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黄精属植物SRAP分子标记遗传多样性分析

北方园艺 2024年第13期 103-109页

作者：蒋小刚王华由金文张美德周武先湖北省农业科学院中药材研究所农业农村部中药材生物学与栽培重点实验室湖北恩施445000

以34份黄精属种质资源(多花黄精、湘黄精、早花黄精、湖北黄精、滇黄精、玉竹)为试材,采用SRAP分子标记技术,研究其遗传多样性,以期为黄精属植物种质鉴别和分子育种提供参考依据。结果表明:筛选了12对SRAP多态性引物,共检测到106个位点... 详细信息

以34份黄精属种质资源(多花黄精、湘黄精、早花黄精、湖北黄精、滇黄精、玉竹)为试材,采用SRAP分子标记技术,研究其遗传多样性,以期为黄精属植物种质鉴别和分子育种提供参考依据。结果表明:筛选了12对SRAP多态性引物,共检测到106个位点,多态性百分率为100.0%,Nei′s基因多样性指数(H)平均值为0.2858,Shannon多样性指数(I)平均值为0.4399,遗传分化系数Gst为0.5360,种质间基因流Nm为0.4328。34份种质间遗传相似系数为0.5000~0.9528,平均值为0.6698。湘黄精和滇黄精种质遗传差异最小,而多花黄精和滇黄精种质遗传差异最大。聚类分析可将34份黄精属种质划分为六大类,多花黄精、湘黄精、早花黄精、湖北黄精、滇黄精、玉竹分别聚为一类。该研究的12对多态性SRAP分子标记能有效鉴别黄精属不同种质,将为黄精属遗传多样性分析、种质鉴定、分子标记辅助育种等提供参考依据。

关键词：黄精属 SRAP分子标记种质资源遗传多样性

有机肥替代部分化肥对湖北贝母生长及土壤性质的影响

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中国农业科技导报 2024年

作者：李大荣李小玲周武先张美德蒋小刚由金文王华湖北省农业科学院中药材研究所农业农村部中药材生物学与栽培重点实验室

为探究有机肥替代部分化肥对湖北贝母生长及品质的影响，以湖北贝母为研究对象，采用大田试验，设置单施化肥（CK）和有机肥氮分别替代10%(T1)、20%(T2)、30%(T3)、40%化肥氮（T4）5种处理，分析不同处理下湖北贝母形态、生理特性、产... 详细信息

为探究有机肥替代部分化肥对湖北贝母生长及品质的影响，以湖北贝母为研究对象，采用大田试验，设置单施化肥（CK）和有机肥氮分别替代10%(T1)、20%(T2)、30%(T3)、40%化肥氮（T4）5种处理，分析不同处理下湖北贝母形态、生理特性、产量、品质以及土壤理化性质。结果表明，湖北贝母的茎粗、总鲜重和产量在T4处理下均达到最大值，与CK相比分别显著提高60.13%、69.46%和106.96%。与CK相比，T1～T4处理均能显著提高叶片SPAD值，增幅为64.62%～93.05%; T3和T4处理的土壤pH有显著提高。相较于CK，脲酶、蔗糖酶活性在T3处理下分别提高47.17%、19.06%，且显著高于其他处理；碱性磷酸酶活性在T1和T2处理下均显著高于CK，增幅分别为131.63%和306.44%。T1～T4处理的黄酮含量显著低于CK。T2～T4处理下，湖北贝母可溶性蛋白和总生物碱含量均显著低于CK，降幅分别达5.70%～15.46%和22.79%～30.85%。多糖含量在T3和T4处理下显著高于CK，分别是CK的1.67和2.06倍。综上，有机肥替代部分化肥能有效促进湖北贝母的生长，提高其产量，且氮替代比例越大，作用效果越明显，但对次生代谢产物的形成有一定的影响。此外，有机肥替代部分化肥还能有效调节土壤酶活性及pH，对湖北贝母的生长具有积极作用，以有机肥氮替代30%～40%化肥氮效果最佳。

关键词：有机肥湖北贝母产量品质土壤酶活性

隔山消治疗溃疡性结肠炎的机制:基于UPLC-QE-MS、网络药理学及代谢组学技术

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南方医科大学学报 2024年第8期44卷 1485-1496页

作者：于官正程炜强涂星张满李鸿聂娟湖北民族大学武陵山中药材检验检测中心湖北恩施445000 湖北民族大学医学部湖北恩施445000

目的基于UPLC-QE-MS与网络药理学挖掘隔山消防治溃疡性结肠炎(UC)的靶点及通路,并结合代谢组学技术探讨作用机制。方法采用UPLC-QE-MS技术鉴定隔山消醇提物化学成分,基于Swiss Target Prediction、GeneCards、Pubchem等数据库筛选相应靶... 详细信息

目的基于UPLC-QE-MS与网络药理学挖掘隔山消防治溃疡性结肠炎(UC)的靶点及通路,并结合代谢组学技术探讨作用机制。方法采用UPLC-QE-MS技术鉴定隔山消醇提物化学成分,基于Swiss Target Prediction、GeneCards、Pubchem等数据库筛选相应靶点,获取核心PPI,进行GO、KEGG富集分析。将40只雄性C57小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组(0.2 g/kg)、隔山消组(2.28 g/kg),每组10只,除正常组外,其余各组自由饮用2.5%DSS诱导UC模型,造模期间给药组给予药物灌胃干预。通过体质量变化率、DAI得分评价治疗效果;HE及AB-PAS染色观察结肠组织病理变化;Western blotting技术检测JAK2、STAT3蛋白水平;代谢组学技术鉴别差异代谢物并挖掘代谢通路。结果鉴定出隔山消醇提物化学成分240个,其中甾体类(高含量)19个,得到隔山消(甾体类)靶点177个,UC基因5406个,隔山消与UC交集基因117个,JAK2、STAT3等为核心PPI,在脂质与动脉粥样硬化等通路富集显著。动物实验结果显示,经隔山消治疗后,小鼠体质量变化率上升、DAI评分显著下降(P<0.05),肠组织病理改变明显缓解,JAK2、STAT3蛋白水平显著降低(P<0.05)。鉴定出正常组、模型组及隔山消组之间交集差异代谢物83个,以甘油磷脂、类花生酸、氨基酸成分为主,与甘油磷脂代谢等通路相关。整合分析显示隔山消治疗UC的核心靶点参与了代谢物的调节。结论隔山消可通过调节JAK2、STAT3等核心靶点表达及内源性代谢物水平来缓解脂质及氨基酸代谢紊乱,发挥治疗UC的作用。

关键词：隔山消溃疡性结肠炎代谢组学 UPLC-QE-MS 甾体类

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基于DNA条形码及HPLC对市售刺五加的种质资源鉴定和质量评价

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药学学报 2024年第7期59卷 2171-2178页

作者：刘珊瑚张志飞黄钰莹刘子齐陈文沁阿木拉哈王馨石玥张晓芹何高洁安克露王晓晖魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心北京102488 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京100102 黑龙江北草堂中药材有限责任公司黑龙江哈尔滨150900

刺五加Acanthopanax senticosus(*** Maxim.)Harms是我国东北道地药材之一,本研究根据之前的叶绿体基因组测序结果,选取atpI和atpB_rbcL基因片段对市售刺五加样品进行种质资源鉴定,并利用HPLC对其紫丁香苷含量进行测定,以期确定市售刺... 详细信息

刺五加Acanthopanax senticosus(*** Maxim.)Harms是我国东北道地药材之一,本研究根据之前的叶绿体基因组测序结果,选取atpI和atpB_rbcL基因片段对市售刺五加样品进行种质资源鉴定,并利用HPLC对其紫丁香苷含量进行测定,以期确定市售刺五加的主流种质和质量。本研究从24省47市收集80份刺五加样品并提取DNA,通过PCR扩增atpI和atpB_rbcL基因片段,分析结果表明,2个基因片段联合分析形成7个单倍型(H2、H5、H8、H10、H12、H14、H23),其中来自黑龙江伊春、哈尔滨尚志、黑龙江绥化、辽宁抚顺、辽宁本溪、吉林长白和吉林靖宇的单倍型H2是主流单倍型,占总样本量的58.75%。H14和H23为产地独有单倍型,分别来自黑龙江省双鸭山市饶河县和黑龙江省绥化市明水县。通过HPLC检测市售刺五加样品中的紫丁香苷含量,结果表明73.96%样品紫丁香苷含量符合药典标准。样品间的紫丁香苷含量差异显著,在0.0037%~0.5245%之间,相差0.5208%,说明刺五加市场样品质量参差不齐,但是不同单倍型之间市售刺五加紫丁香苷含量没有显著性差异。市场样品中单倍型H23中的紫丁香苷含量比较高,因此可能是质量比较好的种质。本文对刺五加市场样品的种质资源和药材质量进行研究,有利于指导刺五加市场样品流通、临床合理用药和后续优良品种筛选。

关键词：刺五加 DNA条形码分子鉴定紫丁香苷质量评价

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基于传统品质评价的淡豆豉质量分析

中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 31-42页

作者：王艺涵林王敏张水利俞冰南铁贵康利平李国凤何锡远詹志来黄璐琦中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室北京100700 浙江中医药大学药学院杭州310053 成都宝芎中药材有限公司四川彭州611930

目的:基于历代本草总结的淡豆豉“香美而浓者佳”的品质评价经验,对黑豆与淡豆豉所含化学成分进行系统对比分析,并对淡豆豉不同发酵时间的主要发酵产物进行定量分析,以明确炮制过程内在成分的转化规律,为淡豆豉现代质量控制提供科学依... 详细信息

目的:基于历代本草总结的淡豆豉“香美而浓者佳”的品质评价经验,对黑豆与淡豆豉所含化学成分进行系统对比分析,并对淡豆豉不同发酵时间的主要发酵产物进行定量分析,以明确炮制过程内在成分的转化规律,为淡豆豉现代质量控制提供科学依据。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对黑豆及淡豆豉的化学成分进行结构鉴定,借助Progenesis QI v2.3软件,采用负离子模式进行主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),绘制S-plot图,选取|P|>0.1的化合物作为备选差异性成分。采用UPLC测定淡豆豉发酵期间异黄酮类化合物含量,前酵期间每8 h取样,后酵期间每2 d取样,并分析不同发酵阶段异黄酮含量动态变化。采取异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,利用高效液相色谱法(HPLC)检测淡豆豉不同发酵阶段样品及黑豆中氨基酸和核苷酸的含量,通过味道强度值(TAV值)探讨各呈味物质对淡豆豉“美”味的贡献度。结果:从黑豆和淡豆豉中共筛选出19种差异成分,以大豆皂苷类和异黄酮类成分为主,发酵后含量均显著减少甚至消失。淡豆豉前酵过程主要发生苷键水解反应,黑豆中所含异黄酮苷类物质大量降解转化为对应的苷元类物质,氨基酸等风味物质含量增势较为平缓;后酵过程则主要发生蛋白质降解反应,后酵8 d后异黄酮类化合物含量基本稳定,而各氨基酸总含量平均上升8~40倍,不同的氨基酸形成了淡豆豉特殊的风味,如鲜味物质谷氨酸TAV值始终领先于其他呈味物质,甜味物质如丙氨酸、缬氨酸对淡豆豉的贡献同样较大。结论:基于成分转化规律,结合传统“香美而浓”的评价指标,淡豆豉现有标准较难控制其发酵程度,建议细化淡豆豉性状描述,改为“气香,味鲜,微甘”,同时增加谷氨酸、丙氨酸和缬氨酸等后酵程度指标性化合物为淡豆豉质控指标,以规范淡豆豉制作工艺,提高淡豆豉质量。

关键词：淡豆豉黑豆品质评价超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS) 异黄酮氨基酸呈味物质

不同因素对药用大黄种子萌发和幼苗生长的影响

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北方园艺 2024年第20期 91-99页

作者：王帆帆唐涛张路娜张力斌段媛媛游景茂湖北省农业科学院中药材研究所农业农村部中药材生物学与栽培重点实验室湖北省中药材规范化生产(GAP)工程研究中心湖北省农业科学院林下经济湖北省工程研究中心恩施土家族苗族自治州科学技术局

以三年生药用大黄种子为试材，采用三因素四水平的正交实验设计，研究了浸种时长、基质含水量和激素对药用大黄种子萌发及幼苗特性的影响，以期为药用大黄种苗繁育标准化规模化发展提供参考依据。结果表明：浸种时长为6 h、基质含水量为... 详细信息

以三年生药用大黄种子为试材，采用三因素四水平的正交实验设计，研究了浸种时长、基质含水量和激素对药用大黄种子萌发及幼苗特性的影响，以期为药用大黄种苗繁育标准化规模化发展提供参考依据。结果表明：浸种时长为6 h、基质含水量为70%处理的种子出苗率最佳，T16(24 h, 70%,赤霉素)的种苗叶面积、株高、地上质量和鲜质量均最佳，T8(12 h, 70%,IAA)的种苗茎粗和叶片可溶性蛋白质含量最佳，T7(12 h, 60%,水杨酸)的种苗根长和叶片过氧化物酶活性最佳，T10(18 h, 50%,水杨酸)的种苗叶片丙二醛(MDA)含量最佳，T5(12 h, 40%,6-BA)的种苗叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性最佳。相关性分析和极差分析结果表明，药用大黄种苗繁育的理论最佳方案为浸种18 h、基质含水量保持70%和喷施水杨酸。

关键词：药用大黄种苗浸种时长含水量激素

有机肥配施化肥对柔毛淫羊藿产量和品质的影响

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 2871-2881页

作者：赖锟阳肖建才万修福范蕊闫滨滨康传志孙楷吕朝耕柯潇何刚张燕郭兰萍广东药科大学中药学院广东广州510006 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 农业农村部中药材生物学与栽培重点实验室北京100700 德兴市中医研究院试验培训基地江西德兴334220 四川康弘中药材种植有限公司四川成都610037

探究不同比例有机肥和化肥配施对柔毛淫羊藿产量和品质的影响,为柔毛淫羊藿的高产优质栽培提供科学的施肥依据。该试验采用田间小区试验,以CK(不施肥)为对照,设置5个不同比例有机肥和化肥配施处理组,OF0(100%化肥)、OF25(25%有机肥配施)... 详细信息

探究不同比例有机肥和化肥配施对柔毛淫羊藿产量和品质的影响,为柔毛淫羊藿的高产优质栽培提供科学的施肥依据。该试验采用田间小区试验,以CK(不施肥)为对照,设置5个不同比例有机肥和化肥配施处理组,OF0(100%化肥)、OF25(25%有机肥配施)、OF50(50%有机肥配施)、OF75(75%有机肥配施)和OF100(100%有机肥),测定不同施肥模式对柔毛淫羊藿农艺性状、产量、有效成分含量、养分积累量及土壤理化的影响,并采用CRITIC权重法对药材产量及品质进行综合评价。结果发现各施肥处理药材产量均较CK显著增加,尽管各有机肥配施化肥处理产量略低于OF0处理,但无显著差异,表明有机肥配施化肥可以保证药材产量。随着有机肥配比的提高,药效成分朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C呈先增后降趋势,以OF25处理含量最高,淫羊藿苷则呈不断上升趋势,以OF100处理最佳,但总体来说,总黄酮醇苷ABCI以OF25处理积累最多。CRITIC法结果显示药材情况综合得分前三的施肥处理为OF25、OF50、OF75。有机肥配施化肥有利于提高土壤的持肥能力和供肥能力,土壤指标以OF100处理最优,土壤酶活以OF75处理活性最高,同时有机肥配施化肥有助于植株对养分的吸收积累,以OF25处理促进最明显。综合不同比例有机肥配施化肥对柔毛淫羊藿产量、有效成分含量及养分积累量等指标,建议在柔毛淫羊藿生产中第一年采用25%比例(7 500 kg·hm^(-2))的有机肥和化肥配施,以促进柔毛淫羊藿产业增产提质。

关键词：柔毛淫羊藿有机肥化肥有效成分土壤理化养分吸收 CRITIC权重法

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麦冬根腐病的病原鉴定及室内防治药剂筛选

中药材 2024年 2168-2173页

作者：毛婷王帆帆游景茂赵翠荣郭晓亮段媛媛唐涛湖北省农业科学院中药材研究所襄阳市农业科学院

目的:明确麦冬根腐病的症状、分离鉴定病原并筛选有效的防治药剂。方法:本研究采用组织分离法分离纯化麦冬根腐病的病原菌;通过针刺接种进行致病性验证;采用形态学和分子生物学相结合的方法对麦冬根腐病的病原进行鉴定;最后利用菌丝生... 详细信息

目的:明确麦冬根腐病的症状、分离鉴定病原并筛选有效的防治药剂。方法:本研究采用组织分离法分离纯化麦冬根腐病的病原菌;通过针刺接种进行致病性验证;采用形态学和分子生物学相结合的方法对麦冬根腐病的病原进行鉴定;最后利用菌丝生长速率法测定11种化学杀菌剂和11种生物源杀菌剂对病原菌株的抑制效果。结果:从感染了根腐病的麦冬植株中分离了病原菌株,其中菌株MD1的致病性最强。经形态学和分子生物学鉴定,引起麦冬根腐病的病原菌株MD1为镰孢菌属锐顶镰刀菌Fusarium acuminatum。化学杀菌剂中,异菌脲和氟硅唑对病原菌株MD1的抑制效果较好,其EC50值分别为0.07和0.10μg/mL。生物源杀菌剂中,乙蒜素、中生菌素和丁子香酚对菌株MD1的抑制效果较好,其EC50值分别为29.08、30.60和14.81μg/mL。结论:本研究首次报道了麦冬根腐病的病原为锐顶镰刀菌Fusarium acuminatum,并初步筛选出室内防治效果较好的药剂,为该病害的防治提供了理论基础。

关键词：麦冬病原分离鉴定锐顶镰刀菌室内防治药剂筛选

不同氮肥用量对湖北贝母氮磷钾吸收及生物碱积累的影响

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浙江农林大学学报 2024年

作者：姜利郭坤元陈钢程维舜罗茜王素萍黄翔杜雷张贵友洪娟武汉市农业科学院环境与安全研究所湖北省农业科学院中药材研究所

【目的】分析湖北贝母Fritillaria hupehensis鳞茎中氮、磷、钾质量分数及积累量的年变化规律，探讨不同氮肥用量对湖北贝母干物质及各生物碱积累的影响，为湖北贝母合理施肥提供科学依据。【方法】以湖北省恩施市新塘乡境内种植的湖北... 详细信息

【目的】分析湖北贝母Fritillaria hupehensis鳞茎中氮、磷、钾质量分数及积累量的年变化规律，探讨不同氮肥用量对湖北贝母干物质及各生物碱积累的影响，为湖北贝母合理施肥提供科学依据。【方法】以湖北省恩施市新塘乡境内种植的湖北贝母为材料，在磷肥（五氧化二磷）、钾肥（氧化钾）用量均为102.4和86.4 kg·hm-2条件下，设置4个氮肥处理：不施氮肥（N0）、氮肥用量为58.0 kg·hm-2（N1）、氮肥用量为116.0 kg·hm-2（N2）、氮肥用量为174.0 kg·hm-2（N3），分别于苗期、花期、收获期取样，测定不同生育期湖北贝母鳞茎中氮、磷、钾及各生物碱质量分数。【结果】随氮肥用量增加，单株湖北贝母鳞茎的干物质，鳞茎中氮、磷、钾及总生物碱，贝母素甲，贝母素乙，湖贝甲素，贝母辛的积累量显著增加（P湖北贝母苗期鳞茎中钾磷比小于3.4，花期及收获期贝母鳞茎中钾磷比均大于3.4；整个生育期内湖北贝母鳞茎中氮磷比小于14.0，氮钾比小于2.1。苗期及收获期，湖北贝母鳞茎中总生物碱、贝母素甲、贝母素乙、湖贝甲素质量分数均随氮肥用量增加而降低；花期湖北贝母鳞茎中贝母素甲、贝母素乙、贝母辛质量分数随氮肥用量增加呈上升趋势。氮肥用量为116.0 kg·hm-2时，湖北贝母鳞茎中总生物碱、贝母素甲、贝母素乙、湖贝甲素、贝母辛积累量的峰值分别为56.50、4.20、12.73、1.66、3.68 mg·株-1。相同氮肥用量时，随生育期延长，除贝母辛外，其余各生物碱质量分数均为收获期最高，花期最低。氮肥用量为116.0kg·hm-2时，花期至收获期鳞茎中贝母素甲、贝母素乙、贝母辛的积累速率降低。苗期至花期，湖北贝母鳞茎的干物质积累速率较快，花期至收获期鳞茎中总生物碱的积累能力较强。【结论】氮肥用量对湖北贝母产量及品质影响显著，过量施用氮肥不利于鳞茎干物质及各生物碱的积累。湖北贝母在不同物候期鳞茎干物质及生物碱的积累是动态的过程，营养生长期以产量提升为主，生殖生长阶段以生物碱积累为主。图4表2参28

关键词：湖北贝母氮肥生育期氮磷钾生物碱