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siRNA沉默α-TAT1对肝肺综合征中内皮细胞迁移行为的影响

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陆军军医大学学报 2024年第3期46卷 215-224页

作者：刘畅朱佳熙刘亚楠徐木陈璟莉华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院麻醉科武汉431600 湖北省分子诊断重点实验室武汉431600

目的探究siRNA沉默微管乙酰化转移酶1(alpha tubulin acetyltransferase 1,α-TAT1)对肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS)中内皮细胞迁移行为的影响。方法通过在线数据库Tabula Muris分析肺组织各细胞亚群α-TAT1的表达。24只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组(Sham组,n=6)、胆管结扎组(HPS组,n=18)。造模后在第2、4周分别取材HPS组大鼠,通过免疫荧光共定位检测2周和4周HPS大鼠肺血管内皮细胞中α-TAT1表达水平变化。收集Sham和HPS大鼠血清处理人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) 12 h和24 h,之后进行小分子RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰实验,分为Sham血清+siRNA NC组、Sham血清+siRNA α-TAT1组、HPS血清+siRNA NC组、HPS血清+siRNA α-TAT1组。Western blot检测各组HUVECs中α-TAT1、Ace-α-tubulin表达水平变化。免疫荧光观察各组诺考达唑(10μmol/L)预处理后HUVECs中α-Tubulin微管聚合水平,评估微管的结构稳定性;细胞划痕实验联合细胞免疫荧光观察HUVECs的细胞迁移能力和高尔基体的定位。体外成血管实验检测HUVECs成血管能力。结果体内及体外实验表明HPS中肺血管内皮细胞α-TAT1表达显著增加(P<0.01)。siRNA α-TAT1干扰组中α-TAT1和Ace-α-tubulin表达量均显著下调,且微管稳定性减弱(P<0.01)。另外,siRNA α-TAT1干扰组中GM130标记的高尔基体在核周细胞突出段方向的分布比例降低,且迁移能力下降(P<0.01)。同时,成血管长度及网络水平显著减弱(P<0.01)。结论沉默α-TAT1可减弱HPS中内皮细胞迁移和成血管能力,其机制与减弱微管稳定性有关。

关键词：肝肺综合征内皮细胞病理性血管新生 α-TAT1 迁移极性

SIRT3激动剂厚朴酚通过抑制海马神经元铁死亡缓解小鼠术后认知功能障碍

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 827-835页

作者：黄涛韩甜甜许倩倩张振胡鹏超丁旭东罗辉宇曾炼湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院湖北武汉430000 华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科湖北武汉430000

目的:探究沉默信息调节因子3(SIRT3)激动剂厚朴酚(HKL)在小鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用及其可能机制。方法:将10月龄雄性C57/BL6小鼠随机分成对照(Con)组、手术(Sur)组和Sur+HKL组(n=10)。Sur+HKL组小鼠给予HKL腹腔注射预处理7 d,... 详细信息

目的:探究沉默信息调节因子3(SIRT3)激动剂厚朴酚(HKL)在小鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用及其可能机制。方法:将10月龄雄性C57/BL6小鼠随机分成对照(Con)组、手术(Sur)组和Sur+HKL组(n=10)。Sur+HKL组小鼠给予HKL腹腔注射预处理7 d,Sur和Sur+HKL组小鼠均采用胫骨骨折切开复位内固定术的方法建立POCD模型。使用旷场实验、新物体识别实验、Morris水迷宫实验和Y迷宫实验来检测小鼠的认知功能;尼氏染色评价小鼠海马和皮层神经元形态、结构和活力;Western blot检测小鼠海马谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLA7A11)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、SIRT3和核因子E2相关因子2(NRF2)蛋白的表达;免疫荧光染色测定GPX4表达水平。结果:与Con组比较,Sur组和Sur+HKL组小鼠在旷场实验中移动的总距离和中央区域探索时间差异无统计学意义(P>0.05);新物体识别实验和Y迷宫实验结果显示,Sur组小鼠识别指数和轮替次数较Con组显著降低(P<0.01),侧臂封锁再通后,小鼠进入新臂的距离百分比和次数百分比显著下降(P<0.01);水迷宫训练时Sur组小鼠潜伏期较Con组下降缓慢,测试时Sur组小鼠潜伏期、目的象限穿越次数及穿越时间百分比均显著低于Con组(P<0.01);与Sur组比较,Sur+HKL组上述指标均显著升高(P<0.01)。尼氏染色结果显示,Sur组小鼠海马CA1区和内侧前额叶皮层的神经元染色较浅,尼氏染色阳性神经元数量显著下降(P<0.01);HKL治疗后神经元活力明显增强。Western blot结果显示,与Con组比较,Sur组SIRT3、GPX4、SLC7A11和NRF2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),ACLS4蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与Sur组比较,Sur+HKL组上述结果被逆转,差异有统计学意义(P<0.05)。海马神经元的免疫荧光染色与Western blot结果一致,Sur组海马区神经元中GPX4的表达水平显著下降,HKL显著升高神经元GPX4的表达水平(P<0.01)。结论:SIRT3激动剂HKL缓解小鼠POCD,其作用机制可能是抑制了海马神经元铁死亡。

关键词：厚朴酚术后认知功能障碍铁死亡沉默信息调节因子3

miR-17通过调控自噬影响TGF-β1诱导的肺纤维化

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华中科技大学学报（医学版） 2024年第4期53卷 473-478页

作者：许美霞安宁张晓霞许涛武汉市第四医院重症医学科武汉430033 华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科武汉430022

目的探讨miR-17对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的体外肺纤维化细胞模型自噬和纤维化的影响机制。方法重组人TGF-β1蛋白诱导人胚肺成纤维细胞HFL1,构建肺纤维化细胞模型,CCK-8检测细胞活力,ELISA试剂盒检测细胞上清中羟脯氨酸(Hyp)含... 详细信息

目的探讨miR-17对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的体外肺纤维化细胞模型自噬和纤维化的影响机制。方法重组人TGF-β1蛋白诱导人胚肺成纤维细胞HFL1,构建肺纤维化细胞模型,CCK-8检测细胞活力,ELISA试剂盒检测细胞上清中羟脯氨酸(Hyp)含量,鉴定造模成功与否。将细胞分成对照组、模型组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、miR-17inhibitor组和miR-17inhibitor+3-MA组。CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测线粒体自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62和纤维化标志物α-SMA、CollagenⅠ蛋白的表达。结果TGF-β1诱导后HFL1细胞活力升高(P<0.01),细胞上清中Hyp含量升高(P<0.01),体外肺纤维化细胞模型构建成功。与对照组相比,模型组细胞活力显著升高(P<0.01),细胞凋亡率显著降低(P<0.01),细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著降低(P<0.01),p62、α-SMA和CollagenⅠ蛋白表达水平显著升高(均P<0.01);与模型组相比,miR-17inhibitor组细胞活力显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.01),p62、α-SMA和CollagenⅠ蛋白表达水平显著降低(均P<0.01);与3-MA组相比,miR-17inhibitor+3-MA组细胞活力显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.01),p62、α-SMA和CollagenⅠ蛋白表达水平显著降低(均P<0.01)。结论抑制miR-17可通过激活自噬抑制TGF-β1诱导的肺纤维化。

关键词： miR-17 肺纤维化自噬

超声引导下腰方肌阻滞与腹横肌平面阻滞对腹腔镜下胰腺癌术后镇痛效果比较

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武汉大学学报（医学版） 2024年第4期45卷 430-434页

作者：严净徐平平吴茜杨凯华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科湖北武汉430022

目的:比较超声引导下腰方肌(QL)阻滞与腹横肌平面(TAP)阻滞在腹腔镜下胰腺癌术后的镇痛效果。方法:选择2021年12月—2022年4月择期全麻下行腹腔镜下胰腺癌手术的患者40例,男15例,女25例,年龄18~70岁,美国麻醉医师协会(ASA)Ⅰ~Ⅲ级。按... 详细信息

目的:比较超声引导下腰方肌(QL)阻滞与腹横肌平面(TAP)阻滞在腹腔镜下胰腺癌术后的镇痛效果。方法:选择2021年12月—2022年4月择期全麻下行腹腔镜下胰腺癌手术的患者40例,男15例,女25例,年龄18~70岁,美国麻醉医师协会(ASA)Ⅰ~Ⅲ级。按照随机数表字法分为QL阻滞组(Q组)和TAP阻滞组(T组),每组20例。患者术毕转运至麻醉后恢复室(PACU),Q组在PACU行双侧腰方肌阻滞,双侧分别推注0.25%罗哌卡因20 mL。T组在PACU行双侧腹横肌平面阻滞,双侧分别推注0.25%罗哌卡因20 mL。两组术后镇痛方案为舒芬太尼自控静脉镇痛(PCIA)。记录术后1、6、12、24、36、48 h的舒芬太尼累积用量、静息视觉模拟评分(VAS)、补救镇痛情况等;相关不良反应(恶心呕吐、呼吸抑制)以及阻滞相关并发症(穿刺部位感染、血肿、局麻药中毒)。结果:术后1、6、12、24、36、48 h,Q组静息VAS疼痛评分和舒芬太尼累积用量均明显低于T组(P<0.05),两组补救镇痛、术后不良反应发生率差异无统计学意义。两组未出现穿刺部位感染、血肿和局麻药中毒等并发症。结论:超声引导下腰方肌阻滞较腹横肌平面阻滞能为腹腔镜下胰腺癌术后提供更好的术后镇痛,降低疼痛评分,减少术后阿片类药物使用。

关键词：超声腰方肌阻滞腹横肌平面阻滞胰腺手术术后镇痛

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不同频次唤醒护理对全身麻醉胸科腔镜手术后患者苏醒效果的影响

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护理学杂志 2024年第7期39卷 61-64页

作者：代恒茂余遥刘尚昆杨莹邱晓慧华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科湖北武汉430030

目的探讨不同频次的唤醒护理对全身麻醉胸科腔镜手术后带气管导管转入麻醉后监测治疗室(PACU)患者苏醒效果的影响。方法采用便利抽样法,选取全身麻醉胸科腔镜手术后带气管导管转入气管导管观察的116例患者为研究对象,探讨不同频次(试验... 详细信息

目的探讨不同频次的唤醒护理对全身麻醉胸科腔镜手术后带气管导管转入麻醉后监测治疗室(PACU)患者苏醒效果的影响。方法采用便利抽样法,选取全身麻醉胸科腔镜手术后带气管导管转入气管导管观察的116例患者为研究对象,探讨不同频次(试验组A每5分钟、试验组B每10分钟、对照组等待患者自然苏醒)的唤醒护理对气管导管拔管时间、拔管后苏醒时间、总苏醒时间、拔管时呛咳反应、苏醒期躁动、拔管成功率、拔管后低氧血症和平均动脉压波动发生率的影响。结果气管导管拔管时间三组比较差异有统计学意义,试验组A和试验组B显著短于对照组(均P0.05)。拔管后苏醒时间三组比较差异有统计学意义,试验组A显著长于对照组(P0.05)。三组气管导管拔管成功率和拔管后低氧血症发生率比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。与对照组相比,试验组A和试验组B拔管时呛咳反应、苏醒期躁动程度和拔管后平均动脉压波动发生率明显降低(均P麻醉胸科腔镜手术后患者在气管导管机械通气时间,降低拔管时呛咳反应和苏醒期躁动严重度,有利于维持拔管时血流动力学稳定,提高苏醒质量。

关键词：胸科腔镜手术全身麻醉苏醒期麻醉后监测治疗室唤醒护理护理频次苏醒期躁动麻醉护理

脑电双频谱指数指导下瑞马唑仑联合舒芬太尼对女性患者全麻诱导气管插管应激反应的影响

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武汉大学学报（医学版） 2024年第8期45卷 958-962,984页

作者：刘国澜彭丹萍于俊相潘侠洪湖市中医医院麻醉科湖北洪湖433200 天津市静海区医院麻醉科天津静海301669 武汉大学人民医院麻醉科湖北武汉430060

目的:在目标脑电双频谱指数(BIS)指导下,观察瑞马唑仑联合舒芬太尼对女性患者全麻气管插管应激反应的影响。方法:纳入气管插管全麻下择期手术女性患者78例(年龄18~65岁,ASAⅠ~Ⅱ级,18 kg/m^(2)≤BMI≤30 kg/m^(2)),将其随机分为瑞马唑... 详细信息

目的:在目标脑电双频谱指数(BIS)指导下,观察瑞马唑仑联合舒芬太尼对女性患者全麻气管插管应激反应的影响。方法:纳入气管插管全麻下择期手术女性患者78例(年龄18~65岁,ASAⅠ~Ⅱ级,18 kg/m^(2)≤BMI≤30 kg/m^(2)),将其随机分为瑞马唑仑组和丙泊酚组,每组39例。患者入室后常规监测心率(HR)、血压(BP)和脉搏氧饱和度(SpO2),BIS监测患者镇静深度。使用瑞马唑仑和丙泊酚分别诱导两组患者,当两组患者在BIS值40~60时进行气管插管,记录两组患者麻醉诱导开始时(T0),气管插管时(T1),气管插管后1 min(T2),气管插管后5 min(T3)时的血流动力学、血糖变化及诱导时间、低血压、呼吸抑制等不良事件发生率。结果:瑞马唑仑组与丙泊酚组镇静成功率都是100%,但瑞马唑仑组的诱导时间较丙泊酚更长(P<0.05);诱导期间,瑞马唑仑组患者的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)及血糖在T1、T2时间点较丙泊酚组患者差异有统计学意义(P<0.05),低血压、呼吸抑制等不良事件发生率明显低于丙泊酚组(P<0.05)。结论:瑞马唑仑用于女性患者全麻诱导,血流动力学更加平稳,不良反应更少,安全性较高。

关键词：脑电双频谱指数瑞马唑仑丙泊酚麻醉诱导期应激反应气管导管

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槐杞黄颗粒通过调控AMPK/ACC通路影响IgA血管炎肾炎小鼠Th17细胞的分化

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 78-86页

作者：叶星兰李可盈李佳轩白娟许文成刘红薛雪湖北中医药大学中医学院武汉430061 湖北中医药大学附属湖北省中医院武汉430006 武汉市第一医院武汉430022

目的:观察槐杞黄颗粒对免疫球蛋白(Ig)A血管炎肾炎(IgAVN)小鼠的干预作用并探讨该方药的疗效机制。方法:SPF级昆明种雄性小鼠50只,随机分为正常组、IgAVN模型组、地塞米松组(2.5 mg·kg^(-1)·d^(-1))、槐杞黄低、高剂量组(4、8 g·kg^(... 详细信息

目的:观察槐杞黄颗粒对免疫球蛋白(Ig)A血管炎肾炎(IgAVN)小鼠的干预作用并探讨该方药的疗效机制。方法:SPF级昆明种雄性小鼠50只,随机分为正常组、IgAVN模型组、地塞米松组(2.5 mg·kg^(-1)·d^(-1))、槐杞黄低、高剂量组(4、8 g·kg^(-1)·d^(-1))。采用口服麦胶蛋白结合尾静脉注射印度墨水法建立小鼠模型。判断造模成功后依据分组灌胃给药4周麻醉处死小鼠。检测各组小鼠24 h尿蛋白定量、尿β2-微球蛋白、血清总蛋白、白蛋白、IgA等;流式测定脾脏单细胞悬液辅助性T细胞17(Th17)比例;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Th17细胞腺苷酸激活蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶α(p-AMPKα)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶1(p-ACC1)蛋白表达;观察脾脏与肾脏病理变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠24 h尿蛋白定量、尿β2-微球蛋白、总胆固醇(P<0.05)、血清白细胞介素-17(IL-17)、IgA及脾单细胞悬液Th17比例、脾组织IL-17表达显著升高(P<0.01);血清总蛋白、白蛋白、Th17细胞p-AMPKα/AMPKα与p-ACC1/ACC1表达显著下降(P<0.01)。与IgAVN模型组比较,第4周各治疗组24 h尿蛋白定量、尿β2-微球蛋白与血清IL-17、IgA水平及肾脏IgA沉积均显著降低(P<0.01),脾脏组织中Th17比例与IL-17表达明显降低(P<0.05,P<0.01);血清白蛋白水平明显上升(P<0.05)。与IgAVN模型组比较,地塞米松组与槐杞黄高剂量组血清总蛋白显著上升(P<0.01)、Th17细胞p-AMPKα/AMPKα与p-ACC1/ACC1表达明显升高(P<0.05,P<0.01);槐杞黄高剂量组总胆固醇水平明显下降(P<0.05)。各治疗组脾脏与肾脏病理变化均有不同程度改善。结论:槐杞黄颗粒可能通过调控AMPK/ACC通路影响Th17细胞分化,纠正免疫炎症紊乱从而发挥治疗IgAVN的效应。

关键词：槐杞黄颗粒免疫球蛋白(Ig)A血管炎肾炎腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK) 乙酰辅酶A羧化酶(ACC) 辅助性T细胞17(Th17)

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中西医结合病房患者入院护理评估单的研制及信效度检验

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中华护理杂志 2024年第7期59卷 802-807页

作者：周樊华甘霖梅艳丽杜芬严冶熊莉娟华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科武汉市430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院护理部武汉市430022

目的设计中西医结合病房患者入院护理评估单并检验其信效度。方法在文献研究的基础上,以中医学的四诊“望、闻、问、切”为基础框架,体质判别为评估结局,融入患者入院一般护理评估要点,设计中西医结合病房患者入院护理评估单初稿,采用... 详细信息

目的设计中西医结合病房患者入院护理评估单并检验其信效度。方法在文献研究的基础上,以中医学的四诊“望、闻、问、切”为基础框架,体质判别为评估结局,融入患者入院一般护理评估要点,设计中西医结合病房患者入院护理评估单初稿,采用德尔菲法对评估单初稿进行函询,修改补充后,于2022年4月选取湖北省某三级甲等综合医院中西医结合科3名临床护理人员对160例入院患者进行评估,采用Fleiss’Kappa系数和内容效度系数对评估单进行信效度检验。结果共开展2轮专家函询,问卷回收率分别为95.45%、100%。专家权威系数为0.931、0.957,肯德尔和谐系数为0.101、0.106(P<0.01)。第2轮函询专家条目重要性评分为4.13~4.82分,变异系数为0.07~0.19。最终确定的中西医结合病房患者入院护理评估单包含一般人口学资料、四诊评估及体质判别、护理风险评估3个部分,共32项评估内容。评估单的Fleiss’Kappa系数为0.602(P<0.001),条目水平内容效度指数为0.857~1.000,量表水平内容效度指数为0.920。结论编制的中西医结合病房患者入院护理评估单具有良好的信效度,能体现中医护理的内涵,适用于中西医结合病房患者的入院护理评估。

关键词：中西医结合住院患者入院护理评估单德尔菲技术信度效度

翻转课堂结合PBL用于围术期床旁超声心动图规范化培训的效果

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中华麻醉学杂志 2024年第5期44卷 615-618页

作者：郭小密赵岩张丽王静谢明星孙振兴华中科技大学同济医学院附属协和医院超声医学科武汉430022 武汉亚心总医院超声科武汉430056 华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科武汉430022

目的评价翻转课堂结合基于问题教学(PBL)用于围术期床旁超声心动图规范化培训的效果。方法选取2021年1月至2022年6月在华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科轮转规培二年级学生64名,性别不限,采用随机数字表法分为2组(n=32):对照... 详细信息

目的评价翻转课堂结合基于问题教学(PBL)用于围术期床旁超声心动图规范化培训的效果。方法选取2021年1月至2022年6月在华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科轮转规培二年级学生64名,性别不限,采用随机数字表法分为2组(n=32):对照组采用传统教学模式,试验组采用翻转课堂结合PBL模式。在为期3个月的床旁超声心动图标准切面及血流动力学评价教学结束后,比较2组超声心动图理论综合成绩和临床实践成绩(≥80分为优良),并通过发放问卷对学生的自主学习能力和主动性、学习兴趣、专业知识掌握效率、对带教工作满意度、沟通协作能力及临床思维能力进行调查。结果与对照组相比,试验组学生超声心动图理论综合成绩[(87±8)分vs(80±8)分]和临床实践成绩[(86±8)分vs(78±8)分]明显升高,超声心动图理论综合成绩优良率(88%vs 47%)和临床实践成绩优良率(84%vs 50%)明显升高(P<0.05或0.01)。共发放64份调查问卷,收回64份,回收率为100%。试验组学生超声心动图自学能力和主动性增强(94%vs 69%)、学习兴趣增强(91%vs 66%)、专业知识掌握效率提高(97%vs 75%)、对带教工作满意(94%vs 62%)、沟通协作能力增强(84%vs 62%)及临床思维能力增强(88%vs 59%)等方面明显优于对照组(P<0.05)。结论翻转课堂结合PBL用于围术期床旁超声心动图规范化培训的效果优于传统教学。

关键词：超声心动描记术围手术期教学方法基于问题教学翻转课堂