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亚胺培南对携带bla_(NDM-1)耐药基因的Escherichia coli耐药性及内膜secY、secE和secG转录水平的影响

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中国抗生素杂志 2023年第9期48卷 1048-1056页

作者：吴兆猛赵琼吴玲玲王祖华余春芳金志雄湖北医药学院基础医学研究所十堰442000 湖北医药学院附属国药东风总医院检验部十堰442008 湖北医药学院附属太和医院输血科十堰442000

目的探讨亚胺培南(IPM)对bla_(NDM-1)阳性Escherichia coli耐药性及其内膜secY、secE和secG转录水平的影响。方法以重组质粒pET28a(+)-bla_(NDM-1)转化菌株*** DH5α-bla_(NDM-1)和*** BL21(DE3)-bla_(NDM-1)为研究对象,在梯度浓度增加或撤消IPM暴露下传代培养菌株,检测17种抗生素对IPM暴露菌株的MIC值;SDS-PAGE凝胶电泳检测NDM-1表达;蛋白活性实验检测NDM-1活性;qRT-PCR检测bla_(NDM-1)及内膜secY、secE和secG转录水平。结果12μg/mL和0_(20)μg/mL IPM暴露的*** DH5α-bla_(NDM-1)菌株CFZ、CXM、FOX、CRO、CAZ、FEP等头孢类药物的MIC值(≥8μg/mL/≥8μg/mL、≥32μg/mL/≥32μg/mL、≥32μg/mL/≥32μg/mL、≥64μg/mL/=32μg/mL、≥32μg/mL/≥32μg/mL、≥32μg/mL/=8μg/mL)与0μg/mL IPM暴露MIC值(≤2μg/mL、=16μg/mL、≤8μg/mL、≤1μg/mL、≤4μg/mL、≤2μg/mL)相比均显著增高,而IPM和MEM的MIC值与0μg/mL IPM暴露(≤1μg/mL和≤1μg/mL)相比也显著增高(=8μg/mL/=8μg/mL和=4μg/mL/=4μg/mL)。12μg/mL和0_(20)μg/mL IPM暴露的*** BL21(DE3)-bla_(NDM-1)菌株FOX、CRO、FEP等头孢类药物的MIC值(≥32μg/mL/≥32μg/mL、≥64μg/mL/≥64μg/mL、=16μg/mL/=16μg/mL)与0μg/mL IPM暴露(≤8μg/mL、≤1μg/mL、≤2μg/mL)相比也均显著增高,而IPM和MEM的MIC值与0μg/mL IPM暴露(≤1μg/mL和≤1μg/mL)相比也均显著增高(≥16μg/mL/≥16μg/mL和≥16μg/mL/≥16μg/mL)。SDS-PAGE显示,随12μg/mL IPM暴露时间的延长,菌株NDM-1水解IPM活性增加。qRT-PCR显示,12μg/mL IPM暴露的*** DH5α-bla_(NDM-1)和*** BL21(DE3)-bla_(NDM-1)的bla_(NDM-1)、secY、secE和secG转录水平分别上调2.31/2.5、3.05/1.96、2.83/1.24和2.71/1.45倍。结论IPM可使bla_(NDM-1)阳性***由碳青霉烯类敏感变为耐药且保持稳定,细菌内膜SecYEG跨膜通道蛋白参与菌株耐药性调控,这为认识抗生素压力下肠杆菌科细菌耐药性变化及指导临床合理用药提供理论支撑。

关键词：亚胺培南暴露 Escherichia coli NDM-1 SecYEG

转化生长因子β3复合海藻酸钠水凝胶修复膝关节软骨缺损

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中国组织工程研究 2022年第16期26卷 2504-2509页

作者：刘莹松郭晓鹏魏明珠十堰市太和医院骨科(湖北医药学院附属医院) 湖北省十堰市442000 十堰市中西医结合医院功能科湖北省十堰市442000

背景:已经有大量研究报道转化生长因子β3与藻酸盐、间充质干细胞复合修复软骨缺损的动物实验,但是关于转化生长因子β3与海藻酸钠水凝胶复合间充质干细胞修复软骨损伤的研究较少。目的:对比海藻酸钠水凝胶与负载转化生长因子β3的海藻... 详细信息

背景:已经有大量研究报道转化生长因子β3与藻酸盐、间充质干细胞复合修复软骨缺损的动物实验,但是关于转化生长因子β3与海藻酸钠水凝胶复合间充质干细胞修复软骨损伤的研究较少。目的:对比海藻酸钠水凝胶与负载转化生长因子β3的海藻酸钠水凝胶分别复合骨髓间充质干细胞修复骨缺损的效果。方法:体外分离培养兔骨髓间充质干细胞备用;制备转化生长因子β3海藻酸钠水凝胶复合物;移植前,将骨髓间充质干细胞悬液与水凝胶等体积混合。取48只新西兰大白兔制备膝关节软骨缺损,随机分3组:损伤组不作任何处理,对照组植入海藻酸钠水凝胶与骨髓间充质干细胞悬液,观察组植入转化生长因子β3海藻酸钠水凝胶复合物与骨髓间充质干细胞悬液。术后12周时取材,分别进行大体、组织学观察、Ⅱ型胶原免疫组化染色与RT-PCR检测。结果与结论:(1)大体观察:术后12周时,损伤组缺损部位由大量肉芽组织填充,对照组由半透明状软骨样组织填充,观察组由新生组织填满;(2)组织学观察:术后12周苏木精-伊红染色与番红O染色可见,损伤组缺损部位被较多的纤维组织填充,中央部位存在较大的缝隙;对照组可见较多的软骨样组织与成纤维组织,表面欠规则,材料大部分降解,材料周围由大量的骨小梁包绕;观察组可见大量的软骨样组织,表面较光滑且结构较致密,类似于周围正常软骨组织;(3)Ⅱ型胶原免疫组化染色:损伤组仅见极其微弱的阳性染色,对照组、观察组可见阳性染色,并且观察组的阳性着色程度明显强于对照组;(4)RT-PCR检测:对照组再生软骨组织的Ⅱ型胶原、Sox9、糖胺多糖mRNA表达均低于观察组(P生长因子β3的海藻酸钠水凝胶-骨髓间充质干细胞复合物可促进关节软骨缺损的修复,提升关节软骨基因的表达。

关键词：软骨材料水凝胶转化生长因子β3 海藻酸钠水凝胶软骨缺损软骨组织工程

切应力通过Pim1/eNOS途径调节人脐静脉内皮细胞NO分泌

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中国病理生理杂志 2020年第1期36卷 17-21页

作者：张敏孙玉唐平静张文君王汉琴湖北医药学院附属随州医院转化医学研究中心湖北随州441300 湖北医药学院附属随州医院麻醉科湖北随州441300 十堰市太和医院超声影像科湖北十堰442000

目的:探讨层流切应力是否可通过Pim1调节内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性,从而调节血管内皮细胞一氧化氮(NO)分泌。方法:体外原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),运用平行平板流动腔系统给HUVECs加载层流切应力(15 dyn/cm^2)。采用Western ... 详细信息

目的:探讨层流切应力是否可通过Pim1调节内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性,从而调节血管内皮细胞一氧化氮(NO)分泌。方法:体外原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),运用平行平板流动腔系统给HUVECs加载层流切应力(15 dyn/cm^2)。采用Western blot法检测Pim1蛋白表达及eNOS-Ser1177磷酸化水平;硝酸还原酶法检测NO分泌量;利用特异性小干扰RNA(siRNA)转染技术沉默Pim1基因后再检测上述指标的变化。结果:切应力作用HUVECs 15 min,可以显著上调Pim1蛋白表达(P<0.05),同时显著增强eNOS-Ser1177磷酸化水平(P<0.05),伴随HUVECs NO分泌显著增多(P<0.05)。转染siPim1可以抑制切应力诱导的Pim1表达(P<0.05),同时抑制eNOS-Ser1177磷酸化(P<0.05),NO分泌随之显著降低(P<0.05)。结论:流体切应力可能通过Pim1/eNOS途径调节血管内皮细胞NO分泌。

关键词： Pim1/eNOS信号通路切应力内皮细胞一氧化氮

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四种常用成年人肥胖评价标准的诊断价值研究

中国全科医学 2017年第22期20卷 2732-2738页

作者：张苗陈晋甘亚楠阮班银王潇刘颖刘长俊郑弘郭怀兰湖北医药学院公共卫生与管理学院湖北省十堰市442000 湖北医药学院附属东风医疗集团总医院ICU 湖北省十堰市442000 湖北医药学院卫生管理与卫生事业发展研究中心湖北省十堰市442000 湖北医药学院附属太和医院内分泌科湖北省十堰市442000

目的探讨体脂百分比(BF%)法、体质指数(BMI)法、肥胖度(OBD)法、腰臀比(WHR)法4种常用成年人肥胖评价标准的诊断价值,以寻找更灵敏、特异的肥胖评价标准,为健康指导提供依据。方法于2016年6月,以湖北省某高校教师共596例为研究对象,其中... 详细信息

目的探讨体脂百分比(BF%)法、体质指数(BMI)法、肥胖度(OBD)法、腰臀比(WHR)法4种常用成年人肥胖评价标准的诊断价值,以寻找更灵敏、特异的肥胖评价标准,为健康指导提供依据。方法于2016年6月,以湖北省某高校教师共596例为研究对象,其中男269例(45.1%)、女327例(54.9%)。采用清华同方BCA-2A人体成分分析仪,检测其身高、体质量、BF%、WHR等体格指标。分别计算BF%法(以男BF%≥25.0%、女BF%≥30.0%为肥胖)、BMI法(以BMI≥28.0 kg/m^2为肥胖)、OBD法(以超过标准体质量20%为肥胖)、WHR法(以男≥0.90、女≥0.85为中心性肥胖)的肥胖检出率,并以BF%法为金标准,分析其他3种评价标准的诊断价值,诊断价值评价指标包括灵敏度(Se)、漏诊率(FN)、特异度(Sp)、误诊率(FP)、符合率、阳性预测值(Pv+)、阴性预测值(Pv-)。结果 BF%法、BMI法、OBD法、WHR法的肥胖检出率分别为25.7%(153/596)、7.2%(43/596)、24.0%(143/596)、50.5%(301/596)。4种评价标准的男性肥胖检出率、女性肥胖检出率及总体肥胖检出率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。其中,WHR法的男性肥胖检出率、女性肥胖检出率及总体肥胖检出率高于BF%法、BMI法、OBD法,BF%法、OBD法的男性肥胖检出率、女性肥胖检出率及总体肥胖检出率高于BMI法,BF%法的女性肥胖检出率高于OBD法,差异有统计学意义(P<0.05)。以BF%为诊断肥胖的金标准,BMI法、OBD法、WHR法诊断男性肥胖、女性肥胖及总体肥胖的Se、FN、Sp、FP、符合率、Pv+、Pv-比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。分别将BMI法诊断肥胖的截断值调整至男≥25.0 kg/m^2、女≥23.0 kg/m^2(方案1),男≥24.5 kg/m^2、女≥22.5 kg/m^2(方案2),男≥24.0 kg/m^2、女≥22.0 kg/m^2(方案3),3种方案诊断男性肥胖的Sp、FP、符合率,诊断女性肥胖的Se、FN、Sp、FP、Pv+、Pv-,诊断总体肥胖的Se、FN、Sp、FP、符合率、Pv+、Pv-比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 WHR法更适合该人群的肥胖筛查,BMI法的诊断截断值偏高。

关键词：肥胖症体脂肪率人体质量指数肥胖度腰臀比诊断

支气管动脉栓塞术治疗全内脏反位并咯血患者1例

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介入放射学杂志 2023年第9期32卷 947-948页

作者：刘书铭关惠元唐先志谢兴武陈光斌十堰市人民医院放射影像中心湖北十堰4420000 锦州医科大学湖北医药学院附属人民医院研究生培养基地

1临床资料患者男,59岁。因1 d前无明显诱因出现咯血症状入院。既往无高血压、糖尿病、冠心病、外伤、输血等病史,否认肝炎、结核等传染性疾病史,有吸烟史。入院时偶有咳嗽,无咳痰、发热、胸闷、气促、胸痛、盗汗、纳差、消瘦等表现,无... 详细信息

1临床资料患者男,59岁。因1 d前无明显诱因出现咯血症状入院。既往无高血压、糖尿病、冠心病、外伤、输血等病史,否认肝炎、结核等传染性疾病史,有吸烟史。入院时偶有咳嗽,无咳痰、发热、胸闷、气促、胸痛、盗汗、纳差、消瘦等表现,无血尿、黑便等病史。查体:双肺呼吸音粗,未闻及干湿性啰音;余未见异常。

关键词：全内脏反位支气管动脉栓塞咯血

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社区老年人幸福感指数的影响因素

中国老年学杂志 2017年第4期37卷 988-990页

作者：徐曼刘冰柴云程桢卢丽锦州医科大学湖北医药学院研究生培养基地湖北十堰442000 湖北医药学院卫生管理与发展中心东风公司总医院

目的探讨社区老年人幸福感指数影响因素及其相互作用。方法运用Campbell幸福感指数量表(WBIS)采用简单随机抽样方法(SRS)选取十堰市6个居民委员会/村民委员会441名老年人进行问卷调查,数据分析主要使用相关分析和路径分析。结果路径分... 详细信息

目的探讨社区老年人幸福感指数影响因素及其相互作用。方法运用Campbell幸福感指数量表(WBIS)采用简单随机抽样方法(SRS)选取十堰市6个居民委员会/村民委员会441名老年人进行问卷调查,数据分析主要使用相关分析和路径分析。结果路径分析发现,自评健康状况(β=0.33)、压力应对方式(β=0.21)、未来目标(β=0.22)直接作用于幸福感指数,受教育程度通过未来目标间接影响老年人的幸福感指数。结论未来目标、压力应对方式和自评健康状况是影响老年人幸福感指数最直接、最重要的因素,受教育程度等其他因素是影响老年人幸福感指数的间接因素,提示相关部门应该有重点、有计划地制定政策以提高老年人的幸福感。

关键词：幸福感指数路径分析

碘过量对小鼠甲状腺滤泡和胰腺腺泡细胞形态的影响

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中华地方病学杂志 2018年第6期37卷 436-440页

作者：王潇李显东陈晋王珏王静刘长俊刘颖刘锐杨啸天郭怀兰湖北医药学院基础医学院十堰442000 湖北医药学院公共卫生与管理学院十堰442000 湖北医药学院第一临床学院十堰442000 湖北医药学院南水北调水源地环境与健康研究中心十堰442000 湖北省十堰市太和医院检验部十堰442000

目的观察不同程度的碘过量对小鼠甲状腺滤泡和胰腺腺泡细胞形态学变化的影响。方法选取60只雌性（BALB／c）小鼠，体重18 - 22 g，按体重采用随机数字表法将小鼠分为6组，每组10只。采用在饮用水中加入碘酸钾的形式，按碘含量分成300... 详细信息

目的观察不同程度的碘过量对小鼠甲状腺滤泡和胰腺腺泡细胞形态学变化的影响。方法选取60只雌性（BALB／c）小鼠，体重18 - 22 g，按体重采用随机数字表法将小鼠分为6组，每组10只。采用在饮用水中加入碘酸钾的形式，按碘含量分成300、 600、1 200、2 400和4 800 μg／L组，正常（对照）组给予正常碘含量（5 μg／L）的自来水。饲养1个月，取小鼠甲状腺和胰腺组织，光镜下观察甲状腺滤泡和胰腺腺泡细胞形态，电镜下观察胰腺超微结构变化。结果光镜下，从1 200 μg／L组开始，甲状腺滤泡腔逐渐增大，细胞变为扁平；小鼠胰腺腺泡细胞肿胀，并出现空泡样变形。电镜下，从600 μg／L组开始，胰腺腺泡细胞超微结构出现显著变化，酶原数量减少，细胞器变性坏死，以及内质网扩张。结论碘过量可引起小鼠胰腺腺泡细胞损伤。

关键词：碘小鼠胰腺腺泡细胞甲状腺内质网应激

MicroRNA-155/Nrf2对体外培养雪旺细胞增殖和迁移的影响及作用机制

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中国现代医学杂志 2023年第2期33卷 35-42页

作者：赵飞姚忠军曹洪朱必涛张弥湖北医药学院附属太和医院骨2科湖北十堰442000 湖北医药学院附属人民医院创伤骨科湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院皮肤科湖北十堰442000

目的探讨microRNA-155(miR-155)/Nrf2对雪旺细胞增殖和迁移的影响及作用机制,为坐骨神经慢性卡压损伤等临床诊断和治疗策略提供科学依据。方法将大鼠雪旺细胞(RSC96)作为研究对象,转染miR-155 mimics、miR-155 inhibitor、si-Nrf2及... 详细信息

目的探讨microRNA-155(miR-155)/Nrf2对雪旺细胞增殖和迁移的影响及作用机制,为坐骨神经慢性卡压损伤等临床诊断和治疗策略提供科学依据。方法将大鼠雪旺细胞(RSC96)作为研究对象,转染miR-155 mimics、miR-155 inhibitor、si-Nrf2及其阴性对照质粒(miR-NC、inhibitor NC、si-NC)。为验证miR-155过表达/抑制质粒转染效果,探究miR-155对雪旺细胞增殖、迁移的影响,将细胞分为inhibitor NC组(细胞转染inhibitor NC质粒)、miR-155 inhibitor组(细胞转染miR-155 inhibitor质粒)、miR-NC组(细胞转染miR-NC质粒)、miR-155 mimics组(细胞转染miR-155 mimics质粒)。为了验证Nrf2沉默效果,将细胞分为si-NC组(细胞转染si-NC质粒)、si-Nrf2(1)组[细胞转染si-Nrf2(1)质粒]、si-Nrf2(2)组[细胞转染si-Nrf2(2)质粒]。为证实靶向Nrf2可实现miR-155对细胞增殖、迁移的影响和Nrf2、Ngf、Laminin mRNA相对表达量的调控作用,拟抑制miR-155表达的同时选取Nrf2沉默效果较好的质粒(si-Nrf2)转染细胞行挽救实验,探讨miR-155的作用是否会部分逆转,将细胞分为miR-155 inhibitor+si-NC组(细胞转染miR-155 inhibitor和si-NC质粒)、miR-155 inhibitor+si-Nrf2组(细胞转染miR-155 inhibitor和si-Nrf2质粒)。通过CCK-8法检测miR-155对细胞增殖的影响,Transwell实验检测细胞迁移情况,实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-155、神经生长因子(Ngf)、层粘连蛋白(Laminin)和核因子E2相关因子2(Nrf2)的基因水平,Western blotting检测Nrf2蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-155与Nrf2的结合关系。结果 miR-155 inhibitor组miR-155相对表达量较inhibitor NC组降低(P生型Nrf2细胞荧光素酶活性较inhibitor NC组升高(P <0.05),miR-155 mimics组较miR-NC组降低(P <0.05)。si-Nrf2(1)组和si-Nrf2(2)组沉默效果验证实验中Nrf2 mRNA相对表达量较si-NC组降低(P <0.05),且si-Nrf2(2)组效果更好。miR-155 inhibitor组挽救实验中Nrf2 mRNA相对表达量较inhibitor NC组高(P<0.05),miR-155 inhibitor+si-Nrf2组较miR-155 inhibitor+si-NC组低(P<0.05)。miR-155 inhibitor组挽救实验中细胞吸光度值较inhibitor NC组高(P <0.05),miR-155 inhibitor+si-Nrf2组较miR-155 inhibitor+si-NC组低(P <0.05)。miR-155 inhibitor组挽救实验中细胞迁移数量较inhibitor NC组增加(P <0.05),miR-155 inhibitor+si-Nrf2组较miR-155 inhibitor+si-NC组减少(P <0.05)。miR-155 inhibitor组挽救实验中Ngf、Lamini

关键词：坐骨神经慢性卡压损伤雪旺细胞 miR-155 Nrf2 增殖和迁移

玄参水提取物对高糖暴露条件下INS-1细胞AMPK的激活作用

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医药导报 2024年第6期43卷 850-854页

作者：郭旭周俊李晓晗陈仕琦高艳果张永红王启斌郑涛陈黎湖北医药学院药学院十堰442000 湖北医药学院附属太和医院武当中医药研究所十堰442000 湖北医药学院附属太和医院药学部十堰442000

目的研究玄参水提取物(AESN)对高糖(HG)条件下INS-1细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的影响。方法将INS-1细胞培养于HG培养基中,并给予不同浓度AESN共孵育处理;利用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测AESN干预对细胞增殖/活力和焦亡小体形成... 详细信息

目的研究玄参水提取物(AESN)对高糖(HG)条件下INS-1细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的影响。方法将INS-1细胞培养于HG培养基中,并给予不同浓度AESN共孵育处理;利用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测AESN干预对细胞增殖/活力和焦亡小体形成的影响,使用Western blotting法观察AESN对细胞内AMPK表达及磷酸化水平的影响;利用时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET)实验检测AESN对AMPK激酶活性的影响。结果CCK-8检测结果显示同正常培养条件相比,HG暴露显著降低INS-1细胞增殖/活力并增加焦亡小体形成数量,Western blotting检测结果表明HG暴露可导致细胞内AMPK磷酸化水平下降;而AESN共孵育可呈浓度依赖性地增加INS-1细胞增殖/活力、抑制焦亡小体形成并激活AMPK。TR-FRET实验结果表明,AESN可浓度依赖性增加AMPK激酶活性。结论AESN对HG暴露条件下INS-1细胞AMPK具有激活作用。

关键词：玄参腺苷酸活化蛋白激酶高糖暴露 INS-1细胞荧光共振能量转移