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黄连解毒汤对脂多糖诱导的小鼠急性肾损伤治疗作用及机制

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中草药 2024年第3期55卷 853-860页

作者：熊致立王瑞朱晓云付彤飞李成银吴俊松王林群沈银峰巴元明湖北中医药大学中医临床学院湖北武汉430000 湖北省中医院湖北中医药大学附属医院湖北省中医药研究院湖北武汉430000

目的研究黄连解毒汤对脂多糖诱导的小鼠急性肾损伤的作用及作用机制。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和黄连解毒汤低、中、高剂量(50、100、150 mg/kg)组,每组8只。连续ig黄连解毒汤3 d,末次给药2 h后,ip脂多糖(10 mg/kg)... 详细信息

目的研究黄连解毒汤对脂多糖诱导的小鼠急性肾损伤的作用及作用机制。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和黄连解毒汤低、中、高剂量(50、100、150 mg/kg)组,每组8只。连续ig黄连解毒汤3 d,末次给药2 h后,ip脂多糖(10 mg/kg)建立急性肾损伤模型。检测血清中肌酐和尿素氮水平;苏木素-伊红(HE)和高碘酸-席夫(PAS)染色检测肾组织病理变化;免疫组化法检测肾组织B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达;TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡情况;Western blotting检测肾组织磷酸酯酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、p-PI3K和p-Akt蛋白表达。结果黄连解毒汤明显降低急性肾损伤小鼠血清中尿素氮及肌酐水平(P<0.01、0.001),改善肾脏组织病理变化,抑制肾组织细胞凋亡,上调肾组织PI3K、Akt蛋白表达(P<0.05),下调PTEN、p-PI3K、p-Akt蛋白表达(P<0.05)。结论黄连解毒汤通过调控PTEN/PI3K/Akt通路抑制细胞凋亡,进而缓解急性肾损伤。

关键词：黄连解毒汤急性肾损伤炎症反应细胞凋亡磷酸酯酶与张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路咖啡酸小檗碱黄芩素

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补阳还五汤抗动脉粥样硬化的作用机制

时珍国医国药 2024年第1期35卷 93-96页

作者：谢谢丁砚兵陈小敏湖北中医药大学湖北武汉430065 湖北省中医药研究院湖北武汉430065

目的探讨补阳还五汤抗动脉粥样硬化作用机制。方法将60只健康家兔随机分为正常对照组、模型组、立普妥组[5mg/(kg·d)]、补阳还五汤低、中、高剂量组[0.89g/(kg·d)、1.78g/(kg·d)、3.56g/(kg·d)],每组10只。造模成功后连续给药干... 详细信息

目的探讨补阳还五汤抗动脉粥样硬化作用机制。方法将60只健康家兔随机分为正常对照组、模型组、立普妥组[5mg/(kg·d)]、补阳还五汤低、中、高剂量组[0.89g/(kg·d)、1.78g/(kg·d)、3.56g/(kg·d)],每组10只。造模成功后连续给药干预并观察8周。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组颈动脉血管的结构变化;采用酶联免疫吸附测定法检测各组相关炎症因子及抗炎因子的水平变化;采用蛋白免疫印迹法检测各组相关炎症信号通路的蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组家兔血管壁组织结构明显紊乱,可见内皮细胞损伤及相关其它炎症反应;与模型对照组比较,各给药组动脉组织粥样硬化病理损伤均有不同程度改善;在炎症因子(IL-1β、TNF-α及MMP-9)表达方面,与正常对照组相比,模型对照组家兔的炎症因子表达量均有增加(P<0.05),而相关抗炎症因子IL-10、IL-4及TGF-β表达量呈下降水平(P<0.05);在与模型对照组相比较,阿托伐他汀组及补阳还五汤低剂量组、中剂量组和高剂量组中上述炎症因子的表达量都有降低(P<0.05),而相关抗炎因子的表达量显著增加(P<0.05);在炎症信号通路的检测中,与正常对照组相比较,NF-κB的蛋白表达量明显上升,而LXRα的蛋白表达量明显下降。与模型对照组相比较,阿托伐他汀组、补阳还五汤低剂量组、中剂量组和高剂量组中NF-κB的蛋白表达量明显降低,而LXRα的蛋白表达量都明显升高。结论补阳还五汤对家兔动脉粥样硬化具有一定抑制作用,其作用机制可能通过降低炎症因子IL-1β、TNF-α及MMP-9的表达从而抑制炎症反应,上调IL-10、IL-4及TGF-β等抗炎因子水平,并多环节调控LXRα/NF-κB信号通路保护动脉血管免受炎症损伤有关。

关键词：动脉粥样硬化炎症反应 LXRα/NF-κB信号通路补阳还五汤

KRT18与mRNA及长链非编码RNA互作调控椎间盘髓核细胞损伤的机制

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中国组织工程研究 2024年

作者：刘钟元李扬张志文湖北中医药大学针灸骨伤学院湖北中医药大学附属医院湖北省中医院湖北省中医药研究院

背景：椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用，其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关，但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的：探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间... 详细信息

背景：椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用，其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关，但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的：探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓核细胞的影响及机制。方法：对因腰部骨折或椎间盘退行性病变而接受椎间融合术的患者进行人体髓核组织取样获得正常髓核细胞和退变髓核细胞，并进行iRIP-seq、功能富集分析以及DNA微阵列分析，随后根据分析结果在髓核细胞中敲低KRT18，通过蛋白免疫印迹及qRt-PCR在蛋白和RNA水平检测相关基因水平的表达。结果与结论：通过iRIP-seq分析发现GUAAUC和AGCCUC序列中存在大量的KRT18结合位点，表明KRT18可参与调控RNA的转录、翻译、稳定性或在细胞信号传导途径中发挥作用。其能够与成熟的mRNA稳定结合，其中表达较高的基因包括CRLF1及IGFBP4等，同时与其结合的长链非编码RNA的峰值基因包括SNHG25、SNHG12、NEAT1、USP32、EIF4A2和CDH4，这些基因多涉及细胞凋亡、炎症等多种生物过程，并且能介导细胞外基质代谢的相关通路，KRT18能够调控它们的稳定性、转运、翻译、剪接等多个方面的功能，进而影响基因的表达和细胞功能。实验结果验证了在髓核细胞中敲低KRT18，细胞外基质代谢水平被抑制出现失衡，导致体外椎间盘退变。该研究首次从KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合的角度探讨其调控机制，并推测了KRT18在椎间盘退变发病机制中的潜在功能，为今后KRT18关键功能的研究奠定了基础。

关键词：椎间盘退行性变 RNA结合蛋白 KRT18 i RIP-seq mRNA 长链非编码RNA

加减薯蓣丸上调MyRF减轻血管性痴呆小鼠mPFC-BLA环路髓鞘损伤及焦虑抑郁行为

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：陈欣怡冯小霞陈晨邱静谭子虎阳光湖北省中医院老年病科/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院湖北中医药大学第一临床学院

目的探讨加减薯蓣丸(MSP)改善血管性痴呆(VaD)小鼠焦虑、抑郁行为的机制。方法在药效研究中,选择60只C57BL/6小鼠,以颈总动脉缩窄/束缚应激(BCAS/CRS)构建VaD行为异常模型,假手术处理作为对照。按干预条件分为对照组(生理盐水)、模型... 详细信息

目的探讨加减薯蓣丸(MSP)改善血管性痴呆(VaD)小鼠焦虑、抑郁行为的机制。方法在药效研究中,选择60只C57BL/6小鼠,以颈总动脉缩窄/束缚应激(BCAS/CRS)构建VaD行为异常模型,假手术处理作为对照。按干预条件分为对照组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、MSP组(7、14、28 g/kg)、氟西汀(10 mg/kg)组。在机制研究中,40只BCAS/CRS模型小鼠,分别接受空载病毒、髓鞘基因调节因子(MyRF)过表达病毒、MSP(14 g/kg)、MSP+MyRF敲低病毒处理。旷场实验、高架十字迷宫实验、悬尾实验评估行为学变化;Western Blot检测髓鞘相关糖蛋白(MAG)、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)、髓鞘碱性蛋白(MBP)及髓鞘基因调节因子(MyRF)表达;免疫荧光染色检测MBP表达;胼胝体复合动作电位记录评估有髓轴突动作电位传导。结果与对照组比较,模型组小鼠开放臂次数/时间、中央区时间/距离减少,不动时间延长(P<0.01);mPFC和BLA脑区MAG、MOG、MBP和MyRF表达降低(P<0.01),MBP荧光强度和动作电位N1振幅降低(P<0.01)。MSP及氟西汀增加模型小鼠开放臂次数/时间和中央区时间/距离,缩短不动时间(P<0.01,P<0.05),上调髓鞘相关蛋白及MyRF表达(P<0.01,P<0.05),增加MBP荧光强度和动作电位N1振幅(P<0.01)。MyRF敲低减弱了MSP对模型小鼠行为学、髓鞘相关蛋白表达和动作电位N1振幅的改善效应(P<0.01,P<0.05)。结论加减薯蓣丸通过上调mPFCBLA环路MyRF表达,促进髓鞘修复和信号传导,改善VaD小鼠焦虑和抑郁行为。

关键词：加减薯蓣丸髓鞘血管性痴呆情绪环路焦虑抑郁行为异常中药复方氟西汀

通督活血汤对腰椎间盘突出症急性期患者腰椎功能及血清炎症因子水平的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 135-141页

作者：熊雨墨李梓宸李瑛肖强兵王丽华胡昊丰瑞兵乔杰胡彦湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院湖北省中医药研究院骨伤诊疗中心武汉430074 湖北中医药大学针灸骨伤学院武汉430074 江汉大学中医系武汉430074 洪湖市中医医院/湖北中医药大学附属洪湖中医医院湖北荆州433200

目的:观察通督活血汤治疗腰椎间盘突出症(LDH)急性期的临床疗效。方法:将2020年1月至2023年6月湖北省中医院和洪湖市中医医院骨科门诊收治的316例LDH急性期患者随机分为2组。对照组156例(脱落2例)予美洛昔康片治疗,观察组153例(脱落5例... 详细信息

目的:观察通督活血汤治疗腰椎间盘突出症(LDH)急性期的临床疗效。方法:将2020年1月至2023年6月湖北省中医院和洪湖市中医医院骨科门诊收治的316例LDH急性期患者随机分为2组。对照组156例(脱落2例)予美洛昔康片治疗,观察组153例(脱落5例)予以通督活血汤治疗,2组均治疗3个月。比较2组临床疗效、治疗前后及McGill疼痛积分量表(SF-MPQ)、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分、日本骨科协会下腰痛评价量表评分(JOA)、采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测患者治疗前后血清白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用NDI-092型肌电图诱发电位仪检测2组患者治疗前后的胫神经、腓总神经运动传导速度及临床疗效疗效,并比较2组患者的临床安全性。结果:治疗后观察组总有效率95.4%(146/153),对照组总有效率76.3%(119/156),观察组总有效率高于对照组(χ^(2)=23.18,P<0.05)。与本组治疗前比较,2组患者的SF-MPQ、ODI评分,IL-1β、IL-6、TNF-α水平均明显降低(P<0.05),与对照组治疗后比较,观察组下降更为明显(P<0.05)。2组患者的JOA得分、胫神经、腓总神经运动性传导速度均明显升高(P<0.05),与对照组治疗后比较,观察组升高更明显(P<0.05)。结论:通督活血方能够缓解LDH急性期腰腿痛、改善腰椎功能、抑制炎性反应,具有较好的安全性,值得临床推广。

关键词：椎间盘突出中医药疗法腰椎功能炎症因子

指纹图谱结合化学模式识别及网络药理学的石菖蒲质量标志物预测分析

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中国新药杂志 2024年第11期33卷 1174-1184页

作者：李鹏辉孙瑜冯小龙陶新如龚年春蔡媛彭艳梅湖南省中医药研究院长沙410006

目的:指纹图谱结合化学模式识别技术及网络药理学,分析预测不同产地野生石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)中潜在的差异质量标志物(quality marker,Q-marker)。方法:采用HPLC法建立石菖蒲药材指纹图谱,确认共有峰并进行指认,通过主成... 详细信息

目的:指纹图谱结合化学模式识别技术及网络药理学,分析预测不同产地野生石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)中潜在的差异质量标志物(quality marker,Q-marker)。方法:采用HPLC法建立石菖蒲药材指纹图谱,确认共有峰并进行指认,通过主成分分析(principal component analysis,PCA)及正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least square-discriminant analysis,OPLS-DA),筛选引起产地差异的主要特征化学成分;再运用网络药理学构建“活性成分-靶点-通路网络”图,预测Q-marker。结果:建立了4个产地18批石菖蒲药材指纹图谱,共有峰的选择显示不同产地石菖蒲药材的内在质量存在明显差异,PCA和OPLS-DA显示同一产地石菖蒲药材各自聚为一类,指认的3号峰(β-细辛醚)是引起产地差异的主要特征化学成分。网络药理学筛选出6个潜在Q-marker,结合Q-marker五要素原则,进一步明确β-细辛醚可作为石菖蒲的潜在Q-marker。结论:预测了β-细辛醚可作为不同产地石菖蒲药材的差异Q-marker,为石菖蒲质控指标的选择提供思路和参考依据。

关键词：石菖蒲指纹图谱化学模式识别网络药理学差异质量标志物 β-细辛醚

淫羊藿苷对大鼠膝骨性关节炎关节功能及软骨保护的作用机制

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中国老年学杂志 2024年第9期44卷 2197-2201页

作者：丰瑞兵黄勇胡昊吴刚段小锋黄一拯李超张海涛湖北省中医院骨伤科湖北中医药大学附属医院湖北省中医药研究院

目的探讨淫羊藿苷对大鼠膝骨性关节炎(KOA)关节功能及软骨保护的作用机制。方法将30只SD大鼠随机均分为假手术组、模型组和淫羊藿苷组。模型组与淫羊藿苷组采用膝关节前交叉韧带离断法进行造模。淫羊藿苷组给予淫羊藿苷[100 mg/(kg·... 详细信息

目的探讨淫羊藿苷对大鼠膝骨性关节炎(KOA)关节功能及软骨保护的作用机制。方法将30只SD大鼠随机均分为假手术组、模型组和淫羊藿苷组。模型组与淫羊藿苷组采用膝关节前交叉韧带离断法进行造模。淫羊藿苷组给予淫羊藿苷[100 mg/(kg·d)]灌胃干预，假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃干预，时间均为8 w。采用膝关节活动度、旷场实验、步态分析检测评估关节功能；采用软骨组织大体观及Pelletier评分及番红-固绿染色与国际骨关节炎研究学会评分评估关节软骨的退变程度；采用酶联免疫吸附试验检测软骨组织代谢血清标志物Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTX-Ⅱ)、大鼠脱二氢嘧啶脱氢酶(DPD)的含量。采用Western印迹检测软骨组织基质金属蛋白酶(MMP)-13、MMP-1、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)的蛋白表达水平。结果与假手术组相比，模型组运动总距离、总穿格数、中央区滞留时间均显著下降(P<0.05);与模型组相比，淫羊藿苷组上述3个指标均显著上升(P<0.05)。与假手术组相比，模型组关节活动度显著降低(P<0.05);与模型组相比，淫羊藿苷组关节活动度显著提高(P<0.05)。与假手术组相比，模型组血清中软骨组织代谢标志物CTX-Ⅱ、DPD含量均显著升高(P<0.05);与模型组相比，淫羊藿苷组以上指标均显著降低(P<0.05)。与假手术组相比，模型组膝关节软骨中MMP-1、MMP-13蛋白表达显著升高，Aggrecan、CollagenⅡ蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组相比，淫羊藿苷组MMP-1、MMP-13蛋白表达显著降低，Aggrecan、CollagenⅡ蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论淫羊藿苷可以显著改善大鼠KOA的关节软骨退变程度及功能，其作用机制与提高大鼠软骨代谢血清标志物CTX-Ⅱ、DPD含量，促进软骨组织合成代谢标志物Aggrecan、CollagenⅡ蛋白表达，抑制软骨组织分解代谢标志物MMP-13、MMP-1蛋白表达有关。

关键词：淫羊藿苷膝骨性关节炎(KOA) 关节功能软骨

通督活血汤结合刺络放血治疗退行性腰椎管狭窄症临床效果及对患者腰椎功能影响观察

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中华中医药学刊 2024年

作者：熊雨墨李梓宸李瑛肖强兵王丽华胡昊丰瑞兵乔杰胡彦湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院针灸科洪湖市中医医院(湖北中医药大学附属洪湖中医医院)骨伤三科湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院骨伤诊疗中心湖北中医药大学针灸骨伤学院

目的观察通督活血汤结合刺络放血治疗退行性腰椎管狭窄症临床效果及对患者腰椎功能影响。方法将我院收治的90例退行性腰椎管狭窄症患者（2020年1月～2023年2月收治）纳入本次实验研究，将患者以随机数字表法分为中医组与对照组，各组45... 详细信息

目的观察通督活血汤结合刺络放血治疗退行性腰椎管狭窄症临床效果及对患者腰椎功能影响。方法将我院收治的90例退行性腰椎管狭窄症患者（2020年1月～2023年2月收治）纳入本次实验研究，将患者以随机数字表法分为中医组与对照组，各组45例，对照组患者西医治疗，中医组患者在对照组治疗基础上结合中医方案（通督活血汤结合刺络放血）治疗，治疗过程中对照组患者脱落1例，中医组患者脱落2例，观察各组数据：临床治疗效果、治疗前后患者中医症候总积分以及步行距离变化、日本骨科学会腰椎功能评分（JapaneseOrthopaedicAssociationScores)，JOA）及腰痛奥斯威斯指数量表（OswestryDisabilityIndex，ODI）评分变化、血清肿瘤坏子因子α（Tumournecrosisfactor-α，TNF-α）及白细胞介素-1α（Interleukin-1α，IL-1α）水平变化、血液流变学指标（血细胞比容、纤维蛋白原、血浆黏度、全血低切黏度以及全血高切黏度）变化、治疗不良反应。结果中医组患者治疗总有效率为95.35%，对照组患者治疗总有效率为81.82%，前者更高，P＜0.05；治疗前，各组患者中医症候总积分以及步行距离、JOA评分以及ODI评分、TNF-α水平及IL-1α水平、血液流变学指标（血细胞比容、纤维蛋白原、血浆黏度、全血低切黏度以及全血高切黏度）比较，P＞0.05，各组患者经治疗后中医症候总积分以及步行距离、JOA评分以及ODI评分、TNF-α水平及IL-1α水平、血液流变学指标（血细胞比容、纤维蛋白原、血浆黏度、全血低切黏度以及全血高切黏度）均明显改善，而中医组患者治疗后中医症候总积分以及步行距离、JOA评分以及ODI评分、TNF-α水平及IL-1α水平、血液流变学指标（血细胞比容、纤维蛋白原、血浆黏度、全血低切黏度以及全血高切黏度）均优于对照组，P＜0.05；中医组与对照组患者不良反应率分别为，均较低4.66%、2.27%，且症状轻微，P＞0.05。结论通督活血汤结合刺络放血治疗退行性腰椎管狭窄症临床效果显著，患者症状改善，恢复较好，腰椎功能改善，不良反应少，本次治疗安全、可行，值得应用。

关键词：退行性腰椎管狭窄症刺络放血通督活血汤治疗效果腰椎功能血液流变学

多指标综合评分法结合正交试验优选温阳通便汤的水煎煮工艺

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中国医院药学杂志 2024年第6期44卷 677-683页

作者：王思萌朱田密余婷张伟欣陈树和陈科力林爱珍孙光军肖文洁湖北中医药大学药学院湖北武汉430065 湖北省中医院湖北中医药大学附属医院湖北省中医药研究院湖北武汉430061

目的:优选温阳通便汤的水煎煮工艺,为该制剂的工业化生产提供参考。方法:采用液相色谱-串联三重四级杆质谱法,选择Agilent ZORBAX SB-C_(18) (150 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B),梯度洗脱,流速为0.25 m L·mi... 详细信息

目的:优选温阳通便汤的水煎煮工艺,为该制剂的工业化生产提供参考。方法:采用液相色谱-串联三重四级杆质谱法,选择Agilent ZORBAX SB-C_(18) (150 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B),梯度洗脱,流速为0.25 m L·min^(–1),柱温为30℃;运用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)的正、负离子模式测定温阳通便汤水煎液中7种指标性成分松果菊苷、桂皮醛、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮、藁本内酯、辛弗林、异阿魏酸的含量,以7种成分含量及出膏率作为评价指标,利用层次分析法确定各评价指标的权重系数并计算综合评分。通过单因素试验考察料液比、煎煮时间、煎煮次数对综合评分的影响,确定各因素的水平。采用多指标综合评分法,以上述8个指标的综合评分为指标,设计正交试验优选温阳通便汤的水煎煮工艺参数并进行验证。结果:松果菊苷、桂皮醛、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮、藁本内酯、辛弗林、异阿魏酸及出膏率的权重系数分别为0.233 89,0.233 89,0.140 04,0.140 04,0.082 92,0.082 92,0.051 58,0.034 72。最终优选出的温阳通便汤的水煎煮工艺为料液比1∶10,煎煮3次,每次0.5 h。3批验证试验综合评分值的RSD为6.57%。结论:该研究优选的温阳通便汤的水煎煮工艺稳定、可行。

关键词：温阳通便汤煎煮工艺多反应监测层次分析法正交试验松果菊苷桂皮醛 β-蜕皮甾酮