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腺病毒介导的血管内皮生长因子联合干细胞生长因子治疗严重肢体缺血的实验研究

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实用医学杂志 2024年第5期40卷 639-645页

作者：钟睿王家宁张蕾郭凌郧杨建业郑飞晏誉文余丹丽谭利国湖北医药学院附属人民医院心内科湖北十堰442000 湖北医药学院附属人民医院临床研究所湖北十堰442000 湖北医药学院附属人民医院消化内镜中心湖北十堰442000

目的探究血管内皮生长因子(VEGF)和干细胞生长因子(HGF)双基因腺病毒载体在缺血组织中促血管生成的作用及疗效。方法将84只昆明小鼠随机分为假手术组、空白对照组、VEGF组、HGF组、VEGF+HGF组,构建左侧下肢缺血模型,血流仪观察缺血组... 详细信息

目的探究血管内皮生长因子(VEGF)和干细胞生长因子(HGF)双基因腺病毒载体在缺血组织中促血管生成的作用及疗效。方法将84只昆明小鼠随机分为假手术组、空白对照组、VEGF组、HGF组、VEGF+HGF组,构建左侧下肢缺血模型,血流仪观察缺血组织血运情况,Western blot及ELISA检测各组小鼠不同时间点VEGF、HGF表达,免疫组织化学染色检测缺血组织的血管生成情况(CD31、SMA),以小鼠治疗期间副作用评估安全性。结果建模成功后,各组小鼠左侧下肢血流流速均显著下降;术后第7天,各组小鼠左侧下肢血流流量均明显优于术后即刻(P <0.05),且Ad-VEGF-HGF组小鼠左下肢血流量明显优于其他各组(P <0.05);术后28 d Ad-VEGF-HGF组小鼠左下肢血流量逐步稳定,且术后Ad-VEGF-HGF组小鼠血流明显优于其余各组,且VEGF组、HGF组均显著优于对照组(P <0.05);Western Blot及ELISA检测发现术后7、14、28 d时Ad-HGF组、Ad-VEGF组、Ad-VEGF-HGF组HGF蛋白、VEGF蛋白均明显高于对照组(P <0.05),且14 d Ad-VEGF-HGF组的表达水平处于相对峰值(P <0.001),术后第28天时表达水平逐步降低至术前水平。结论 Ad-VEGF-HGF基因注射可显著提高小鼠体内VEGF和HGF蛋白的表达水平并快速达到相对峰值水平,继而进一步促进下肢缺血后的血管生成,增加血流量,改善下肢循环。

关键词：血管内皮生长因子干细胞生长因子下肢缺血腺病毒载体

双氢青蒿素通过诱导自噬抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖

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肿瘤防治研究 2024年第1期51卷 22-26页

作者：张丹张昊何俐湖北医药学院十堰442000 十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)口腔医学研究所十堰442000

目的探讨双氢青蒿素(DHA)对人口腔鳞癌细胞增殖能力的影响及其作用机制。方法用不同浓度的双氢青蒿素干预CAL27细胞,采用CCK-8法检测其细胞增殖活力,集落形成实验检测细胞克隆形成能力;基于网络药理学和生物信息学筛选DHA抑制口腔癌生... 详细信息

目的探讨双氢青蒿素(DHA)对人口腔鳞癌细胞增殖能力的影响及其作用机制。方法用不同浓度的双氢青蒿素干预CAL27细胞,采用CCK-8法检测其细胞增殖活力,集落形成实验检测细胞克隆形成能力;基于网络药理学和生物信息学筛选DHA抑制口腔癌生物学行为的潜在靶点;不同浓度的DHA干预CAL27细胞后,Western blot检测增殖相关蛋白PCNA和自噬相关蛋白Beclin-1、LC3的表达;联合自噬阻断剂3-甲基腺嘌呤和自噬诱导剂雷帕霉素与双氢青蒿素共处理细胞后,检测细胞增殖活力、克隆形成能力和增殖及自噬相关蛋白的表达。结果双氢青蒿素显著降低了CAL27细胞的增殖活力及克隆形成能力,且呈现浓度依赖性,PCNA的表达量也显著下降。网络药理学结合生物信息学发现DHA抑制口腔癌的靶点涉及自噬相关通路。DHA干预可升高细胞内自噬相关蛋白Beclin-1、LC3的表达,DHA联合自噬阻断剂共处理CAL27后,细胞的增殖活力及克隆形成能力降低,PCNA的表达升高、Beclin-1、LC3的表达降低。结论双氢青蒿素可在体外抑制口腔鳞癌细胞的增殖能力,其作用机制可能与诱导细胞自噬相关。

关键词：双氢青蒿素口腔鳞状细胞癌自噬

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人β-防御素3水凝胶治疗大鼠牙周炎

中国组织工程研究 2024年第17期28卷 2690-2695页

作者：王玉雪周歆郑钧元周永庆湖北医药学院湖北省十堰市442000 十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)口腔科湖北省十堰市442000

背景:既往研究显示人β-防御素3具有显著的抗真菌、抗细菌和抗病毒活性,并且在连接先天和获得性免疫应答中起到重要的桥梁作用。目的:观察人β-防御素3水凝胶治疗大鼠牙周炎的效果。方法:以泊洛沙姆188与407为基质,采用冷溶法构建空白... 详细信息

背景:既往研究显示人β-防御素3具有显著的抗真菌、抗细菌和抗病毒活性,并且在连接先天和获得性免疫应答中起到重要的桥梁作用。目的:观察人β-防御素3水凝胶治疗大鼠牙周炎的效果。方法:以泊洛沙姆188与407为基质,采用冷溶法构建空白水凝胶,将人β-防御素3与该水凝胶混合制备人β-防御素3水凝胶。将25只SD大鼠随机分为5组,每组5只:健康组不做任何处理,牙周炎组、空白水凝胶组、盐酸米诺环素组、载药水凝胶组采用正畸结扎钢丝法构建牙周炎模型,造模8周后于颊侧与腭侧牙周袋内分别注射空白水凝胶、盐酸米诺环素、人β-防御素3水凝胶,1次/周,连续给药4周后进行相关检测。结果与结论:①与健康组比较,牙周炎组大鼠牙周菌斑指数、牙龈出血指数及牙周探诊深度均增加(P<0.01);与牙周炎组比较,盐酸米诺环素组与载药水凝胶组大鼠牙周菌斑指数、牙龈出血指数及牙周探诊深度均减少(P<0.05);②大鼠脏器苏木精-伊红染色显示载药水凝胶无毒性作用;③体视显微镜与Micro CT扫描显示,与健康组比较,牙周炎组大鼠牙根暴露及釉牙骨质界-牙槽嵴顶距离均增加(P<0.05);与牙周炎组比较,盐酸米诺环素组与载药水凝胶组大鼠牙根暴露、釉牙骨质界-牙槽嵴顶距离均减少(P<0.05);④苏木精-伊红、Masson及抗酒石酸酸性磷酸酶染色显示,牙周炎组、空白水凝胶组大鼠牙周炎症明显、纤维结构混乱、破骨细胞活跃,盐酸米诺环素组、载药水凝胶组大鼠牙周炎症水平降低、纤维排列较规则、破骨细胞减少;⑤qRT-PCR检测显示,与健康组比较,牙周炎组大鼠牙龈组织中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达升高(P<0.05);与牙周炎组比较,盐酸米诺环素组、载药水凝胶组大鼠牙龈组织中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达降低(P<0.05);⑥结果表明,人β-防御素3水凝胶可通过降低炎症因子的相对表达及抑制破骨来减轻大鼠牙周组织炎症。

关键词：人β-防御素3 水凝胶温敏型牙周炎炎症因子

肺部感染患者美罗培南相关血小板减少症的影响因素分析

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中国医院药学杂志 2024年第5期44卷 564-569页

作者：王萧贺艳邬闻文朱建勇刘艳红王佳于慧斌湖北医药学院药学院湖北十堰442000 十堰市人民医院/湖北医药学院附属人民医院药学部湖北十堰442000 湖北医药学院公共卫生与健康学院预防医学教研室湖北十堰442000 十堰市人民医院/湖北医药学院附属人民医院呼吸内科湖北十堰442000

目的:探讨肺部感染患者美罗培南相关血小板减少症的影响因素及其预测价值。方法:采用回顾性病例对照研究,通过中国医院药物警戒系统(CHPS)检索、筛选十堰市人民医院2018年1月至2021年12月使用美罗培南治疗的肺部感染患者临床资料,分别... 详细信息

目的:探讨肺部感染患者美罗培南相关血小板减少症的影响因素及其预测价值。方法:采用回顾性病例对照研究,通过中国医院药物警戒系统(CHPS)检索、筛选十堰市人民医院2018年1月至2021年12月使用美罗培南治疗的肺部感染患者临床资料,分别使用单因素分析和多因素logistic回归分析美罗培南相关血小板减少症的影响因素。结果:纳入研究患者625例,其中美罗培南相关血小板减少症73例。单因素分析结果显示,年龄、高血压、冠心病、血小板基线值、血清肌酐值和分别联用喹诺酮类、头孢菌素类、青霉素类、利奈唑胺药物与血小板减少症显著相关(P<0.05);多因素logistic回归结果显示,高血压(OR=1.811,95%CI:1.029~3.188)、血小板基线值(OR=0.988,95%CI:0.983~0.993)、联用头孢菌素类药物(OR=2.998,95%CI:1.573~5.711)或青霉素类药物(OR=2.703,95%CI:1.317~5.548)是肺部感染患者美罗培南相关血小板减少症的独立危险因素。结论:高血压、血小板基线值、联用头孢菌素类或青霉素类药物是肺部感染患者美罗培南相关血小板减少症的重要影响因素,通过多因素联合分析可有效评估和预测肺部感染患者发生美罗培南相关血小板减少症的风险。

关键词：美罗培南肺部感染血小板减少症中国医院药物警戒系统

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巨噬细胞在慢性疼痛中的作用机制和研究进展

中国疼痛医学杂志 2024年第3期30卷 205-209,214页

作者：田伟苏山春徐雪琴柯昌斌湖北医药学院附属太和医院麻醉科十堰442000 湖北医药学院附属太和医院麻醉疼痛研究所十堰442000

在医学研究中,慢性疼痛一直是备受关注的热点领域。慢性疼痛的生理学和病理学机制一直是研究的难点,其包括疼痛信号的传导、感知和调控机制等。在临床中慢性疼痛的发生通常与炎症、肿瘤、神经损伤等因素有关。巨噬细胞作为免疫系统中的... 详细信息

在医学研究中,慢性疼痛一直是备受关注的热点领域。慢性疼痛的生理学和病理学机制一直是研究的难点,其包括疼痛信号的传导、感知和调控机制等。在临床中慢性疼痛的发生通常与炎症、肿瘤、神经损伤等因素有关。巨噬细胞作为免疫系统中的重要成分,不仅起到吞噬清除功能,还能产生多种炎症因子和细胞因子,调节炎症和免疫反应。最近研究表明巨噬细胞在各种慢性疼痛的发生和发展中都起着重要作用,提示其可能是未来治疗疼痛的有效靶点之一。本文将重点讨论巨噬细胞在慢性疼痛领域的最新进展,包括巨噬细胞的功能和作用机制,以及与巨噬细胞相关的信号通路和分子机制,为进一步研究和治疗慢性疼痛提供新的思路和策略。

关键词：慢性疼痛巨噬细胞炎症肿瘤

基于筒鞘蛇菰治疗高尿酸血症的网络药理学分析及其对高尿酸细胞模型和高尿酸血症模型小鼠的治疗作用

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吉林大学学报（医学版） 2024年第1期50卷 58-70页

作者：刘丽黄林生赵永恒曹文洁钱永帅余惠凡李飞湖北医药学院药学院湖北十堰442000 湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000 湖北省十堰市太和医院肝胆胰外科湖北十堰442000

目的:基于网络药理学、分子对接和体内外高尿酸模型实验探讨筒鞘蛇菰治疗高尿酸血症(HUA)的作用,阐明其活性成分的主要作用靶点和信号通路相关机制。方法:通过台湾地区中医药资料库、本草组鉴数据库、化学专业数据库、TargetNet数据库、... 详细信息

目的:基于网络药理学、分子对接和体内外高尿酸模型实验探讨筒鞘蛇菰治疗高尿酸血症(HUA)的作用,阐明其活性成分的主要作用靶点和信号通路相关机制。方法:通过台湾地区中医药资料库、本草组鉴数据库、化学专业数据库、TargetNet数据库、SwissTargetPrediction数据库、GeneCards数据库、药物靶点数据库(TTD)、DrugBank数据库、DisGeNET数据库、人类在线孟德尔遗传(OMIM)数据库和Venny数据库获取筒鞘蛇菰治疗HUA的潜在靶点;利用STRING数据库和Cytoscape软件构建筒鞘蛇菰活性成分-预测靶点网络和蛋白-蛋白互作(PPI)网络,并进行拓扑分析筛选筒鞘蛇菰主要活性成分和核心靶点,采用R软件进行基因本体论(GO)功能和京都基因组与基因百科全书(KEGG)信号通路富集分析,采用AutoDock Vina软件进行分子对接验证。NRK-52E细胞分为空白对照组、空白给药组、模型组和不同浓度(2.0、10.0及50.0μmol·L-1)圣草酚(EDT)组,模型组和不同浓度EDT组细胞采用腺苷诱导制备高尿酸细胞模型,采用高效液相色谱(HPLC)法检测各组细胞培养上清液中尿酸(UA)水平。雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、空白给药组、模型组和EDT组,后2组小鼠制备HUA模型,采用试剂盒检测各组小鼠血清中UA、肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN)水平;取小鼠两侧肾组织,称质量,计算各组小鼠肾脏指数;TUNEL染色法观察各组小鼠肾组织中细胞凋亡情况;Western blotting法检测各组小鼠肾组织中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平。结果:筛选得到筒鞘蛇菰6种活性成分,涉及116个交集靶点,14个核心靶点。富集分析得到1828个GO条目和145条信号通路。分子对接结果,EDT与MMP-9具有较好的结合活性。高尿酸细胞实验,与空白对照组比较,模型组细胞中UA水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,2.0、10.0和50.0μmol·L-1 EDT组细胞中UA水平明显降低(P<0.01)。与空白对照组比较,模型组小鼠血清中UA、Cr和BUN水平及肾脏指数明显升高(P<0.01);与模型组比较,EDT组小鼠血清中UA、Cr和BUN水平及肾脏指数明显降低(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,模型组小鼠肾组织中可见大量凋亡细胞;与模型组比较,EDT组小鼠肾组织中凋亡细胞数明显减少。与空白对照组比较,模型组小鼠肾组织中p-AKT/AKT及p-PI3K/PI3K比值和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),Bax和MMP-9蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,EDT组小鼠肾组织中p-AKT/AKT及p-PI3K/PI3K比值和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Bax和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:筒鞘蛇菰活性成分EDT具有降UA作用,且可能通过激活PI3K/AKT信号通路抑制细胞凋亡并缓解肾损伤。

关键词：网络药理学筒鞘蛇菰圣草酚高尿酸血症肾损伤

白藜芦醇对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用:基于抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 270-279页

作者：桂建军孙晓东温舒刘欣覃冰清桑明湖北医药学院基础医学院湖北十堰442000 湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院转化医学中心湖北襄阳441000 湖北省帕金森病临床医学研究中心湖北襄阳441000 武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的探讨白藜芦醇(RES)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病模型小鼠肠道屏障的保护作用及其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的分子机制。方法将52只小鼠随机分为对照组(n=12),MPTP组(n=14),RES低剂量(MPTP+RES30)组(n... 详细信息

目的探讨白藜芦醇(RES)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病模型小鼠肠道屏障的保护作用及其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的分子机制。方法将52只小鼠随机分为对照组(n=12),MPTP组(n=14),RES低剂量(MPTP+RES30)组(n=13)及高剂量(MPTP+RES90)组(n=13)。利用30 mg/kg MPTP腹腔注射7 d诱导帕金森病小鼠模型,对照组腹腔注射等剂量PBS,治疗组分别利用30 mg/kg和90 mg/kg RES干预3周。小鼠行为学测试分析RES对帕金森模型小鼠运动功能的影响。Western blotting检测RES在TLR4/MyD88/Nf-κB信号通路中发挥的作用。免疫组织化学、免疫荧光、酶联免疫吸附试验和透射电镜检测验证RES抑制炎症和保护肠屏障的作用。结果与对照组相比,MPTP组小鼠在运动功能、多巴胺能神经元数量、神经炎症、LPS和LBP水平以及肠屏障紧密连接蛋白表达水平等方面的差异具有统计学意义(P<0.05);RES治疗组与MPTP组相比,运动功能改善(P<0.01),神经元数量恢复,TH蛋白表达上调(P<0.05),GFAP、Iba-1和TLR4的表达下调,粪便、血浆中LPS、LBP水平下降(P<0.05),ZO-1、Claudin-1的表达恢复(P<0.01),结肠组织TLR4、MyD88、NF-κB表达下调(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。电镜检测结果显示,与MPTP组比较,MPTP+RES30组紧密连接复合体形态正常,肠绒毛排列整齐且紧密。结论RES通过抑制肠屏障TLR4/MyD88/NF-κB信号通路介导的炎症反应修复肠屏障,从而改善MPTP诱导的帕金森病小鼠模型的运动功能障碍和神经病变,对多巴胺能神经元发挥保护作用。

关键词：白藜芦醇帕金森病肠-脑轴多巴胺能神经元 TLR4

玄参水提取物对高糖暴露条件下INS-1细胞AMPK的激活作用

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医药导报 2024年第6期43卷 850-854页

作者：郭旭周俊李晓晗陈仕琦高艳果张永红王启斌郑涛陈黎湖北医药学院药学院十堰442000 湖北医药学院附属太和医院武当中医药研究所十堰442000 湖北医药学院附属太和医院药学部十堰442000

目的研究玄参水提取物(AESN)对高糖(HG)条件下INS-1细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的影响。方法将INS-1细胞培养于HG培养基中,并给予不同浓度AESN共孵育处理;利用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测AESN干预对细胞增殖/活力和焦亡小体形成... 详细信息

目的研究玄参水提取物(AESN)对高糖(HG)条件下INS-1细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的影响。方法将INS-1细胞培养于HG培养基中,并给予不同浓度AESN共孵育处理;利用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测AESN干预对细胞增殖/活力和焦亡小体形成的影响,使用Western blotting法观察AESN对细胞内AMPK表达及磷酸化水平的影响;利用时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET)实验检测AESN对AMPK激酶活性的影响。结果CCK-8检测结果显示同正常培养条件相比,HG暴露显著降低INS-1细胞增殖/活力并增加焦亡小体形成数量,Western blotting检测结果表明HG暴露可导致细胞内AMPK磷酸化水平下降;而AESN共孵育可呈浓度依赖性地增加INS-1细胞增殖/活力、抑制焦亡小体形成并激活AMPK。TR-FRET实验结果表明,AESN可浓度依赖性增加AMPK激酶活性。结论AESN对HG暴露条件下INS-1细胞AMPK具有激活作用。

关键词：玄参腺苷酸活化蛋白激酶高糖暴露 INS-1细胞荧光共振能量转移

α-常春藤皂苷通过激活和稳定p53/Noxa信号诱导肝癌细胞凋亡

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医药导报 2024年第3期43卷 334-345页

作者：陈晓静周莉刘凯琪段菊凤刘明李洪亮汪选斌湖北医药学院附属人民医院药学部和药学院十堰442000 湖北医药学院生物医药研究院十堰442000 武当特色中药研究湖北省重点实验室(湖北医药学院) 十堰442000

目的研究预知子活性成分α-常春藤皂苷对肝癌细胞的体内外抑制作用及其机制。方法将肝癌细胞分为4组,分别给予0、10、20和30μmol·L^(-1)α-常春藤皂苷至24、48 h。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡率,转录组学筛选α-常... 详细信息

目的研究预知子活性成分α-常春藤皂苷对肝癌细胞的体内外抑制作用及其机制。方法将肝癌细胞分为4组,分别给予0、10、20和30μmol·L^(-1)α-常春藤皂苷至24、48 h。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡率,转录组学筛选α-常春藤皂苷作用的信号通路,核糖核酸(RNA)干扰、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹检测信号通路和凋亡通路信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达,体内移植瘤试验验证α-常春藤皂苷体内对肝癌细胞生长的抑制作用。结果α-常春藤皂苷通过激活腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9(Caspase9)和Caspase3诱导肝癌细胞凋亡。转录组学、qRT-PCR和蛋白免疫印迹检测发现α-常春藤皂苷上调了p53和Noxa的表达,并抑制p53和Noxa蛋白的降解,α-常春藤皂苷还能逆转p53/Noxa敲低所致的凋亡减少。动物实验结果表明,α-常春藤皂苷可抑制肝癌细胞移植瘤的增殖。结论α-常春藤皂苷可通过激活和稳定p53/Noxa信号诱导肝癌细胞凋亡。

关键词： α-常春藤皂苷肝细胞癌凋亡 p53 Noxa