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基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和网络药理学探究尖尾芋抗乳腺癌作用机制

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天然产物研究与开发 2024年第4期36卷 675-693页

作者：王鹏陈娅彭兰淳郑青竹陈厅彭江丽彭求贤湖南中医药大学药学院湖南中医药大学中西结合学院湖南省中药活性物质筛选工程技术研究中心湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室长沙410208

本研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术、网络药理学策略探究尖尾芋石油醚部位抗乳腺癌药效物质基础及作用机制,并通过4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型验证尖尾芋石油醚部位(petroleum ether fraction of Alocasia cucullata,EAC)体内抗乳腺癌作用及机... 详细信息

本研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术、网络药理学策略探究尖尾芋石油醚部位抗乳腺癌药效物质基础及作用机制,并通过4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型验证尖尾芋石油醚部位(petroleum ether fraction of Alocasia cucullata,EAC)体内抗乳腺癌作用及机制。基于UPLC-Q-TOF-MS/MS数据获取EAC化学成分41个,包括11种芳香类成分、8种萜类成分、5种生物碱类成分、4种脂肪酸类成分、2种香豆素类成分和11种其他类成分;基于鉴定出的化合物通过网络药理学得到556个潜在作用靶点;蛋白互作网络(PPI)分析发现MAPK1、Bcl-2等10个核心靶点,富集分析发现核心靶点可能通过MAPK、PI3K-Akt等细胞凋亡相关信号通路发挥抗乳腺癌作用,并通过分子对接技术验证了毛地黄毒苷配基等活性成分与细胞凋亡相关蛋白pERK、Bcl-2、Bax具有良好的结合能力。抗乳腺癌活性研究结果表明与模型对照组比较,EAC低、中、高剂量组肿瘤生长趋势渐缓,肿瘤质量减少,抑瘤率逐渐增加;EAC中、高剂量组脾脏指数有显著性差异,EAC低剂量组脾脏指数效果不显著(P检测小鼠血清,发现EAC高、中剂量组、5-氟尿嘧啶阳性对照组的IL-1β、TNF-α含量均降低。动物验证实验结果表明不同浓度EAC均能下调MAPKs信号通路中p-ERK蛋白的表达(P<0.01),而对ERK、JNK、p-38、p-JNK、p-p38蛋白水平无显著性差异;EAC能显著升高小鼠乳腺癌组织中Bax/Bcl-2蛋白水平和基因表达水平。综上,尖尾芋石油醚部位能下调p-ERK蛋白水平,促进癌细胞凋亡从而抑制4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长。

关键词：尖尾芋石油醚部位抗乳腺癌活性化学成分网络药理学 MAPKs信号通路

尖尾芋石油醚部位化学成分及其乳腺癌细胞毒活性研究

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天然产物研究与开发 2024年第1期36卷 72-77页

作者：王鹏陈娅彭兰淳郑青竹彭江丽彭求贤湖南中医药大学药学院湖南省中药活性物质筛选工程技术研究中心湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室长沙410208

研究天南星科海芋属植物尖尾芋Alocasia cucullata(Lour.)Schott石油醚部位化学成分。采用硅胶、Sephadex LH-20等色谱方法进行分离纯化,运用波谱学技术进行结构鉴定。采用CCK-8法测试化合物对人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞及小鼠乳腺... 详细信息

研究天南星科海芋属植物尖尾芋Alocasia cucullata(Lour.)Schott石油醚部位化学成分。采用硅胶、Sephadex LH-20等色谱方法进行分离纯化,运用波谱学技术进行结构鉴定。采用CCK-8法测试化合物对人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞及小鼠乳腺癌4T1细胞的体外细胞毒活性。从尖尾芋根茎石油醚部位中分离得到15个化合物,分别为对羟基苯甲醛(1)、苯甲酸(2)、香草酸乙酯(3)、没食子酸乙酯(4)、7-羟基香豆素(5)、肉豆蔻酸甲酯(6)、角鲨烯(7)、齐墩果酸(8)、熊果酸(9)、香紫苏醇(10)、香紫苏内酯(11)、原儿茶醛(12)、原儿茶酸(13)、二十八烷醇(14)和没食子酸(15),化合物2~15为海芋属首次分离得到,所有化合物均为尖尾芋首次分离得到。乳腺癌细胞毒活性研究显示:化合物4、8和9对3种乳腺癌细胞均有一定的抑制作用。

关键词：尖尾芋化学成分结构鉴定乳腺癌细胞毒活性

5-羟色胺与缝隙连接的交互作用与抑郁症发病的关系及中药干预研究进展

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中草药 2024年第21期 7539-7546页

作者：田志锋曾璇严子涵王宏彬林玉婷艾启迪林美妤阳松威杨岩涛湖南中医药大学药学院湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心

抑郁症是一种常见的精神疾病，其发病机制至今尚未完全阐明。近年来，5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）与缝隙连接的交互作用在抑郁症发病中的关键作用逐渐受到关注。通过总结关于5-HT和抑郁症的现有发现、缝隙连接与抑郁症的关系... 详细信息

抑郁症是一种常见的精神疾病，其发病机制至今尚未完全阐明。近年来，5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）与缝隙连接的交互作用在抑郁症发病中的关键作用逐渐受到关注。通过总结关于5-HT和抑郁症的现有发现、缝隙连接与抑郁症的关系、中药调控5-HT和缝隙连接相关机制的研究进展，对当前关于5-HT与缝隙连接在抑郁症发病过程中的交互作用的研究进展进行综述，为进一步探索抑郁症的发病机制提供有益参考。

关键词： 5-羟色胺缝隙连接神经细胞抑郁症神经递质调控机制

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基于网络药理学探讨沙棘治疗酒精性肝损伤的作用机制

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食品工业科技 2024年第14期45卷 25-33页

作者：邓斌陈洁李想娄可轩周立权周一苗肖作为湖南中医药大学药食同源创新实验室湖南长沙410208 湖南省健康产品与生命科技工程技术研究中心湖南长沙410208 湖南中医药大学湘杏学院湘阴校区湖南岳阳414615

目的:基于网络药理学预测沙棘治疗酒精性肝损伤(Alcohol Liver Injury)的作用机制,并通过建立斑马鱼酒精性肝损伤动物模型来验证沙棘治疗酒精性肝损伤的功效。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Sy... 详细信息

目的:基于网络药理学预测沙棘治疗酒精性肝损伤(Alcohol Liver Injury)的作用机制,并通过建立斑马鱼酒精性肝损伤动物模型来验证沙棘治疗酒精性肝损伤的功效。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology,TCMSP)、Uniprot数据库收集有效成分及其作用靶标,Venny2.1寻找交集靶点。通过GeneCards及OMIM数据库收集和筛选疾病靶点,STRING v12.0数据库进行PPI网络分析,PDB及PubChem进行蛋白质结构及小分子结构确认。通过Cytoscape(Version 3.9.1)软件网络图构建沙棘治疗酒精性肝损伤关联网络。利用Metascape数据库对共有靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Gene,KEGG)数据库通路富集分析。通过斑马鱼实验进行功能验证:选取受精后3 d(3 dpf)野生型AB品系斑马鱼,正常组喂养于正常饲养用水,其余各组饲养于2%的无水乙醇溶液中建立酒精性肝损伤模型。沙棘组给予不同浓度的沙棘溶液,28℃处理2 d后,确定沙棘对酒精性肝损伤模型斑马鱼的最大耐受浓度(MTC)剂量,并根据MTC结果进行下一步给药,测定样品肝保护功效评价表型实验结果。结果:筛选后得到沙棘活性成分33个,主要包括槲皮素、花葵素、儿茶酸等;治疗酒精性肝损伤的潜在靶点1434个,主要包括ADH1C、CTNNB1、TGFB1等。调控这些核心靶点的信号通路主要富集在Lipid and atherosclerosis、Fluid shear stress and atherosclerosis、PI3K-Akt signaling pathway等多条信号通路中。动物实验结果显示:与模型组相比,沙棘可显著降低酒精性肝损伤模型斑马鱼肝脏不透明值(P<0.01),改善肝脏和卵黄囊肿大(P<0.01),下调AST和ALT的活力值(P<0.001),改善肝细胞核肿大,减少肝组织脂肪空泡样变性的功效。结论:沙棘可改善酒精性肝损伤,其机制可能与改善脂肪酸氧化、细胞代谢和抑制细胞凋亡有关。

关键词：沙棘网络药理学酒精性肝损伤

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药用动物源蛋白质多肽化学组成和生物活性的研究进展

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中国药学杂志 2024年第1期59卷 7-17页

作者：周凡星童明慧刘娟李蓉方爱青郭英球时贞平李娟湖南中医药大学长沙410208 长沙欧邦生物科技有限公司长沙410000 湖南省中药活性物质筛选工程技术研究中心长沙410208 湖南省中美老年性退行性疾病治疗药物国际联合研究中心长沙410208

动物药是中药的重要药源之一,近年来,其生物活性物质逐步被发现,尤其是动物药中共有物质——蛋白质和多肽类成分,具有良好的抗菌、抗肿瘤和抗血栓等生物活性。本文选择目前研究较多的蟾蜍科、不同科属的地龙和全蝎等动物来源中药,检索... 详细信息

动物药是中药的重要药源之一,近年来,其生物活性物质逐步被发现,尤其是动物药中共有物质——蛋白质和多肽类成分,具有良好的抗菌、抗肿瘤和抗血栓等生物活性。本文选择目前研究较多的蟾蜍科、不同科属的地龙和全蝎等动物来源中药,检索国内外数据库,查阅从1989年至今与动物蛋白质和多肽相关的研究资料,重点综述了这些动物来源蛋白质/多肽的组成、成分分析和生物活性,为动物来源蛋白质和多肽的进一步研究和应用提供参考依据。

关键词：动物蛋白质动物多肽生物活性抗菌纤维蛋白溶解抗病毒

基于代谢组学及转录组学研究灰毡毛忍冬不同品种黄酮类成分差异积累的转录调控机制

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2666-2679页

作者：张惊宇龙雨青曾娟付学森何佳蔚周日宝刘湘丹湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湘产大宗道地药材种质资源及规范化种植重点研究室湖南长沙410208 湖南省普通高等学校中药现代化研究重点实验室湖南长沙410208 湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心湖南长沙410208

为探究湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬黄酮类成分差异积累的分子调控机制,该研究以灰毡毛忍冬2个品种花、茎和叶为材料,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术和高通量转录组测序(RNA-seq)技术进行代谢组学和转录组学联合分析,筛选黄酮... 详细信息

为探究湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬黄酮类成分差异积累的分子调控机制,该研究以灰毡毛忍冬2个品种花、茎和叶为材料,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术和高通量转录组测序(RNA-seq)技术进行代谢组学和转录组学联合分析,筛选黄酮类差异代谢物、关键差异表达基因及相应转录因子,并随机挑选其中14条差异表达基因进行qRT-PCR验证。结果表明,代谢组学分析共筛选出黄酮类化合物生物合成相关途径差异代谢物17个,包括柚皮苷查尔酮、芹菜素、槲皮苷等;转录组学分析共筛选出黄酮类化合物生物合成相关途径差异表达基因19条,包括2条CHS、3条CHI等;调控网络分析和加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选出调节黄酮类成分积累的关键酶基因CHS1、FLS1和HCT;同时发现MYB12和LBD4这2个转录因子可能通过调控关键酶基因CHS1、FLS1和HCT的表达来调控黄酮类成分的生物合成;qRT-PCR结果显示,随机选取的14个差异表达基因的表达模式与RNA-seq结果基本一致。该研究初步解析了2个品种灰毡毛忍冬黄酮类成分差异积累的转录调控机制,为进一步阐明其中关键酶基因及相应转录因子对灰毡毛忍冬黄酮类成分积累的调控作用奠定基础。

关键词：灰毡毛忍冬黄酮类化合物转录代谢组学联合分析转录因子调控机制

南山不老松的考证及其松针化学成分和活性研究进展

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中华中医药杂志 2024年第1期39卷 326-335页

作者：彭华清周扬涛倪晓婷李娟李顺祥湖南中医药大学药学院湖南省中药活性物质筛选工程技术研究中心长沙410208 湖南省中美老年性退行性疾病治疗药物国际联合研究中心长沙410208

笔者通过查阅古今文献、书籍及相关药材标准,对“南山不老松”中松的品种进行考证,并对其松针的化学成分和活性进行综述。笔者初步考证出南山不老松品种主要为松科植物马尾松。现代研究表明,马尾松松针主要含有挥发油类、黄酮类、木脂... 详细信息

笔者通过查阅古今文献、书籍及相关药材标准,对“南山不老松”中松的品种进行考证,并对其松针的化学成分和活性进行综述。笔者初步考证出南山不老松品种主要为松科植物马尾松。现代研究表明,马尾松松针主要含有挥发油类、黄酮类、木脂素类及莽草酸成分等,具有抗衰老、降脂、降压、抗肿瘤、抑菌等药理活性。

关键词：不老松考证松针化学成分药理活性抗衰老

基于化学成分药理作用及网络药理学的海芋质量标志物预测分析

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中药材 2024年第1期47卷 244-250页

作者：王鹏彭江丽陈娅彭兰淳郑青竹李亚梅彭求贤湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湖南省中药活性物质筛选工程技术研究中心湖南长沙410208 湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208

天南星科海芋属植物海芋Alocasia macrorrhiza(L.)Schott具有清热解毒、消肿散结的功效。近年来发现海芋具有良好的药理活性,但关于海芋的药效物质基础及质量控制研究较少。该文通过查阅文献及多个数据库,总结海芋化学成分及药理作用并... 详细信息

天南星科海芋属植物海芋Alocasia macrorrhiza(L.)Schott具有清热解毒、消肿散结的功效。近年来发现海芋具有良好的药理活性,但关于海芋的药效物质基础及质量控制研究较少。该文通过查阅文献及多个数据库,总结海芋化学成分及药理作用并利用网络药理学确立海芋的成分-靶点-通路网络,从海芋传统药性、药效、化学成分有效性等方面对海芋质量标志物(Q-marker)进行初步预测,总结出海芋素B(alocasin B)、海芋素D(alocasin D)、海芋素E(alocasin E)、海芋素A(alocasin A)、hyrtiosulawesine等11个活性成分作为海芋潜在的质量标志物,可为海芋的深入研究与开发利用提供理论依据。

关键词：海芋化学成分药理作用质量标志物网络药理学

熄风活络胶囊HPLC特征图谱建立及11个成分含量测定

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药物分析杂志 2024年第6期44卷 938-945页

作者：谭姣章夏建成周红玲刘阳蒋龙波邓湘俊刘隆基段云峰严建业湖南中医药高等专科学校附属第一医院(湖南省直中医医院) 株洲412000 湖南中医药大学科技创新中心长沙410208 湖南省中药活性物质筛选工程技术研究中心长沙410208

目的:建立熄风活络胶囊的HPLC特征图谱,并测定天麻素、苦杏仁苷、士的宁、羟基红花黄色素A、马钱子碱、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的含量。方法:熄风活络胶囊的75%甲醇水提取液,采用Venusil MP C18色谱柱(... 详细信息

目的:建立熄风活络胶囊的HPLC特征图谱,并测定天麻素、苦杏仁苷、士的宁、羟基红花黄色素A、马钱子碱、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的含量。方法:熄风活络胶囊的75%甲醇水提取液,采用Venusil MP C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL·min^(-1);柱温为30℃,检测波长为变波长。测定10批熄风活络胶囊特征图谱,标定共有峰并进行归属分析及相似度评价,对采用对照品比对确认的成分进行含量测定。结果:10批熄风活络胶囊特征图谱标定共有峰31个,相似度均大于0.99,归属于12味药材,指认出11个色谱峰。11个成分在各自范围内线性良好(r≥0.999 4),平均加样回收率为99.3%~103.0%,RSD为1.5%~2.4%。结论:所建立的方法灵敏度高,专属性强,HPLC特征图谱结合多成分定量测定能全面地反映其内在质量,可用于熄风活络胶囊的质量控制。

关键词：熄风活络胶囊高效液相色谱法特征图谱相似度分析化学成分