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解毒化瘀升散方抑制NLRP3信号通路缓解慢加急性肝衰竭大鼠炎症损伤的实验研究

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中华肝脏病杂志 2024年第4期32卷 354-362页

作者：刘潇蒙健林王明刚毛德文戴铭湖南中医药大学长沙410208 广西中医药大学南宁530200 广西中医药大学第一附属医院南宁530023

目的观察解毒化瘀升散方缓解慢加急性肝衰竭(ACLF)大鼠肝脏炎症损伤的疗效及其对NLRP3信号通路活化强度的影响。方法取SD大鼠63只,随机分为空白组、模型组和解毒化瘀升散方低、中、高剂量组(分别为7.29、14.58及29.16 g·kg^(-1)·d^(-... 详细信息

目的观察解毒化瘀升散方缓解慢加急性肝衰竭(ACLF)大鼠肝脏炎症损伤的疗效及其对NLRP3信号通路活化强度的影响。方法取SD大鼠63只,随机分为空白组、模型组和解毒化瘀升散方低、中、高剂量组(分别为7.29、14.58及29.16 g·kg^(-1)·d^(-1))。采用四氯化碳联合D-氨基半乳糖和脂多糖复制ACLF大鼠模型,解毒化瘀升散方不同剂量梯度干预处理5 d,收集大鼠血清及组织样本。采用生物化学分析仪检测大鼠血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素水平;酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-18、白细胞介素-1β含量;苏木精-伊红染色观察肝组织形态学改变;免疫组织化学法检测肝组织中消皮素D(GSDMD)表达;蛋白质免疫印迹法及PCR检测NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白、Toll样受体4、白细胞介素-1β、白细胞介素-18mRNA和蛋白表达水平。计量资料采用方差分析,组间比较采用秩和检验。结果与空白组相比,模型组大鼠肝组织损伤严重,血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素水平,炎症因子白细胞介素-1β、白细胞介素-18水平,GSDMD蛋白表达水平,均较空白组显著升高(P值均<0.01),NLRP3、TLR4、Caspase 1、凋亡相关斑点样蛋白、白细胞介素-1β、白细胞介素-18蛋白与mRNA表达水平也显著升高(P值均<0.01);与模型组相比,解毒化瘀升散方低、中、高剂量组能改善ACLF大鼠肝组织损伤,血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素水平,血清白细胞介素-1β、白细胞介素-18水平,肝组织GSDMD蛋白水平,NLRP3、TLR4、Caspase 1、凋亡相关斑点样蛋白表达均较模型组降低,其中以高剂量组降低程度最明显(P值均<0.01)。结论解毒化瘀升散方能减弱ACLF大鼠肝脏NLRP3信号通路活化强度,减轻肝组织病理损伤,减少炎症因子释放,缓解ACLF大鼠肝脏炎症损伤。

关键词：慢加急性肝衰竭炎症 NLRP3信号通路解毒化瘀升散方

沙眼衣原体pORF5蛋白通过上调DJ-1激活Nrf2/NQO1通路调控细胞氧化应激与凋亡

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微生物学通报 2024年

作者：龚思露周辉湖南中医药大学第二附属医院医学检验中心湖南中医药大学第一附属医院医学检验与病理中心

【背景】pORF5质粒蛋白是沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis，Ct）重要毒力因子，具有抑制细胞氧化应激和凋亡的作用。【目的】探讨pORF5是否通过上调DJ-1蛋白激活Nrf2/NQO1信号通路调控LPS诱导的细胞氧化应激与凋亡。【方法】用不同... 详细信息

【背景】pORF5质粒蛋白是沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis，Ct）重要毒力因子，具有抑制细胞氧化应激和凋亡的作用。【目的】探讨pORF5是否通过上调DJ-1蛋白激活Nrf2/NQO1信号通路调控LPS诱导的细胞氧化应激与凋亡。【方法】用不同浓度的pORF5质粒蛋白以不同时间刺激HeLa细胞，Western blotting检测DJ-1蛋白表达情况；采用活性氧（reactive oxygen species， ROS）试剂盒、流式细胞术检测pORF5对LPS诱导的细胞氧化应激和凋亡的影响；利用siRNA干扰HeLa细胞DJ-1蛋白表达，荧光显微镜观察细胞内ROS荧光强度，试剂盒检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量变化；用Nrf2特异性抑制剂（ML385）预处理细胞1 h，pORF5单独或与LPS共刺激细胞后，分析凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白表达水平；利用Western blotting分析干扰DJ-1蛋白表达对Nrf2/NQO1信号通路的影响。【结果】pORF5可上调DJ-1蛋白表达，且最佳刺激浓度和时间分别为10 μg/mL，18 h；pORF5质粒蛋白可显著减弱LPS诱导的ROS荧光强度及细胞凋亡率（P<0.001）；si-DJ-1组中ROS荧光强度增强，MDA含量增多（P<0.001），SOD活性下降（P<0.001）；ML385能抑制pORF5诱导的Nrf2、NQO1蛋白表达（P<0.001），上调促凋亡蛋白Bax表达（P<0.05），下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达（P<0.01）；si-DJ-1组中Nrf2及NQO1的表达明显降低（P<0.001，P<0.01）。【结论】pORF5质粒蛋白可通过上调DJ-1蛋白激活Nrf2/NQO1信号通路抑制LPS诱导的细胞氧化应激与凋亡。

关键词：沙眼衣原体 pORF5质粒蛋白氧化应激凋亡 DJ-1

基于AMPK/SIRT1通路探究祛风明目丸对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠的作用机制

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2363-2368页

作者：赵凡朱定耀喻京生湖南中医药大学第一中医临床学院长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院长沙410007

目的:研究祛风明目丸对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)大鼠腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/SIRT1通路及Th1/Th17细胞的作用机制。方法:SPF级雄性Lewis大鼠70只,随机取19只作为空白组,剩余51只建立EAU模型,造模后行炎症评分。造模成功后随机... 详细信息

目的:研究祛风明目丸对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)大鼠腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/SIRT1通路及Th1/Th17细胞的作用机制。方法:SPF级雄性Lewis大鼠70只,随机取19只作为空白组,剩余51只建立EAU模型,造模后行炎症评分。造模成功后随机分为模型组、中药常量组、中药高倍组。中药常量组、中药高倍组每天分别以2.4、4.8 g/kg祛风明目丸药液灌胃,空白组、模型组每天予等量蒸馏水灌胃。14 d后ELISA检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-6、IL-17A、IL-22水平,流式细胞数检测外周Th1/Th17细胞比例,qRT-PCR定量检测视网膜中CCL20、CXCL9、CXCL10、CCR6和CXCR3表达,Western Blot检测视网膜AMPK、P-AMPK、SIRT1蛋白表达。结果:Caspi评分示:自造模后第3天起模型组EAU大鼠眼前节炎症评分显著高于空白组(P<0.01)。ELISA示:与空白组比较,模型组IFN-γ、IL-6、IL-17A、IL-22水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,中药常量组、中药高倍组炎症因子表达显著下降(P<0.05)。qRT-PCR示:与空白组比较,模型组CXCL9、CXCL10、CCL20、CCR6和CXCR3水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,中药高倍组趋化因子及受体的表达显著下调(P<0.05),中药常量组CXCL10、CCL20、CCR6和CXCR3的表达显著降低(P<0.05)。流式细胞数示:与空白组比较,模型组Th1和Th17细胞亚群比例显著升高(P<0.05);与模型组比较,中药高倍组Th1和Th17细胞比例显著下降(P<0.05),中药常量组Th1细胞比例显著下降(P<0.05)。Western Blot示:与空白组比较,模型组P-AMPK、P-AMPK/AMPK、SIRT1表达显著下调;与模型组比较,中药常量组与高倍组表达显著上调(P<0.05)。结论:祛风明目丸减轻EAU大鼠炎症、抑制Th1/Th17细胞的作用机制可能与AMPK/SIRT1通路激活相关。

关键词：祛风明目丸动物模型自身免疫性葡萄膜炎腺苷酸活化蛋白激酶 Th1/Th17细胞

枸杞子-丹参诱导穆勒细胞重编程治疗视网膜色素变性的实验研究

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 3040-3049页

作者：宋厚盼欧晨熊萌蒋鹏飞曾梅艳逯晶彭俊周亚莎杨毅敬彭清华湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医诊断研究所湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208

探讨滋阴活血明目药对枸杞子-丹参(Lycii Fructus-Salviae Miltiorrhizae Radix, LFSMR)抑制穆勒细胞(Müller cell,MC)胶质化,促进MC重编程转分化为视网膜神经细胞治疗视网膜色素变性(retinitis pigmentosa, RP)的效应及机制。将12只C57小鼠作为正常对照组,48只转基因RP(rd10)小鼠随机分为模型组、阳性对照组和LFSMR低、高剂量组,每组12只。HE染色检测视网膜病理改变,视网膜电图检测视网膜功能,眼底光学相干断层扫描检测视网膜厚度并进行眼底照相,激光散斑灌注成像检测视网膜局部血流,数字PCR检测视网膜神经细胞相关基因表达,免疫荧光法检测视网膜神经细胞相关蛋白表达。LFSMR可明显改善rd10小鼠视网膜病理改变;LFSMR可明显增加小鼠视网膜a波和b波振幅;LFSMR可显著增加小鼠视网膜厚度;LFSMR可明显恢复RP病变过程小鼠眼底损伤;LFSMR可显著提升RP病变过程小鼠视网膜血流量;LFSMR可显著抑制RP发病过程胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)mRNA表达,上调性别决定域Y链蛋白2(sex determining region Y box protein 2, SOX2)、双链复合蛋白6(paired box protein 6, Pax6)、视紫红质(rhodopsin)、蛋白激酶C-α(protein kinase C-α, PKCα)、突触融合蛋白(syntaxin)、胸腺细胞抗原1.1(thymic cell antigen 1.1, Thy1.1)mRNA表达;LFSMR可显著抑制GFAP蛋白表达,提升SOX2、Pax6、rhodopsin、PKCα、syntaxin、Thy1.1蛋白表达。LFSMR可逆转rd10小鼠视网膜病理改变,改善视网膜功能和眼底表现,增加视网膜厚度,提升视网膜局部血流量,发挥治疗RP的效应。LFSMR的作用机制可能与抑制穆勒细胞胶质化,促进穆勒细胞重编程转分化为各类视网膜神经细胞有关。

关键词：枸杞子丹参视网膜色素变性穆勒细胞胶质化重编程

CalliSpheres药物洗脱微球和空白微球经动脉化疗栓塞术治疗中晚期非小细胞肺癌的比较

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实用医学杂志 2024年第1期40卷 32-37页

作者：程瑞文郝若冰李平张堃邓梨平曹亚衡粟麟沈宏荣湖南中医药大学第一附属医院血管肿瘤介入科长沙410021 湖南中医药大学第一附属医院放射科长沙410021

目的回顾性分析并比较CalliSpheres药物洗脱微球和空白微球经支气管动脉化疗栓塞术治疗中晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法收集50例经放、化疗、靶向及免疫治疗后无效或复发的中晚期非小细胞肺癌患者,进行超选择性支气管动脉化疗栓塞... 详细信息

目的回顾性分析并比较CalliSpheres药物洗脱微球和空白微球经支气管动脉化疗栓塞术治疗中晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法收集50例经放、化疗、靶向及免疫治疗后无效或复发的中晚期非小细胞肺癌患者,进行超选择性支气管动脉化疗栓塞治疗。通过回顾性分析,比较CalliSpheres药物洗脱微球和空白微球两组间肿瘤治疗有效率和生存期的差异。结果术后药物洗脱微球组PR、ORR、DCR均高于空白微球组,其中术后1个月两组间DCR差异有统计学意义(χ^(2)=4.08,P=0.04)。术后药物洗脱微球组PD低于空白微球组;术后药物洗脱微球组的CEA、CYF、SCC均低于空白微球组,两组术后CEA、CYF、SCC均低于术前,其中两组间术后1个月CEA、CYF差异有统计学意义(P<0.05);药物洗脱微球组PFS、OS均高于空白微球组。结论CalliSpheres药物洗脱微球相较于空白微球经动脉化疗栓塞术可更有效地提高肿瘤治疗有效率及延长生存时间,为其治疗中晚期非小细胞肺癌提供可靠的临床实践依据。

关键词：非小细胞肺癌药物洗脱微球动脉化疗栓塞术

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中药药对治疗肝癌的研究进展

中华中医药学刊 2024年

作者：丁琳王若宇银思涵祁双林彭憬孙克伟湖南中医药大学第一中医临床学院湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学中医学国内一流建设学科湖南中医药大学第二临床附属医院

肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)恶性程度高，预后差，目前治疗手段未取得理想疗效。中医药辨证施治对肝癌治疗疗效颇佳，具有独特优势。肝癌归属于中医“黄疸”、“积聚”、“癥瘕”、“鼓胀”等范畴，中药药对作为中药复方... 详细信息

肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)恶性程度高，预后差，目前治疗手段未取得理想疗效。中医药辨证施治对肝癌治疗疗效颇佳，具有独特优势。肝癌归属于中医“黄疸”、“积聚”、“癥瘕”、“鼓胀”等范畴，中药药对作为中药复方核心，其研究价值对临床用药指导具有重要意义。研究发现，某些药对在临床上可以缓解患者腹痛、腹胀、疲乏及纳差等临床症状，降低中医症状评分，提高患者生活质量，改善患者预后。药理研究发现，药对配伍后有增效减毒作用，可以通过抑制肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移，阻滞细胞周期，诱导凋亡等多途径、多靶点发挥抗肝癌作用。故选取疏肝理气，养血柔肝的柴胡、白芍；清热利湿，泻火解毒的半枝莲、白花蛇舌草；益气活血，化瘀消癥的黄芪、莪术；大补元气，敛阴生津的人参、五味子对其治疗HCC的功效、药理作用及临床应用进行归纳总结，为“药对”治疗HCC提供理论基础，为中医药防治肝癌提供临床参考。

关键词：中药药对辨证施治肝细胞癌药理作用临床应用

机器学习在食品风味领域的研究进展与未来趋势

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食品科学 2024年第10期45卷 28-37页

作者：陈靓阳佳红田星湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湖南中医药大学湖南省中医药民族医药国际联合实验室湖南长沙410208

随着生活水平不断提高,人们除了关心食物是否美味外,其健康要素和良好风味的结合也越来越受到重视。食品风味成分不仅是影响食品感官品质的重要因素,也是影响食品营养水平的关键指标。目前,传统方法对食品风味成分进行分析及预测费时费... 详细信息

随着生活水平不断提高,人们除了关心食物是否美味外,其健康要素和良好风味的结合也越来越受到重视。食品风味成分不仅是影响食品感官品质的重要因素,也是影响食品营养水平的关键指标。目前,传统方法对食品风味成分进行分析及预测费时费力,且无法处理大量数据。相比之下,机器学习是人工智能的核心,在区分差异性以及寻找共同性上具有传统分析技术难以比拟的优势,在食品风味分析领域已取得了良好的应用。基于此,本文围绕机器学习在食品风味领域的研究现状,介绍常用的机器学习方法的原理和优点,及其在食品风味预测及调节中的最新应用与前景。重点探讨现代智能感官检测技术结合机器学习在食品风味分析领域研究的优势与未来趋势,以期为食品风味分析与预测领域研究提供新思路和理论基础。

关键词：机器学习食品风味风味分析与预测智能感官检测技术研究进展

补肾活血方促进脂肪间充质干细胞类髓核分化的作用机制

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中国组织工程研究 2024年第25期28卷 3974-3980页

作者：郭泽华李兆勇陈龙段嘉豪蒋浩波陈光学苏友贤刘恩旭杨少锋湖南中医药大学湖南省长沙市410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南省长沙市410007

背景:干细胞移植是防治椎间盘退变的新思路,但移植后的干细胞如何顺利存活、增殖、分化,并恢复髓核细胞功能,是目前亟需克服的重点和难点。目的:探讨补肾活血方对脂肪间充质干细胞存活、增殖、类髓核分化的影响。方法:采用Transwell小... 详细信息

背景:干细胞移植是防治椎间盘退变的新思路,但移植后的干细胞如何顺利存活、增殖、分化,并恢复髓核细胞功能,是目前亟需克服的重点和难点。目的:探讨补肾活血方对脂肪间充质干细胞存活、增殖、类髓核分化的影响。方法:采用Transwell小室构建人脂肪间充质干细胞和人退变髓核细胞共培养模型。实验分为对照组、模型组、含药血清组、无药血清组,除对照组外,其余各组均用50μmol/L叔丁基过氧化氢干预24 h,然后含药血清组和无药血清组分别予以含体积分数20%补肾活血方含药血清或无药血清的DMEM低糖完全培养液干预48 h,取下层脂肪间充质干细胞,甲苯胺蓝染色法观察蛋白聚糖合成水平,Real-Time PCR法检测Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9的mRNA表达,Western blot法检测SOX9的蛋白表达,乳酸脱氢酶法检测细胞毒性,流式细胞术检测细胞活性氧水平,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况。结果与结论:①与对照组相比,模型组坏死脱落细胞比例增加,甲苯胺蓝染色变浅,Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA和SOX9蛋白表达水平下降(P0.05);②与对照组相比,模型组细胞毒性、活性氧水平、细胞衰老水平显著增加;与模型组相比,补肾活血方干预后共培养体系微环境得到明显改善(P0.05);③结果表明,补肾活血方可以促进脂肪间充质干细胞存活、增殖、类髓核分化。

关键词：脂肪间充质干细胞髓核细胞共培养椎间盘退变补肾活血方氧化损伤

基于“天癸失于时序”论治男性迟发性性腺功能减退症

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北京中医药大学学报 2024年

作者：吴悔宁港李波男彭阿建王浩宇石若冰周兴湖南中医药大学研究生院长沙市第四医院湖南中医药大学第一附属医院

随着中医学对男性迟发性性腺功能减退症的认识及研究的不断深入，中医药论治男性迟发性性腺功能减退症的独特优势逐渐凸显。时序是对自然生长及运行规律的总体概括，天癸与睾酮均有其正常的时序，且存在可能相关性。生理状态下，男子天... 详细信息

随着中医学对男性迟发性性腺功能减退症的认识及研究的不断深入，中医药论治男性迟发性性腺功能减退症的独特优势逐渐凸显。时序是对自然生长及运行规律的总体概括，天癸与睾酮均有其正常的时序，且存在可能相关性。生理状态下，男子天癸遵循以“八”为期、由“至”到“竭”的正常时序；“天癸失于时序”包括天癸盛失于时序（以肝为主的脏腑功能失调）和天癸竭失于时序（以肾为主的脏腑病理性虚损），最终导致“天癸竭”提前于“八八”发生。基于天癸与睾酮是男性迟发性性腺功能减退症中、西医发病认识中的重要生理基础，本团队认为，“天癸失于时序”与男性迟发性性腺功能减退症肝郁肾虚的核心病机有重要联系，提出恢复天癸正常时序，肝肾同治，分时论治男性迟发性性腺功能减退症，临床运用雄蚕益肾方取得良好疗效，以期为男性迟发性性腺功能减退症的中医药认识及治疗提供新的思路与借鉴。

关键词：天癸时序男性迟发性性腺功能减退症中医