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叶天士“人在气交,法乎天地”补法微探

中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2592-2595页

作者：蒋啸李鑫辉李彩云夏旭婷王慧湖南中医药大学中医学院长沙410208

“天人合一”是中医学的重要认识,强调人与自然顺应和谐。叶天士由此论提出“人在气交,法乎天地,兼参体质施治”的立法原则。叶天士此论是考量不同时序阴阳消长、气机升降、脏腑荣衰三者变化,对治法确立的精辟总结。可惜叶天士思想多散... 详细信息

“天人合一”是中医学的重要认识,强调人与自然顺应和谐。叶天士由此论提出“人在气交,法乎天地,兼参体质施治”的立法原则。叶天士此论是考量不同时序阴阳消长、气机升降、脏腑荣衰三者变化,对治法确立的精辟总结。可惜叶天士思想多散金碎玉的湮没于零散医案中,学界虽有争鸣,但尚需系统阐述、提炼科学内涵。文章基于《素问·脉要精微论》所提,将四时年节律细分,以冬至、夏至为矩,讨论年节律影响下阴阳消长、气机升降、脏腑荣衰与补法关系。从择时用药上看,阳气微上,阴气微下时,人身气机顺应天时变化,多处“一阳始生、胆气春升”状态,此时立法当注意顾护胆气升发,宜宣畅少阳佐以健运中宫,方剂多选择瓜蒌栀子汤、玉竹麦冬汤合用。阴气微上,阳气微下时,下元亏损、化津无源,又兼燥邪当令,立法则多从肺肾论治,治此当分缕层次,补益阴精,方剂多选择六味二至丸佐以沙参麦冬汤。最后,文章以案释法,爬梳叶天士此论要点,认为“顺势思维”与“机法相参”是叶天士临证思维特点,希冀御简执繁,丰富临证思路,提高诊疗精度。

关键词：时间医学气交之变阴阳消长气机升降叶天士举案释法

基于GPR43/β-arrestin-2/IκBα/NF-κB通路探讨左归降糖通脉方对高糖合并LPS诱导的人脐静脉内皮细胞炎性损伤的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 64-74页

作者：彭岚玉姚敬心李钰佳李定祥刘迅邓奕辉湖南中医药大学中西医结合学院长沙410208 湖南中医药大学中医学院长沙410208

目的:探讨左归降糖通脉方(ZJTP)对高糖合并脂多糖(LPS)损伤后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响及作用机制。方法:通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平确定LPS最... 详细信息

目的:探讨左归降糖通脉方(ZJTP)对高糖合并脂多糖(LPS)损伤后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响及作用机制。方法:通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平确定LPS最适损伤浓度及作用时间、ZJTP含药血清的最佳作用浓度。将HUVECs分为空白组、模型组、ZJTP含药血清组、短链脂肪酸(SCFAs)混合液组。采用ELISA检测内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和TNF-α的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测G蛋白偶联受体43(GPR43)、β-抑制蛋白-2(β-arrestin-2)、核转录因子-κB抑制因子α(IκBα)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达;免疫荧光法(IF)观察NF-κB p65入核情况。运用小干扰核糖核酸(siRNA)的方法观察GPR43在炎性损伤调控中的作用。将干扰后的细胞分为空载体组、ZJTP含药血清组、Si-GPR43组、Si-GPR43+ZJTP含药血清组。ELISA检测IL-1β、IL-6和TNF-α含量;Western blot检测通路蛋白表达;IF观察NF-κB p65入核情况。结果:最适造模条件为1 mg·L^(-1) LPS作用24 h;最佳药物干预条件为5%的ZJTP含药血清作用24 h。与空白组比较,模型组ET-1含量显著升高,NO含量显著下降(P<0.01);炎症因子水平显著上升(P<0.01);GPR43和IκBα蛋白表达量下降,β-arrestin-2和NF-κB p65蛋白表达量显著升高(P<0.01);NF-κB p65蛋白由核外转移至核内(P<0.01)。与模型组比较,ZJTP含药血清组ET-1含量下降,NO含量升高(P<0.05);炎症因子水平下降(P<0.05);GPR43和IκBα蛋白表达升高,β-arrestin-2和NF-κB p65表达下降(P<0.05);NF-κB p65由核外转移至核内的数量减少(P<0.01)。机制研究发现,与Si-GPR43组比较,ZJTP含药血清干预后IL-1β、IL-6和TNF-α含量显著下降(P<0.01);GPR43和IκBα蛋白表达量显著上升(P<0.01),β-arrestin-2和NF-κB p65蛋白表达量显著下降(P<0.01);NF-κB p65由核外转移至核内数量减少(P<0.01)。结论:ZJTP对高糖合并LPS诱导炎性损伤的HUVECs具有保护作用,其机制可能与调控GPR43/β-arrestin-2/IκBα/NF-κB通路有关。

关键词：人脐静脉内皮细胞炎性损伤左归降糖通脉方 G蛋白偶联受体43 核转录因子-κB

NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡在慢性心力衰竭中的机制及中医药研究进展

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中国中药杂志 2024年第8期49卷 2106-2116页

作者：范星宇廖晓倩王梓仪赵晋稷胡志希湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 天津中医药大学天津301617

慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)是一种严重的心血管疾病,其发病机制极为复杂,包括心肌结构和功能异常、炎症反应的激活等多种因素。NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated pro... 详细信息

慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)是一种严重的心血管疾病,其发病机制极为复杂,包括心肌结构和功能异常、炎症反应的激活等多种因素。NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎症小体作为炎症细胞传感器,在CHF的发生和发展中发挥着关键作用。研究表明,NLRP3炎症小体的活化可以诱导炎症反应,导致心脏炎症,损害心肌功能,并与CHF的严重程度相关联。中医药作为一种传统的治疗方式,近年来受到了越来越多的关注。中医药的药物和治疗方法在抑制炎症反应、减轻心肌细胞焦亡、改善心肌结构和功能、抑制心肌纤维化能等方面显示出潜在的疗效。中医药中的多种药物及其提取物已经被用于CHF的治疗,其机制可能涉及到NLRP3炎症小体的抑制以及炎症反应的减轻。该文综述了NLRP3炎症小体的组成、结构特点、启动与激活方式及其在CHF中的作用机制,同时探讨了中医药干预NLRP3炎症小体防治CHF的研究进展,旨在更深入了解CHF发病机制,为未来开发新的治疗策略提供参考和依据。

关键词：中医药慢性心力衰竭 NLRP3 细胞焦亡

益气活血方调控cAMP/Epac1/Rap1信号改善冠心病气虚血瘀证大鼠的验证

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期 107-116页

作者：吴华英邓凯李静毛一之李亮彭清华湖南师范大学医学院湖南中医药大学中医学院长沙市中医医院

目的：基于环磷酸腺苷（cAMP）/环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Epac1)/Ras-同源蛋白1(Rap1)信号通路探讨益气活血方对冠心病气虚血瘀证大鼠的心肌保护机制。方法：88只SPF级雄性SD大鼠，按随机数字表分为假手术组（n=12）和实验... 详细信息

目的：基于环磷酸腺苷（cAMP）/环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Epac1)/Ras-同源蛋白1(Rap1)信号通路探讨益气活血方对冠心病气虚血瘀证大鼠的心肌保护机制。方法：88只SPF级雄性SD大鼠，按随机数字表分为假手术组（n=12）和实验组（n=76），实验组大鼠采用限制饮食及力竭性游泳复合冠状动脉左前降支（LAD）结扎术构建冠心病气虚血瘀证模型，采集大鼠心电图，将造模成功后的实验组大鼠随机分为模型组、益气活血方低、中、高剂量组（4.28、8.55、17.1 g·kg-1）、西药组（单硝酸异山梨酯片，3.6 mg·kg-1），连续给药4周；假手术组及模型组灌胃等体积双蒸水。末次给药后24 h取材，行心脏超声检测左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室收缩末期内径（LVESD），左室短轴缩短率（FS）、射血分数（EF），腹主动脉采血行血液流变学测定，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血浆cAMP水平；留取心肌组织进行苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色观察心肌病理损伤情况，透射电镜观察心肌组织超微结构改变；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测心肌Epac1、Rap1GTP酶激活蛋白（Rap1GAP）及Rap1 mRNA表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌Epac1、Rap1GAP及Rap1蛋白表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠的LVEDD、LVESD显著增加（P<0.01）,EF及FS比率显著下降（P<0.01），表现出心功能减退的“心气虚”症状；全血黏度及血浆黏度显著升高（P<0.01）,cAMP含量显著升高（P<0.01），心肌组织胶原纤维显著增生（P<0.01），心肌超微结构受损严重，表现出“血瘀”的病理改变；Real-time PCR结果显示模型组大鼠Epac1及Rap1 mRNA显著降低（P<0.01）,Rap1GAP mRNA显著增加（P<0.01）;Western blot显示Epac1蛋白表达显著降低（P<0.01）,Rap1GAP蛋白表达明显增加（P<0.05）；与模型组比较，益气活血方能改善冠心病气虚血瘀证大鼠心功能、降低血液黏度、降低血浆cAMP含量、减少胶原纤维增生，改善心肌超微结构损伤，以高剂量组作用效果最佳。益气活血方高剂量组能显著增加Epac1 mRNA及蛋白表达（P<0.01），显著增加Rap1 mRNA表达（P<0.01），明显降低Rap1GAP mRNA及Rap1GAP/Rap1蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论：益气活血方可改善冠心病气虚血瘀证大鼠心功能、降低血液黏度与血浆cAMP含量、改善心肌损伤、减少胶原纤维增生，其心肌保护机制可能与调节cAMP/Epac1/Rap1信号通路有关。

关键词：益气活血方补阳还五汤冠心病气虚血瘀证环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Epac1)/Ras-同源蛋白1(Rap1)信号通路

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H型血管促进成血管-成骨耦联在骨折愈合中作用机制的研究进展

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华中科技大学学报（医学版） 2024年第1期53卷 133-139页

作者：卢承印罗志强简功辉齐新宇熊辉李汪洋湖南中医药大学第二附属医院骨伤科长沙410005 湖南中医药大学第二中医临床医学院长沙410005

骨折是临床上常见的一种骨科疾病,由此产生的骨折不愈合或延迟愈合是临床治疗的一大难题。在骨折愈合过程中,血管生成与骨生成存在复杂的相互作用关系,被称为“成血管-成骨耦联”机制。近年来,一种以高表达血小板内皮细胞粘附分子1(PECA... 详细信息

骨折是临床上常见的一种骨科疾病,由此产生的骨折不愈合或延迟愈合是临床治疗的一大难题。在骨折愈合过程中,血管生成与骨生成存在复杂的相互作用关系,被称为“成血管-成骨耦联”机制。近年来,一种以高表达血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM-1/CD31)及唾液糖蛋白内粘蛋白(EMCN)为特征的新型毛细血管亚型,即H型血管,被鉴定并发现在调控成血管-成骨耦联中起到重要的作用。该文将对H型血管促进成血管-成骨耦联的作用机制及调控H型血管新生的相关分子与信号通路进行综述,以期为促进骨折愈合提供新的思路与方法。

关键词： H型血管骨折血管新生骨形成成血管-成骨耦联

基于数据挖掘和网络药理学的淫羊藿保健品组方规律及主要保健功能研究

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中草药 2024年第6期55卷 2027-2039页

作者：刘永铭刘树森熊轶喆沈知彼王翔齐卓操詹红生杜国庆上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海201203 上海市中医药研究院骨伤科研究所上海201203 哈尔滨商业大学药学院黑龙江哈尔滨150076 上海中医药大学中医学院上海201203

目的通过数据挖掘、网络药理学及分子对接技术分析含淫羊藿的保健食品的组方规律并对其潜在的机制进行研究。方法通过检索国家市场监督管理总局及药智网含淫羊藿的保健食品,采用频数统计和关联规则等方法分析基本信息及组方规律。通过检... 详细信息

目的通过数据挖掘、网络药理学及分子对接技术分析含淫羊藿的保健食品的组方规律并对其潜在的机制进行研究。方法通过检索国家市场监督管理总局及药智网含淫羊藿的保健食品,采用频数统计和关联规则等方法分析基本信息及组方规律。通过检索TCMSP等数据库、整理相关文献获得淫羊藿相关化学成分及潜在靶点;根据保健功能频次分析结果,从GeneCards等数据库中筛选相关的潜在靶点信息;借助R语言相关软件包、String数据库、Cytoscape软件等筛选出关键成分和关键靶点。随后进行蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析,根据度(degree)值筛选出核心靶点,并进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。最后,利用分子对接技术验证核心靶点和关键成分的作用亲和力。结果筛选纳入501种含淫羊藿保健食品。剂型以胶囊剂为主;保健功能频次排名前3的分别为缓解体力疲劳(343次)、有助于增强免疫力(140次)、有助于改善骨密度(87次);涉及116种中药,以补虚药为主,四气以温为主,五味以甘为主,归经以肾经为主。获得淫羊藿有效成分139个、靶基因1677个,获得体力疲劳相关潜在靶点849个、免疫力相关潜在靶点2076个、骨质疏松相关潜在靶点1440个;将淫羊藿和主要保健功能的靶基因取交集,得到淫羊藿缓解体力疲劳关键靶点227个、有助于增强免疫力关键靶点358个、有助于改善骨密度关键靶点332个;淫羊藿通过激酶活性的正向调节等过程及磷脂酰肌醇-3-羟激酶(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)等信号通路起到缓解体力疲劳的作用,通过细胞因子产生的正向调节等过程及Th17细胞分化等信号通路起到增强免疫力的作用,通过对肽的反应等过程及PI3K/Akt等信号通路起到改善骨密度的作用。分子对接结果提示淫羊藿的关键成分与核心靶点能自发稳定地结合。结论通过数据挖掘、网络药理学和分子对接研究,分析了含淫羊藿的保健食品相关信息,初步揭示淫羊藿主要保健功能的潜在靶点与机制通路,为淫羊藿后续产品的研发提供了理论依据。

关键词：淫羊藿保健品数据挖掘网络药理学缓解体力疲劳增强免疫力改善骨密度淫羊藿苷朝藿定A

基于网络药理学探讨固表防感加减方在免疫抑制小鼠预防流感病毒中的作用机制及实验验证

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中国免疫学杂志 2024年第7期40卷 1447-1453,I0002-I0005页

作者：马心悦黄家望朱梦晨刘卓琳徐子晔卢芳国李玲湖南中医药大学中西医结合学院长沙410208 湖南中医药大学中医学院长沙410208 湖南中医药大学医学院长沙410208

目的:运用网络药理学方法探讨固表防感加减方调节免疫抑制小鼠防御A型流感病毒的作用靶点及信号通路,并通过免疫抑制小鼠模型进行关键靶点验证。方法:利用TCMSP数据库检索固表防感加减方药物的有效成分,利用GeneCard、OMIM、PharmGkb数... 详细信息

目的:运用网络药理学方法探讨固表防感加减方调节免疫抑制小鼠防御A型流感病毒的作用靶点及信号通路,并通过免疫抑制小鼠模型进行关键靶点验证。方法:利用TCMSP数据库检索固表防感加减方药物的有效成分,利用GeneCard、OMIM、PharmGkb数据库获得有效成分预防流感的潜在靶点,取其交集靶点;运用STRING11.5数据库制作蛋白质-蛋白质相互作用网络,分析并找到核心靶点;利用Cytoscape3.8.1构建中药-成分-疾病靶点网络,并进行GO富集分析和KEGG富集分析。腹腔注射环磷酰胺构建免疫功能抑制小鼠模型,设置正常组、模型对照组、固表防感加减方组、奥司他韦组,随后预防性给药,第4天进行流感病毒干预,药物灌胃治疗7 d后,通过小鼠脾脏指数、HE染色、RT-qPCR、免疫组化法验证关键靶点。结果:固表防感加减方中5味中药共含82个活性成分,IL-6、TNF-α、IL-2等72个药物与疾病的共同靶点,主要涉及IL-17、TNF及AGE-RAGE信号通路等。固表防感加减方可以提高脾脏指数,显著降低小鼠脾组织中IL-6及TNF-α的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:固表防感加减方可能通过IL-6和TNF-α等靶点调控机体免疫功能,从而预防流感病毒感染。

关键词：流感病毒固表防感加减方免疫功能抑制网络药理学

基于GPR43/β-arrestin-2/IκBα/NF-κB通路探讨左归降糖通脉方对糖尿病大鼠血管内皮炎性保护的影响

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中国中西医结合杂志 2024年第5期44卷 558-566页

作者：彭岚玉李定祥姚敬心蔡昱哲邓奕辉湖南中医药大学中西医结合学院长沙410208 湖南中医药大学中医学院长沙410208

目的研究左归降糖通脉方对2型糖尿病(T2DM)大鼠血管内皮功能障碍的影响与作用机制。方法高脂饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射的方法制备模型。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、左归降糖通脉方低剂量(12 g/kg,ZJTF-L)组、左归降糖通... 详细信息

目的研究左归降糖通脉方对2型糖尿病(T2DM)大鼠血管内皮功能障碍的影响与作用机制。方法高脂饲料喂养联合链脲佐菌素腹腔注射的方法制备模型。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、左归降糖通脉方低剂量(12 g/kg,ZJTF-L)组、左归降糖通脉方高剂量(24 g/kg,ZJTF-H)组、二甲双胍+阿托伐他汀(150 mg/kg+10 mg/kg、西药联用)组、短链脂肪酸(500 mg/kg,SCFAs)组,每组10只。干预结束后,采用透射电镜观察大鼠颈动脉超微结构变化;ELISA检测血清胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbAlc)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管内皮细胞黏附分子1(VCAM-1)、内皮素1(ET-1)、白细胞介素-1 β(IL-1 β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;生化分析法检测血清一氧化氮(NO)的含量;分别采用Western Blot、q PCR检测G蛋白偶联受体43(GPR43)、β-抑制蛋白2(β-arrestin-2)、核因子κB抑制因子α(IκBα)、核因子κB p65(NF-κBp65)的蛋白表达与mRNA水平。结果与空白组比较,模型组体重下降,血糖显著升高(P<0.01);HbA1 c、FINS、IL-1 β、IL-6、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1及ET-1水平明显升高,NO明显降低(P<0.01);内皮细胞肿胀,胞核皱缩,细胞形状不清晰;颈动脉GPR43、IκBα蛋白表达与mRNA水平显著降低(P<0.05,P<0.01),β-arrestin-2、NF-κBp65蛋白表达与mRNA水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,药物干预各组体重升高、血糖下降(P<0.01);炎症因子、血管内皮功能各项指标均有所好转(P<0.05,P<0.01)。ZJTF-H组颈动脉部分内皮脱落,胞核形状较规则;GPR43、IκBα蛋白表达与mRNA水平明显升高(P<0.05,P<0.01);β-arrestin-2、NF-κBp65蛋白表达与mRNA水平明显下降(P<0.01)。结论左归降糖通脉方可改善T2DM大鼠血管内皮功能障碍,其机制可能与调节GPR43/β-arrestin-2/IκBα/NF-κB信号通路有关。

关键词：左归降糖通脉方 2型糖尿病 G蛋白偶联受体43 β-抑制蛋白2 核因子κB抑制因子α 核因子κB 中药复方

CA9作为激素性股骨头坏死中软骨铁死亡特征基因的生物信息学鉴定

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中国组织工程研究 2024年第27期28卷 4293-4299页

作者：余鹏孟东方李慧英张向北河南中医药大学骨伤学院河南省郑州市450002 河南中医药大学第一附属医院骨伤科河南省郑州市450002

背景:激素性股骨头坏死中骨代谢的紊乱与铁死亡密切相关,同时激素性股骨头坏死的病理过程中伴随着软骨的损伤与退变。但关于铁死亡与软骨之间的关系和具体调控靶点尚不明确。目的:运用生物信息学和机器学习方法筛选靶向软骨的铁死亡特... 详细信息

背景:激素性股骨头坏死中骨代谢的紊乱与铁死亡密切相关,同时激素性股骨头坏死的病理过程中伴随着软骨的损伤与退变。但关于铁死亡与软骨之间的关系和具体调控靶点尚不明确。目的:运用生物信息学和机器学习方法筛选靶向软骨的铁死亡特征基因,探究铁死亡与软骨之间的关系,为研究和治疗激素性股骨头坏死提供新的思路与方法。方法:通过GEO数据库和FerrDb数据库下载相关疾病数据集和铁死亡相关基因,采用R语言对疾病数据集进行归一化处理和差异分析,筛选出铁死亡相关差异基因。对铁死亡相关差异基因进行GO功能富集分析和KEGG信号通路富集分析,同时根据铁死亡相关差异基因的PPI网络和机器学习方法筛选铁死亡特征基因。最后,将兔子分为正常组和模型组,正常组给予相同剂量的生理盐水模拟造模药物,模型组采用改良马血清联合注射用甲泼尼龙构建兔激素性股骨头坏死模型,造模成功后,验证不同组别间特征基因的表达,分析软骨中铁死亡的表型。结果与结论:①通过对数据集的归一化处理和差异分析,最终获得1315个差异表达基因,通过FerrDb数据库获取379个铁死亡相关基因。二者取交集后,最终获得19个铁死亡差异表达基因。②GO分析铁死亡相关差异基因主要涉及细胞迁移和细胞对氧化应激反应等生物过程;涉及激酶复合物、氨基酸复合体和细胞质膜等细胞组分;涉及激酶活性、受体活性和蛋白结合等分子功能。KEGG分析铁死亡相关差异基因主要在FoxO信号通路、血管内皮生长因子信号通路和FcγR介导的吞噬作用中富集。③通过PPI网络和机器学习筛选出铁死亡特征基因CA9。④特征基因的GSEA分析发现,CA9在脂肪酸代谢、O-GlcNAc糖基化修饰等生物过程中上调表达,而在神经活性配体受体相互作用方面被抑制。⑤RT-PCR和Western blot检测结果显示,与正常组对比,模型组中的ACSL4,CA9 mRNA和蛋白表达水平显著增高(P一定的思路与方向。

关键词：激素性股骨头坏死软骨铁死亡生物信息学特征基因生物标志物 CA9 ACSL4 SLC7A11 GPX4