信号通路的激活，减轻哮喘小鼠气道炎症与气道损伤。

关键词：代谢组学网络药理学五虎汤中药入血成分 RSV 儿童哮喘 NOD样受体信号通路

麻杏石甘汤通过JAK1/2-STAT1信号通路改善流感病毒感染所致肺组织与结肠组织损伤

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中国中药杂志 2022年第19期47卷 5306-5315页

作者：赵澄张香港陈纯静王小奇陈凯琴刘畅肖荣贺笠彭美红卢芳国湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410021

该研究基于Janus激酶1/2-信号转导与转录激活子1(Janus kinase 1/2-signal transducer and activator of transcription 1,JAK1/2-STAT1)信号通路探讨麻杏石甘汤改善流感病毒感染小鼠肺组织与结肠组织损伤的免疫机制。采用流感病毒滴鼻... 详细信息

该研究基于Janus激酶1/2-信号转导与转录激活子1(Janus kinase 1/2-signal transducer and activator of transcription 1,JAK1/2-STAT1)信号通路探讨麻杏石甘汤改善流感病毒感染小鼠肺组织与结肠组织损伤的免疫机制。采用流感病毒滴鼻法制备流感病毒感染模型,实验设正常组、模型组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组、麻杏石甘汤组。经灌胃给药或生理盐水3、7 d后,常规法检测体质量,计算肺指数、脾指数、胸腺指数;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法观察肺组织、结肠组织的病理变化;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清炎症因子白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的水平;蛋白免疫印迹(Western blot)法和实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polyme-rase chain reaction,RT-qPCR)法分别检测肺组织、结肠组织中JAK1、JAK2、STAT1、干扰素调节因子9(interferon regulatory factor 9,IRF9)、IFN-γ蛋白和mRNA的表达水平。结果显示,给药3、7 d后,与正常组比较,模型组小鼠体质量、脾指数和胸腺指数显著降低(P<0.05或P<0.01),肺指数显著升高(P<0.01);肺组织充血水肿,大量淋巴细胞及巨噬细胞浸润;结肠黏膜结构不齐,上皮细胞溃疡、脱落,大量炎性细胞浸润;血清炎症因子IFN-γ水平显著升高(P<0.01);肺组织JAK1、JAK2、STAT1、IRF9、IFN-γ蛋白和mRNA的表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01);结肠组织JAK2蛋白表达水平显著升高(P<0.01),STAT1、IRF9蛋白和mRNA的表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,麻杏石甘汤组小鼠体质量、脾指数和胸腺指数显著升高(P<0.05或P<0.01),肺指数显著降低(P<0.05或P<0.01);肺、结肠组织病理损伤得到显著改善;血清炎症因子IFN-γ水平显著降低(P<0.05或P<0.01);肺组织JAK1、JAK2、STAT1、IRF9、IFN-γ蛋白和mRNA的表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01);结肠组织JAK2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),STAT1、IRF9蛋白和mRNA表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。给药3 d后,模型组小鼠血清炎症因子IL-8水平较正常组显著升高(P<0.01),麻杏石甘汤组小鼠血清炎症因子IL-8水平显著降低(P<0.01)。结果表明,麻杏石甘汤能显著上调体质量、脾指数和胸腺指数,下调肺指数,降低炎症因子IL-8、IFN-γ的水平,下调肺组织JAK1、JAK2、STAT1、IRF9、IFN-γ与结肠组织JAK2、STAT1、IRF9蛋白和mRNA的表达水平,改善肺组织、结肠组织的免疫病理损伤。其可能机制是通过抑制JAK1/2-STAT1信号通路的活化,从而达到减少肺与结肠组织损伤的治疗目的。

关键词：麻杏石甘汤流感病毒 JAK1/2-STAT1信号通路肺结肠

滋阴明目方调控GRP78/IRE1/ATF6通路改善视网膜色素变性的体外研究

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北京中医药大学学报 2024年第6期 773-781页

作者：欧晨宋厚盼谢薇彭俊曾梅艳彭清华湖南中医药大学湖南中医药大学第一附属医院

目的探讨滋阴明目方对改善视网膜色素变性的作用机制。方法制备滋阴明目方含药血清及空白血清，采用液质联用技术分析滋阴明目方含药血清的化学成分。采用衣霉素干预人视网膜色素上皮（ARPE-19）细胞构建内质网应激损伤模型。CCK-8法... 详细信息

目的探讨滋阴明目方对改善视网膜色素变性的作用机制。方法制备滋阴明目方含药血清及空白血清，采用液质联用技术分析滋阴明目方含药血清的化学成分。采用衣霉素干预人视网膜色素上皮（ARPE-19）细胞构建内质网应激损伤模型。CCK-8法筛选滋阴明目方含药血清最优体积分数。将ARPE-19细胞分为空白组、模型组、空白血清组、滋阴明目方含药血清组、牛磺熊去氧胆酸组。采用多时间动态细胞功能分析系统对细胞进行形态观察，CCK-8法检测细胞存活率，Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率，蛋白质印迹法和微滴式数字PCR法检测细胞葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、1型内质网转膜蛋白激酶(IRE1)、活化转录因子6(ATF6)的蛋白及mRNA表达。结果液质联用分析得到滋阴明目方含药血清中熊果苷、水杨酸、木犀草素、丹酚酸A、刺桐碱、牛磺酸、檞皮素、麦芽酚、黄芩苷、丹参素等主要化学成分。与模型组比较，滋阴明目方含药血清组细胞数量增多，生长较均匀，漂浮的死亡ARPE-19细胞及碎片减少；滋阴明目方含药血清组和牛磺熊去氧胆酸组的细胞存活率升高，细胞凋亡率均下降（均P＜0.01）；滋阴明目方含药血清组GRP78、IRE1、ATF6蛋白表达降低，牛磺熊去氧胆酸组IRE1、ATF6蛋白表达降低，滋阴明目方含药血清组、牛磺熊去氧胆酸组GRP78、IRE1、ATF6 mRNA表达降低（均P＜0.05）。结论滋阴明目方可以减少ARPE-19细胞内质网应激损伤模型的细胞凋亡，其分子机制与下调GRP78、IRE1、ATF6的表达，抑制细胞内质网应激反应有关。

关键词：滋阴明目方人视网膜色素上皮细胞内质网应激葡萄糖调节蛋白78/1型内质网转膜蛋白激酶/活化转录因子6通路凋亡

基于HGF/PI3K/Akt信号轴研究赤芍-附子药对促进慢加急性肝衰竭肝细胞再生的作用机制

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中国中药杂志 2024年

作者：田晓玲张彧杜珊伍梦思谭年花陈斌湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学

基于肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor， HGF)/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase， PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B， Akt)信号轴研究赤芍-附子药对对慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure， ACLF)大鼠的治疗作用及对肝细胞再生的影响。采用牛血清白蛋白皮下及尾静脉注射联合脂多糖(lipopolysaccharides， LPS)+D-氨基半乳糖(D-galactosamine， D-GalN)腹腔注射构建ACLF大鼠模型，实验设置正常对照(NC)组、模型(vehicle)组、赤芍-附子药对(SFYD，5.85 g·kg-1) 组、促肝细胞生长颗粒(HGFG，4.05 g·kg-1)组。苏木精-伊红(hematoxylin-Eosin staining， HE)染色观察大鼠肝组织病理变化。全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(alanineaminotransferase， ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase， AST)、总胆红素(total bilirubin， TBIL)。ELISA法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β， IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α， TNF-α)炎症因子水平。免疫荧光染色检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen， PCNA)、细胞增殖相关抗原(antigen identified by monoclonal antibody，Ki67)及细胞周期蛋白(cell cycle protein B1， CyclinB1)阳性表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测HGF、结合蛋白Gab1(grb2 associated binding protein 1， Gab1)、PI3K、Akt、磷酸化-PI3K(phosphorylation-PI3K， p-PI3K)、磷酸化-Akt(phosphorylation-Akt， p-Akt)mRNA及蛋白表达水平。结果显示与vehicle组比较，SFYD组大鼠肝组织病理评分降低，肝功能及炎症反应改善，PCNA、Ki67、CyclinB1荧光表达增强。同时与模型组相比，SFYD组HGF、Gab1蛋白表达上调，PI3K、Akt磷酸化激活。以上研究表明赤芍-附子药对通过减轻肝细胞炎症损伤以及促进肝细胞再生来达到抗肝衰竭的效应，其具体调控机制可能与激活HGF/PI3K/Akt信号通路有关。

关键词：慢加急性肝衰竭赤芍-附子药对 HGF/PI3k/Akt 肝再生

半枝莲总黄酮提取工艺优化及抗氧化、抗肿瘤活性评价

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食品工业科技 2023年第23期44卷 194-202页

作者：郑沛文敏刘秋叶王潇左亚杰湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208

本实验旨在优化半枝莲总黄酮提取工艺,评价半枝莲总黄酮纯化物抗氧化、抗肿瘤活性。采用单因素实验结合响应面Box-Behnken设计对半枝莲总黄酮提取工艺进行研究,主要考察了提取时间、料液比、提取温度和乙醇体积分数对黄酮得率的影响,从... 详细信息

本实验旨在优化半枝莲总黄酮提取工艺,评价半枝莲总黄酮纯化物抗氧化、抗肿瘤活性。采用单因素实验结合响应面Box-Behnken设计对半枝莲总黄酮提取工艺进行研究,主要考察了提取时间、料液比、提取温度和乙醇体积分数对黄酮得率的影响,从而得出半枝莲总黄酮提取的最佳工艺;采用DPPH、ABTS法检测半枝莲总黄酮纯化物的抗氧化活性;采用MTT法检测纯化物对NCI-H1299、HepG2、MHCC-97H、HuH-7细胞增殖的影响。结果表明,半枝莲总黄酮提取最佳工艺为提取时间93 min、料液比1:41(g/mL)、提取温度为68℃、乙醇体积分数为75%,该条件下半枝莲总黄酮得率为26.46 mg/g。抗氧化实验结果表明,半枝莲总黄酮纯化物对DPPH、ABTS+自由基有较好的清除作用,IC_(50)值分别为25.41、70.41μg/mL;抗肿瘤实验表明,在一定浓度范围内不同质量浓度的半枝莲总黄酮纯化物对肿瘤细胞增殖均有一定抑制作用,其NCI-H1299、HepG2、MHCC-97H、HuH-7细胞的IC_(50)值分别为168.6、330.5、269.2、335.8μg/mL。综上可知,该方法稳定可行、重复性好,能有效提取出半枝莲中总黄酮成分,且纯化后的半枝莲总黄酮具有良好的抗氧化及抗肿瘤活性,可以进行功能性食品的研发。

关键词：半枝莲总黄酮工艺优化纯化抗氧化活性抗肿瘤活性

A20在类风湿关节炎中的作用机制研究及中医药干预进展

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中国免疫学杂志 2023年

作者：吴伊莹柳玉佳郑蕾刘梨陈新怡郭志华湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学

类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis， RA）是一种以慢性侵蚀性关节炎症为主要特征的自身免疫疾病，严重危害患者的心理和身体健康。临床治疗RA的药物效果有限，寻求新的治疗靶点及药物是当前的热点问题。锌指蛋白A20是一种细胞质泛素... 详细信息

类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis， RA）是一种以慢性侵蚀性关节炎症为主要特征的自身免疫疾病，严重危害患者的心理和身体健康。临床治疗RA的药物效果有限，寻求新的治疗靶点及药物是当前的热点问题。锌指蛋白A20是一种细胞质泛素修饰酶，与炎症信号通路核因子κB（Nuclear factor kappa-B， NF-κB）的负性调节密切相关，具有抗炎和抗细胞坏死性凋亡的作用。A20参与RA的发病，有改善RA的炎症反应及骨破坏的作用。中医药治疗RA具有多靶点、多通路的独特优势，研究发现中医药对A20具有调节作用。本文通过阐述A20在RA中作用机制研究，以及中医药干预A20的研究进展，以期为RA的治疗和药物研发提供参考。

关键词：锌指蛋白A20 类风湿关节炎中医药 NF-κB