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慢性皮质酮注射诱导焦虑性抑郁树鼩模型的研究

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中国药理学通报 2018年第1期34卷 141-145页

作者：吴梦瑶赵洪庆杨琴柳卓杜青孟盼韩远山王宇红湖南中医药大学湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208

目的探讨慢性皮质酮注射对近灵长类动物树鼩焦虑和抑郁样行为的影响,并进行药物预见性评价,建立新型焦虑性抑郁动物模型。方法12只中缅树鼩随机分为正常组、模型组和文拉法辛组,每组4只。采用慢性皮质酮注射(ih,27 mg·kg^(-1),21 d)建... 详细信息

目的探讨慢性皮质酮注射对近灵长类动物树鼩焦虑和抑郁样行为的影响,并进行药物预见性评价,建立新型焦虑性抑郁动物模型。方法12只中缅树鼩随机分为正常组、模型组和文拉法辛组,每组4只。采用慢性皮质酮注射(ih,27 mg·kg^(-1),21 d)建立焦虑性抑郁树鼩模型,文拉法辛组于造模同时灌胃给药(6 mg·kg^(-1))。采用自主活动评分、糖水偏好测试、Morris水迷宫实验评价树鼩的焦虑和抑郁行为表现;ELISA试剂盒检测树鼩血浆CRH、ACTH、COR含量;HPLC-ECD法检测树鼩脑内海马、杏仁核、前额叶皮质的单胺递质5-HT、NE、DA含量。结果与正常组比较,模型组树鼩自主活动评分、糖水偏食度、学习记忆能力均明显下降(P药物预见性,是一种更接近人类临床的新型焦虑性抑郁动物模型。

关键词：焦虑抑郁树鼩文拉法辛 HPA轴单胺递质皮质酮

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超微七味白术散对肠道微生物及酶活性的影响

生态学报 2012年第21期32卷 6856-6863页

作者：谭周进吴海刘富林蔡莹蔡光先张华玲曾奥湖南中医药大学长沙410208 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地长沙410208

肠道微生物与人体多项生理功能密切相关,为探讨超微七味白术散疗效与肠道微生物及酶活性的关系,为中药复方超微饮片临床应用提供科学依据,运用抗生素建立菌群失调小鼠模型,分别灌胃给药七味白术散传统汤剂、超微全量汤剂、超微1/2量汤... 详细信息

肠道微生物与人体多项生理功能密切相关,为探讨超微七味白术散疗效与肠道微生物及酶活性的关系,为中药复方超微饮片临床应用提供科学依据,运用抗生素建立菌群失调小鼠模型,分别灌胃给药七味白术散传统汤剂、超微全量汤剂、超微1/2量汤剂、超微1/4量汤剂、超微1/8量汤剂,分析肠道菌群数及酶活性。结果表明,模型组的肠道微生物(细菌、大肠杆菌、酵母菌、霉菌、乳酸菌及双歧杆菌)数量、木聚糖酶活、蛋白酶活及淀粉酶活均低于对照组(P药物浓度的升高而增多,细菌及霉菌数在超微1/2量时最多,与传统汤剂相比,超微1/2组的三类菌均显著增加(P0.05);经超微全量治疗后,大肠杆菌增长十分迅速,远高于其余各组(P药物组的数量比对照组明显增加(P药物组超过了传统汤剂组的数量(P<0.05),超微1/2剂量组的数量最大,远高于其它各组(P<0.01)。肠道内纤维素酶、木聚糖酶、蛋白酶及淀粉酶活性与超微饮片浓度有一定相关性,但肠道酶活性未达到对照组水平(P<0.05)。超微七味白术散1/2量治疗肠道菌群失调小鼠的效果与传统汤剂相当。

关键词：七味白术散超微中药肠道微生物酶活菌群失调小鼠

补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及Nrf2/HO-1信号途径的影响

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中国药理学通报 2016年第1期32卷 123-128页

作者：佘颜王宇红邵乐夏相宜刘芳蔡光先湖南中医药大学医学院湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208

目的观察补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号途径的影响。方法 120只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤精简方组。采用大脑中动脉线栓法建立局灶... 详细信息

目的观察补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号途径的影响。方法 120只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤精简方组。采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,各组给予相应处理。在d 1、3、7三个时间点取脑组织进行检测,免疫组织化学法检测血浆Ⅷ因子相关抗原(v WF),测定微血管密度(MVD)。采用Real-time PCR和Western blot法检测大鼠脑组织中Nrf2、HO-1基因及蛋白表达。结果 1与假手术组比,模型组v WF阳性表达微血管在d 3时表达明显升高(P<0.05),给药组d 7与模型组比较差异有显著性(P<0.05);2假手术组Nrf2、HO-1mRNA及蛋白呈少量表达,模型组Nrf2蛋白表达水平d 3与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01),各给药组能上调Nrf2mRNA及蛋白表达,其中Nrf2mRNA在d 7,Nrf2蛋白表达在d 1及d 7上调最明显,与同时间点模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。模型组HO-1mRNA及蛋白在d 7与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),各给药组HO-1mRNA在d 3,HO-1蛋白在d 3及d 7上调最明显,与同时段模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论补阳还五汤精简方促进脑缺血后血管新生,这一作用可能与调控Nrf2/HO-1信号途径的表达有关。

关键词：补阳还五汤精简方血管新生核转录因子E2相关因子2 血红素加氧酶1-血浆Ⅷ因子相关抗原微血管密度

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马胰岛素抵抗的影响

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中草药 2020年第11期51卷 3013-3020页

作者：杨蕙刘检唐林蔺晓源罗薇絮韩远山刘林孟盼王宇红湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南中医药大学湖南长沙410007

目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马胰岛素抵抗的调节作用。方法建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为4组,模型组,阳性药组(二甲双胍0.18 g/kg+氟西汀1.8 mg/kg),左归降糖解郁方高、低剂量组(20.52、10.26g/kg),另... 详细信息

目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马胰岛素抵抗的调节作用。方法建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为4组,模型组,阳性药组(二甲双胍0.18 g/kg+氟西汀1.8 mg/kg),左归降糖解郁方高、低剂量组(20.52、10.26g/kg),另设健康大鼠为对照组。各组大鼠ig给药28 d后,采用血糖仪及ELISA法检测空腹血糖及外周胰岛素抵抗程度。采用旷野实验和强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为。采用免疫荧光法和Western blotting法检测大鼠海马胰岛素受体磷酸化蛋白(p-IR)、磷酸化的胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)的表达,采用Westernblotting法检测海马磷酸化的磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血糖显著升高并伴随明显的外周胰岛素抵抗,其在旷野实验中的活动次数显著降低、在强迫游泳实验中的不动时间显著延长;蛋白检测结果表明大鼠脑内p-IR、p-IRS-1、p-PI3K、p-Akt表达水平均显著降低。与模型组比较,左归降糖解郁方高剂量组大鼠血糖水平显著降低,外周胰岛素抵抗水平减轻,其在旷野实验中的活动次数显著增加、在强迫游泳实验中的不动时间显著缩短,而海马内p-IR、p-IRS-1、p-PI3K、p-Akt表达显著升高。结论左归降糖解郁方可有效调节糖尿病并发抑郁症大鼠海马胰岛素信号通路,从而改善动物脑内的胰岛素抵抗状态。

关键词：左归降糖解郁方糖尿病并发抑郁症海马胰岛素抵抗胰岛素受体(IR) 胰岛素受体底物-1(IRS-1) 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K) 蛋白激酶B(Akt)

基于转录组和单细胞测序探讨扶正化瘀片抗肝纤维化的作用机制

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2597-2606页

作者：陆华冠彭望霞江丽红姚强谢新雷昌黄丹刘建军湖南中医药大学科技创新中心/中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208

旨在通过单细胞、转录组学测序和体内外实验,探讨巨噬细胞极化在扶正化瘀片(FZHY)治疗肝纤维化中的作用。从GEO数据库中获取肝纤维化相关芯片、转录组数据集及单细胞测序数据集,筛选差异基因;运用GeneCards、DisGeNET、NCBI、PharmgKB、... 详细信息

旨在通过单细胞、转录组学测序和体内外实验,探讨巨噬细胞极化在扶正化瘀片(FZHY)治疗肝纤维化中的作用。从GEO数据库中获取肝纤维化相关芯片、转录组数据集及单细胞测序数据集,筛选差异基因;运用GeneCards、DisGeNET、NCBI、PharmgKB、TTD和OMIM 6个数据库获取肝纤维化相关基因;从GeneCards数据库中获取巨噬细胞极化相关基因;将上述3个基因集取交集,构建蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络,使用Cytoscape软件筛选核心蛋白,并通过单细胞测序对核心蛋白的表达模式进行可视化。使用四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))构建的肝纤维化小鼠模型,采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、马松(Masson)染色对肝组织病理形态学进行观察;免疫组织化学染色检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)和转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1蛋白的表达;比色法检测血清丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST);酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中炎症因子水平;蛋白质印记(Western blot,WB)检测肝组织中α-SMA、TGF-β1、CD86、血小板反应蛋白(thrombospondin,THBS)1的表达情况。使用LPS刺激RAW264.7细胞构建M1巨噬细胞极化模型,通过CCK-8法检测细胞活力,WB检测细胞中CD86、THBS1的蛋白表达情况和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)-1β的mRNA表达水平。结果显示,共获得26个潜在调节肝纤维化巨噬细胞极化相关的基因,并筛选出THBS1、LUM、FBLN5等10个肝纤维化巨噬细胞极化相关的核心蛋白。单细胞数据分析,显示排名最靠前的THBS1可能由M1巨噬细胞表达。动物实验表明,FZHY可以减少CCl_(4)诱导的小鼠肝脏中的炎性细胞浸润以及胶原沉积;缓解肝损伤和炎症水平,抑制α-SMA、TGF-β1、CD86和THBS1蛋白的表达。细胞实验结果显示,FZHY能显著减少细胞内CD86和THBS1蛋白表达以及TNF-α、IL-1β的mRNA水平。结果表明,扶正化瘀片改善肝纤维化的机制,可能与抑制THBS1蛋白的表达,减少巨噬细胞M1极化,降低炎症反应有关。

关键词：肝纤维化扶正化瘀片单细胞测序转录组学血小板反应蛋白1

巨噬细胞极化在肝纤维化中的作用和调控机制以及中国传统医药的干预

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中国新药杂志 2024年第10期33卷 1021-1031页

作者：彭望霞陆华冠谢新刘建军湖南中医药大学科技创新中心/中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地长沙410208

肝巨噬细胞是肝脏中重要的免疫细胞,具有显著的异质性和可塑性。在肝脏慢性损伤条件下,驻留的肝巨噬细胞和被招募到损伤部位的外周单核细胞在肝微环境中各种因素的刺激下,被激活并极化为多种巨噬细胞表型,发挥不同的功能。近年来的研究... 详细信息

肝巨噬细胞是肝脏中重要的免疫细胞,具有显著的异质性和可塑性。在肝脏慢性损伤条件下,驻留的肝巨噬细胞和被招募到损伤部位的外周单核细胞在肝微环境中各种因素的刺激下,被激活并极化为多种巨噬细胞表型,发挥不同的功能。近年来的研究表明,肝巨噬细胞极化对肝纤维化进程起关键的调节作用,但机制尚不完全清楚。本文综述了Notch、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smads、Janus激酶/信号传导及转录激活因子(JAK/STAT)和Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)等信号通路调节巨噬细胞极化参与肝纤维化进程的分子机制。此外,中国传统医药具有多成分、多靶点的优势,对慢性肝病和肝纤维化具有良好的疗效,本文也综述了近年来中药方剂和单体化合物靶向肝巨噬细胞的抗纤维化作用机制,并为临床应用提出新的见解。

关键词：肝纤维化巨噬细胞极化中药复方单体化合物

左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症环境下小胶质细胞活化的干预作用及其机制研究

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中国现代应用药学 2022年第18期39卷 2309-2315页

作者：孟盼向韵雷昌王宇红黄丹蔡川张秀丽湖南中医药大学科技创新中心长沙410208 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地长沙410208

目的探讨模拟糖尿病并发抑郁症环境下,左归降糖解郁方对小胶质细胞活化的调节作用及干预机制。方法将体外培养的HAPI细胞分为空白组、模型(高糖+皮质酮)组、左归降糖解郁方组及二甲双胍+氟西汀组。采用150 mmol·L^(–1)高糖联合200μ... 详细信息

目的探讨模拟糖尿病并发抑郁症环境下,左归降糖解郁方对小胶质细胞活化的调节作用及干预机制。方法将体外培养的HAPI细胞分为空白组、模型(高糖+皮质酮)组、左归降糖解郁方组及二甲双胍+氟西汀组。采用150 mmol·L^(–1)高糖联合200μmol·L^(–1)皮质酮的方法模拟糖尿病并发抑郁症状态下小胶质细胞的活化状态,给予10%含药血清后,免疫荧光染色观察HAPI细胞形态变化及Tim3表达,qPCR及ELISA法检测HAPI细胞M1/M2型表面标记分子及促炎性因子与抗炎性因子的表达变化,Western blotting检测糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)、TLR4及Tim3的蛋白表达。结果与空白组比较,模型组中HAPI细胞胞体体积变大,细胞数量减少,M1型标记分子、促炎性因子以及Tim3表达的上调。与模型组相比,左归降糖解郁方组的HAPI细胞胞体回缩且数量增多,HAPI细胞M1型表面标记分子及促炎性因子的表达受到抑制,且M2型表面标记分子及抗炎性因子的表达上调;此外,左归降糖解郁方还可促进GR上调,降低HAPI细胞中TLR4及Tim3的表达。结论左归降糖解郁方可能通过皮质酮介导的GR/TLR4/Tim3信号通路调节MG的M1/M2型活化。

关键词：小胶质细胞活化 Tim3 糖尿病并发抑郁症左归降糖解郁方

基于网络药理学研究复方钩藤降压片治疗高血压的作用机制

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中国中药杂志 2018年第7期43卷 1360-1365页

作者：龙红萍蔺晓源王宇红任卫琼邵乐张稳谭元生湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208 湖南中医药大学湖南长沙410208

该文通过网络药理学研究预测复方钩藤降压片潜在的主要活性成分和作用靶点,探讨其多成分-多靶点-多通路的治疗高血压的可能作用机制。采用整合药理学平台（TCMIP）构建复方钩藤降压片成分靶标-疾病靶标网络,通过网络分析方法筛选关键节... 详细信息

该文通过网络药理学研究预测复方钩藤降压片潜在的主要活性成分和作用靶点,探讨其多成分-多靶点-多通路的治疗高血压的可能作用机制。采用整合药理学平台（TCMIP）构建复方钩藤降压片成分靶标-疾病靶标网络,通过网络分析方法筛选关键节点,并在此基础上对关键节点进行通路富集分析,探索复方钩藤降压片治疗高血压可能参与的生物过程。靶点网络特征分析显示,所预测复方钩藤降压片中有35个活性成分与前列腺素内源性过氧化物合酶（PTGS1,PTGS2）、ATP合成酶（ATP1A1,ATP5A1,ATP5C1,ATP5B）等29个主要蛋白有很强的相互作用,富集到血压调节、G-蛋白耦合受体激活、心肌细胞肾上腺素能信号转导和血小板激活等15条通路,参与对高血压病理过程不同环节的调控。该研究初步揭示了复方钩藤降压片治疗高血压的潜在活性成分及其可能的作用机制,为进一步的药效物质基础和作用机制实验研究提供了理论依据。

关键词：网络药理学高血压复方钩藤降压片 PTGS

超微七味白术散对菌群失调腹泻小鼠肠道微生物代谢多样性的影响

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应用与环境生物学报 2014年第1期20卷 93-100页

作者：张华玲蔡莹谭周进周赛男郭抗萧佘颜蔡光先湖南中医药大学 2010级研究生班长沙410208 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地长沙410208

为探讨超微七味白术散对菌群失调腹泻疗效的微生态学机理,采用灌胃头孢拉定和硫酸庆大霉素混合抗生素进行小鼠菌群失调腹泻造模,灌胃给药七味白术散传统汤药和1/2剂量超微汤药进行治疗,正常组和模型组灌胃等量的无菌水,3 d后,提取肠道... 详细信息

为探讨超微七味白术散对菌群失调腹泻疗效的微生态学机理,采用灌胃头孢拉定和硫酸庆大霉素混合抗生素进行小鼠菌群失调腹泻造模,灌胃给药七味白术散传统汤药和1/2剂量超微汤药进行治疗,正常组和模型组灌胃等量的无菌水,3 d后,提取肠道微生物,在有氧条件下,运用Biolog微生物自动分析系统研究肠道微生物的代谢情况.结果显示,培养72 h时,各组的颜色平均变化率(AWCD)趋于稳定,且正常组>1/2剂量的超微汤药治疗组>传统汤药治疗组>模型组;正常组的Shannon指数、Shannon均匀度、Simpson指数和Mclntosh指数等微生物群落多样性指数均为最大,且与其他各组都存在极显著性差异(P<0.01),1/2剂量超微汤药治疗组的Shannon指数、Simpson指数和传统汤药治疗组的Shannon均匀度、Mclntosh指数分别位于第2位;聚类分析和主成分分析的结果提示抗生素的抑菌作用明显,使得小鼠肠道微生物的某些代谢途径受到影响,七味白术散传统汤药和1/2剂量超微汤药的调控使得小鼠肠道微生物的代谢多样性逐渐恢复平衡,但两种汤药的调控作用存在异同,1/2剂量超微汤药比传统汤药调控作用更显著.研究表明超微七味白术散对肠道微生物代谢多样性的调控作用显著,对小鼠菌群失调腹泻具有明显的微生态调节作用.

关键词：超微中药七味白术散 Biolog-Eco 代谢多样性肠道微生物菌群失调腹泻