检索结果-南通市图书馆

重组人PLCζ蛋白在昆虫细胞/杆状病毒表达系统内的表达、纯化及活性测定

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生物工程学报 2019年第6期35卷 1135-1142页

作者：陈鑫胡玥玥徐鸿毅王晓燕邓锴湖北医药学院附属人民医院生殖医学中心湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院湖北十堰442000

PLCζ是PLC家族的一种新型同工酶,在哺乳动物卵母细胞激活中起着极其重要的作用。近年来,体外大量表达和纯化有活性的PLCζ蛋白用于结构生物学研究一直未能获得成功。本研究首次在杆状病毒表达系统中表达和纯化重组人PLCζ蛋白,首先将人... 详细信息

PLCζ是PLC家族的一种新型同工酶,在哺乳动物卵母细胞激活中起着极其重要的作用。近年来,体外大量表达和纯化有活性的PLCζ蛋白用于结构生物学研究一直未能获得成功。本研究首次在杆状病毒表达系统中表达和纯化重组人PLCζ蛋白,首先将人PLCζ基因克隆至pFastBac-HTA质粒构建重组载体,转化DH10Bac发生位点特异性转座,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒Bacmid-PLCζ;在脂质体介导下将穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞产生重组病毒,扩增病毒感染Sf9昆虫细胞进行蛋白表达;利用Ni2+亲和柱及分子筛来纯化蛋白,并通过考马斯亮蓝染色、Western blotting及飞行时间质谱对蛋白进行鉴定,并进行酶活性测定。结果显示重组蛋白在Sf9昆虫细胞感染杆状病毒后72 h达到峰值并以分泌形式表达在细胞培养基中,Ni2+亲和柱及分子筛纯化后的重组蛋白经Western blotting及电离飞行时间质谱鉴定为PLCζ蛋白,酶活性可达326.8 U/mL。该实验结果为重组人PLCζ蛋白大规模生产和生物医学应用研究提供了可参考利用的技术。

关键词： PLCζ蛋白昆虫细胞杆状病毒表达系统表达纯化鉴定

短期不同水平PM_(2.5)暴露对早卵泡期降调节方案助孕患者妊娠结局的影响

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中华生殖与避孕杂志 2023年第11期43卷 1153-1157页

作者：沈贝贝汤玉佩付奎徐鸿毅杨梦刘玉芳王泽瑞李昊耘孙志丰湖北医药学院生物医学工程学院十堰442000 湖北医药学院附属人民医院(十堰市人民医院)生殖医学中心十堰442000 湖北医药学院第三临床学院十堰442000

目的探讨短期(30 d)不同水平PM_(2.5)暴露对早卵泡期降调节方案助孕患者的卵子质量、胚胎质量和妊娠结局的影响。方法采用回顾性队列研究的方法,选取2018年12月至2019年2月、2019年7~9月期间于湖北医药学院附属人民医院(十堰市人民医院... 详细信息

目的探讨短期(30 d)不同水平PM_(2.5)暴露对早卵泡期降调节方案助孕患者的卵子质量、胚胎质量和妊娠结局的影响。方法采用回顾性队列研究的方法,选取2018年12月至2019年2月、2019年7~9月期间于湖北医药学院附属人民医院(十堰市人民医院)生殖医学中心进行辅助生殖助孕的早卵泡期降调节方案患者作为研究对象。根据PM_(2.5)的空气质量新标准,以115μg/m^(3)作为分界值,将患者分为高暴露组(n=94)和低暴露组(n=254)。患者从开始促排卵到验孕日这一时间段,活动区域均在十堰市市区,计算该时间段大气细颗粒物PM_(2.5)总量及日均量。比较两组间细颗粒物PM_(2.5)对卵子异常率、胚胎质量(可利用胚胎数、优质胚胎数、优质胚胎率、囊胚形成率)及妊娠结局(妊娠率、流产率、移植周期活产率、低出生体质量儿比例等)的影响。结果PM_(2.5)高暴露组的可利用胚胎数[(3.9±1.1)个]、优质胚胎数[(2.9±1.5)个]、优质胚胎率[35.5%(352/992)]与低暴露组[(4.3±1.2)个,P=0.005;(3.4±1.7)个,P=0.001;40.4%(792/1959),P=0.009]相比,均显著下降,而低出生体质量儿比例[21.4%(12/56)]显著高于低暴露组[5.26%(8/156),P<0.001],差异有统计学意义。结论短期PM_(2.5)高水平暴露对早卵泡期降调节方案的可利用胚胎数、优质胚胎数、优质胚胎率以及低出生体质量儿比例有明显负面影响。

关键词：受精,体外胚胎移植 PM_(2.5) 胚胎质量垂体降调节妊娠结局

关于新型冠状病毒肺炎疫情暴发期间IVF实验室防护的探讨

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中华生殖与避孕杂志 2021年第5期41卷 462-466页

作者：徐鸿毅陈鑫田佳蓉张昌军十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)生殖医学中心 442000

自2019年12月出现新型冠状病毒肺炎(COVID-19)以后,全国各地均启动了突发公共卫生事件一级响应,实行了强有力的防疫措施。医院是患者聚集之地,各个科室都可能存在感染风险,生殖医学中心同时也面临着重大考验,体外受精(in vitro fertiliz... 详细信息

自2019年12月出现新型冠状病毒肺炎(COVID-19)以后,全国各地均启动了突发公共卫生事件一级响应,实行了强有力的防疫措施。医院是患者聚集之地,各个科室都可能存在感染风险,生殖医学中心同时也面临着重大考验,体外受精(in vitro fertilization,IVF)实验室在生殖医学中心承担着授精、胚胎培养、胚胎冷冻储存等重要任务,同时也是医患交汇之处,存在潜在的交叉污染风险,因此有必要制定有效的防范措施和流程,以降低风险,保障辅助生殖技术安全及应对将来可能发生类似突发性的大面积感染事件。本文在近期新型冠状病毒流行期间针对IVF实验室防护进行探索,结合我们的实践对出入实验室的医务人员、患者、污物、耗材以及净化系统、配子、胚胎管理的防护流程进行探讨。

关键词：新型冠状病毒肺炎 IVF实验室风险管理三区五通道

关于胚胎植入前遗传学检测遗传咨询规范化的探讨

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中华生殖与避孕杂志 2023年第12期43卷 1306-1311页

作者：张颖冯博闫旭徐鸿毅张昌军十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)生殖医学中心/产前诊断中心、湖北省生殖医学临床医学研究中心十堰442000

随着分子诊断技术的快速发展和大众优生优育意识的提高, 近年来胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing, PGT)技术在临床上得到了广泛应用。PGT助孕流程中, 遗传咨询由始至终贯穿了PGT助孕的各个阶段, 是PGT助孕成功的... 详细信息

随着分子诊断技术的快速发展和大众优生优育意识的提高, 近年来胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing, PGT)技术在临床上得到了广泛应用。PGT助孕流程中, 遗传咨询由始至终贯穿了PGT助孕的各个阶段, 是PGT助孕成功的重要保证。目前在我国, 关于PGT遗传咨询如何规范地开展缺乏相应的法律法规进行统一规定, 也没有全国统一标准的培训体系和认证机构, 专家共识和指南也少有涉及。因此, 制定切实可行的PGT遗传咨询流程和标准十分必要, 做到有理可循, 有法可依, 保障PGT过程的顺利实施, 最大化降低出生缺陷儿的发生风险。本文从遗传咨询体系的现状和规范化建设两个方面, 结合国内外的实际情况以及现有的法律法规, 对PGT遗传咨询的规范化做了一个全面的梳理和探讨。

关键词：胚胎植入前遗传学检测遗传咨询规范

常规受精失败行早期补救ICSI中透明带结合精子的选择性应用(附2例报道及文献复习)

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中国男科学杂志 2014年第12期28卷 57-58,65页

作者：徐鸿毅罗清炳陈娟张颖张鑫张昌军湖北医药学院附属人民医院生殖医学中心

自卵胞浆内单精子显微注射（Intracytoplasmic Sperm Injection, ICSI）应用于辅助生殖技术获得成功妊娠以来，ICSI技术已经从单纯男性精子的因素推广到治疗免疫性因素、体外受精失败等因素导致的不孕。近年来,体外常规受精失败患者的... 详细信息

自卵胞浆内单精子显微注射（Intracytoplasmic Sperm Injection, ICSI）应用于辅助生殖技术获得成功妊娠以来，ICSI技术已经从单纯男性精子的因素推广到治疗免疫性因素、体外受精失败等因素导致的不孕。近年来,体外常规受精失败患者的卵母细胞由隔夜行补救ICSI逐步改进到短时补救，很多报道[1-3]已经证实通过短时受精判断受精与否,再行补救 ICSI，获得了良好的妊娠结局。在此基础上我们对常规受精失败中行早期补救ICSI时选择卵母细胞透明带（zona pellucida, ZP）上黏附的精子行ICSI，现报道2例如下。

关键词：透明带精子精子注射细胞质内

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卵母细胞成熟及胚胎发育障碍基因突变4例

中国妇产科临床杂志 2022年第6期23卷 643-644页

作者：孙志丰胡玥玥闫旭徐鸿毅张昌军湖北医药学院附属人民医院生殖医学中心、湖北省生殖医学临床医学研究中心 442000

一、病例摘要患者1:34岁,因“同居6年,未避孕未孕”于2018-06-10入院。患者既往月经周期30~60 d,基础性激素和超声检查提示多囊卵巢综合征。2017年于本院行输卵管碘油造影(HSG)示双侧输卵管梗阻。2018年6月第一周期月经期长方案助孕,获... 详细信息

一、病例摘要患者1:34岁,因“同居6年,未避孕未孕”于2018-06-10入院。患者既往月经周期30~60 d,基础性激素和超声检查提示多囊卵巢综合征。2017年于本院行输卵管碘油造影(HSG)示双侧输卵管梗阻。2018年6月第一周期月经期长方案助孕,获得10个卵母细胞(5个成熟,5个未成熟),补救卵浆内单精子注射(R-ICSI),形成2个2原核胚胎,移植胚胎2个未孕;第二周期早卵泡期长方案助孕,适当放大卵泡尺寸至最大直径24.6 mm,获得16个卵母细胞(2个成熟,14个未成熟),形成2个两原核胚胎,因胚胎质量差取消移植。

关键词：病例摘要超声检查提示输卵管碘油造影多囊卵巢综合征基因突变月经周期卵母细胞移植胚胎

PRKN基因突变引起青少年型帕金森综合征一例报道,并文献复习

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中华神经医学杂志 2020年第8期19卷 830-832页

作者：随晓菲尤志珺陈毅孙兰兰邓锴十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)神经内科 442000 十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)生殖医学中心 442000

PD是临床常见的一种运动障碍类疾病,以四大核心症状为主要临床表现,绝大多数于60岁以后缓慢发病,40岁之前起病者较少见。而青少年型帕金森综合征(Juvenile Parkinsonism,JP)是指40岁之前发病、以帕金森综合征为主要临床表现、早期对小... 详细信息

PD是临床常见的一种运动障碍类疾病,以四大核心症状为主要临床表现,绝大多数于60岁以后缓慢发病,40岁之前起病者较少见。而青少年型帕金森综合征(Juvenile Parkinsonism,JP)是指40岁之前发病、以帕金森综合征为主要临床表现、早期对小剂量左旋多巴补充非常敏感、与遗传因素密切相关的一组疾病。笔者现报道十堰市人民医院神经内科收治的1例常染色体隐性遗传青少年型帕金森综合征(autosomal recessive Juvenile Parkinsonism.AR-JIP)患者的诊疗经过,并结合国内外文献对AR-JP的临床特点.鉴别诊断等进行简要复习。

关键词：青少年型帕金森综合征 PRKN基因单人全外显子组检测

手术取卵日偶发ED男性不同取精方式对助孕结局的影响

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中华男科学杂志 2015年第12期21卷 1093-1097页

作者：徐鸿毅邓锴罗清炳张鑫李欣张昌军湖北医药学院附属人民医院生殖医学中心湖北十堰442000

目的:探讨在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)手术取卵(OPU)当天因男方偶发阴茎勃起功能障碍(ED)造成手淫取精困难的最佳处理方式。方法:回顾性分析2011年1月至2014年5月进入IVF周期偶发ED的男性患者93例,分为新鲜精液组45例(A组),提前冻精子... 详细信息

目的:探讨在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)手术取卵(OPU)当天因男方偶发阴茎勃起功能障碍(ED)造成手淫取精困难的最佳处理方式。方法:回顾性分析2011年1月至2014年5月进入IVF周期偶发ED的男性患者93例,分为新鲜精液组45例(A组),提前冻精子组30例(B组),卵子冷冻组18例(C组),其中新鲜精液组又分口服药物(西地那非)组18例(A1组)和未服用药物组27例(A2组),比较各组受精率、优质胚胎率、妊娠率。结果:A组、B组、C组相比年龄、不孕年限、平均获卵数、成熟卵率、卵裂率均无统计学差异(P>0.05)。正常受精率(80.78%vs 80.43%vs 84.77%)、优质胚胎率(53.27%vs 52.97%vs 47.69%)、临床妊娠率(60.00%vs 56.77%vs 44.44%)也无统计学差异(P>0.05),C组3PN率(0.63%)明显低于A组(9.61%)和B组(4.34%)(P0.05)。结论:IVF-ET中取卵当天偶发ED男性口服西地拉非有助于手淫取精,不影响助孕结局;对预知取精可能失败的患者可采用提前冷冻精子,取精失败者可采用冷冻卵子,但尽可能使用新鲜精液,避免睾丸附睾穿刺性损伤。

关键词：偶发勃起功能障碍体外受精胚-胎移植取精冷冻

安宫黄体酮和来曲唑联合Gn超促排卵在卵巢储备减退患者IVF/ICSI-FET中应用效果的比较

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现代妇产科进展 2017年第5期26卷 366-368页

作者：江成龙张昌军湖北医药学院附属人民医院生殖医学中心十堰442000

目的:比较安宫黄体酮(MPA)联合促性腺激素(Gn)超促排卵与来曲唑微刺激促排卵在卵巢储备功能减退(DOR)患者体外受精及冻融胚胎移植(FET)中的应用效果。方法:回顾分析730周期拟行体外受精助孕的DOR的不孕症患者的临床资料,380周期行MPA联... 详细信息

目的:比较安宫黄体酮(MPA)联合促性腺激素(Gn)超促排卵与来曲唑微刺激促排卵在卵巢储备功能减退(DOR)患者体外受精及冻融胚胎移植(FET)中的应用效果。方法:回顾分析730周期拟行体外受精助孕的DOR的不孕症患者的临床资料,380周期行MPA联合Gn促排卵(MPA组),350周期行来曲唑联合Gn促排卵(来曲唑组)。观察两组的周期取消率、Gn天数、Gn剂量、性激素水平、获卵数、可利用胚胎数、优胚率和FET妊娠率、种植率、流产率和活产率。结果:MPA组患者的Gn使用时间、Gn使用总量、优胚率均显著高于来曲唑组(P0.05)。MPA组患者的FET种植率和临床妊娠率均显著高于来曲唑组(P0.05)。结论:与来曲唑联合Gn促排卵比较,MPA联合Gn促排卵对于DOR患者可有效抑制早发LH峰,减少提前排卵发生,能获得可观的临床妊娠率,值得临床应用推广。

关键词：卵巢储备功能减退安宫黄体酮来曲唑体外受精冻融胚胎移植