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中国民间疗法 2025年第01期 22-25页

作者：彭应宁彭应涛湖北省应城市人民医院湖北省应城市中医医院

该文对彭慕斌主任医师的接诊经验予以归纳与总结，内容包括秉承大医精神、问诊注重技巧、运用形象生动的比喻、重视医嘱作用、妥善保存病历档案、接诊区分轻重缓急、充分保护患者隐私、编写健康教育处方、坚持开展后期随访工作等，旨在... 详细信息

该文对彭慕斌主任医师的接诊经验予以归纳与总结，内容包括秉承大医精神、问诊注重技巧、运用形象生动的比喻、重视医嘱作用、妥善保存病历档案、接诊区分轻重缓急、充分保护患者隐私、编写健康教育处方、坚持开展后期随访工作等，旨在说明接诊方法的重要性。

关键词：接诊方法接诊技巧彭慕斌

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肠道菌群与骨质疏松性骨折

中国组织工程研究 2025年第6期29卷 1296-1304页

作者：赵文生李孝林彭昌华邓佳盛浩陈洪卫张朝驹何川湖北中医药大学湖北省武汉市430061 长江大学湖北省荆州市434023 湖北中医药大学附属荆州市中医医院湖北省荆州市434000

背景:骨质疏松性骨折是骨质疏松症最严重的并发症,既往的研究已经证实了肠道菌群对骨骼组织具有调节作用,肠道菌群与骨质疏松性骨折有着重要关系,但是二者之间的因果关系尚不清楚。目的:使用孟德尔随机化(MR)方法探索肠道菌群与骨质疏... 详细信息

背景:骨质疏松性骨折是骨质疏松症最严重的并发症,既往的研究已经证实了肠道菌群对骨骼组织具有调节作用,肠道菌群与骨质疏松性骨折有着重要关系,但是二者之间的因果关系尚不清楚。目的:使用孟德尔随机化(MR)方法探索肠道菌群与骨质疏松性骨折之间的因果关系。方法:从IEU Open GWAS数据库和芬兰数据库R9中分别获得了肠道菌群和骨质疏松性骨折的GWAS数据集,以肠道菌群作为暴露因素,骨质疏松性骨折作为结局变量,采用随机效应逆方差加权法、MR-Egger回归、加权中位数法、简单模型法以及加权模型法进行孟德尔随机化分析来评估肠道菌群与骨质疏松性骨折之间是否存在因果关系,通过敏感性分析来检验结果的可靠性和稳健性,并进行反向孟德尔随机化分析来进一步验证正向孟德尔随机化分析中确定的因果关系。结果与结论:①此孟德尔随机化分析结果表明,肠道菌群与骨质疏松性骨折之间存在因果关系。放线菌目(OR=1.562,95%CI:1.027-2.375,P=0.037)、放线菌科(OR=1.561,95%CI:1.027-2.374,P=0.037)、放线菌属(OR=1.544,95%CI:1.130-2.110,P=0.006)、丁酸球菌属(OR=1.781,95%CI:1.194-2.657,P=0.005)、粪球菌属-2(OR=1.550,95%CI:1.068-2.251,P=0.021)、Family ⅩⅢ UCG-001属(OR=1.473,95%CI:1.001-2.168,P=0.049)、产甲烷短杆菌属(OR=1.274,95%CI:1.001-1.621,P=0.049)、罗氏菌属(OR=1.429,95%CI:1.015-2.013,P=0.041)的丰度升高,会增加患者骨质疏松性骨折的风险;②拟杆菌纲(OR=0.660,95%CI:0.455-0.959,P=0.029)、拟杆菌目(OR=0.660,95%CI:0.455-0.959,P=0.029)、克里斯滕森氏菌科(OR=0.725,95%CI:0.529-0.995,P=0.047)、瘤胃球菌科(OR=0.643,95%CI:0.443-0.933,P=0.020)、肠杆菌属(OR=0.558,95%CI:0.395-0.788,P=0.001)、直肠真杆菌属(OR=0.631,95%CI:0.435-0.916,P=0.016)、毛螺菌科-UCG008(OR=0.738,95%CI:0.546-0.998,P=0.048)、瘤胃梭菌属-9(OR=0.492,95%CI:0.324-0.746,P=0.001)的丰度升高,会降低患者骨质疏松性骨折的风险。③文章通过孟德尔随机化方法发现了16种与骨质疏松性骨折相关的肠道菌群,即以肠道菌群为暴露因素,骨质疏松性骨折为结局变量,8种肠道菌群与骨质疏松性骨折呈正向因果关联,另外8种肠道菌群与骨质疏松性骨折呈负向因果关联。④此研究结果不仅为临床上骨质疏松性骨折的早期预测及潜在治疗靶点确定了新的生物标志物,还为骨组织工程中研究通过肠道菌群改善骨质疏松性骨折的发生与预后提供了实验基础和理论依据。

关键词：孟德尔随机化肠道菌群骨质疏松性骨折因果关系遗传学全基因组关联研究单核苷酸多态性工具变量风险因素

KRT18与mRNA及长链非编码RNA互作调控椎间盘髓核细胞损伤的机制

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 312-321页

作者：刘钟元李扬张志文湖北中医药大学针灸骨伤学院湖北省武汉市430061 湖北中医药大学附属医院、湖北省中医院、湖北省中医药研究院湖北省武汉市430061

背景:椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用,其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关,但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的:探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓... 详细信息

背景:椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用,其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关,但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的:探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓核细胞的影响及机制。方法:对因腰部骨折或椎间盘退行性病变而接受椎间融合术的患者进行人体髓核组织取样获得正常髓核细胞和退变髓核细胞,并进行iRIP-seq、功能富集分析以及DNA微阵列分析,随后根据分析结果在髓核细胞中敲低KRT18,通过蛋白免疫印迹及qRt-PCR在蛋白和RNA水平检测相关基因水平的表达。结果与结论:通过iRIP-seq分析发现GUAAUC和AGCCUC序列中存在大量的KRT18结合位点,表明KRT18可参与调控RNA的转录、翻译、稳定性或在细胞信号传导途径中发挥作用。其能够与成熟的mRNA稳定结合,其中表达较高的基因包括CRLF1及IGFBP4等,同时与其结合的长链非编码RNA的峰值基因包括SNHG25、SNHG12、NEAT1、USP32、EIF4A2和CDH4,这些基因多涉及细胞凋亡、炎症等多种生物过程,并且能介导细胞外基质代谢的相关通路,KRT18能够调控它们的稳定性、转运、翻译、剪接等多个方面的功能,进而影响基因的表达和细胞功能。实验结果验证了在髓核细胞中敲低KRT18,细胞外基质代谢水平被抑制出现失衡,导致体外椎间盘退变。该研究首次从KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合的角度探讨其调控机制,并推测了KRT18在椎间盘退变发病机制中的潜在功能,为今后KRT18关键功能的研究奠定了基础。

关键词：椎间盘退行性变 RNA结合蛋白 KRT18 iRIP-seq mRNA 长链非编码RNA

开塞通联合阿司匹林对缺血性中风患者神经功能及脑血流灌注参数的影响

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中国药业 2025年第1期34卷 97-100页

作者：何泉余晖湖北省咸宁市中医医院湖北咸宁437100

目的探讨开塞通胶囊联合阿司匹林治疗缺血性中风(IS)的临床疗效,以及对患者神经功能及脑血流灌注参数的影响。方法选取医院2022年1月至2023年1月收治的IS患者140例,按随机数字表法分为联合组和对照组,各70例。两组患者均予常规疗法联合... 详细信息

目的探讨开塞通胶囊联合阿司匹林治疗缺血性中风(IS)的临床疗效,以及对患者神经功能及脑血流灌注参数的影响。方法选取医院2022年1月至2023年1月收治的IS患者140例,按随机数字表法分为联合组和对照组,各70例。两组患者均予常规疗法联合阿司匹林治疗,联合组加用开塞通,均治疗1个月。结果联合组总有效率为91.43%,显著高于对照组的71.43%(P<0.05)。治疗后,两组患者的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分均显著降低(P<0.05),日常生活活动能力量表(BI)评分均显著升高(P<0.05),且联合组均显著优于对照组(P<0.05);两组患者的脑血流量、脑血容量均显著升高(P<0.05),平均通过时间、达峰时间均显著缩短(P<0.05),且联合组均显著优于对照组(P<0.05);两组患者的记忆商数评分均显著升高(P<0.05),可溶性细胞间黏附分子-1和S100β水平均显著降低(P<0.05),且联合组均显著优于对照组(P<0.05)。联合组和对照组不良反应发生率相当(1.43%比4.29%,P=0.310)。结论开塞通联合阿司匹林治疗IS的临床疗效良好,可改善患者的神经功能,提高灌注参数和生活质量,且安全性良好。

关键词：缺血性中风开塞通阿司匹林神经功能脑血流灌注参数临床疗效

神经肌肉训练对膝骨关节炎患者疼痛和功能影响的Meta分析

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中国组织工程研究 2025年第9期29卷 1945-1952页

作者：孙韫頔程露露万海丽常赢熊雯娟夏渊武汉体育学院运动医学院湖北省武汉市430079 安徽中医药大学安徽省合肥市230012 湖北省直属机关医院湖北省武汉市430000

目的:神经肌肉训练是近年来较新的一种综合康复治疗方法,对膝骨关节炎的疗效尚存在争议。此次研究通过系统Meta分析评价神经肌肉训练治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法:全面检索中国知网、维普、万方、中国生物医学文献数据库、PubMed、We... 详细信息

目的:神经肌肉训练是近年来较新的一种综合康复治疗方法,对膝骨关节炎的疗效尚存在争议。此次研究通过系统Meta分析评价神经肌肉训练治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法:全面检索中国知网、维普、万方、中国生物医学文献数据库、PubMed、Web of Science、Cochrane Library、EBSCO和Embase文献数据库中有关神经肌肉训练治疗膝骨关节炎的临床随机对照试验,时间从各数据库建库至2023年10月,神经肌肉训练组(试验组)使用神经肌肉训练或以神经肌肉训练为主要干预方式;对照组为空白组或采用常规康复治疗。结局指标包括西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数评分(The Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index,WOMAC)、行走计时、膝关节稳定性、30 s内膝关节最大弯曲次数。采用Cochrane偏倚风险评估工具和物理治疗证据数据库量表确定纳入文献质量,使用RevMan5.4软件进行Meta分析。结果:共纳入11项临床随机对照试验,纳入样本量628例。Meta分析结果显示:①WOMAC疼痛评分试验组优于对照组(SMD=0.38,95%CI:0.08-0.69,P=0.01);②膝关节稳定性和30s内膝关节最大弯曲次数试验组均优于对照组(膝关节稳定性:SMD=0.57,95%CI:0.23-0.92,P=0.001;30 s内膝关节最大弯曲次数:SMD=0.35,95%CI:0.05-0.65,P=0.02);两组均可提高膝骨关节炎患者行走速度,改善行走能力,但差异无显著性意义(行走计时:SMD=-0.22,95%CI:-0.48-0.03,P=0.09);③WOMAC身体功能评分试验组优于对照组(SMD=-0.79,95%CI:-1.30至-0.28,P=0.002)。结论:神经肌肉训练可以有效改善膝骨关节炎患者的疼痛,增强膝关节稳定性,促进功能恢复,但仍需要更多高质量随机对照试验进一步研究证实。

关键词：膝骨关节炎疼痛功能神经肌肉训练随机对照试验 Meta分析

不同类型女性髌股关节疼痛综合征患者的下肢生物力学特征

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中国组织工程研究 2025年第21期29卷 4458-4468页

作者：董友清魏子轩吴海鸥陈瑞兄段鹏陈楠林熙凯湖北省石首市人民医院康复医学科湖北省石首市434400 武汉体育学院运动医学院湖北省武汉市430079 湖北省体育科学研究所湖北省武汉市430205 北京中医药大学深圳医院(龙岗)推拿科广东省深圳市518172

背景:目前国内外关于髌股关节疼痛综合征的运动学和动力学研究已经涉及到上下楼梯、行走等日常生活活动。但是不同距下关节状态的髌股关节疼痛综合征年轻女性患者的下肢生物力学特征尚未见报道。目的:探究不同距下关节功能状态的髌股关... 详细信息

背景:目前国内外关于髌股关节疼痛综合征的运动学和动力学研究已经涉及到上下楼梯、行走等日常生活活动。但是不同距下关节状态的髌股关节疼痛综合征年轻女性患者的下肢生物力学特征尚未见报道。目的:探究不同距下关节功能状态的髌股关节疼痛综合征年轻女性患者的下肢生物力学特征,为临床治疗不同类型的髌股关节疼痛综合征提供理论支撑。方法:共纳入受试者33例,其中健康对照组(C组)10例,其余27例髌股关节疼痛综合征受试者根据足姿指数分组,距下关节正常组(A组,足姿指数0-6分)14例,距下关节异常组(B组,足姿指数7-12分)13例。采集各组受试者在正常速度下阶梯时的生物力学指标并进行对比,运动学指标选取初始触地时刻与支撑期屈膝角度最大时刻的髋膝三维关节角度与踝矢状面关节角度;动力学指标选取支撑期屈膝角度最大时刻的髋膝三维关节力矩与踝矢状面关节力矩;表面肌电指标选取股内侧肌、股外侧肌、股直肌、半腱半膜肌、股二头肌和臀中肌在预激活阶段和缓冲阶段的均方根振幅。结果与结论:(1)在初始触地时刻,A组相较于B组有更大的屈膝角度(P <0.05)、髋外旋角度(P <0.01)和更小的膝外旋角度(P <0.01);A组与C组相比有更大的屈膝角度和更小的屈髋角度(均为P<0.01);B组和C组相比有更大的膝外旋角度和更小的髋外旋角度、屈髋角度(均为P<0.01);(2)在屈膝角度最大时刻,A组相较于B组有更小的膝外翻角度(P<0.05)、膝外旋角度(P<0.05)和更大的屈膝角度(P<0.01);A组相较于C组有更小的膝外翻角度(P <0.05)、屈髋角度(P <0.01)和髋外旋角度(P <0.05);B组相较于C组有更小的屈膝角度、屈髋角度、髋外旋角度和更大的膝外旋角度(均为P <0.01);且A组相较于C组有更大的髋内旋力矩(P <0.05)和跖屈力矩(P <0.01);(3)在正常速度下阶梯缓冲阶段时,C组相较于A组有更大的股外侧肌(P <0.05)、股内侧肌(P <0.01)、臀中肌(P <0.01)和股二头肌(P <0.05)激活程度;C组相较于B组有更大的股内侧肌(P <0.01)、臀中肌(P <0.01)和股二头肌(P <0.05)激活程度;A组相较于B组(P <0.05)有更大的半腱半膜肌激活程度;(4)结果表明,髌股关节疼痛综合征年轻女性患者在下阶梯时,髋、膝关节缓冲机制更加僵硬,不足之处可能由踝关节缓冲来代偿;下肢肌肉激活程度低是导致年轻女性罹患髌股关节疼痛的因素;距下关节正常组的下肢生物力学特征异常可能是髋膝关节屈曲不足导致的;距下关节异常组的下肢生物力学特征异常可能是距下关节过度旋前造成的。

关键词：距下关节髌股关节疼痛综合征运动学动力学表面肌电日常生活活动女性

当归多糖作为潜在佐剂对细胞的免疫激活及机制研究

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药学学报 2025年

作者：何沅聪尤朋涛黄雅宁张剑锋苟君波王建湖北中医药大学药学院湖北中医药大学中药资源与中药化学湖北省重点实验室宣城市食品药品检验中心湖北时珍实验室

为了探讨当归多糖 (Angelica sinensis polysaccharide， ASP) 作为潜在疫苗佐剂对巨噬细胞RAW264.7免疫激活作用及其释放细胞因子的影响，并阐明其潜在的信号通路作用机制。采用细胞计数试剂 (cell counting kit-8， CCK-8) 法检测细... 详细信息

为了探讨当归多糖 (Angelica sinensis polysaccharide， ASP) 作为潜在疫苗佐剂对巨噬细胞RAW264.7免疫激活作用及其释放细胞因子的影响，并阐明其潜在的信号通路作用机制。采用细胞计数试剂 (cell counting kit-8， CCK-8) 法检测细胞活力，流式细胞术检测5个浓度梯度的ASP对RAW264.7细胞表面分子白细胞分化抗原 (cluster of differentiation， CD) 80、CD86和主要组织相容性复合物Ⅱ (major histocompatibility complex II， MHC Ⅱ) 表达的影响， ELISA法测定细胞上清液中白细胞介素-6 (interleukin-6， IL-6)、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α， TNF-α) 等细胞因子的含量; quantitative polymerase chain reaction (qPCR) 检测Toll样受体4 (Toll-like receptor 4， TLR4)、髓样分化因子88 (myeloid differentiation factor 88， MyD88)、TNF受体相关因子6 (TNF receptor associated factor 6， TRAF6)、核因子κB (nuclear factor kappa-B， NF-κB) 信号通路的mRNA表达水平， Western blot检测TRAF6、IκB激酶 (IκB kinase， IKK) 和p65蛋白磷酸化水平。结果显示，不同浓度的ASP对RAW264.7无细胞毒性。ASP均能浓度依赖性地促进RAW264.7细胞表面分子CD80、CD86和MHC Ⅱ的表达上调 (P < 0.05)。不同浓度的ASP组均使得IL-6和TNF-α等的分泌水平有显著的提升 (P < 0.05)，且在一定范围内存在量-效关系。qPCR结果显示，不同浓度的ASP均使得TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB的mRNA表达水平上调。不同浓度的ASP均能提高TRAF6、p-IKK和p-p65的表达水平。TLR4受体抑制剂TAK-242能显著降低ASP诱导的细胞因子分泌量 (P < 0.05)。本研究揭示了ASP可通过TLR4等信号通路显著增强了共刺激分子和细胞因子的表达，显示出作为疫苗佐剂的潜力。

关键词：当归多糖佐剂免疫活性 TLR4信号通路 RAW264.7细胞

基于孟德尔随机化探讨肠道菌群与失眠的因果关联研究

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中国全科医学 2025年第8期28卷 954-961页

作者：郭玉梦崔杨霖张宪忠山东中医药大学山东省日照市中医医院中医经典科

背景随着失眠的发病率逐渐升高，其严重影响患者的精神及工作状态。肠道菌群被认为是失眠的一个危险因素，但目前存在相关证据较为缺乏的问题，难以准确认识二者之间的关系。目的使用两样本孟德尔随机化作为研究方法，探索肠道菌群与... 详细信息

背景随着失眠的发病率逐渐升高，其严重影响患者的精神及工作状态。肠道菌群被认为是失眠的一个危险因素，但目前存在相关证据较为缺乏的问题，难以准确认识二者之间的关系。目的使用两样本孟德尔随机化作为研究方法，探索肠道菌群与失眠之间的因果关系。方法使用MiBioGen联盟进行的最大可用全基因组关联研究荟萃分析（n=18 340）中肠道菌群的汇总统计数据，根据预设的阈值提取与196种肠道微生物相对丰度显著相关的单核苷酸多态性（SNPs）作为工具变量（IVs）。失眠的汇总统计数据来自英国生物样本库（UK Biobank）(n=462 341)。采用逆方差加权法（IVW）、MR-Egger回归、加权中位数法（WME）、加权众数法（WM）等检测肠道菌群与失眠之间的因果关系，其中以IVW法为主，根据效应指标优势比（OR）和95%置信区间（CI）评估结果。结合敏感性分析、异质性检验、基因多效性检验和异常值检验（MR-PRESSO）等方法来验证结果的稳定性和可靠性。并对发现与失眠有因果关系的菌群进行反向孟德尔随机化分析。结果 IVW结果显示蔷薇菌属(OR=0.787,95%CI=0.671～0.923,PFDR=0.016)、丹毒杆菌属(OR=0.880,95%CI=0.794～0.976,PFDR=0.077)、副普雷沃菌属(OR=0.891,95%CI=0.801～0.991,PFDR=0.083)、瘤胃球菌属UCG014组(OR=0.818,95%CI=0.697～0.961,PFDR=0.072)、巴斯德菌科(OR=0.897,95%CI=0.814～0.988,PFDR=0.081)、巴斯德菌目(OR=0.897,95%CI=0.814～0.988,PFDR=0.094)和失眠有关，未发现IVs存在基因多效性或显著异质性。根据反向孟德尔随机化分析结果，失眠对肠道菌群无显著的因果影响。结论蔷薇菌属、丹毒杆菌属、副普雷沃菌属、瘤胃球菌属UCG014组、巴斯德菌科、巴斯德菌目6种肠道菌群丰度与失眠的发病风险呈负相关，即丰度降低会增加失眠的发病风险，为失眠的保护因素。

关键词：肠道菌群失眠孟德尔随机化因果关联

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不同内植物固定耻骨上下支骨折生物力学特征的比较

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中国组织工程研究 2025年第27期29卷 5757-5764页

作者：饶鑫蒋代翔鲁辉罗杨兴李盟刘定玺吴启梅刘融武汉科技大学附属普仁医院骨科湖北省武汉市430081 武汉科技大学医学院湖北省武汉市430065 武汉科技大学附属普仁医院创新与转化研究所湖北省武汉市430081 武汉科技大学机械工程学院湖北省武汉市430080 武汉刘三屋中医骨伤医院湖北省武汉市430200

背景:经皮逆向空心螺钉、微创经皮钢板广泛应用于单侧耻骨支骨折中,但存在误穿髋关节和损伤骨盆内侧滋养动脉等缺点。一种新型逆行耻骨上支髓内钉治疗骨盆前环骨折拥有透射次数少和手术时间短等优点,但目前缺乏上述3种内植物生物力学特... 详细信息

背景:经皮逆向空心螺钉、微创经皮钢板广泛应用于单侧耻骨支骨折中,但存在误穿髋关节和损伤骨盆内侧滋养动脉等缺点。一种新型逆行耻骨上支髓内钉治疗骨盆前环骨折拥有透射次数少和手术时间短等优点,但目前缺乏上述3种内植物生物力学特征的验证。目的:通过有限元分析方法,比较在不同工况下经皮逆向空心螺钉、微创经皮钢板和逆行耻骨上支髓内钉治疗耻骨上下支骨折的生物力学差异。方法:收集1名志愿者的骨盆CT数据,将数据导入mimics 20、Geomagic Wrap 2021、Soildworks 2019中,建成3种内固定治疗单侧耻骨支骨折的几何模型,分别为空心螺钉组、钢板组、髓内钉组。分别将上述模型导入Ansys 2022软件设置垂直工况、开书样工况、剪切工况进行前处理和计算,比较分析内植物的力学稳定性。结果与结论:①在垂直工况下,空心螺钉治疗单侧耻骨骨折的生物力学稳定性较钢板和髓内钉更为优秀,其内植物应力峰值最小,其余两组对比空心螺钉组峰值增加4倍以上;②在开书样工况下,钢板治疗单侧耻骨骨折有更好的生物力学稳定性,钢板组降低耻骨上支断端应力有较好表现,其他两组的应力较钢板组增加5倍以上;③在剪切工况下,髓内钉治疗单侧耻骨骨折表现出良好的生物力学稳定性,其维持骨盆位移效果最佳,其他两组骨盆位移比髓内钉组增加了25%以上;④提示不同内植物在生物力学上存在差异性:逆行经皮空心螺钉在垂直工况下内植物应力峰值最小,微创经皮钢板在开书样工况下减小耻骨上支断端应力最优,逆行耻骨上支髓内钉在剪切工况下骨盆位移最小,可以将内植物生物力学差异性与患者临床实际情况相结合,选择最优内植物治疗方式。

关键词：耻骨上下支骨折经皮逆向空心螺钉微创经皮钢板逆行耻骨上支髓内钉有限元分析生物力学

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强骨康疏方通过RANKL/RANK/OPG信号通路调控破骨细胞分化而抑制类风湿关节炎骨破坏

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中国病理生理杂志 2025年

作者：江露张宗星李玮怡刘道忠包卓玛聂青云袁林湖北民族大学风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室湖北民族大学医学部石柱土家族自治县中医院湖北省肾脏病临床医学研究中心

目的：基于网络药理学及分子对接技术探讨强骨康疏方（Qianggu-Kangshu formula, QGKSF）治疗类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）骨破坏的作用机制并利用细胞实验进行验证。方法：通过TCMSP数据库及文献检索获取QGKSF的主要活性... 详细信息

目的：基于网络药理学及分子对接技术探讨强骨康疏方（Qianggu-Kangshu formula, QGKSF）治疗类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）骨破坏的作用机制并利用细胞实验进行验证。方法：通过TCMSP数据库及文献检索获取QGKSF的主要活性成分及潜在靶点；使用OMIM数据库和GeneCards数据库检索与RA骨破坏相关的靶点，利用Venny 2.1. 0筛选QGKSF抗RA骨破坏的靶点和靶点数量；通过STRING数据库构建潜在作用靶点的蛋白质-蛋白质相互作用网络，并利用Cytoscape软件进行拓扑分析筛选核心靶点；通过Metascape系统将筛选的QGKSF抗RA骨破坏的靶点进行进行京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）和基因本体（Gene Ontology, GO）富集分析；使用AutoDock和PyMOL软件对药物的核心成分与核心蛋白进行分子对接验证。体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞，使用CCK-8法检测细胞活力；抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrateresistant acid phosphatase, TRAP）染色观察各组TRAP阳性多核细胞的数量；测定TRAP酶活性以反映细胞酶活性；鬼笔环肽染色检测F-肌动蛋白环形成情况；Western blot检测活化T细胞核因子1(nuclear factor of activated T cells1, NFATc1)、TRAP、组织蛋白酶K(cathepsin K, CTSK)、c-Fos、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9,MMP9)、骨保护素（osteoprotegerin, OPG）、核因子κB受体活化因子（receptor activator of nuclear factorκB, RANK）、RANK配体（RANK ligand, RANKL）和磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B, p-AKT)蛋白水平。结果：从QGKSF中共筛选出136种有效活性成分及126个有效成分靶点；QGKSF抗RA骨破坏的靶点有207个，其中175个核心靶点。GO富集得到199条通路，筛选出与破骨细胞相关的通路共20条，主要有磷脂酰肌醇3-激酶/AKT信号通路和破骨细胞分化等。TRAP染色、酶活性测定及鬼笔环肽染色结果显示，与model组相比，QGKSF和氨甲蝶呤（methotrexate, MTX）组的阳性细胞形成减少，酶活性降低，F-肌动蛋白环形成减少；Western blot结果显示，与model组相比，QGKSF和MTX组的NFATc1、TRAP、CTSK、c-Fos、MMP9、p-AKT、RANK和RANKL蛋白水平显著降低（P<0.05）,OPG蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。结论：QGKSF可抑制RANKL诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞分化，其机制可能是通过RANKL/RANK/OPG信号通路的调控作用而抑制破骨细胞过度分化，从而起到减轻RA骨破坏的作用。

关键词：强骨康疏方类风湿关节炎破骨细胞 RANKL/RANK/OPG信号通路