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乙型肝炎病毒RNA的转录后调控机制及抗病毒策略

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中华肝脏病杂志 2024年第5期32卷 474-480页

作者：李德瑶陆丹娟曲晨箫张婷刘佳鲁凤民陈香梅北京大学基础医学院病原生物学系暨感染病研究中心北京100191 北京大学人民医院肝病研究所北京100044

慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球持续关注的重大公共健康问题之一。由于对HBV生命周期的认识还不够充分,目前尚缺乏有效治愈慢性乙型肝炎的药物。在HBV复制过程中,共价闭合环状DNA作为病毒复制的模板,可转录产生长度为3.5、2.4、2.1 k... 详细信息

慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球持续关注的重大公共健康问题之一。由于对HBV生命周期的认识还不够充分,目前尚缺乏有效治愈慢性乙型肝炎的药物。在HBV复制过程中,共价闭合环状DNA作为病毒复制的模板,可转录产生长度为3.5、2.4、2.1 kb以及0.7 kb的5种病毒RNA,分别翻译产生HBeAg、core蛋白、聚合酶(P)蛋白、HBsAg和HBx蛋白。其中,3.5 kb的前基因组RNA(pgRNA)也是病毒逆转录的模板,P蛋白可识别并结合pgRNA上的衣壳组装信号,启动衣壳组装和逆转录。近年来研究发现,HBV RNA的剪接、核输出、稳定性、翻译以及pgRNA衣壳化等过程均受到宿主细胞内的转录后调控网络调控,并依赖HBV RNA结构中独特的转录后调节元件。现对HBV RNA的转录后调控机制及其在HBV抗病毒治疗药物研究中的应用进行综述,以期为靶向HBV RNA的新药研发提供新思路。

关键词：慢性乙型肝炎乙型肝炎病毒转录后调控抗病毒治疗

鲁氏接合酵母对高盐和高温胁迫响应的差异性与共性分析

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食品科学 2024年第2期45卷 79-88页

作者：刘梦奇闫珍珍胡娜陈雄李欣湖北工业大学生物工程与食品学院发酵工程教育部重点实验室湖北省工业微生物重点实验室湖北省工业发酵协同创新中心湖北武汉430068

针对高温(40℃)和高盐(18%NaCl)逆境设计了最低营养需求全合成培养基,分析了鲁氏接合酵母(Zygosaccharomyces rouxii)在长期逆境下生长的营养需求差异,重点解析了酵母细胞从生长适应期到对数生长初期阶段有机酸、氨基酸和糖类物质的代... 详细信息

针对高温(40℃)和高盐(18%NaCl)逆境设计了最低营养需求全合成培养基,分析了鲁氏接合酵母(Zygosaccharomyces rouxii)在长期逆境下生长的营养需求差异,重点解析了酵母细胞从生长适应期到对数生长初期阶段有机酸、氨基酸和糖类物质的代谢及基因表达差异。研究结果显示,遭遇高盐压力的鲁氏接合酵母细胞更需要外源氨基酸,而补充维生素和氨基酸有助于缓解酵母细胞的高温压力。鲁氏接合酵母针对高盐和高温逆境采用了差异明显的有机酸、氨基酸和糖代谢策略。MSN4(逆境转录子基因)和HOG1(高渗调控蛋白基因)响应高盐,而HSF1(热激调控蛋白基因)和SOD1(超氧化物歧化酶基因)对高温响应。本研究加深了对耐盐鲁氏接合酵母耐温机制的理解,有助于双抗新能力酿造酵母菌株的研制。

关键词：鲁氏接合酵母高盐逆境高温逆境全合成培养基营养需求代谢差异基因表达

鼠伤寒沙门菌效应因子SteA蛋白的表达纯化与晶体培养

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中国病原生物学杂志 2024年第4期19卷 424-429,435页

作者：范丙乾刘晴刘瑞瑞王玉珍李冰清山东第一医科大学(山东省医学科学院)临床与基础医学院(基础医学研究所)病原生物学系山东济南250000

目的对鼠伤寒沙门菌效应蛋白SteA进行原核表达与纯化,以期获得高质量蛋白和晶体,为SteA的活性检测及结构解析奠定基础。方法利用生物信息学分析方法,对SteA的氨基酸及核苷酸序列进行分析,了解蛋白性状与序列保守性;使用基因工程方法,将s... 详细信息

目的对鼠伤寒沙门菌效应蛋白SteA进行原核表达与纯化,以期获得高质量蛋白和晶体,为SteA的活性检测及结构解析奠定基础。方法利用生物信息学分析方法,对SteA的氨基酸及核苷酸序列进行分析,了解蛋白性状与序列保守性;使用基因工程方法,将steA基因克隆到原核表达载体pGLO1上;使用大肠埃希菌BL21(DE3)进行SteA蛋白的外源表达;使用镍离子亲和层析,离子交换层析,凝胶过滤层析的方法对SteA蛋白进行体外纯化;使用蛋白结晶试剂盒对提纯的SteA蛋白进行晶体普筛,摸索适合的晶体生长条件并进行优化,培养高质量单晶用于结构解析。结果克隆出SteA全长及SteA 35-173 aa片段基因,并构建了SteA35-173 aa C58S突变体。SteA全长和SteA 35-173 aa C58S蛋白在大肠埃希菌感受态细胞BL21中成功表达,获得了无聚集的SteA蛋白,浓度为7.6 mg/mL。发现在1.2 mol/L Sodium phosphate monobasic/0.8 mol/L Potassium phosphate dibasic;0.1 mol/L CAPS/Sodium hydroxide pH 10.5;0.2 mol/L Lithium sulfate条件下能够获得晶体,条件优化获得可用于数据收集的高质量单晶。结论鼠伤寒沙门菌效应蛋白SteA可在原核表达系统中稳定表达,且可溶性良好,Cys58对SteA二聚体的形成起到重要作用。SteA 35-173 C58S蛋白在磷酸盐和硫酸盐环境中易结晶。

关键词：鼠伤寒沙门菌 SteA 蛋白纯化晶体培养

人CSF3蛋白的原核表达和纯化及其亚细胞定位

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中国病原生物学杂志 2024年第3期19卷 285-290,296页

作者：张平李贺刘晓宇李冰清岳盈盈山东第一医科大学(山东省医学科学院)临床与基础医学院(基础医学研究所)病原生物学系山东济南250000

目的粒细胞集落刺激因子(CSF3)作为免疫调控中的重要细胞因子,在中性粒细胞增殖分化的调控方面发挥关键作用。然而,在病原菌感染中CSF3的调控机制仍不清楚。本研究旨在通过原核表达人CSF3,并观察其在HEK-293T细胞中的亚细胞定位,为重组C... 详细信息

目的粒细胞集落刺激因子(CSF3)作为免疫调控中的重要细胞因子,在中性粒细胞增殖分化的调控方面发挥关键作用。然而,在病原菌感染中CSF3的调控机制仍不清楚。本研究旨在通过原核表达人CSF3,并观察其在HEK-293T细胞中的亚细胞定位,为重组CSF3药物开发以及揭示其在病原菌感染和免疫调控中的作用机制奠定基础。方法基于人CSF3的生物信息学分析,分别通过QuikChange和基因克隆获得CSF3 pGlO1和CSF3-pmCherry两种重组质粒。前者在大肠埃希菌原核表达系统中表达,并通过镍离子亲和层析和凝胶过滤层析进行蛋白纯化。后者通过jet-PEI试剂转染到HEK-293T细胞中,48 h后通过荧光共聚焦显微镜观察,确定其亚细胞定位。结果在原核系统中成功表达人CSF3蛋白,其相对分子质量为18.8×10^(3)。该蛋白的溶解性良好,PP酶酶切后蛋白浓度较高,但蛋白性质相对不稳定,对pH值和温度敏感,容易发生聚集和降解。将荧光融合质粒转染到HEK-293T细胞中48 h后观察,人CSF3-pmCherry蛋白定位在细胞质内,呈现出特定的定位和分布模式。结论成功构建人CSF3原核表达系统,获得纯度较高的CSF3蛋白。通过荧光融合技术确定CSF3-pmCherry蛋白主要定位在HEK-293T细胞质。为重组CSF3药物的开发及其在病原菌感染和免疫调控中的作用机制研究奠定了基础。

关键词：粒细胞集落刺激因子原核表达蛋白纯化亚细胞定位感染免疫

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燕麦米酒发酵工艺优化及其抗氧化活性研究

中国酿造 2024年第2期43卷 167-173页

作者：杨州曹露露刘邱阳张增明董良君镇达湖北工业大学生物工程与食品学院发酵工程教育部重点实验室工业发酵省部共建协同创新中心工业微生物湖北省重点实验室湖北武汉430068 孝感亲亲生物科技有限公司湖北孝感432100

采用燕麦(Avena sativa L.)和糯米(Oryza sativa)为主要原料发酵制备燕麦米酒。为优化燕麦米酒发酵工艺,将燕麦粉液化后加入米酒发酵,同时以感官评分和酒精度为评价指标,通过单因素试验及响应面法优化燕麦米酒发酵条件,并对其品质指标... 详细信息

采用燕麦(Avena sativa L.)和糯米(Oryza sativa)为主要原料发酵制备燕麦米酒。为优化燕麦米酒发酵工艺,将燕麦粉液化后加入米酒发酵,同时以感官评分和酒精度为评价指标,通过单因素试验及响应面法优化燕麦米酒发酵条件,并对其品质指标及抗氧化活性进行分析。结果表明,与添加燕麦仁半固态发酵制备的米酒相比,燕麦粉液化后发酵制备的米酒出酒率提高40.6%。燕麦米酒最佳发酵条件为燕麦汁添加量21%,发酵时间4.5 d,酵母菌接种量0.15%,发酵温度31℃。在此优化条件下,燕麦米酒风味口感俱佳,具有独特的燕麦香味,感官评分为89分,酒精度为8.00%vol,总多酚含量为0.69 g/L,还原糖含量为37.40 g/L,总酸含量为5.92 g/L,非糖固形物含量为13.70 g/L,其各项理化指标均符合相关标准要求。抗氧化研究结果表明,燕麦米酒的1,1二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除率,铁离子还原能力(FRAP)分别为纯糯米酒的1.08倍、1.31倍、1.69倍,其抗氧化能力优于纯糯米酒。

关键词：燕麦糯米米酒发酵工艺优化理化指标抗氧化活性

水热-辐射联用技术制备普鲁士蓝/MPC/蚕丝布复合材料及其ROS清除性能研究

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化学与生物工程 2024年第10期41卷 58-63页

作者：唐冬旭刘坤付娌丽周士忠张洋林李月生湖北科技学院医学部药学院湖北咸宁437100 湖北科技学院辐射化学与功能材料湖北省重点实验室湖北咸宁437100 湖北科技学院核技术与化学生物学院湖北咸宁437100

以蚕丝布作为基底原料,通过水热法使普鲁士蓝纳米颗粒(PBNPs)在蚕丝布的表面生长,再通过辐射接枝法将2-甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱(MPC)接枝在蚕丝布上,制备了普鲁士蓝/MPC/蚕丝布复合材料(PMS),通过XRD、FTIR、TG、DTG、XPS等手段对PMS... 详细信息

以蚕丝布作为基底原料,通过水热法使普鲁士蓝纳米颗粒(PBNPs)在蚕丝布的表面生长,再通过辐射接枝法将2-甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱(MPC)接枝在蚕丝布上,制备了普鲁士蓝/MPC/蚕丝布复合材料(PMS),通过XRD、FTIR、TG、DTG、XPS等手段对PMS进行了表征,并探究了PMS的活性氧自由基(ROS)清除能力。结果表明,PBNPs成功在蚕丝布上原位生长,MPC成功接枝在蚕丝布上;PMS的结构稳定,具有良好的ROS清除能力,可以有效保护细胞免受ROS攻击。PMS有望成为一种性能优异、有前景的糖尿病伤口护理敷料。

关键词：普鲁士蓝辐射接枝 ROS清除糖尿病伤口

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水环境中藻类与细菌有益相互作用的研究进展与展望

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华中农业大学学报 2024年第4期43卷 41-50页

作者：武欣艳李鑫于洁赵娜张旭谢波华中师范大学生命科学学院/遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室武汉430070

藻类和细菌在生态系统中重要元素的生物地球化学循环、能量流动等过程中具有重要作用。一些细菌可以通过促进藻类生长、帮助藻类抵抗逆境胁迫等作用,与藻类发生有益相互作用,进而对两者的生存、竞争、生理功能方面均产生重要影响。本文... 详细信息

藻类和细菌在生态系统中重要元素的生物地球化学循环、能量流动等过程中具有重要作用。一些细菌可以通过促进藻类生长、帮助藻类抵抗逆境胁迫等作用,与藻类发生有益相互作用,进而对两者的生存、竞争、生理功能方面均产生重要影响。本文对近年来藻类和细菌有益相互作用的主要方式、微生物类群、分子机制,及其在环境污染处理、生物质能源和合成生物学等方面的应用进展进行综述,并对未来研究提出展望。这不仅对理解水体微生物的群落结构与功能、微生物种间关系的机制与效应具有重要作用,也将为维护生态系统的健康、挖掘和利用生物资源造福人类提供重要的科学依据。

关键词：藻类与细菌相互作用生长促进菌微生物群落抗逆

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乳酸菌消除不同特点酵母抽提物中酵母味分析

食品科学 2024年第2期45卷 64-71页

作者：仇帅利佳炜马春蕾李沛陈雄李欣湖北工业大学生物工程与食品学院工业发酵省部共建协同创新中心发酵工程教育部重点实验室湖北省工业微生物重点实验室湖北武汉430068 安琪酵母股份有限公司酵母功能湖北省重点实验室湖北宜昌443000

以风味物质和氨基酸为重点,对8种不同特征的酵母提取物(FG10、FM88、FM31、KU012、FIG12LS、F58、FIG03、KA02)进行基于乳酸乳球菌和乳酸链球菌混合生物转化体系(Lactococcus lactis and Streptococcus lactis biotransformation system,LSBT)去除酵母风味的研究,并对该微生物转化体系的适应性和广泛性进行评价。5种酵母抽提物经转化后不再具有酵母味,而且FG10和FM88还具有发酵酱风味。没有吲哚的产生是LSBT成功的关键之一。同时,转化后的酵母抽提物中乳酸质量浓度不应低于10.00 g/L。原材料的差异在LSBT中起着重要作用,特别是原料中天冬氨酸的缺乏和苏氨酸的过量很可能是LSBT转化不成功的原因。总体而言,LSBT适用于大多数型号酵母提取物,但对于某些特定型号的酵母提取物(如F58、FIG03和KA02),还需要探索其他微生物组合技术或发酵条件。

关键词：乳酸菌酵母抽提物适应性生物转化酵母味

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枸杞粉对白鲢鱼糜凝胶品质的影响

食品与发酵工业 2024年第2期50卷 168-176页

作者：郑赵敏徐巧玲郑洪梨刘俊辰施咏淇姚春霞肖春元汪兰湖北经济学院烹饪与营养学系湖北武汉430205 湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所湖北武汉430064

该研究以冷冻白鲢鱼糜为实验原料,向其中添加枸杞粉(wolfberry powder,WP),分析不同添加量[0.25%、0.5%、0.75%、1%、1.5%(质量分数)]的WP对白鲢鱼糜凝胶持水性、蒸煮损失率、白度值、水分分布、凝胶特性、微观结构、感官评价及气味特... 详细信息

该研究以冷冻白鲢鱼糜为实验原料,向其中添加枸杞粉(wolfberry powder,WP),分析不同添加量[0.25%、0.5%、0.75%、1%、1.5%(质量分数)]的WP对白鲢鱼糜凝胶持水性、蒸煮损失率、白度值、水分分布、凝胶特性、微观结构、感官评价及气味特征的影响。结果表明,随着WP含量的增加,鱼糜凝胶的持水性、硬度、咀嚼性和凝胶强度都表现出先增大后减小的趋势,当WP的添加量为0.5%时达到最大,分别为78.55%、(2716.77±75.76)g、(2185.15±32.46)g和1087 g·cm;而蒸煮损失率则表现出先减小后增大的趋势,在0.5%的添加量时,蒸煮损失率最小,为7.49%。在鱼糜中加入WP后,可以减少鱼糜凝胶中自由水的比例,增加不易流动水的比例,使鱼糜凝胶保留更多水分,且当WP在最适添加量0.5%时,鱼糜凝胶中只检测到结合水和不易流动水,未检测到自由水。适量WP的添加会增强鱼糜凝胶的网络结构,使其变得更加致密均匀。WP的添加会减小鱼糜凝胶的白度值和色泽评分,但在最适添加量0.5%时,其颜色总体可接受。此外,感官评价和电子鼻分析结果表明,当WP在最适添加量0.5%时,可以显著改善鱼糜凝胶的风味品质。研究结果可为生产高品质的鱼糜产品提供理论依据。

关键词：枸杞粉白鲢鱼糜持水性微观结构凝胶品质