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《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑损伤及血管新生的影响

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中国中药杂志 2024年第8期49卷 2178-2187页

作者：罗政李定祥蔡昱哲刘艺璇阳晶晶吴琴张亚男陈静邓奕辉湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208

旨在探讨《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑缺血性损伤及血管新生的影响。以SD大鼠为研究对象,随机分为6组:假手术组,模型组,续命汤低、中、高剂量组,丁苯酞组。大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型成... 详细信息

旨在探讨《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑缺血性损伤及血管新生的影响。以SD大鼠为研究对象,随机分为6组:假手术组,模型组,续命汤低、中、高剂量组,丁苯酞组。大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型成功建立后,各组大鼠每天分别灌胃给予蒸馏水,续命汤5.13、10.26、20.52 g·kg~(-1)药液、丁苯酞混悬液(0.06 g·kg~(-1))。连续干预7 d后,进行末次神经功能评分,处死所有大鼠,采集脑组织样本。通过神经功能评分和2,3,5-氯化三苯基四氮染色评估脑缺血损伤程度;苏木素-伊红染色观察脑组织病理学形态改变;透射电子显微镜观察缺血半暗区皮层脑组织神经元和微血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)超微结构;免疫荧光检测缺血半暗区皮层脑组织血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)和造血祖细胞抗原CD34(hematopoietic progenitor cell antigen CD34,CD34)的蛋白表达情况;实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测缺血半暗区皮层脑组织Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)、血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)、VEGF受体2(VEGF receptor 2,VEGFR2)mRNA和蛋白的表达情况。结果表明,与假手术组相比,模型组大鼠神经功能评分、脑梗死面积显著升高(P<0.01);缺血半暗区皮层脑组织病理学形态结构、神经元与微血管ECs超微结构受损;RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 mRNA表达均显著升高(P<0.01);vWF、CD34、RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2蛋白表达均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,续命汤高剂量组、丁苯酞组神经功能缺损评分和脑梗死面积显著降低(P<0.01);缺血半暗区皮层脑组织病理学形态结构、神经元与微血管ECs超微结构损伤情况得到改善;RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 mRNA表达显著升高(P<0.01);vWF、CD34、RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2蛋白表达也显著升高(P<0.01)。上述结果表明,《古今录验》续命汤可以促进MCAO大鼠缺血半暗区皮层脑组织的血管新生,加快侧支循环的建立,以减轻神经功能障碍,可能与RUNX1/VEGF途径有关。

关键词：急性脑梗死《古今录验》续命汤血管新生 RUNX1 VEGF

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治未病理论在双心病的应用

光明中医 2024年第20期 4211-4214页

作者：张曾宇何清湖孙贵香刘子毓张冀东湖南中医药大学中医学院湖南医药学院中医学院

双心医学(Psycho-cardiology)是研究并处理与心脏相关的个人情绪波动、社会生活环境及个人行为问题的科学。双心病是一种心理障碍与心血管疾病并存的疾病，两者互为因果且互相影响，属于中医心系相关疾病的范畴，临床上较多从心、肝、... 详细信息

双心医学(Psycho-cardiology)是研究并处理与心脏相关的个人情绪波动、社会生活环境及个人行为问题的科学。双心病是一种心理障碍与心血管疾病并存的疾病，两者互为因果且互相影响，属于中医心系相关疾病的范畴，临床上较多从心、肝、脾三脏论治。中医在“生物-心理-社会”一体化防治治疗、治未病方面具有独到的优势。因此，此文基于中医治未病理论，并结合天人相应、整体观念等诸多理论，探讨中医治未病理论在双心病领域的可行性。

关键词：治未病亚健康双心医学综述

滋阴明目丸通过激活音猬因子信号通路对小鼠视网膜色素变性的改善作用

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中成药 2024年第8期46卷 2551-2561页

作者：曾梅艳熊萌宋厚盼欧晨符超君彭清华秦裕辉湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的探究滋阴明目丸对小鼠视网膜色素变性(RP)的改善作用及其可能机制。方法将RP转基因小鼠(rd10)随机分为模型组、乐盯组(0.15 g/kg)和滋阴明目丸低、高剂量组(4.50、9.00 g/kg),以C57BL/6小鼠为正常组,每组12只。HE染色检测小鼠视网... 详细信息

目的探究滋阴明目丸对小鼠视网膜色素变性(RP)的改善作用及其可能机制。方法将RP转基因小鼠(rd10)随机分为模型组、乐盯组(0.15 g/kg)和滋阴明目丸低、高剂量组(4.50、9.00 g/kg),以C57BL/6小鼠为正常组,每组12只。HE染色检测小鼠视网膜组织病理改变,视网膜电图(ERG)检测视功能,光学相干断层扫描(OCT)观察小鼠眼底表现并检测视网膜厚度,激光散斑血流技术检测小鼠视网膜血液灌注量,数字PCR检测Shh信号通路信号分子Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin mRNA表达,免疫荧光染色检测Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin蛋白表达。结果与正常组比较,模型小鼠眼底和视网膜组织均发生病理性改变,ERG a波和b波振幅降低(P<0.01),视网膜厚度减少(P<0.01),视网膜血液灌注量降低(P<0.01),视网膜Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin mRNA和蛋白表达均降低(P<0.01)。与模型组比较,滋阴明目丸各剂量组和乐盯组小鼠眼底和视网膜组织病理性改变均得到改善,视网膜厚度增加(P<0.01),视网膜血流量升高(P<0.01),ERG a波和b波振幅增加(P<0.01),视网膜Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin mRNA和蛋白表达均升高(P<0.01)。结论滋阴明目丸可增加视网膜厚度和血流量,改善眼底病理改变和视功能,呈现出较好的延缓RP的作用,其机制可能与激活Shh信号通路有关。

关键词：滋阴明目丸视网膜色素变性 rd10 视功能 Shh信号通路

丹参通络解毒汤对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及自噬和血管生成因子的影响

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时珍国医国药 2024年第2期35卷 293-296页

作者：李彩云刘仕成李鑫辉湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005

目的探讨丹参通络解毒汤(DSTL)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及自噬和血管生成因子的影响。方法将雄性SD大鼠随机平均分成5组:假手术组(Sham组)、MIRI模型组(MIRI组)、MIRI模型+DSTL组(DSTL组)、MIRI模型+自噬抑制剂3-甲基... 详细信息

目的探讨丹参通络解毒汤(DSTL)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及自噬和血管生成因子的影响。方法将雄性SD大鼠随机平均分成5组:假手术组(Sham组)、MIRI模型组(MIRI组)、MIRI模型+DSTL组(DSTL组)、MIRI模型+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(3-MA组)以及MIRI模型+自噬激动剂雷帕霉素组(Rap组),每组10只。采用苏木精-伊红(HE)染色评估心肌的病理变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌细胞损伤标志物肌酸激酶MB同功酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(CTnI)的水平,免疫组织化学染色检测Beclin1的表达和分布,蛋白免疫印迹(WB)测定p62、内皮一氧化氮合成酶(eNOS)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。结果MIRI组大鼠在显微镜下显示严重的心肌细胞坏死和炎症浸润,CK-MB、CTnI和Beclin1的水平明显升高(P<0.01),p62、eNOS和VEGF的水平显著降低(P<0.01),而DSTL组的大鼠显示较轻微的病理变化,CK-MB、CTnI和Beclin1的水平下降(P<0.01),p62、eNOS和VEGF的水平升高(P<0.01);DSTL组的Beclin1和p62的水平介于3-MA组和Rap组(P<0.01),而eNOS和VEGF的水平最高(P<0.01)。结论DSTL能适度抑制自噬,促进血管生成因子的产生,从而减轻MIRI,保护大鼠心肌细胞。

关键词：丹参通络解毒汤心肌缺血再灌注损伤自噬血管新生因子

枸杞子-丹参诱导穆勒细胞重编程治疗视网膜色素变性的实验研究

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 3040-3049页

作者：宋厚盼欧晨熊萌蒋鹏飞曾梅艳逯晶彭俊周亚莎杨毅敬彭清华湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医诊断研究所湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208

探讨滋阴活血明目药对枸杞子-丹参(Lycii Fructus-Salviae Miltiorrhizae Radix, LFSMR)抑制穆勒细胞(Müller cell,MC)胶质化,促进MC重编程转分化为视网膜神经细胞治疗视网膜色素变性(retinitis pigmentosa, RP)的效应及机制。将12只C57小鼠作为正常对照组,48只转基因RP(rd10)小鼠随机分为模型组、阳性对照组和LFSMR低、高剂量组,每组12只。HE染色检测视网膜病理改变,视网膜电图检测视网膜功能,眼底光学相干断层扫描检测视网膜厚度并进行眼底照相,激光散斑灌注成像检测视网膜局部血流,数字PCR检测视网膜神经细胞相关基因表达,免疫荧光法检测视网膜神经细胞相关蛋白表达。LFSMR可明显改善rd10小鼠视网膜病理改变;LFSMR可明显增加小鼠视网膜a波和b波振幅;LFSMR可显著增加小鼠视网膜厚度;LFSMR可明显恢复RP病变过程小鼠眼底损伤;LFSMR可显著提升RP病变过程小鼠视网膜血流量;LFSMR可显著抑制RP发病过程胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)mRNA表达,上调性别决定域Y链蛋白2(sex determining region Y box protein 2, SOX2)、双链复合蛋白6(paired box protein 6, Pax6)、视紫红质(rhodopsin)、蛋白激酶C-α(protein kinase C-α, PKCα)、突触融合蛋白(syntaxin)、胸腺细胞抗原1.1(thymic cell antigen 1.1, Thy1.1)mRNA表达;LFSMR可显著抑制GFAP蛋白表达,提升SOX2、Pax6、rhodopsin、PKCα、syntaxin、Thy1.1蛋白表达。LFSMR可逆转rd10小鼠视网膜病理改变,改善视网膜功能和眼底表现,增加视网膜厚度,提升视网膜局部血流量,发挥治疗RP的效应。LFSMR的作用机制可能与抑制穆勒细胞胶质化,促进穆勒细胞重编程转分化为各类视网膜神经细胞有关。

关键词：枸杞子丹参视网膜色素变性穆勒细胞胶质化重编程

脑泰方对脑缺血再灌注损伤小胶质细胞极化及胶质瘢痕的影响

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 989-999页

作者：刘吉勇张文丽廖君胡立娟王国佐葛金文梅志刚湖南中医药大学中医学院中医诊断学湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005 湖南中医药大学中西医结合学院中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

探讨脑泰方(NTF)对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠小胶质细胞极化及胶质瘢痕相关蛋白的影响。用大脑中动脉阻塞/复灌注方法建立大鼠CIRI模型。将造模成功的48只大鼠随机分为脑缺血再灌注模型7 d组(mo... 详细信息

探讨脑泰方(NTF)对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠小胶质细胞极化及胶质瘢痕相关蛋白的影响。用大脑中动脉阻塞/复灌注方法建立大鼠CIRI模型。将造模成功的48只大鼠随机分为脑缺血再灌注模型7 d组(model 7 d)、脑缺血再灌注模型14 d组(model 14 d)、脑泰方+脑缺血再灌注模型7 d组(NTF 7 d)、脑泰方+脑缺血再灌注模型14 d组(NTF 14 d),每组12只,另设12只SD大鼠为假手术组(sham)。NTF治疗组给予NTF混悬液27 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,sham与model 7 d、model 14 d每天给予同体积生理盐水,连续灌胃7、14 d。干预结束,各组大鼠进行Longa评分;2,3,5-三苯四唑氯(TTC)染色法检测脑梗死面积;水迷宫实验、旷场实验评估大鼠空间学习记忆和认知功能以及焦虑程度;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脑组织形态结构及损伤情况;免疫荧光检测活化星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达和胶质瘢痕情况;免疫印迹法检测脑皮质瘢痕相关蛋白GFAP、神经蛋白聚糖(neurocan)、磷酸蛋白聚糖(phosphacan),小胶质细胞极化蛋白CD206、精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)及炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-4的表达情况。与sham比较,model 7 d及model 14 d大鼠均出现不同程度的脑梗死,脑皮质及神经元海马组织病理损伤严重,神经功能缺损,空间学习记忆及认知功能障碍及焦虑严重,星形胶质细胞增生及半暗带胶质瘢痕厚度均增加,IL-1β、IL-6表达升高,脑皮质GFAP、neurocan、phosphacan、CD206、Arg-1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,NTF 7 d及NTF 14 d大鼠空间学习记忆和认知功能改善,焦虑减轻,神经功能改善,脑梗死体积减少,星形胶质细胞增生及半暗带胶质瘢痕厚度均减少,脑皮质组织GFAP、neurocan、phosphacan、IL-6、IL-1β表达降低,IL-4、CD206、Arg-1表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。NTF对CIRI具有神经保护作用,能诱导小胶质细胞向M2型极化,抑制炎症反应,减轻胶质瘢痕的形成。

关键词：中风脑缺血再灌注胶质瘢痕小胶质细胞脑泰方

基于中西医盆腔炎性疾病后遗症临床病证特点的动物模型分析

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中药药理与临床 2024年第6期40卷 93-98页

作者：胡伊蕾俞赟丰周曼丽蔡磊简维雄湖南中医药大学中医学院长沙410208 湖南中医药大学国家重点学科中医诊断学湖南省重点实验室长沙410208

盆腔炎性疾病后遗症(SPID)是现代社会严重影响女性生殖健康与生活质量的妇科疾病之一,具有迁延难愈的临床特点。目前,SPID的发病机制尚且不明,临床治疗效果欠佳,因此,推进SPID的基础、临床研究,构建更为吻合中西医临床症状的动物模型乃... 详细信息

盆腔炎性疾病后遗症(SPID)是现代社会严重影响女性生殖健康与生活质量的妇科疾病之一,具有迁延难愈的临床特点。目前,SPID的发病机制尚且不明,临床治疗效果欠佳,因此,推进SPID的基础、临床研究,构建更为吻合中西医临床症状的动物模型乃当下之需。本文通过梳理SPID的病因病机、临床特点及诊断标准,总结现有SPID动物模型的构建方法及造模机制,并依据中西医动物模型贴合度评分分析各模型优劣,提出改进建议。分析结果指出,SPID西医病理模型中异物置入法、苯酚胶浆、机械损伤结合苯酚胶浆造模法最为理想;中医病证模型中以寒湿凝结、气滞血瘀证模型与临床特征最为吻合,可以作为其他模型优化思路的参考。

关键词：盆腔炎性疾病后遗症动物模型临床病证特点

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中医学预测模型研究探讨

中华中医药杂志 2024年第8期39卷 3873-3876页

作者：杨丞玮赖新梅魏佳肖雯迪房盛懿李灿东福建中医药大学中医学院福州350122 福建省中医四诊智能诊疗设备研究中心福州350122 福建省立医院福州350000 湖南中医药大学中医学院长沙410000

临床预测模型因其对疾病诊断和预后具有预测作用而被广泛应用于医疗决策、医疗质量管理及医疗资源的配置。中医整体观念和预后思想对预测模型研究具有很好的实践指导价值。文章挖掘中医思维对预测模型构建的意义,并从研究设计类型、预... 详细信息

临床预测模型因其对疾病诊断和预后具有预测作用而被广泛应用于医疗决策、医疗质量管理及医疗资源的配置。中医整体观念和预后思想对预测模型研究具有很好的实践指导价值。文章挖掘中医思维对预测模型构建的意义,并从研究设计类型、预测因素筛选、数据偏倚以及建模方法等角度,探讨限制中医预测能力发挥的因素。高质量的中医学预测模型研究,应从中医思维出发,完善研究设计,严格筛选预测因素,将整体、动态、个性的特点融入预测模型研究。

关键词：中医预测模型预测因素中医思维

理中汤干预MAPK通路治疗脾胃虚寒型胃溃疡大鼠的机制研究

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中药药理与临床 2024年

作者：仇婧玥喻昶熊萌任保平仲美琪周顺华王晓娟高晴曾梅艳宋厚盼湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室湖南中医药大学中医学院湖南中医药大学中医诊断研究所浙江中医药大学附属金华中医院

目的：基于丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路探讨理中汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡（GU）模型大鼠的药效作用及分子机制。方法：将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、艾司奥美拉唑4 mg/kg组及理中汤3.75、7.5 g/kg组。在15 d内... 详细信息

目的：基于丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路探讨理中汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡（GU）模型大鼠的药效作用及分子机制。方法：将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、艾司奥美拉唑4 mg/kg组及理中汤3.75、7.5 g/kg组。在15 d内，采用“苦寒泻下+饮食失节+劳倦过度+吲哚美辛”法构建GU脾胃虚寒证大鼠模型。观察大鼠整体状态及鼻唇、舌象、爪趾色泽改变；观测大鼠胃黏膜溃疡指数（UI）和溃疡抑制率（CI）；HE染色法观察大鼠胃黏膜病理改变并评分；酶联免疫吸附法测定大鼠血清中白细胞介素17（IL-17）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）含量和胃组织中胃蛋白酶活性；微滴式数字PCR法和免疫荧光法分别检测大鼠胃组织中MAPK通路关键信号分子丝裂原活化蛋白激酶15（MAPK15）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、基质金属蛋白酶3（MMP3）与半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3（CASP3）基因及蛋白表达。结果：理中汤可有效改善GU脾胃虚寒证大鼠胃黏膜表现。相较于正常大鼠，模型大鼠胃黏膜溃疡指数显著上升（P<0.01）；上皮细胞严重水肿、脱落，可见大量炎性细胞浸润（P<0.01）；血清中IL-17、TNF-α、MDA含量及胃蛋白酶活性明显上升（P<0.01），GSH含量显著下降（P<0.01）；MAPK15、p38 MAPK与MMP3基因、蛋白表达水平显著上调（P<0.01），CASP3基因、蛋白表达均明显下调（P<0.01）；与模型对照组比较，理中汤组大鼠胃黏膜溃疡指数明显降低（P<0.05），理中汤7.5 g/kg组CI达86.95%；镜下病理评分均明显下降（P＜0.05）；血清IL-17、TNF-α、MDA含量和胃蛋白酶活性均明显降低（P<0.01），GSH含量明显升高（P<0.01）；MAPK15、p38 MAPK与MMP3基因、蛋白表达水平显著下降（P<0.01）；CASP3基因、蛋白表达均显著上调（P<0.01）。结论：理中汤对GU脾胃虚寒证大鼠疗效显著，可促进溃疡愈合，其干预机制可能与调控MAPK信号通路，抑制氧化应激，消除炎症，促进胃黏膜修复有关。

关键词：理中汤胃溃疡脾胃虚寒证炎症反应氧化应激丝裂原活化蛋白激酶基质金属蛋白酶3 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3