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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1993年第4期11卷 294-297页

作者：周述龙湖北医科大学寄生虫学教研室血吸虫病研究室

寄生虫体外培养的研究是在组织培养技术基础上发展起来的。而组织培养技术是从上世纪某些胚胎学技术发展而来。1885年,Roux用温盐水保存鸡胚髓板活力达数日之久。

关键词：蠕虫体外培养

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日本血吸虫成虫培养细胞的超微结构观察

动物学报 1999年第1期45卷 1-7页

作者：董惠芬蒋明森杨明义李瑛钟沁萍周述龙湖北医科大学寄生虫学教研室血吸虫病研究室武汉430071

报告日本血吸虫成虫培养细胞的超微结构。在透射电镜下日本血吸虫成虫培养细胞呈多角形、圆颗粒形、三角扇形和鞭毛形等多种形状 ,其中以多角形为主。细胞表面光滑 ,或有乳头状突起、微绒毛和微饮泡等。胞质内有不同数量的线粒体、内质... 详细信息

报告日本血吸虫成虫培养细胞的超微结构。在透射电镜下日本血吸虫成虫培养细胞呈多角形、圆颗粒形、三角扇形和鞭毛形等多种形状 ,其中以多角形为主。细胞表面光滑 ,或有乳头状突起、微绒毛和微饮泡等。胞质内有不同数量的线粒体、内质网、核糖体和糖原颗粒等分布 ,高尔基复合体很少或无 ;其中线粒体超微结构的变化可以作为评判培养条件优劣的一个指标。核常呈圆形 ,核膜为一单位膜 ,核孔清晰 ;核内具较丰富的异染色质 ,核膜内缘常有块状异染色质分布 ;核仁圆形。不同来源的细胞具不同的内部特征 ,生殖细胞内核质比例较高 ,胞质内具许多大小不等的囊泡和不同类型的皮质颗粒 ;卵黄细胞的典型特征是胞质中存在由高电子密度颗粒组成的卵黄球、卵黄滴 ;焰细胞的胞质中具纤毛束 ;神经细胞内具丰富的圆形或椭圆形突触小泡。可识别来源的这些培养细胞中卵黄细胞的数量最多 ,神经细胞的数量最少。

关键词：日本血吸虫成虫培养细胞超微结构

EGF对用或未用MNNG诱导的日本血吸虫成虫培养细胞生长的影响

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中国地方病学杂志 2000年第5期19卷 347-349页

作者：董惠芬蒋明森明珍平钟沁萍杨明义湖北医科大学寄生虫学教研室血吸虫病研究室，湖北武汉 430071

目的　研究表皮生长因子 (EGF)对用或未用甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)诱导的日本血吸虫成虫培养细胞的促生长、增殖作用。方法　将联合法接种培养至第 3天的日本血吸虫成虫培养细胞 ,一部分在含 EGF终浓度分别为 0、0 .5、1、2、4、8、12... 详细信息

目的　研究表皮生长因子 (EGF)对用或未用甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)诱导的日本血吸虫成虫培养细胞的促生长、增殖作用。方法　将联合法接种培养至第 3天的日本血吸虫成虫培养细胞 ,一部分在含 EGF终浓度分别为 0、0 .5、1、2、4、8、12、16、2 0、2 4、2 8ng/ml的附加 2 0 %小牛血清及常量抗菌素的 RPMI- 16 40培养基中培养 ;另一部分 ,先用含 MNNG终浓度为 3μg/m l附加 2 0 %小牛血清和常量抗生素的 RPMI- 16 40培养基处理48h,再换用含终浓度分别为 0、1、8、12、16、2 0 ng/ml的 EGF培养基继续培养。每日用 Olym pus IM倒置显微镜观察细胞生长和增殖情况。结果　两实验组中 ,用不同浓度 EGF处理后的日本血吸虫成虫培养细胞均在 2周以后出现不同程度的脱落、退化 ;并且 ,随着 EGF浓度的升高 ,培养细胞脱落、退化的现象更加严重 ;两实验组相比 ,未用 MNNG诱导的培养细胞出现脱落和退化现象的时间比用 MNNG诱导的相对更早。结论　外加 EGF对用或未用 MNNG诱导的日本血吸虫成虫培养细胞的生长增殖均无促进作用 ,相反 ,加速了培养细胞的老化 ,尤其是对未用 MNNG诱导的日本血吸虫成虫培养细胞。

关键词：日本血吸虫表皮生长因子 MNNG 成虫培养细胞

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日本血吸虫精子的超微结构

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1998年第4期16卷 264-268页

作者：杨明义蒋明森李瑛董惠芬周述龙湖北医科大学寄生虫学教研室

目的：了解日本血吸虫正常精子的超微结构。方法：半超薄切片定位雄虫睾丸和含有成熟精子的雌虫输卵管，常规透射电镜制样并观察。结果：日本血吸虫精子由头、尾两部分组成，头部呈长卵圆形，平均长６．２μｍ，宽１．４μｍ，无顶体构... 详细信息

目的：了解日本血吸虫正常精子的超微结构。方法：半超薄切片定位雄虫睾丸和含有成熟精子的雌虫输卵管，常规透射电镜制样并观察。结果：日本血吸虫精子由头、尾两部分组成，头部呈长卵圆形，平均长６．２μｍ，宽１．４μｍ，无顶体构造，前端钝圆，后端尖细，质膜下有１圈纵行的微管，核１个，前端有少量线粒体，尾部鞭毛１根，在中、后段主体部分鞭毛轴丝外周为９组二联管，中央为一团弥散的电子致密物质，呈９×２＋《１》型；但在过渡区鞭毛轴丝中央无电子致密物质，呈９×２＋０型。结论：日本血吸虫精子超微结构与其他血吸虫相似，具有同源性，但明显区别于复殖目大多数吸虫的构造。

关键词：日本血吸虫超微结构精子

日本血吸虫尾蚴发育的超微结构观察:Ⅱ.腺体

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动物学报 1995年第1期41卷 28-34页

作者：周述龙蒋明森李瑛杨孟祥陈喜珪陈保平湖北医科大学寄生虫学教研室血吸虫病研究室武汉430071 咸宁医学院寄生虫学教研室湖北医科大学电镜室

在透射电镜下观察不同发育期日本血吸虫尾蚴的腺体。结果：胚球期（Ｓ２）主要出现体细胞分裂与分化，首次证明分泌细胞及其小体在Ｓ２出现，雏体期（Ｓ３）见到前钻腺细胞体与钻腺管束及分泌小体。成熟前期（Ｓ４）钻腺分泌小体基质分... 详细信息

在透射电镜下观察不同发育期日本血吸虫尾蚴的腺体。结果：胚球期（Ｓ２）主要出现体细胞分裂与分化，首次证明分泌细胞及其小体在Ｓ２出现，雏体期（Ｓ３）见到前钻腺细胞体与钻腺管束及分泌小体。成熟前期（Ｓ４）钻腺分泌小体基质分Ａ／Ｂ为主两型，分别演变为成熟期（Ｓ５）的后／前钻腺分泌小体。头腺分泌小体亦在Ｓ４出现。从前钻腺体排至头器远端腺管的分泌小体，显眼透明球消失成为致密同质性小体，已为大家共识。而在后钻腺体分泌小体由于基质的深浅、电子结集物的有无及单一透明区的变幻，从腺体排至腺管的远端，这些分泌小体持续发生变化，并非停留在同质性基础上，这个现象未为前人所揭示。

关键词：日本血吸虫尾蚴超微结构头腺钻腺腺体

甲基硝基亚硝基胍诱导日本血吸虫成虫培养细胞增殖的研究

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中国公共卫生 2000年第10期16卷 883-884页

作者：董惠芬蒋明森明珍平钟沁萍杨明义湖北医科大学人体寄生虫学和血吸虫病研究室武汉430071

将培养第 5天的日本血吸虫成虫培养细胞在含甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)终浓度分别为 0 (对照 )、1、2、3、4、6、9μg/ml的附加 2 0 %小牛血清及常量抗生素的RPMI 16 40培养基中分别处理 2 4h、36h、48h ;随后 ,换用含 2 0 %小牛血清及常... 详细信息

将培养第 5天的日本血吸虫成虫培养细胞在含甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)终浓度分别为 0 (对照 )、1、2、3、4、6、9μg/ml的附加 2 0 %小牛血清及常量抗生素的RPMI 16 40培养基中分别处理 2 4h、36h、48h ;随后 ,换用含 2 0 %小牛血清及常量抗生素的RPMI 16 40培养基培养 ;3d后 ,改用含 5 %小牛血清及常量抗生素的RPMI 16 40培养基继续培养 ,每天在OlympusIM倒置显微镜下观察。用浓度为 6 μg/ml、9μg/ml的MNNG处理的日本血吸虫成虫培养细胞在处理后 3天左右大片脱落 ,残留的少量细胞在换用 5 %小牛血清及常量抗生素的RPMI 16 40培养后逐渐死亡 ;用 1、2、3、4μg/ml浓度MNNG处理后的日本血吸虫成虫培养细胞 ,生长良好 ,与对照组相比 ,培养细胞的体积变大 ,分裂细胞增多 ,尤以 3μ/ml的MNNG处理48h的试验组最为明显 ,并观察到转化灶 ,但传代培养没有成功。结果表明在一定程度上 ,MNNG能够诱导日本血吸虫成虫培养细胞出现转化灶 ,并发生分裂。

关键词：日本血吸虫培养细胞 MNNG 细胞增殖研究

日本血吸虫未成熟卵抗原和成虫抗原分别与联合免疫小鼠的研究

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中国人兽共患病杂志 1998年第3期14卷 28-31页

作者：杨明义杨孟祥蒋明森余祖江董惠芬李瑛湖北医科大学寄生虫学教研室武汉430071

目的探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（SIEA）和成虫抗原（SA）分别与联系免疫小鼠的抗卵胚胎发育效果和抗感染效果。方法采用SIEA与SA分别与联合免疫小鼠，于攻击感染后48天剖杀，统计雌雄虫数及肝脏各期虫卵数。结果与对照组比较，S... 详细信息

目的探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（SIEA）和成虫抗原（SA）分别与联系免疫小鼠的抗卵胚胎发育效果和抗感染效果。方法采用SIEA与SA分别与联合免疫小鼠，于攻击感染后48天剖杀，统计雌雄虫数及肝脏各期虫卵数。结果与对照组比较，SIEA单独免疫产生显著抗卵胚胎发育的免疫力，肝组织成熟卵数下降37，3％，成熟卵比例下降24．0％；SA单独免疫产生显著抗感染免疫力，减虫率为34．5％；SIEA与SA联合免疫，产生显著抗感染免疫力和最佳抗卵胚胎发育免疫力，减虫率33．5％，成熟卵数和成熟卵比例分别下降73．8％和45．0％，抗卵胚胎发育免疫力显著高于SIEA单独免疫组。结论提示来源于成虫的抗感染抗原与来源于未成熟虫卵的抗卵胚胎发育抗原联合应用是血吸虫疫苗研制中有希望的发展方向。

关键词：日本血吸虫免疫抗原虫卵 SIEA SA

PHA诱导日本血吸虫成虫培养细胞增殖的研究

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中国人兽共患病杂志 1998年第5期14卷 41-44页

作者：董惠芬蒋明森陈晓蓓杨明义张培喜周述龙湖北医科大学寄生虫学教研室武汉430071

研究PHA对日本血吸虫成虫培养细胞的促增殖作用。方法用浓度为333．3ug／ml的PHA处理日本血吸虫成虫培养细胞24h，在光镜和电镜下观察培养细胞的增殖情况。结果在光镜下发现在老化的培养细胞中间出现一些类似于淋巴母细胞样的新细胞；... 详细信息

研究PHA对日本血吸虫成虫培养细胞的促增殖作用。方法用浓度为333．3ug／ml的PHA处理日本血吸虫成虫培养细胞24h，在光镜和电镜下观察培养细胞的增殖情况。结果在光镜下发现在老化的培养细胞中间出现一些类似于淋巴母细胞样的新细胞；在光镜和扫描电镜下观察到有呈哑铃状的成对细胞；在透射电镜下观察到有细胞核膜消失，染色质变成粗颗粒状．中心粒一分为二，两中心粒之间还有纺锤丝牵引；还观察到处于分裂早期的细胞，核中染色质浓缩成四块状，核膜有部分消失、结论PHA对日本血吸虫成虫培养细胞有一定的促增殖作用。

关键词：日本血吸虫细胞培养 PHA 细胞增殖

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日本血吸虫卵黄培养细胞超微结构动态的研究

水生生物学报 2000年第1期24卷 25-29页

作者：董惠芬蒋明森杨孟祥杨明义李瑛周述龙湖北医科大学寄生虫学教研室武汉430071

从超微结构水平研究日本血吸虫卵黄细胞培养的动态。在体外培养过程中，卵黄细胞对外界环境的改变比日本血吸虫的其它体细胞更加敏感。随着培养时间的延长，卵黄细胞发生不同程度的变性，成熟卵黄细胞比未成熟卵黄细胞先发生变性。变性... 详细信息

从超微结构水平研究日本血吸虫卵黄细胞培养的动态。在体外培养过程中，卵黄细胞对外界环境的改变比日本血吸虫的其它体细胞更加敏感。随着培养时间的延长，卵黄细胞发生不同程度的变性，成熟卵黄细胞比未成熟卵黄细胞先发生变性。变性主要表现在核和胞质的电子密度降低；卵黄球相互融合，或卵黄球与膜之间的空隙逐步增大，最终卵黄球从中释放出来，变成裸露体；脂滴数目增多，体积增大；粗面内质网扩大和囊泡变，其上的核糖体脱颗粒等。由此认为，未成熟卵黄细胞在体外培养过程中超微结构的变化可以作为评价培养条件优劣的一个指标。

关键词：日本血吸虫卵黄培养细胞超微结构动态变化

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导免疫对虫卵肉芽肿影响的初步研究

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中国人兽共患病杂志 1998年第2期14卷 15-17页

作者：余祖江杨明义董惠芬蒋明森杨孟祥李瑛湖北医科大学寄生虫学教研室武汉430071

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原和成虫冷浸抗原分别免疫昆明系小鼠，发现未成熟虫卵可溶性抗原（SIEA）能诱导小鼠产生明显抗卵成熟能力。所得虫卵肉芽肿面积（HE染色，LSAB法）和只用佐剂的对照组存在显著性差异（P＜0．01），面... 详细信息

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原和成虫冷浸抗原分别免疫昆明系小鼠，发现未成熟虫卵可溶性抗原（SIEA）能诱导小鼠产生明显抗卵成熟能力。所得虫卵肉芽肿面积（HE染色，LSAB法）和只用佐剂的对照组存在显著性差异（P＜0．01），面积显著减小，而对照组和成虫冷浸抗原之间无显著性差异（P＞0．05）。

关键词：日本血吸虫虫卵免疫肉芽肿 SIEA