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淫羊藿苷调控P53/SLC7A11/GPX4通路抑制睾丸细胞铁死亡改善少弱精子症小鼠生精功能

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：江晓翠萧闵刘祺赵敏吕银娟陈思易曹继刚湖北中医药大学中医药实验中心湖北时珍实验室湖北省中医院泌尿外科湖北中医药大学基础医学院

目的观察淫羊藿苷通过肿瘤抑制因子（P53）/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路改善小鼠少弱精子症的作用。方法将KM小鼠随机分为空白组、模型组、淫羊藿苷高、中、低（117.0、58.5、29.3 mg/kg）剂量组和... 详细信息

目的观察淫羊藿苷通过肿瘤抑制因子（P53）/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路改善小鼠少弱精子症的作用。方法将KM小鼠随机分为空白组、模型组、淫羊藿苷高、中、低（117.0、58.5、29.3 mg/kg）剂量组和左卡尼汀（400 mg/kg）组，每组10只。除空白组外，采用腺嘌呤（1.25 g/kg）灌胃14天构建少弱精子症模型后，给予相应剂量药物连续灌胃21 d。动物精子分析仪检测精子质量；ELISA检测血清睾酮（T）、雌二醇（E2）、促卵泡激素（FSH）水平；HE染色评估睾丸生精功能；普鲁士蓝染色法评估睾丸组织铁沉积；免疫组化法评估睾丸组织SLC7A11、GPX4蛋白表达量；生化法检测睾丸组织超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量；Western Blot及RTPCR检测睾丸组织P53、GPX4、SLC7A11通路蛋白及m RNA表达。结果模型组小鼠曲细精管分布疏松，生精细胞排列紊乱，管腔内仅见少量精子；各干预组干预后，睾丸形态明显改善，生精细胞不同程度增多，管腔内可见较多游离精子。与空白组比较，模型组小鼠精子密度和活动率、血清T、E2水平、睾丸生精功能总分（TMS）、睾丸组织SLC7A11、GPX4蛋白及m RNA表达、SOD活性降低（P<0.01），血清FSH水平、铁沉积阳性平均光密度（AOD）、睾丸组织MDA含量、P53蛋白及m RNA表达升高（P<0.01）。与模型组比较，干预组小鼠血清T水平、睾丸组织GPX4蛋白及m RNA表达、P53 mRNA表达、SOD活性升高，血清FSH水平降低（P<0.05,P<0.01）；除淫羊藿苷低剂量组外其他干预组小鼠精子密度和活动率、血清E2水平、TMS、睾丸组织SLC7A11蛋白及m RNA表达升高（P<0.05,P<0.01），铁沉积阳性AOD、睾丸组织P53蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）；淫羊藿高、中剂量组小鼠睾丸组织SLC7A11蛋白表达升高（P<0.05）；高剂量组及左卡尼汀组小鼠睾丸组织MDA含量降低（P<0.05）。结论淫羊藿苷改善少弱精子症小鼠睾丸生精功能的机制可能与调控P53/SLC7A11/GPX4通路抑制睾丸细胞铁死亡有关。

关键词：淫羊藿苷少弱精子症肿瘤抑制因子溶质载体家族7成员11 谷胱甘肽过氧化物酶4 铁死亡睾丸生精功能

双氢青蒿素通过促进骨髓间充质干细胞归巢治疗小鼠前列腺炎的研究

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中药药理与临床 2024年第6期40卷 45-50页

作者：郭阔周岩王军浩韩建鹏冯建勇王任陈文彬李永章河北省中医院泌尿外科石家庄050011

目的:探讨双氢青蒿素对非细菌性前列腺炎(Chronic non-bacterial prostatitis,CNP)的治疗效果及其对骨髓间充质干细胞(BMSCs)归巢的影响。方法:选取30只9~11 w龄雄性C57BL/6小鼠,随机抽取6只作为正常对照组,剩余24只注射消痔灵建立慢性... 详细信息

目的:探讨双氢青蒿素对非细菌性前列腺炎(Chronic non-bacterial prostatitis,CNP)的治疗效果及其对骨髓间充质干细胞(BMSCs)归巢的影响。方法:选取30只9~11 w龄雄性C57BL/6小鼠,随机抽取6只作为正常对照组,剩余24只注射消痔灵建立慢性非细菌性前列腺炎小鼠模型。将造模成功后的小鼠随机分为模型对照组、骨髓间充质干细胞组、双氢青蒿素5 mg/kg+骨髓间充质干细胞组和双氢青蒿素15 mg/kg+骨髓间充质干细胞组,每组6只。采用膀胱穿刺测压法行小鼠膀胱排尿功能检测;免疫荧光法检测红色荧光蛋白(RFP)阳性细胞在前列腺组织中的表达情况;HE染色检测小鼠前列腺组织病理状态;天狼星红染色检测小鼠前列腺组织胶原累积情况;ELISA法检测小鼠前列腺组织炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β和趋化因子COX2、CXCL9、CXCL10、CXCL11的含量。结果:膀胱穿刺测压法结果显示,与正常对照组相比,模型对照组和骨髓间充质干细胞组小鼠膀胱最大容量(v_(m))和最大排尿压力(P_(MV))降低,残余尿量(v_(R))增加,CNP小鼠膀胱组织大部分腺体炎细胞浸润,胶原积累增多,前列腺组织TNF-α、IL-1β、COX2、CXCL9、CXCL10、CXCL11含量明显增加(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,双氢青蒿素各组v_(m)和P_(MV)均增加,v_(R)减少;腺体炎细胞浸润和胶原积累减少;双氢青蒿素5 mg/kg+骨髓间充质干细胞组前列腺组织TNF-α、IL-1β、COX2、CXCL11的含量明显降低,双氢青蒿素15 mg/kg+骨髓间充质干细胞组前列腺组织TNF-α、IL-1β、COX2、CXCL9、CXCL10、CXCL11的含量明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:双氢青蒿素治疗可剂量依赖性地促进骨髓间充质干细胞的归巢,改善小鼠的CNP相关症状,降低CNP小鼠前列腺组织炎症水平和纤维组织增生,降低炎性因子和趋化因子的水平。双氢青蒿素和骨髓间充质干细胞联合治疗可极大改善CNP病情。

关键词：双氢青蒿素非细菌性前列腺炎骨髓间充质干细胞排尿功能

左归丸干预子代先天精亏进展及其“补益先天”探讨

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中国实验方剂学杂志 2024年第17期30卷 51-59页

作者：陈好远沈灿张泽权徐安莉张智华金晶赵敏湖北中医药大学中西医结合学院武汉430065 湖北中医药大学中医临床学院武汉430061 湖北中医药大学附属医院武汉430060 湖北省中医院武汉430060 湖北省中医药研究院武汉430060

左归丸作为中医经典方剂之一,具有峻补真阴、填精益髓的功效,在临床上广泛应用于治疗因先天精亏而导致的疾病。该文通过系统回顾“先天不足”等相关古籍,以及左归丸治疗先天不足的现代科研文献,从左归丸的组方原则和中医理论中先天不足... 详细信息

左归丸作为中医经典方剂之一,具有峻补真阴、填精益髓的功效,在临床上广泛应用于治疗因先天精亏而导致的疾病。该文通过系统回顾“先天不足”等相关古籍,以及左归丸治疗先天不足的现代科研文献,从左归丸的组方原则和中医理论中先天不足的概念出发,探讨了左归丸治疗先天不足的理论基础,并结合现代研究成果互参互证。古代医家早已发现父母之不足,可以导致子代形体发育异常、机体羸弱,张景岳将先天精气分为真阴、元阳,以“阴阳互济”组方左归丸,专补先天真阴。实验研究发现,左归丸能提高间隙连接蛋白43(Cx43)蛋白表达及间隙连接细胞间通讯(GJIC)功能,促进骨髓基质细胞(BMSCs)成骨分化成熟,改善先天精亏引起的骨发育异常;增强皮质颤蛋白(Reelin)表达和活性等改善脑发育异常;上调Cx43蛋白表达,干预磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路等改善生殖功能异常;促进T细胞发育成熟,激活胸腺内Wnt/β-链蛋白(β-catenin)信号通路等改善免疫功能异常;促进β-catenin的表达,抑制微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达改善皮肤功能异常。还能通过中医“精-神”之间的相关性,干预指导干细胞的分化。左归丸在部分儿科、男科、妇科疾病、老年疾病、内科疾病、骨科疾病和皮肤疾病的临床应用中均显示出显著的治疗效果。基于实验与临床应用的验证,文章进一步分析了“先天不足”的具体内涵,提出“先天不足”应细分精气阴阳,其中“先天精亏”属于真阴不足,可以导致子代的“肾精不足”,出现基于“肾藏精”的功能表达异常。药理学研究发现左归丸中菟丝子、枸杞子、牛膝含有槲皮素和山柰酚等有效成分,影响环加氧酶2(PTGS2)、白细胞介素-6(IL-6)、丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)、肿瘤坏死因子(TNF)、17号染色体基因(TP53)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、白蛋白(ALB)等靶点,在生殖系统发育、激素反应等方面发挥作用,左归丸在滋补肾中先天真阴方面相较于六味地黄丸具有独特的优势,能对“先天精亏”所致病证取得更好的临床疗效。通过该研究,期望对左归丸的功效有更全面、更深入的认识,对其临床应用有更深刻的体会,为先天不足、先天精亏的预防和治疗提供新的视角和方法,也希望为其在现代医疗保健,尤其是子代优育中的应用提供更多的科学依据和实践指导。

关键词：左归丸先天精亏肾藏精研究进展

仙甲汤抑制IL-6/JAK2/STAT3信号通路改善大鼠前列腺增生

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中国中西医结合杂志 2024年第7期44卷 856-863页

作者：刘祺萧闵江晓翠蔚文垚陈思易姜兴宇曹继刚湖北省中医院泌尿外科武汉430061 湖北中医药大学实验动物中心武汉430065 湖北中医药大学基础医学院武汉430065

目的基于白细胞介素(IL)-6介导的炎症反应,探讨仙甲汤改善大鼠前列腺增生(BPH)的作用及机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、仙甲汤高、中、低剂量组、非那雄胺组,每组6只。除空白组外,每组皮下注射丙酸睾酮(5 mg/kg)... 详细信息

目的基于白细胞介素(IL)-6介导的炎症反应,探讨仙甲汤改善大鼠前列腺增生(BPH)的作用及机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、仙甲汤高、中、低剂量组、非那雄胺组,每组6只。除空白组外,每组皮下注射丙酸睾酮(5 mg/kg)连续30天制备BPH模型。造模完成后,仙甲汤高、中、低剂量组分别给予仙甲汤27.18、13.59、6.80 g/kg灌胃,非那雄胺组给予非那雄胺0.45mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水,连续30天。测量大鼠体重、前列腺湿重及体积并计算前列腺指数;HE染色法观察前列腺组织病理学变化;甲苯胺蓝染色法观察前列腺组织肥大细胞并计数;ELISA法检测前列腺组织IL-6、IL-10含量;Western Blot检测前列腺组织酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)、磷酸化JAK2(p-JAK2)、转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)表达;Real-time PCR检测前列腺组织IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达。结果空白组大鼠前列腺组织中腺体饱满、规则;模型组大鼠前列腺腺体不规则,腺上皮细胞增生,基质内出现纤维组织增生,并有炎性细胞浸润;干预组出现不同程度好转。与空白组比较,模型组大鼠前列腺体积、湿重、指数、肥大细胞数、IL-6含量、p-STAT3、p-JAK2蛋白及IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达升高,前列腺组织IL-10含量降低(P<0.01)。与模型组比较,仙甲汤高、中剂量组和非那雄胺组前列腺体积、湿重、指数、肥大细胞数,IL-6含量、p-STAT3、p-JAK2蛋白及IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达降低,前列腺组织IL-10含量升高(P<0.05,P<0.01);仙甲汤低剂量组大鼠前列腺体积、湿重、STAT3 mRNA表达下降(P<0.05,P<0.01)。与非那雄胺组比较,仙甲汤高剂量组大鼠前列腺体积、湿重、指数、肥大细胞数、IL-6含量、p-STAT3、p-JAK2蛋白表达降低,前列腺组织IL-10含量升高(P<0.05,P<0.01)。结论仙甲汤能显著改善大鼠BPH,其机制可能与抑制IL-6/JAK2/STAT3通路过度激活有关。

关键词：仙甲汤前列腺增生炎症反应白细胞介素6 酪氨酸蛋白激酶2 转录激活因子3 中药复方

基于网络药理学分析益肾通络方治疗男性不育的潜在机制

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中华男科学杂志 2024年第1期30卷 51-59页

作者：郝高利孙自学樊立鹏徐磊秦国政南京中医药大学江苏南京210033 河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院男科河南郑州450002 云南中医药大学第一附属医院男科云南昆明650021 云南省中医医院男科云南昆明650021

目的:通过网络药理学技术分析益肾通络方治疗男性不育的主要有效活性成分及其潜在作用分子机制。方法:利用中药系统药理学(TCMSP)数据库与中药分子机制生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)数据库查询整理益肾通络方中每味药物的主要活性成... 详细信息

目的:通过网络药理学技术分析益肾通络方治疗男性不育的主要有效活性成分及其潜在作用分子机制。方法:利用中药系统药理学(TCMSP)数据库与中药分子机制生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)数据库查询整理益肾通络方中每味药物的主要活性成分与潜在靶点;使用Genecards数据库、DisGeNET、OMIM等数据库查找、筛选男性不育疾病相关靶点;将益肾通络方药物预测靶点与男性不育疾病靶点取交集,制作Venn图,借助Cytoscape软件构建交集靶点可视化联系,利用STRING平台构建蛋白互作网络(PPI),利用DAVID数据库与R语言“Cluster Profiler”软件包,进行GO功能分析与KEEG富集分析。结果:共筛选出益肾通络方主要有效活性成分99个,包含250个靶点;男性不育靶点4397个;通过Venny2.1.0取交集,共获得127个共同作用靶点;Go分析提示主要与RNA聚合酶启动子Ⅱ的转录调控、基因表达的调控、凋亡过程的调控、对雌激素的反应、细胞对缺氧的反应等生物过程和功能有关;KEGG分析提示主要显著富集于雌激素信号通路、细胞凋亡通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路等。结论:通过网络药理学研究,初步揭示了益肾通络方主要有效活性成分及其治疗男性不育的多靶点-多途径作用机制,为后期动物、细胞实验验证中药复方益肾通络方治疗男性不育的作用机制奠定了基础。

关键词：网络药理学益肾通络方男性不育作用机制

益肾疏肝起痿汤联合他达拉非治疗勃起功能障碍肝郁肾虚型的疗效及对血清性激素和血管内皮功能的影响

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辽宁中医杂志 2024年

作者：邵耀宁谢福贤周玉媛梁韶芳李羽萍袁绮琳东莞市中医院中心门诊男科

目的：探讨益肾疏肝起痿汤联合他达拉非治疗勃起功能障碍（ED）肝郁肾虚型的疗效及对血清性激素和血管内皮功能的影响。方法：ED患者80例随机分为对照组与观察组，每组40例。对照组予以他达拉非治疗，观察组予以益肾疏肝起痿汤联合他达... 详细信息

目的：探讨益肾疏肝起痿汤联合他达拉非治疗勃起功能障碍（ED）肝郁肾虚型的疗效及对血清性激素和血管内皮功能的影响。方法：ED患者80例随机分为对照组与观察组，每组40例。对照组予以他达拉非治疗，观察组予以益肾疏肝起痿汤联合他达拉非治疗，两组均连续治疗4周。于治疗前和治疗后，对患者进行勃起功能国际问卷-5（IIEF-5）评分、勃起质量量表（EQS）评分、勃起硬度（EHS）评分及中医证候积分，进行血清性激素[睾酮（T）、促黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）]和血管内皮功能指标[内皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO）]的测定，比较两组临床疗效和各项指标的差异，并观察不良反应。结果：观察组治疗总有效率为90.00%，与对照组（72.50%）相比显著增高（P中医证候积分更低（P0.05）。结论：益肾疏肝起痿汤联合他达拉非治疗ED肝郁肾虚型患者疗效显著，能够改善患者勃起功能，其机制可能与调节性激素和血管内皮功能有关。

关键词：勃起功能障碍肝郁肾虚益肾疏肝起痿汤他达拉非性激素血管内皮功能

二仙汤对少弱精子症小鼠Keap1/Nrf2/HO-1通路的影响

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中国医院药学杂志 2024年第6期44卷 641-647页

作者：江晓翠萧闵刘祺王望周艳艳吕银娟赵敏曹继刚湖北中医药大学实验动物中心湖北武汉430065 湖北省中医院泌尿外科湖北武汉430061 湖北中医药大学基础医学院湖北武汉430065 湖北时珍实验室湖北武汉430065

目的:探讨二仙汤对少弱精子症小鼠生精功能和精子质量的影响及其作用机制。方法:48只成年雄性SPF级KM小鼠,随机数字法分为空白组,模型组,二仙汤高、中、低剂量组和维生素E组,每组8只。除空白组外,其余各组以1.25g·kg^(–1)腺嘌呤灌胃... 详细信息

目的:探讨二仙汤对少弱精子症小鼠生精功能和精子质量的影响及其作用机制。方法:48只成年雄性SPF级KM小鼠,随机数字法分为空白组,模型组,二仙汤高、中、低剂量组和维生素E组,每组8只。除空白组外,其余各组以1.25g·kg^(–1)腺嘌呤灌胃构建少弱精子症小鼠模型。造模完成后,二仙汤高、中、低剂量组分别灌胃给予11.7,5.85,2.93 g·kg^(–1)二仙汤,维生素E组灌胃给予0.013 g·kg^(–1)维生素E,连续灌胃21 d后取材。测定睾丸、附睾指数;苏木素-伊红染色观察睾丸组织病理变化并对睾丸生精功能评分;全自动精子分析仪检测精子密度和活动率;生化试剂盒检测睾丸组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA);蛋白免疫印迹法检测睾丸组织Kelch-样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH related protein 1,Keap1)、核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应检测睾丸组织Keap1、Nrf2、HO-1 m RNA表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠附睾指数、睾丸指数,睾丸生精功能,精子密度及活动率,睾丸组织SOD、CAT活性,Nrf2、HO-1蛋白及其m RNA表达水平均降低,睾丸MDA含量、Keap1蛋白及其m RNA表达水平均升高(P<0.01);与模型组比较,二仙汤高、中剂量组小鼠上述指标均有显著逆转(P<0.05,P<0.01)。结论:二仙汤可能通过调控Keap1/Nrf2/HO-1信号通路减轻睾丸组织氧化应激损伤,提高生精功能,改善少弱精子症。

关键词：二仙汤少弱精子症氧化应激 Keap1/Nrf2/HO-1 精子质量

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原发性肾盂黏液腺癌混合印戒细胞癌1例报告

中华泌尿外科杂志 2024年第8期45卷 626-628页

作者：孙梦伟张庆玲吴岩橙王耀辉徐彦韩杰南京中医药大学附属医院江苏省中医院泌尿外科南京210029 南京中医药大学附属医院江苏省中医院病理科南京210029

肾盂黏液腺癌临床罕见。本文报道1例原发性肾盂黏液腺癌混合印戒细胞癌患者,因右侧腰痛入院,完善检查诊断为右肾结石伴积水和感染、右肾脓肿、右肾无功能。先后两次行右肾穿刺造瘘术,引流出黄绿色脓性液体,后行机器人辅助腹腔镜根治性... 详细信息

肾盂黏液腺癌临床罕见。本文报道1例原发性肾盂黏液腺癌混合印戒细胞癌患者,因右侧腰痛入院,完善检查诊断为右肾结石伴积水和感染、右肾脓肿、右肾无功能。先后两次行右肾穿刺造瘘术,引流出黄绿色脓性液体,后行机器人辅助腹腔镜根治性右肾切除术。术后病理诊断为右侧肾盂黏液腺癌(黏液腺癌混合印戒细胞癌)。术后11个月应用亚叶酸钠+奥沙利铂+5-氟尿嘧啶化疗12个周期,影像学检查无复发转移征象。

关键词：肾盂黏液腺癌印戒细胞癌病理化疗机器人手术

电针治疗妇科手术后恶心呕吐的有效性和安全性Meta分析

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临床麻醉学杂志 2024年第6期40卷 621-628页

作者：王彩红魏晓涛赵永强薛建军徐紫清崔一阳周婷甘肃中医药大学第一临床医学院兰州市730000 甘肃省中医院骨科甘肃省中医院泌尿外科甘肃省中医院麻醉疼痛医学中心甘肃省中西医结合麻醉临床医学研究中心

目的系统性评价电针(EA)治疗妇科手术后恶心呕吐(PONV)的有效性和安全性。方法计算机检索PubMed、Cochrane Library、Web of Science、Embase、中国知网(CNKI)、万方数据库、中国生物医学文献数据库(CBM)等,检索时间为建库至2022年12... 详细信息

目的系统性评价电针(EA)治疗妇科手术后恶心呕吐(PONV)的有效性和安全性。方法计算机检索PubMed、Cochrane Library、Web of Science、Embase、中国知网(CNKI)、万方数据库、中国生物医学文献数据库(CBM)等,检索时间为建库至2022年12月,纳入EA用于治疗妇科手术PONV的随机对照试验,采用RevMan5.3软件进行Meta分析。结果共纳入14篇文献,患者958例,其中EA组477例,对照组481例。与对照组比较,EA组术后0~48 h PONV发生率明显降低(RR=0.55,95%CI 0.47~0.65,P<0.001),术后48 h内PONV评分明显降低(MD=-0.40分,95%CI-0.65~-0.16分,P=0.001),术后补救性止吐发生率明显降低(RR=0.28,95%CI 0.16~0.51,P<0.001)。结论采用EA可明显降低妇科手术PONV发生率和补救性止吐的发生率。

关键词：电针妇科手术术后恶心呕吐 Meta分析