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麻杏石甘汤对流感病毒所致小胶质细胞炎性损伤的保护作用

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中成药 2024年

作者：陈纯静张香港卢芳国赵澄彭美红贺笠李彤陈琲湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学医学院

目的探讨麻杏石甘汤对甲型流感病毒所致小胶质细胞炎性病理损伤的影响。方法将小胶质细胞BV2分为正常组、激活剂组、抑制剂组、模型组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组、麻杏石甘汤组。经甲型流感病毒干预后，换为相应培养基，继续培养24、... 详细信息

目的探讨麻杏石甘汤对甲型流感病毒所致小胶质细胞炎性病理损伤的影响。方法将小胶质细胞BV2分为正常组、激活剂组、抑制剂组、模型组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组、麻杏石甘汤组。经甲型流感病毒干预后，换为相应培养基，继续培养24、48h后收集样本，ELISA法检测IL-1β、CXCL2水平，RT-qPCR法检测NP、JAK1、JAK2、STAT1、IL-1β、CXCL2 mRNA表达，Westernblot法检测细胞JAK1/2、STAT1蛋白表达，免疫荧光法检测p-STAT1蛋白表达，Pearson相关分析分别评估p-STAT1蛋白表达与IL-1β、CXCL2水平之间的相关性。结果甲型流感病毒刺激后，上清液IL-1β、CXCL2水平，流感病毒NP，细胞JAK1、JAK2、STAT1、IL-1β、CXCL2 mRNA表达和JAK1、JAK2、STAT1、p-STAT1蛋白表达升高（P＜0.05，P＜0.01）；麻杏石甘汤能降低上清液IL-1β、CXCL2水平，流感病毒NP，细胞JAK1、JAK2、STAT1、IL-1β、CXCL2 mRNA表达和JAK1、JAK2、STAT1、p-STAT1蛋白表达（P＜0.05，P＜0.01）。细胞p-STAT1与IL-1β、CXCL2分泌水平呈现正相关。结论 JAK/STAT信号通路激活及其介导的炎症因子分泌可能是甲型流感病毒所致小胶质细胞过度活化的分子机制之一，麻杏石甘汤可能通过调控该信号通路抑制小胶质细胞所介导的免疫病理损伤。

关键词：麻杏石甘汤甲型流感病毒 JAK/STAT信号通路 BV2细胞

桃红四物汤调控Nrf2/Keap1/HO-1信号通路介导的铁死亡在膝骨关节炎中的作用机制

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中药药理与临床 2024年第7期40卷 10-15页

作者：段航曾凡王林华邝高艳卢敏湖南中医药大学第一附属医院长沙410007 湖南中医药大学长沙410208

目的:桃红四物汤调控核因子E2相关因子(Nrf2)/Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路介导的铁死亡在膝骨关节炎(KOA)中的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、桃红四物汤9 g/kg组、双醋瑞... 详细信息

目的:桃红四物汤调控核因子E2相关因子(Nrf2)/Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路介导的铁死亡在膝骨关节炎(KOA)中的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、桃红四物汤9 g/kg组、双醋瑞因胶囊0.0045 g/kg组,每组各10只;各组均采用内侧半月板失稳手术造模,造模成功1 w后各组灌胃给予相应的药物或无菌水,1次/d,连续8 w。干预完成后,检测各组大鼠血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-18含量及关节软骨组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、活性氧(ROS)含量;透射电镜观察大鼠软骨线粒体数量、形态、结构及分布情况;Western Blot法检测大鼠关节软骨组织Keap1、Nrf2、HO-1、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、肿瘤抑制蛋白53(P53)、溶质载体家族7成员11重组蛋白(SLC7A11)的表达。结果:与假手术对照组比较,模型对照组Mankin和OARSI病理评分增加,IL-1β、TNF-α、IL-18、MDA、ROS含量显著升高,Keap1、P53蛋白表达显著上调,SOD活力显著降低,Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11蛋白表达显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,桃红四物汤组Mankin和OARSI病理评分降低,IL-1β、TNF-α、IL-18、MDA、ROS含量降低,Keap1、P53蛋白表达显著下调,SOD活力显著升高,Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:桃红四物汤可能通过激活Nrf2/Keap1/HO-1信号通路抑制大鼠关节软骨铁死亡。

关键词：桃红四物汤核因子E2相关因子铁死亡膝骨关节炎氧化应激谷胱甘肽过氧化物酶4

从JAK1/2-STAT1信号通路探讨A型流感病毒对巨噬细胞的影响及麻杏石甘汤含药血清的干预作用

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中国免疫学杂志 2024年

作者：陈纯静赵澄卢芳国张香港贺笠彭美红陈琲李彤湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学医学院

基于Janus激酶/信号转导和转录激活因子（Janus kinase /signal transducer and activator of transcription，JAK/STAT）通路介导的细胞因子表达研究A型流感病毒（IAV）对巨噬细胞的影响，并进一步探讨麻杏石甘汤含药血清的干预作用。R... 详细信息

基于Janus激酶/信号转导和转录激活因子（Janus kinase /signal transducer and activator of transcription，JAK/STAT）通路介导的细胞因子表达研究A型流感病毒（IAV）对巨噬细胞的影响，并进一步探讨麻杏石甘汤含药血清的干预作用。RAW264.7分为正常对照组、JAK/STAT信号通路激活剂组、JAK/STAT信号通路抑制剂组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组、麻杏石甘汤组。经IAV干预后，换为相应的培养基，继续培养24、48h后收集样本，检测与分析指标：以ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β（interleukin-1β，IL-1β）、CXCL2（CXC chemokine ligand 2，CXCL2）的分泌水平；以RT-qPCR法检测细胞中流感病毒核蛋白（Nuclear Protein，NP）、JAK1/2、STAT1的mRNA表达水平；以Western blotting法检测细胞中JAK1/2、STAT1的蛋白表达水平；以免疫荧光法检测细胞中磷酸化STAT1（phosphorylated STAT1，p-STAT1）；Pearson相关分析分别评估p-STAT1蛋白表达水平与IL-1β、CXCL2分泌水平之间的相关性。结果显示，细胞培养上清液中IL-1β、CXCL2分泌水平、流感病毒NP及细胞JAK1/2、STAT1 mRNA表达水平、细胞JAK1/2、STAT1、p-STAT1 蛋白表达水平均升高（P＜0.05或0.01）；细胞p-STAT1与IL-1β、CXCL2分泌水平呈现正相关。麻杏石甘汤能下调细胞培养上清液中IL-1β、CXCL2分泌水平、下调流感病毒NP及细胞JAK1/2、STAT1 mRNA表达水平、下调细胞中JAK1/2、STAT1、p-STAT1蛋白表达水平（P＜0.05或0.01）。JAK1/2-STAT1信号通路激活及其介导的炎症因子失衡可能是IAV所致巨噬细胞免疫病理损伤的分子机制之一，麻杏石甘汤可能通过调控该信号通路缓解IAV的致病作用。

关键词： RAW264.7细胞 IAV 麻杏石甘汤 JAK1/2-STAT1 炎症因子免疫病理损伤

用于肿瘤治疗的智能调控/响应肿瘤微环境的纳米递药系统研究进展

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中国新药杂志 2024年第15期33卷 1564-1570页

作者：邹蔓姝雷昌黄丹柳兰韩远山湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院长沙410007

肿瘤微环境是一个由免疫细胞、炎症细胞、肿瘤相关成纤维细胞、多种细胞因子、趋化因子、微血管等共同组成的复杂综合系统。作为肿瘤细胞生存的环境,与肿瘤发生、转移和复发息息相关。利用肿瘤微环境和正常组织之间的不同来构建智能型... 详细信息

肿瘤微环境是一个由免疫细胞、炎症细胞、肿瘤相关成纤维细胞、多种细胞因子、趋化因子、微血管等共同组成的复杂综合系统。作为肿瘤细胞生存的环境,与肿瘤发生、转移和复发息息相关。利用肿瘤微环境和正常组织之间的不同来构建智能型纳米制剂已成为当前研究热点。本文综述了近年来常见的调控或响应肿瘤微环境的智能纳米递药系统,以期为合理设计智能纳米递药系统提供新的思路和方法。

关键词：智能纳米递药系统肿瘤微环境肿瘤治疗

基于GSEA和STEM分析方法挖掘左归降糖解郁方治疗糖尿病并发抑郁症的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 98-106页

作者：雷诗卉李薇王瑾茜刘检孟盼王宇红杨蕙湖南中医药大学第一附属医院长沙410007 湖南中医药大学长沙410208

目的:结合基因集富集分析(GSEA)和趋势分析(STEM)方法研究左归降糖解郁方治疗糖尿病并发抑郁症的关键途径并进行验证。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、左归降糖解郁方高、中、低剂量组、西药组。采用高脂饲养、链脲佐菌素(STZ)... 详细信息

目的:结合基因集富集分析(GSEA)和趋势分析(STEM)方法研究左归降糖解郁方治疗糖尿病并发抑郁症的关键途径并进行验证。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、左归降糖解郁方高、中、低剂量组、西药组。采用高脂饲养、链脲佐菌素(STZ)注射、慢性温和不可预知应激结合法建立糖尿病并发抑郁症模型。左归降糖解郁方高、中、低剂量组分别灌胃20.52、10.26、5.13 g·kg^(-1)左归降糖解郁方,西药组灌胃给药二甲双胍0.18 g·kg^(-1)和氟西汀1.8 g·kg^(-1)。正常组和模型组灌胃等体积蒸馏水。给药28 d后,采用强迫游泳实验和Morris水迷宫检测动物的抑郁样行为和认知功能,血糖试纸检测动物空腹血糖,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测胆固醇和甘油三酯含量。随机选取正常组、模型组和左归降糖解郁方高剂量组中每组3个海马样本进行高通量转录组测序,采用差异基因分析、GSEA分析、STEM分析筛选左归降糖解郁方治疗糖尿病并发抑郁症的关键通路和基因。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)进行验证筛选靶基因,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测靶基因介导的信号蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖、胆固醇、甘油三酯含量显著升高(P<0.01),其在强迫游泳实验中的不动时间显著增加,在Morris水迷宫实验中登上平台的时间显著延长而在目标象限的搜寻路程比明显下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,左归降糖解郁方高剂量显著降低了糖尿病并发抑郁症大鼠血糖、胆固醇、甘油三酯含量,减少了动物在强迫游泳实验中的不动时间,缩短了动物在Morris水迷宫实验中的登台时间并增加了在目标区域的搜寻路程比(P<0.05,P<0.01)。转录组测序差异分析显示,正常组较模型组有差异基因1 366个,模型组较左归降糖解郁方高剂量组有差异基因1 149个,交集基因581个。GSEA结果显示,正常组与模型组有差异基因集9个,模型组与左归降糖解郁方高剂量组有差异基因集43个,交集基因集7个。STEM分析显示,按照正常组、模型组、左归降糖解郁方高剂量组的分析顺序,得到显著差异趋势聚类群2个。3种分析方法获得关键基因集轴突导向及关键靶点信号素3c(Sema3c)、信号素7a(Sema7a)、轴突导向受体蛋白3(Robo3)、酪氨酸蛋白激酶受体A8(Epha8)、酪氨酸蛋白激酶受体A7(Epha7)。Real-time PCR验证发现,与正常组比较,模型组大鼠海马Robo3、Sema7a、Epha7 mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,左归降糖解郁方高剂量可明显增加Robo3、Sema7a、Epha7 mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果表明,与正常组比较,模型组大鼠海马Sema7a、整合素β_(1)(ITGB1)、黏着斑激酶(FAK)蛋白显著降低(P<0.01);与模型组比较,左归降糖解郁方显著增加糖尿病并发抑郁症大鼠海马Sema7a、ITGB1、FAK蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:左归降糖解郁方可能通过调控Sema7a/ITGB1信号经轴突导向途径治疗糖尿病并发抑郁症。

关键词：左归降糖解郁方糖尿病并发抑郁症转录组测序基因集富集分析趋势分析

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桂枝新加汤对颈椎间盘退变大鼠模型椎间盘TNF-α及血清中炎症因子的影响

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辽宁中医杂志 2024年

作者：李兆勇杨雷郭彦涛陈龙李硕夫贺美宇张超杨少锋湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学

目的依据前期桂枝新加汤治疗颈椎病网络药理学研究结果，在动物实验中对桂枝新加汤治疗颈椎病的作用机制进行初步验证。方法前期网络药理学筛选出桂枝新加汤治疗颈椎病有关的PIK3CA、STAT3、TP53、IL6、TNF、MAPK14等主要作用靶点，涉... 详细信息

目的依据前期桂枝新加汤治疗颈椎病网络药理学研究结果，在动物实验中对桂枝新加汤治疗颈椎病的作用机制进行初步验证。方法前期网络药理学筛选出桂枝新加汤治疗颈椎病有关的PIK3CA、STAT3、TP53、IL6、TNF、MAPK14等主要作用靶点，涉及MAPK、PI3K-AKT等多条与炎症调节相关通路。在动物实验中，采用动静力失衡法构建颈椎间盘退变大鼠模型，观察桂枝新加汤对模型大鼠疼痛阈值、椎间盘组织HE染色、椎间盘内TNF-α及外周血清TNF-α、SP、PGE2等炎症因子的影响，初步验证桂枝新加汤治疗颈椎病的作用机制。结果与模型组相比，桂枝新加汤干预颈椎间盘退变大鼠模型2、4、8周，降低外周血清PGE2、SP、TNF-α含量（P<0.01）；桂枝新加汤干预8周，能有效的降低颈椎间盘TNF-α水平（P<0.05）。结论桂枝新加汤能提高机械刺激疼痛阈值，降低颈椎间盘退变大鼠血清中SP、PGE2、TNF-α及颈椎间盘内TNF-α表达，起到缓解颈椎病疼痛的作用，成功验证了网络药理学部分结果。

关键词：桂枝新加汤颈椎病网络药理学疼痛炎症因子

固有免疫受体在曲霉菌诱导的NETs形成中的作用

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中国病原生物学杂志 2024年第6期19卷 736-740页

作者：李彤卢芳国湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院

曲霉病是一种致命的疾病,对医疗提供者构成重大挑战。现有的抗真菌治疗在治疗严重侵袭性感染的情况下效果有限。研究人员正在探索曲霉病治疗的替代方法,例如调节宿主免疫系统的抗真菌能力。一个有前途的策略是利用中性粒细胞外陷阱(NET... 详细信息

曲霉病是一种致命的疾病,对医疗提供者构成重大挑战。现有的抗真菌治疗在治疗严重侵袭性感染的情况下效果有限。研究人员正在探索曲霉病治疗的替代方法,例如调节宿主免疫系统的抗真菌能力。一个有前途的策略是利用中性粒细胞外陷阱(NETs),这是中性粒细胞形成的细胞外网状结构,比其他防御机制更有效地对抗真菌病原体。本综述将探讨曲霉菌与NETs之间的相互作用,深入研究曲霉菌诱导NET形成以及其防御策略的分子机制。通过阐明曲霉菌如何逃避免疫系统以及如何利用NETs来对抗这些策略,我们旨在为曲霉病的治疗提供新的见解,特别是对抗耐药菌株。这一知识可能会导致更有效的治疗方法和改善患者预后。

关键词：中性粒细胞中性粒细胞胞外诱捕网烟曲霉先天免疫真菌感染综述

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卢敏教授辨治膝关节骨髓水肿综合征临床撷菁

辽宁中医杂志 2024年

作者：段航卢敏邝高艳王林华湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学

文章统计了卢敏教授治疗膝关节骨髓水肿综合征的有效案例，探讨卢敏教授辨治膝关节骨髓水肿综合征的临床经验。卢敏教授认为膝关节骨髓水肿综合征病机上应围绕“痿”、“痹”两个主要的方面展开讨论，针对其核心病机“痿痹同病”在临床... 详细信息

文章统计了卢敏教授治疗膝关节骨髓水肿综合征的有效案例，探讨卢敏教授辨治膝关节骨髓水肿综合征的临床经验。卢敏教授认为膝关节骨髓水肿综合征病机上应围绕“痿”、“痹”两个主要的方面展开讨论，针对其核心病机“痿痹同病”在临床治疗上提出急则治痹，以通络止痛为要，缓则痿痹同治，以补虚强筋为主，注重内外同调，直达病所的治疗原则，务必通过补益肝肾、调和气血，以达到“骨正筋柔”的目的，卢敏教授坚持辨病、辨证、辨期相结合，分期论治，灵活遣方，处方具有脏腑同治，气血同调的特点，兼顾外治法以求内外兼顾，重视宣教，积极配合功能锻炼，临床上取得良好的疗效。

关键词：膝关节骨髓水肿综合征名老中医经验卢敏

基于网络药理学和体内实验研究五虎汤干预RSV诱导哮喘的效应物质及作用机制

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4148-4157页

作者：姚冰刘靖雷王孟清罗银河谢静荀春铮李凡黄婷曾庆佳湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410021

探讨五虎汤治疗呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘的效应物质及作用机制。使用超高效液相串联高分辨质谱仪确定五虎汤的入血成分;借助数据库对入血成分作用于哮喘的靶点进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析及基因本体论(GO)功能分析... 详细信息

探讨五虎汤治疗呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘的效应物质及作用机制。使用超高效液相串联高分辨质谱仪确定五虎汤的入血成分;借助数据库对入血成分作用于哮喘的靶点进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析及基因本体论(GO)功能分析。同时将靶点蛋白及代谢物-靶点-通路等信息导入STRING数据库,构建蛋白互作网络,明确五虎汤核心成分及关键通路。体内实验部分使用RSV联合鸡卵清蛋白(OVA)建立哮喘模型,通过肺功能、苏木精-伊红(HE)染色、酶联免疫吸附测定(ELISA)法、蛋白免疫印迹法及免疫组织化学法验证五虎汤对RSV诱导哮喘小鼠的干预作用。结果显示,五虎汤入血成分以黄酮类、苯丙素类、木脂素类、萜类等化合物为主,作用于儿童哮喘的核心成分有(-)-表没食子儿茶素、山柰素、异甘草素、香叶木素、桦木酸、熊果酸、瑞香素、七叶素等,钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用、NOD样受体信号通路、T细胞受体信号通路、Toll样受体信号通路等是其靶点主要作用通路。体内实验结果表明,五虎汤能够改善肺功能指标,下调白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17((IL-17)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并且能够降低肺组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)、核因子-κB亚基1(NFKB1)等蛋白的表达,减轻中性粒细胞炎症浸润及肺淤血。结果表明,五虎汤通过多组分、多靶点、多途径的协同作用干预病毒诱发哮喘,体内实验证明其能抑制NOD样受体信号通路的激活,减轻哮喘小鼠气道炎症与气道损伤。

关键词：网络药理学五虎汤中药入血成分 RSV 儿童哮喘 NOD样受体信号通路