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白色念珠菌水溶物诱导的川崎病模型心脏与脾脏病理学特征

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临床与实验病理学杂志 2024年第7期40卷 719-724页

作者：张嘉鑫张宗丽罗一帆李涛席世兵湖北医药学院附属太和医院儿科十堰442000 湖北医药学院附属太和医院儿科疾病研究所十堰442000

目的探讨白色念珠菌水溶物(candida albicans watersoluble fraction, CAWS)诱导的川崎病(Kawasaki disease, KD)模型心脏与脾脏病理学特征,为KD病理机制提供研究基础。方法采用腹腔注射CAWS构建C57BL/6小鼠KD模型,取心脏、主动脉和... 详细信息

目的探讨白色念珠菌水溶物(candida albicans watersoluble fraction, CAWS)诱导的川崎病(Kawasaki disease, KD)模型心脏与脾脏病理学特征,为KD病理机制提供研究基础。方法采用腹腔注射CAWS构建C57BL/6小鼠KD模型,取心脏、主动脉和脾脏标本,测体、心脏和脾脏质量;应用HE染色观察心脏、主动脉和脾脏的形态学变化;运用qRT-PCR和免疫荧光法检测脾脏中成熟巨噬细胞标志物(F4/80)、TNF-α和IL-1β的表达水平,分析其临床病理学特征并复习相关文献。结果与对照组相比,模型组小鼠的心脏和体质量无明显差异,但脾脏质量明显增加(P细胞浸润,主动脉血管壁的弹性纤维结构紊乱并伴黏液样变性,脾脏红白髓结构紊乱,大量巨噬细胞浸润。模型组小鼠脾脏F4/80(2.58倍,P细胞浸润并伴TNF-α和IL-1β表达增加。

关键词：川崎病白色念珠菌水溶物脾肿大巨噬细胞浸润

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膀胱癌合并类白血病反应患者临床诊治分析(附2例报告)

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国际泌尿系统杂志 2024年第2期44卷 345-347页

作者：凌生涛姚启盛黄力王黎李昊陈从波十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)泌尿外科十堰442000 湖北医药学院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室十堰442000

目的探讨膀胱癌合并类白血病反应患者的临床特点、发病机制及预后。方法分析本院收治的2例膀胱癌并类白血病反应患者的临床资料,并就其发病特点、治疗方案和预后进行相关文献复习。结果2例膀胱癌患者术前血白细胞数均明显升高,行骨髓穿... 详细信息

目的探讨膀胱癌合并类白血病反应患者的临床特点、发病机制及预后。方法分析本院收治的2例膀胱癌并类白血病反应患者的临床资料,并就其发病特点、治疗方案和预后进行相关文献复习。结果2例膀胱癌患者术前血白细胞数均明显升高,行骨髓穿刺检查示类白血病反应,术后血白细胞数恢复正常,病理检查均提示分期晚,预后差。结论膀胱癌并类白血病反应发病较少,其发病机制可能与肿瘤细胞分泌粒细胞集落刺激因子(G-CSF)有关。

关键词：膀胱肿瘤类白血病反应粒细胞集落刺激因子穿刺术

基于加权基因共表达网络探索喉癌干性关键基因

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数理医药学杂志 2024年第3期37卷 171-179页

作者：昝雨欣丁妍湖北医药学院生物医药研究院湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所湖北十堰442000 胚胎干细胞研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的采用肿瘤干性指数mRNAsi筛选喉癌相关基因,为喉癌相关研究提供新思路。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载喉癌mRNA表达谱,采用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,W... 详细信息

目的采用肿瘤干性指数mRNAsi筛选喉癌相关基因,为喉癌相关研究提供新思路。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载喉癌mRNA表达谱,采用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)构建基因共表达网络模块,得到干性最显著模块的差异表达基因。采用Cox回归和最小绝对收缩和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)算法建立风险曲线,基于肿瘤免疫功能障碍与排斥(Tumor Immune Dysfunction and Exclusion,TIDE)数据库采用单样本基因集富集分析(single sample gene set enrichment analysis,ssGSEA)探索交集基因的免疫浸润模式,基于CellMiner数据库分析基因药物敏感性,运用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)富集关键基因在喉癌所参与的功能和信号通路。结果通过WGCNA共构建30个喉癌共表达基因模块,选择浅黄色和紫色共表达基因模块进行Cox回归分析。LASSO算法构建模型筛选得到MTHFD2和TBX2基因,并构建风险曲线,其与浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cells,pDCs)和辅助性T细胞2(T helper 2 cell,Th2)免疫细胞相关,且低风险组的TIDE评分明显高于高风险组,达沙替尼与基因耐药性增加相关,功能富集显示关键基因可能与角化细胞相关。结论MTHFD2和TBX2基因可作为喉癌mRNAsi相关生物标志物。

关键词：喉癌肿瘤干细胞干性指数免疫加权基因共表达网络分析

TBX2基因在头颈鳞癌中甲基化相关的预后分析

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数理医药学杂志 2024年第2期37卷 100-107页

目的探究TBX2基因与头颈鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)的关系,分析甲基化预后的价值。方法综合利用UCSC Xena数据库、基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库、人类蛋白质图谱(Human Protein Atlas,HPA)数据库、UALCAN数据库挖掘TBX2基因的表达、DNA甲基化和临床相关性,利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)法富集TBX2在HNSCC中所参与的信号通路。结果TBX2基因在HNSCC中高表达,TBX2基因高、低表达组HNSCC患者的总生存率(overall survival,OS)无明显差异,但HNSCC中TBX2基因的表达与临床分级分期有关。TBX2基因某些cg位点的低甲基化水平与较差的OS和无进展生存期(progression free survival,PFS)密切相关。GSEA结果显示,TBX2基因主要参与钙信号通路、黏着斑、蛋白酶体等多条通路。结论TBX2基因可作为HNSCC特异性诊断和预后的生物标志物。

关键词： TBX2基因甲基化头颈鳞癌预后

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青蒿素及其纳米制剂抗肺癌研究进展

中药药理与临床 2024年

作者：李童斐韩文雅任涛王骁唐以军王梅芳湖北医药学院附属十堰市太和医院呼吸与危重症医学科湖北医药学院基础医学院药理教研室湖北医药学院天然药物纳米制剂研究十堰市重点实验室

肺癌的治疗策略主要包括手术切除、化疗及免疫治疗。化疗是重要手段，其在早期干预及术后辅助治疗中都有重要的临床意义。天然药物来源广，其中一些有强效的抗肿瘤活性，但机制未明。提取于黄花蒿的青蒿素因其特有的氧桥结构被应用在抗... 详细信息

肺癌的治疗策略主要包括手术切除、化疗及免疫治疗。化疗是重要手段，其在早期干预及术后辅助治疗中都有重要的临床意义。天然药物来源广，其中一些有强效的抗肿瘤活性，但机制未明。提取于黄花蒿的青蒿素因其特有的氧桥结构被应用在抗疟疾及抗肺癌中。部分学者也尝试解析青蒿素及其纳米制剂的作用靶标和机制，这成为近年的研究热点。本文从天然药物青蒿素及其衍生药物在抗肺癌中的研究切入，总结了青蒿素类药物主要通过促进铁内流、激活胞内ROS以杀伤肺癌细胞。此外，本文还进一步对现有的青蒿素类药物的纳米剂型进行了归纳，分析了青蒿素纳米药剂的主要类型及其在治疗肺癌中的优势。青蒿素及其衍生物和纳米制剂抗肺癌涉及的机制较为复杂，主要与调控细胞凋亡、促进DNA损伤、激活细胞自噬、诱导铁死亡等有关。此外，药物还参与调控肺癌微环境中免疫细胞的表型及功能，但其作用靶标及分子机制仍未被完全揭示。本文旨在为青蒿素类药物及其纳米剂型介导的抗肺癌治疗提供系统性的理论支持。

关键词：肺癌青蒿素纳米制剂化疗免疫微环境

含Mn^(2+)化合物和氯喹联合作用对PC12细胞株的毒性机制研究

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公共卫生与预防医学 2024年第4期35卷 16-19页

作者：付小龙余子敬杨永刚遵义医科大学基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室贵州遵义563006 湖北省十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院) 湖北十堰442000

目的观察低浓度含Mn^(2+)化合物和自噬抑制药物氯喹长时间共同作用对神经细胞株PC12细胞的毒性作用及机制。方法取对数生长期PC12细胞,分别给予0(对照)、5、10、25、50、100、200μM氯化锰,5、10、25、50、100μM氯喹;染毒24 h。采用... 详细信息

目的观察低浓度含Mn^(2+)化合物和自噬抑制药物氯喹长时间共同作用对神经细胞株PC12细胞的毒性作用及机制。方法取对数生长期PC12细胞,分别给予0(对照)、5、10、25、50、100、200μM氯化锰,5、10、25、50、100μM氯喹;染毒24 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测氯化锰和氯喹对细胞存活率的影响。并联合给药,观察两种化合物共同作用24、48、72 h对细胞存活率的影响。进一步检测线粒体呼吸功能,探讨氯化锰和氯喹可能的毒性作用机理。结果与空白对照组比较,氯化锰和氯喹单独给药均对细胞增殖活力具有抑制作用,其效应表现为给药剂量不断增加,而细胞存活率逐渐降低。实验选取对细胞增殖活力无显著影响的氯化锰和氯喹浓度分别为40μM和2.5μM;在此浓度下,与空白对照组相比,氯喹单独给药24、48和72 h,其细胞存活率和线粒体呼吸功能没有明显改变;氯化锰单独给药作用72 h,其线粒体呼吸功能未受影响;但氯化锰和氯喹联合给药共同作用72 h后,细胞的存活率和线粒体呼吸功能均显著降低(P细胞具有明显毒性,其毒性机制可能与其对线粒体功能损伤有关。

关键词：氯化锰氯喹环境和食品暴露神经毒性线粒体功能

过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型的建立

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生物学杂志 2024年第4期41卷 24-29页

作者：徐菁何柳周芳婷潘勤陈姗罗靓湖北中医药大学、药学院、药物分析教研室武汉430071 武汉大学泰康医学院(基础医学院)人体解剖学与组织胚胎学系武汉430071 武汉市蔡甸区人民医院检验科武汉430100

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳... 详细信息

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳定表达TLR2分子的Nalm-6细胞(TLR2^(+))。利用倒置荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光表达情况,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测相关蛋白表达水平,采用CCK-8以及流式细胞术检测细胞存活率和细胞增殖水平。结果显示:倒置荧光显微镜下可见成功转染慢病毒的Nalm-6细胞表达绿色荧光和嘌呤霉素抗性。Western Blot检测到TLR2在Nalm-6细胞中成功表达,且TLR2信号的激活明显增强PI3K-AKT信号轴分子的磷酸化水平。CCK-8和流式细胞术发现TLR2活化可提升细胞存活率,促进细胞增殖。研究成功构建了过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型,并在此基础上验证TLR2活化不仅能够增强B细胞PI3K-AKT信号通路传导,还可促进细胞增殖。此模型为进一步探究TLR2通路对B细胞抗感染免疫功能的影响奠定基础。

关键词： TLR2 慢病毒载体 B淋巴细胞 PI3K-AKT信号通路细胞增殖

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HPV L1保守序列多肽抗血清降解HPV6感染能力的测试

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中国免疫学杂志 2024年第1期40卷 78-81页

作者：邓金芳李志英薛冰肖长义三峡大学附属仁和医院妇产科三峡大学妇科肿瘤研究所宜昌443000 三峡大学基础医学院组织学与胚胎学教研室宜昌443000

目的:明确对不同类型人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白(HPV L1)具有交叉反应性的HPV L1 C-末端保守序列抗体是否具有降解HPV6感染能力的作用。方法:收集尖锐湿疣标本,从收集的标本中找出HPV6型感染病例,并提取病毒。将多肽抗血清按不同比例稀释... 详细信息

目的:明确对不同类型人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白(HPV L1)具有交叉反应性的HPV L1 C-末端保守序列抗体是否具有降解HPV6感染能力的作用。方法:收集尖锐湿疣标本,从收集的标本中找出HPV6型感染病例,并提取病毒。将多肽抗血清按不同比例稀释,与得到的病毒共同培养并中和,接触单层培养的人永生化角质形成细胞,PCR检验经HPV6病毒接触后人永生化角质形成细胞中HPV6 DNA含量,ELISA检验此细胞中HPV6 L1蛋白存在与否。结果:经不同稀释浓度抗血清中和的HPV6病毒感染的人永生化角质形成细胞,其DNA提取物的PCR产物经电泳,在凝胶280 bp处,HPV6特异性区间呈现不同强度的阳性条带,阳性条带的强度随抗血清浓度的升高逐渐降低。ELISA对经抗血清中和病毒接触的人永生化角质形成细胞提取蛋白进行测试,HPV L1蛋白表达量显示出与上述PCR检测结果同样的梯度变化趋势,变化差异具有统计学意义。结论:初步证明,HPV6 L1保守序列多肽抗血清可部分降解该病毒的感染,该抗血清具有针对更多型HPV进行中和研究的价值。

关键词： HPV 多肽抗血清人永生化角质形成细胞降解体外感染

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Wnt2/β-catenin通路在C57BL/6小鼠肝再生修复中的变化

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安徽医科大学学报 2023年第5期58卷 753-759页

作者：姚路远刘云杨茜鲍欣王琰赵小英唐俊明湖北医药学院基础医学院湖北省胚胎干细胞重点实验室十堰442000 十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)麻醉科十堰442000

目的探讨Wnt2/β-catenin通路在C57BL/6小鼠肝再生修复中的变化特征。方法将C57BL/6雄鼠随机分为假手术组(Sham组)、术后1 d组、术后2 d组、术后4 d组、术后6 d组、术后8 d组,手术组小鼠行部分肝切除术(PHx),分别切除肝左叶和中叶。于... 详细信息

目的探讨Wnt2/β-catenin通路在C57BL/6小鼠肝再生修复中的变化特征。方法将C57BL/6雄鼠随机分为假手术组(Sham组)、术后1 d组、术后2 d组、术后4 d组、术后6 d组、术后8 d组,手术组小鼠行部分肝切除术(PHx),分别切除肝左叶和中叶。于术后第1、2、4、6、8天收集血浆和肝脏组织,丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)生化分析试剂盒检测血浆ALT和AST活力;免疫组化检测各组Ki67阳性细胞数目;免疫荧光检测HNF4-α和Ki67双阳性细胞数、LYVE1和Ki67双阳性细胞数及β-catenin入核细胞数;Western blot检测各组Wnt2蛋白的表达,分析其在肝再生过程中表达的时间特征。结果PHx后第6天肝质量、肝质量/体质量达到高峰,接近Sham组水平。PHx后第1天肝损伤严重,第4天即可恢复正常。PHx后第2天主要是肝细胞增殖,第4、6天主要是肝窦内皮细胞增殖,同时Wnt2/β-catenin通路被激活。结论肝脏有强大的再生修复功能,与肝实质细胞和肝窦内皮细胞的快速增殖密切相关,Wnt2/β-catenin通路在小鼠肝脏再生修复中被激活。

关键词：肝部分切除术肝再生修复 Wnt2 β-catenin

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