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2020-2022年华中地区部分猪场猪圆环病毒3型的分子流行特征与遗传变异分析

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中国农业科学 2024年第3期57卷 613-626页

作者：李博天李春琪刘国平谢军曾攀赵润泽李桐裴洁郭利伟伍锐谭磊长江大学动物科学技术学院湖北省动物疫病预防控制中心四川农业大学动物医学院

【目的】通过系统性试验方案摸清我国华中部分地区猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3)流行病学及遗传变异特点，为PCV3疫苗研究提供数据基础。【方法】对华中地区(湖北、湖南和河南)15个规模化养猪场的3 500份临床采集样品进行real-ti... 详细信息

【目的】通过系统性试验方案摸清我国华中部分地区猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3)流行病学及遗传变异特点，为PCV3疫苗研究提供数据基础。【方法】对华中地区(湖北、湖南和河南)15个规模化养猪场的3 500份临床采集样品进行real-time PCR检测，分析不同猪群、不同组织器官、不同排毒量和对应流行病学症状特点关系。对部分阳性样本PCV3全基因组进行扩增、测序和分析。【结果】50.86%(1 780/3 500)被检样本为PCV3核酸阳性，不同发育阶段猪群PCV3均易感，保育猪、哺乳仔猪、生长育肥猪PCV3阳性率较高，分别为70.44%(498/707)、67.19%(596/887)、41.75%(177/424)。在不同组织器官和样品中，淋巴结、肺脏、产后胎盘样本PCV3阳性率为67.05%(59/88)、63.79%(74/116)、49.11%(55/112)，血液、初乳样本PCV3阳性率分别为56.09%(502/895)、44.20%(278/629)，且鼻拭子和唾液中均检出PCV3。出现猪繁殖障碍症状、厌食症状和呼吸障碍症状的猪群PCV3阳性率高，分别为44.43%(399/898)、36.43%(431/1183)、28.04%(233/831)。24条PCV3全基因组序列长度均为2000 nt，其全基因核苷酸序列同源性为98.4%—100%，与参考株PCV3全基因组的同源性为97.4%—99.5%。遗传进化分析结果显示，23株PCV3属于PCV3b亚型，1株属于PCV3a亚型。Rep氨基酸序列比对结果发现，PCV3-L2、L23和L14株分别在(N124I)、(A183E)和(V244I)出现独特变异位点；Cap蛋白氨基酸序列比对结果发现，PCV3-L15、L21、L3和L19株分别在(T45P)、(R2K)、(R14K)和(F7L)出现独特变异位点。【结论】PCV3可感染不同发育阶段猪群，且分布于不同组织器官中；PCV3可通过垂直传播(如初乳和精液)和水平传播(如口鼻分泌物和唾液)感染猪群；PCV3感染可能与生猪繁殖障碍、呼吸障碍和多器官炎症和关节炎症密切相关。此外，被调查地区规模化猪场同时流行PCV3a和PCV3b两种亚型，其中PCV3b亚型为优势毒株。研究通过全基因组氨基酸序列分析发现部分独特变异位点位于Cap蛋白，这可能导致Cap蛋白赋予的免疫原性发生变化。对PCV3全基因序列的遗传进化做出详细阐述，为未来的PCV3疫苗研究奠定基础。

关键词：猪圆环病毒3型病毒载量全基因组扩增遗传进化分析

N^(+)和Ar^(+)注入红三叶种子的诱变效应研究

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草业学报 2024年第7期33卷 160-171页

作者：张鹤山陆姣云朱伟田宏熊军波吴新江刘洋湖北省农业科学院畜牧兽医研究所湖北省动物胚胎及分子育种重点实验室湖北武汉430064 咸宁市农业科学院湖北咸宁437100

离子注入技术是创制植物新种质的有效手段。为探究离子注入红三叶的诱变效应,以不同注入能量和剂量的N^(+)(能量30或50 keV,剂量5×10^(14)或5×10^(15)ions·cm^(-2),分别记为N3014、N3015、N5014、N5015)和Ar^(+)(能量30或50 keV,剂量... 详细信息

离子注入技术是创制植物新种质的有效手段。为探究离子注入红三叶的诱变效应,以不同注入能量和剂量的N^(+)(能量30或50 keV,剂量5×10^(14)或5×10^(15)ions·cm^(-2),分别记为N3014、N3015、N5014、N5015)和Ar^(+)(能量30或50 keV,剂量5×10_(14)ions·cm^(-2),分别记为Ar3014和Ar5014)注入“鄂牧5号”红三叶种子,研究种子诱变后的萌发特征和生物学特性,并通过株高、单株分枝数、单株花序数、花序小花数、叶片长度、叶片宽度、花序长度以及花序宽度等农艺性状对诱变单株进行变异分析。结果表明,离子注入后红三叶种子表皮具有明显的“灼伤”现象,种皮颜色变成黑褐色。相比于对照,Ar3014处理下发芽率指标值略有提高,处理N3014和N3015的发芽率指标值略有降低,但与对照均差异不显著。N5014处理显著降低了种子发芽率(P<0.05),比对照低约10%,处理N5015和Ar5014发芽率更是降低超过30%(P<0.05)。注入能量为30 keV的2个N^(+)处理显著增加了胚根体积和胚根长度(P<0.05)。经离子诱变的种子(M_(1)代)种植后生产M_(2)代种子,依次生产M_(3)和M_(4)代种子。M_(2)代植株各性状平均值显著低于对照(P<0.05),但表现出更大的性状变异特征,为进一步筛选突变材料奠定基础。50 keV的N^(+)和Ar^(+)诱变处理具有更大的诱变效应,但主要是不利突变。红三叶适宜的N^(+)诱变能量为30 keV,剂量为5×10^(14)~5×10^(15)ions·cm^(-2)。经过4个世代选育,获得8个性状稳定并具有潜在利用价值的M_(4)代突变体材料,为红三叶诱变育种提供基础资料。

关键词：红三叶氮离子氩离子诱变生物学效应

发酵桑枝叶粉对蛋鸡生产性能、蛋品质、肠道组织形态的影响

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草地学报 2024年第4期32卷 1259-1266页

作者：黄静赵娜郭万正金枫陈芳朱伟樊启文杜恩存陶文静黄少文魏金涛湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室湖北武汉430064 咸宁市农业科学院湖北咸宁437000

为探究发酵桑枝叶粉对蛋鸡生产性能、蛋品质、肠道组织形态的影响,试验选用36周龄蛋鸡360只,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验组分别用3%,6%,9%发酵桑枝叶粉替代等量的基础饲粮。结果表明:与对照组相比,1—4周各试验组产蛋率显著降... 详细信息

为探究发酵桑枝叶粉对蛋鸡生产性能、蛋品质、肠道组织形态的影响,试验选用36周龄蛋鸡360只,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验组分别用3%,6%,9%发酵桑枝叶粉替代等量的基础饲粮。结果表明:与对照组相比,1—4周各试验组产蛋率显著降低(P<0.05),5—8周各试验组不合格蛋率显著提高(P<0.05),9—12周3%发酵组不合格蛋率显著提高(P<0.05),6%和9%发酵组显著降低(P<0.05);第4周末各试验组鸡蛋蛋白高度、3%和9%发酵组哈氏单位、6%发酵组蛋壳厚度显著提高(P<0.05),第12周末各试验组蛋黄胆固醇含量显著降低(P<0.05);9%发酵组肝脏指数、各试验组肝脏甘油三酯含量显著降低(P<0.05);3%和6%发酵组空肠绒毛高度、6%和9%发酵组回肠绒隐比显著增加(P<0.05)。本试验条件下,在蛋鸡饲粮中使用6%发酵桑枝叶粉(桑枝叶粉含量50%)最为适宜。

关键词：发酵桑枝叶粉蛋鸡生产性能蛋品质肠道组织形态

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鸡慢羽基因型在不同品种中多态性及其与产蛋性状相关性研究

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中国家禽 2024年第2期46卷 16-21页

作者：贾子佳南九红蔡金萍李世军华中农业大学动物科学技术学院动物医学院湖北武汉430070

研究旨在丰富慢羽基因型的分子标记并探究慢羽基因型与产蛋量的相关关系。试验基于2个慢羽母鸡群体京红1号父母代种鸡母本和欣华鸡母本鉴定慢羽基因型的种类,采用PCR扩增方法检测个体中融合基因dPRLR-dSPEF2和内源性逆转录病毒ev21基因... 详细信息

研究旨在丰富慢羽基因型的分子标记并探究慢羽基因型与产蛋量的相关关系。试验基于2个慢羽母鸡群体京红1号父母代种鸡母本和欣华鸡母本鉴定慢羽基因型的种类,采用PCR扩增方法检测个体中融合基因dPRLR-dSPEF2和内源性逆转录病毒ev21基因的插入情况。结果显示:在两个慢羽母鸡群体中存在6种不同的慢羽基因型,当个体存在ev21基因(OR)或融合基因dPRLR-dSPEF2中的任意一种或两种时均表现为慢羽,当无ev21基因(UR)且融合基因dPRLR-dSPEF2也不存在时,表现为快羽;11个其他品种快慢羽基因型频率统计发现不同的品种快慢羽基因型频率存在差异。个体中携带融合基因dPRLR-dSPEF2时,其产蛋量会显著高于不携带者(P<0.05);与仅携带ev21基因(OR突变)的个体相比,同时携带ev21基因(OR突变)和正常UR区域的产蛋量有显著升高(P<0.05)。研究表明,ev21插入和融合基因并非鸡快慢羽的唯一关联突变,且京红1号父母代群体中慢羽基因型间存在显著的产蛋量差异。

关键词：鸡快慢羽融合基因dPRLR-dSPEF2 ev21基因产蛋量

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月鳢配合饲料的研究

饲料工业 2000年第6期21卷 20-21页

作者：陈芳杨代勤方长琰罗静波李永龙湖北农学院动物科学系 434103

月鳢与乌鳢同属鳢科鱼类.乌鳢性情较凶猛,适应性强,分布广,已在我国各地普遍开展养殖,对其研究也较多;而月鳢的性情较温和,适应能力较差,其分布不及乌鳢广,仅在长江、珠江水系的一些湖泊、沟渠、山溪中分布,对其研究较少.因此,为了开发... 详细信息

月鳢与乌鳢同属鳢科鱼类.乌鳢性情较凶猛,适应性强,分布广,已在我国各地普遍开展养殖,对其研究也较多;而月鳢的性情较温和,适应能力较差,其分布不及乌鳢广,仅在长江、珠江水系的一些湖泊、沟渠、山溪中分布,对其研究较少.因此,为了开发养殖月鳢,推动月鳢养殖的发展,解决月鳢养殖的饲料问题,我们在进行月鳢养殖的同时,开展了月鳢的人工配合饲料的研究及投喂,取得了用配合饲料养殖月鳢的成功.现将主要研究结果报道如下.

关键词：月鳢配合饲料配方设计诱食剂

益生菌及其代谢物对仔猪肠道稳态调控作用的研究进展

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2024年第4期50卷 495-505页

作者：宋梦真李靖靖李家旋陶诗煜华中农业大学动物科学技术学院湖北武汉430070

益生菌及其代谢物通过增强肠道屏障功能和调节宿主免疫反应等方式发挥有益作用,对仔猪生长发育具有重要意义。本文从益生菌调控仔猪肠道屏障功能和益生菌代谢物对仔猪肠道稳态的影响方面进行了概述,全面探讨了益生菌及其代谢物调控仔猪... 详细信息

益生菌及其代谢物通过增强肠道屏障功能和调节宿主免疫反应等方式发挥有益作用,对仔猪生长发育具有重要意义。本文从益生菌调控仔猪肠道屏障功能和益生菌代谢物对仔猪肠道稳态的影响方面进行了概述,全面探讨了益生菌及其代谢物调控仔猪肠道稳态的作用效果与机制,旨在为利用益生菌调控仔猪肠道健康提供理论参考。

关键词：益生菌代谢物肠道屏障肠道稳态仔猪

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14份乡土狼尾草材料幼苗的耐冷性综合评价

草业学报 2024年第8期33卷 98-111页

作者：陆姣云田宏熊军波吴新江刘洋张鹤山动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室湖北省农业科学院畜牧兽医研究所湖北武汉430064

为了探究低温胁迫对不同狼尾草材料幼苗生理特性的影响及综合评价不同材料的抗寒性。本研究采用泥炭土花盆培养法,对采集的14份乡土狼尾草种子发芽后的幼苗进行低温胁迫(25、4、0、-5℃)处理,并测定叶绿素含量、类胡萝卜素含量、抗氧化... 详细信息

为了探究低温胁迫对不同狼尾草材料幼苗生理特性的影响及综合评价不同材料的抗寒性。本研究采用泥炭土花盆培养法,对采集的14份乡土狼尾草种子发芽后的幼苗进行低温胁迫(25、4、0、-5℃)处理,并测定叶绿素含量、类胡萝卜素含量、抗氧化酶活性、丙二醛含量、渗透调节物质含量。采用主成分分析和隶属函数法对14份材料进行抗寒性评价。随低温胁迫的不断加重,供试狼尾草幼苗的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、可溶性糖和脯氨酸含量以及过氧化氢酶活性呈先升后降的趋势,类胡萝卜素含量呈逐渐增大的趋势,超氧化物歧化酶活性呈逐渐增加的趋势,可溶性蛋白呈先升后降再略升的趋势,而过氧化物酶活性变化趋势不一致。光合作用相关的各指标之间显著正相关。主成分分析结果表明,低温胁迫下狼尾草的光合因子、质膜系统因子、渗透调节因子可作为抗寒性评价的综合指标。隶属函数综合评价D值结果显示,L10材料的抗寒性较强,L4、L1和L2材料的抗寒性相对较弱。采用隶属函数综合评价法所得结果更加准确客观、可靠性高,研究结果可为狼尾草抗寒性评价及耐低温种质资源的筛选提供参考。

关键词：狼尾草抗寒性生理特性主成分分析隶属函数法

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龙猫膀胱结石的诊断和手术治疗

中国兽医杂志 2024年第3期60卷 152-153页

作者：乔宇静龙思宇沈瑶琴华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院湖北武汉430070

龙猫,又名栗鼠、南美栗鼠、毛丝鼠或绒毛鼠等,是对毛丝鼠属(Chinchilla)的一支小型啮齿动物的通称,原产于南美洲的安第斯山脉,现已成为一种新兴的伴侣动物。大多数关于龙猫疾病的文献都来自于养殖龙猫,而宠物龙猫相关疾病的报道仍然很缺... 详细信息

龙猫,又名栗鼠、南美栗鼠、毛丝鼠或绒毛鼠等,是对毛丝鼠属(Chinchilla)的一支小型啮齿动物的通称,原产于南美洲的安第斯山脉,现已成为一种新兴的伴侣动物。大多数关于龙猫疾病的文献都来自于养殖龙猫,而宠物龙猫相关疾病的报道仍然很缺乏[1-2]。目前,宠物龙猫的相关疾病,如阴茎问题、尿石症、牙周病、中耳炎、心脏疾病、假单胞菌感染和肠道疾病等报道较少[3-5],本文报告了1例龙猫膀胱结石手术病例,通过临床诊断和取石手术,成功取出结石使龙猫得以康复。旨在为治疗龙猫膀胱结石提供有价值的理论和实践依据。

关键词：膀胱结石毛丝鼠尿石症伴侣动物肠道疾病龙猫宠物假单胞菌感染

基于CRISPR/Cas9技术的SIRT3基因敲除猪肺泡巨噬细胞系的构建与鉴定

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江西农业大学学报 2024年第4期46卷 991-1000页

作者：王宝鑫张文华董霞郑好张晶陈洪波周傲武汉轻工大学动物科学与营养工程学院/动物遗传繁育与精准养殖实验室湖北武汉430023 湖北省家畜种业技术创新中心湖北武汉430023

【目的】旨在构建稳定敲除SIRT3基因的猪肺泡巨噬细胞系,分析SIRT3敲除对病毒诱导的炎症反应的调控作用,为探究SIRT3基因在宿主抗病毒感染中的作用奠定试验基础。【方法】研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,针对猪SIRT3基因第2号外显子设... 详细信息

【目的】旨在构建稳定敲除SIRT3基因的猪肺泡巨噬细胞系,分析SIRT3敲除对病毒诱导的炎症反应的调控作用,为探究SIRT3基因在宿主抗病毒感染中的作用奠定试验基础。【方法】研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,针对猪SIRT3基因第2号外显子设计sgRNA,连接pb-U6-puro-BFP质粒后转染3D4/21细胞,筛选单克隆细胞,结合Sanger测序、qPCR和Western blot技术对获得的单克隆细胞进行鉴定,进而获得SIRT3基因敲除的猪肺泡巨噬细胞系(3D4/21-SIRT3-KO),并以流感病毒A/WSN/33为研究对象,感染野生型和3D4/21-SIRT3-KO猪肺泡巨噬细胞,利用qPCR方法检测炎症相关因子IL-6、IL-8的表达水平,初步分析SIRT3基因在流感病毒感染诱导炎症反应的影响。【结果】Sanger测序结果显示,在挑选获得的敲除SIRT3基因的猪肺泡巨噬细胞克隆中,SIRT3基因第2号外显子位点产生了碱基缺失,并导致移码突变;同时,利用qPCR和Western blot检测猪肺泡巨噬细胞中SIRT3 mRNA和蛋白水平的表达,结果显示与野生型细胞相比,3D4/21-SIRT3-KO细胞中SIRT3 mRNA和SIRT3蛋白均不表达;流感病毒感染SIRT3基因敲除的猪肺泡巨噬细胞时发现,敲除SIRT3能显著加剧流感病毒感染诱导的炎症反应。【结论】研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建了SIRT3基因敲除的猪肺泡巨噬细胞系,并初步分析了SIRT3在流感病毒感染中作用。

关键词：猪肺泡巨噬细胞系 SIRT3 CRISPR/Cas9 炎症反应抗病育种基因编辑