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基于染料标记的核酸适配体对氯霉素的比率定量检测

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武汉大学学报（理学版） 2022年第4期68卷 405-412页

作者：熊威威汪鹏李文恒向东山翟琨湖北民族大学生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北恩施445000 湖北民族大学化学与环境工程学院湖北恩施445000

利用荧光染料标记的氯霉素(CAP)核酸适配体(PLV)、有机猝灭基团标记且与CAP核酸适配体部分互补的单链DNA(PC)及核酸染料SYBR GreenⅠ(SG-Ⅰ)构建了一种比率型荧光探针,并利用该探针建立了一种CAP的定量检测新方法。该探针中,PLV的3’端... 详细信息

利用荧光染料标记的氯霉素(CAP)核酸适配体(PLV)、有机猝灭基团标记且与CAP核酸适配体部分互补的单链DNA(PC)及核酸染料SYBR GreenⅠ(SG-Ⅰ)构建了一种比率型荧光探针,并利用该探针建立了一种CAP的定量检测新方法。该探针中,PLV的3’端标记荧光染料6-carboxy-x-rhodamine(ROX),PC的5’端标记猝灭基团Black Hole Quencher 2(BHQ-2)。当反应体系中没有CAP时,PLV与PC反应形成双链DNA,荧光染料ROX与猝灭基团BHQ-2相互靠近,ROX的荧光被BHQ-2猝灭,其荧光信号很弱。此时,溶液中的核酸染料SG-Ⅰ可与双链DNA结合,导致SG-Ⅰ的荧光信号显著增强。当体系中存在CAP时,CAP与PLV结合形成更稳定的空间结构,使双链DNA不能形成。此时,荧光染料ROX远离猝灭基团BHQ-2,其荧光得到恢复;另外,由于体系中无双链DNA,SG-Ⅰ游离于溶液中,其荧光信号很弱。根据体系中加入CAP后ROX与SG-Ⅰ荧光强度比值(I_(ROX)/I_(SG-I))的变化即可实现对CAP的定量检测。在优化条件下,CAP浓度在2×10^(-10)~100×10^(-10)mol/L范围内,I_(ROX)/I_(SG-I)随CAP浓度的增大而增大,其拟合曲线的回归方程为I_(ROX)/I_(SG-I)=0.072^(e0.055c)(R=0.993),方法检出限为8×10^(-11)mol/L。与单色荧光定量检测CAP的方法相比,该方法重复性更好、检出限更低、准确度更高。

关键词：比率型荧光探针核酸适配体氯霉素定量检测

基于氧化石墨烯及染料标记的核酸三色荧光探针检测汞离子

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武汉大学学报:理学版 2023年第3期69卷 340-348页

作者：李文恒王小红汪鹏王晨向东山翟琨湖北民族大学生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北恩施445000 湖北民族大学化学与环境工程学院湖北恩施445000

利用氧化石墨烯(GO)、两种荧光染料标记的单链DNA及核酸染料SYBR GreenⅠ(SG-Ⅰ),构建了能特异性识别Hg^(2+)的三色荧光探针,建立了一种快速、高效、高灵敏定量检测水体中汞离子(Hg^(2+))的新方法。在这种探针中,两种染料Tetramethyl-6-... 详细信息

利用氧化石墨烯(GO)、两种荧光染料标记的单链DNA及核酸染料SYBR GreenⅠ(SG-Ⅰ),构建了能特异性识别Hg^(2+)的三色荧光探针,建立了一种快速、高效、高灵敏定量检测水体中汞离子(Hg^(2+))的新方法。在这种探针中,两种染料Tetramethyl-6-carboxyrhodamine(TAMRA)和Cyanine-5(Cy-5)分别标记在两条单链DNA的5’端,这两条单链DNA中有一部分碱基互补配对,未互补的碱基均为胸腺嘧啶(T碱基)。在没有Hg^(2+)存在时,两种荧光染料标记的单链DNA被吸附在GO的表面,TAMRA和Cy-5与GO靠近,荧光被GO猝灭,它们的荧光信号都很弱;此时,SG-Ⅰ被吸附在GO的表面或游离在溶液中,荧光信号也很弱。在有Hg^(2+)存在时,两种荧光染料标记的单链DNA通过T-Hg^(2+)-T结构特异性结合形成双链DNA,从而脱离GO的表面,TAMRA和Cy-5远离GO,荧光信号恢复;与此同时,SG-Ⅰ与双链DNA结合,荧光强度显著增强。根据TAMRA、Cy-5及SG-Ⅰ荧光强度增加的程度即可对Hg^(2+)进行定量分析。在优化条件下,当Hg^(2+)的浓度在1.0×10^(-9)~5.0×10^(-8)mol/L范围内时,TAMRA、Cy-5及SG-Ⅰ荧光强度之和与汞离子的浓度具有良好的线性关系,方法的检出限(LOD)为1.1×10^(-10)mol/L,实际水样的加标回收率在96.00%~105.00%之间。该方法用于实际水样中Hg^(2+)检测,获得了较为满意的结果。

关键词：汞离子染料标记的核酸三色荧光探针同步荧光分析

铁死亡细胞中双光子硫化氢荧光探针的构建与应用

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武汉大学学报（理学版） 2021年第4期67卷 312-320页

作者：孙琦王旭梅高明昱王艳宋新建湖北民族大学生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北恩施445000 湖北民族大学化学与环境工程学院湖北恩施445000

传统的消耗型硫化氢荧光探针因灵敏度较低,无法实现铁死亡过程中细胞内硫化氢含量的检测。基于此,设计并合成了一种双光子激发深红光发射的硫化氢荧光探针KS-HS。探针分子中引入了硫代氨基甲酸苄酯的结构单元,可在碳酸酐酶的催化下释放... 详细信息

传统的消耗型硫化氢荧光探针因灵敏度较低,无法实现铁死亡过程中细胞内硫化氢含量的检测。基于此,设计并合成了一种双光子激发深红光发射的硫化氢荧光探针KS-HS。探针分子中引入了硫代氨基甲酸苄酯的结构单元,可在碳酸酐酶的催化下释放出H2S从而提高探针的灵敏度。探针分子中的叠氮基与硫化氢发生还原反应,作为触发分子内电荷转移(ICT)效应并释放深红光的开关。该探针对H2S响应速度快、灵敏度高(检出限低至15 nmol/L)、选择性好,可成功检测基于OGD/R模型模拟的铁死亡过程中细胞内硫化氢含量的变化。

关键词：双光子荧光探针铁死亡硫化氢细胞成像

高灵敏过氧亚硝酸根双光子荧光探针的构建与应用

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武汉大学学报（理学版） 2022年第4期68卷 397-404页

作者：王旭梅高明昱孙琦宋新建湖北民族大学生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北恩施445000 湖北民族大学化学与环境工程学院湖北恩施445000

炎症是生物体内与许多疾病相关的重要保护反应,过氧亚硝酸根(ONOO-)参与炎症过程,与炎症有着密切联系。采用6-羟基-2,3,4,4a-四氢-1H-氧杂蒽-1-酮(GCTPOC)作为双光子荧光团(双光子荧光活性截面δΦ=262 GM(1 GM=1×10^(-50)cm^(4)·s·p... 详细信息

炎症是生物体内与许多疾病相关的重要保护反应,过氧亚硝酸根(ONOO-)参与炎症过程,与炎症有着密切联系。采用6-羟基-2,3,4,4a-四氢-1H-氧杂蒽-1-酮(GCTPOC)作为双光子荧光团(双光子荧光活性截面δΦ=262 GM(1 GM=1×10^(-50)cm^(4)·s·photons^(-1)·molecule^(-1)),激发波长λ_(ex)=860 nm)设计并合成一种用于检测过氧亚硝酸根的双光子荧光探针GCTONOO。该探针具有良好的荧光响应,检出限低(13.5 nmol/L)、Stokes位移大(135 nm),可特异性识别ONOO^(-)。细胞急性炎症模型实验结果表明,该探针可实现细胞炎症过程中ONOO^(-)的荧光成像分析。

关键词：荧光探针过氧亚硝酸根双光子激光共聚焦成像细胞炎症

基于两种荧光染料的内标比率型荧光探针检测水体中银离子

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武汉大学学报（理学版） 2022年第4期68卷 413-419页

作者：汪鹏熊威威李文恒翟琨向东山湖北民族大学生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北恩施445000 湖北民族大学化学与环境工程学院湖北恩施445000

利用荧光染料TAMRA及核酸染料SYBR GreenⅠ(SG)建立了一种水体中痕量Ag^(+)的定量检测方法。先将TAMRA作为内标荧光信号标记在核酸适配体(aptamer)的一端,与Ag^(+)发生特异性反应形成双链DNA,再与核酸染料SG结合。反应后,SG的荧光强度... 详细信息

利用荧光染料TAMRA及核酸染料SYBR GreenⅠ(SG)建立了一种水体中痕量Ag^(+)的定量检测方法。先将TAMRA作为内标荧光信号标记在核酸适配体(aptamer)的一端,与Ag^(+)发生特异性反应形成双链DNA,再与核酸染料SG结合。反应后,SG的荧光强度显著增强,而TAMRA的荧光强度保持不变,根据两种染料荧光强度比值(I_(SG)/I_(TAMRA))的变化即可实现对Ag^(+)的定量检测。结果表明:Ag^(+)浓度在4.0~240.0 nmol/L范围内,ISG/ITAMRA与Ag^(+)浓度(c)之间具有良好的线性关系,方法的检出限为2.0 nmol/L(3σ,n=9),且精密度好、准确度高。将该内标比率型荧光探针应用于实际水样中Ag^(+)的分析,可以实现Ag^(+)的快速定量检测。

关键词：银离子核酸适配体比率型荧光探针定量检测

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咸丰重质碳酸钙的干法改性研究

矿产综合利用 2021年第3期42卷 176-179,175页

作者：胡盛高雪洪颖熊枝敏袁晓慧胡卫兵湖北民族大学生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北恩施445000 湖北民族大学化学与环境工程学院湖北恩施445000

以咸丰重质碳酸钙(heavy calcium carbonate)为原料,高分子乳液为改性剂,通过干法改性制备了改性碳酸钙。采用单因素实验设计探讨了改性剂用量对碳酸钙改性效果的影响,结果分析表明,当改性温度为80℃,改性时间为50 min,转速为500 r/min... 详细信息

以咸丰重质碳酸钙(heavy calcium carbonate)为原料,高分子乳液为改性剂,通过干法改性制备了改性碳酸钙。采用单因素实验设计探讨了改性剂用量对碳酸钙改性效果的影响,结果分析表明,当改性温度为80℃,改性时间为50 min,转速为500 r/min,高分子乳液用量为咸丰重质碳酸钙质量的3%时,改性碳酸钙的活化率达90.8%,改性效果较好。利用FT-IR、XRD、SEM、Zeta电位对碳酸钙进行表征,结果表明,高分子乳液已成功接枝到碳酸钙表面。改性碳酸钙的特征衍射峰向高角度偏移,但高分子乳液改性并未改变响碳酸钙晶型。改性碳酸钙的Zeta电位从14.1 mV提高到29.8 mV,粒径较小,分散性有所增强。

关键词：重质碳酸钙干法改性高分子乳液活化率

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硒对藤茶抗氧化酶活性及有效成分的影响

华中农业大学学报 2010年第3期29卷 321-325页

作者：雷红灵陆海波蔡金洲邱松郑小江李世荣湖北民族学院生物资源保护与利用湖北省重点实验室恩施445000 湖南农业大学生物科学技术学院长沙410128 湖北民族学院化学与环境工程学院恩施445000

为了探讨硒对藤茶生长发育、生理生化特性的影响,以亚硒酸钠作为硒源,设置0、50、75、100、125、1501、75 mg/L 7个质量浓度梯度,对盆栽藤茶进行叶面喷施,研究了不同质量浓度硒对藤茶含硒量、抗氧化酶活性、藤茶的黄酮、可溶性蛋白、可... 详细信息

为了探讨硒对藤茶生长发育、生理生化特性的影响,以亚硒酸钠作为硒源,设置0、50、75、100、125、1501、75 mg/L 7个质量浓度梯度,对盆栽藤茶进行叶面喷施,研究了不同质量浓度硒对藤茶含硒量、抗氧化酶活性、藤茶的黄酮、可溶性蛋白、可溶性糖、游离氨基酸的动态变化的影响。结果表明：当喷施硒质量浓度小于100 mg/L,藤茶叶片的含硒量随着硒质量浓度的增大而增加,施硒质量浓度在100-175 mg/L,藤茶含硒量无显著变化;硒处理可以明显提高藤茶的GSH-Px活性,硒的质量浓度在125 mg/L时,酶活性最强;当硒质量浓度小于125 mg/L时,可以提高APX、CAT的活性;硒对藤茶SOD活性无明显促进作用;施硒质量浓度在75-125mg/L,可以增加藤茶的可溶性蛋白、游离氨基酸、黄酮、可溶性糖的含量,在125 mg/L硒处理时,黄酮含量最高,其他3种有效成分的含量在100 mg/L时最高。低质量浓度的硒能促进藤茶抗氧化酶活性及藤茶中有效成分的合成,最适施硒质量浓度为100 mg/L。

关键词：藤茶硒抗氧化酶黄酮可溶性蛋白质游离氨基酸可溶性糖

TiO2/MIL-53(Al)和TiO2/Al2O3催化剂的制备及其光催化性能研究

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华中农业大学学报 2020年第3期39卷 68-74页

作者：谭海燕孟泽冯翰林胡卫兵吴得勇谭学才生物资源保护与利用湖北省重点实验室/湖北民族大学化学与环境工程学院恩施445000 广西民族大学广西林产化学与工程重点实验室南宁530006

采用溶剂热法合成了MIL-53(Al),以此为载体负载TiO2制备得到TiO2/MIL-53(Al)光催化剂用于污水中次甲基蓝的催化降解研究,并与传统载体材料Al2O3负载的TiO2催化剂的光催化效果进行比较。样品通过热重-差热扫描量热(TG-DSC)、红外光谱(FT... 详细信息

采用溶剂热法合成了MIL-53(Al),以此为载体负载TiO2制备得到TiO2/MIL-53(Al)光催化剂用于污水中次甲基蓝的催化降解研究,并与传统载体材料Al2O3负载的TiO2催化剂的光催化效果进行比较。样品通过热重-差热扫描量热(TG-DSC)、红外光谱(FTIR)、扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、N2物理吸附-脱附等方法进行表征。采用光度吸收法分析污水中次甲基蓝的降解率,结果显示,TiO2/MIL-53(Al)光催化剂对次甲基蓝的光催化降解率达到98.6%,而TiO2/Al2O3光催化剂对次甲基蓝的降解率只有70.3%,TiO2/MIL-53(Al)光催化剂对污水中次甲基蓝的降解去除能力明显优于TiO2/Al2O3光催化剂对次甲基蓝的降解去除能力。

关键词：金属有机骨架材料次甲基蓝污水处理光催化降解去除率

Al2O3与SiO2负载TiO2催化剂的制备及光催化性能研究

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化工新型材料 2019年第S1期47卷 87-89,93页

作者：张世龙谭海燕覃宇胡卫兵石新雨程新华湖北民族大学化学与环境工程学院恩施445000 生物资源保护与利用湖北省重点实验室恩施445000

分别以对环境无污染的Al2O3和SiO2为载体负载TiO2,对具有代表性的次甲基蓝为染料模型的化合物进行光催化降解研究,采用X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外(FT-IR)光谱、扫描电子显微镜(SEM)等方法对催化剂的结构性质进行了表征。最后采用... 详细信息

分别以对环境无污染的Al2O3和SiO2为载体负载TiO2,对具有代表性的次甲基蓝为染料模型的化合物进行光催化降解研究,采用X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外(FT-IR)光谱、扫描电子显微镜(SEM)等方法对催化剂的结构性质进行了表征。最后采用光度吸收法分析次甲基蓝的光催化降解效率。结果表明:TiO2/SiO2光催化剂对污水中次甲基蓝的光催化降解效果更好,其降解率达到90%以上。

关键词：光催化剂浸渍法污水处理次甲基蓝降解