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虚证辨证论治新视角

时珍国医国药 2024年第9期 2228-2231页

作者：李华成李瀚旻湖北中医药大学黄石市中医医院湖北省中医院(湖北中医药大学附属医院)肝病研究所国家中医药科研细胞分子生物学三级实验室国家中医药管理局慢性肝病肝肾论治重点研究室中医肝肾研究及应用湖北省重点实验室国家中医临床研究基地湖北省中医药研究院中医理论传承创新中心中医基础理论研究所李瀚旻名老中医传承工作室

深刻认识虚证本质是进一步提高虚证辨证论治水平和临床疗效的重要途径，对虚证本质的认识必须防止陷入“现象等于本质”和“虚证无本质”的认识误区。提出虚证本质的新认识是病理损伤与再生修复失衡。构建虚证的客观量化指标体系是提高... 详细信息

深刻认识虚证本质是进一步提高虚证辨证论治水平和临床疗效的重要途径，对虚证本质的认识必须防止陷入“现象等于本质”和“虚证无本质”的认识误区。提出虚证本质的新认识是病理损伤与再生修复失衡。构建虚证的客观量化指标体系是提高无症可辨(隐性证候)辨证论治水平有效途径。虚证辨证论治的基本策略是通过避免、减轻、甚或阻止病理损伤，维持正常再生修复，改善异常再生紊乱，发挥调控病理损伤与再生修复失衡的作用，主要包括“开源节流”和“填精生髓”两大配伍规律。“显性证候”则“有是症则用是药”,采用常规辨证论治方法行之有效。“隐性证候”则须根据病理损伤与再生修复失衡的具体态势，参照相关指标体系选方用药。进一步深入研究病理损伤与再生修复失衡的相关机制，不断充实完善虚证的客观量化指标体系和疗效判断标准，深刻揭示相关配伍规律的生物学基础及其疗效机制，是提高虚证辨证论治水平和临床疗效的努力方向。

关键词：虚证辨证论治隐性证候

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脂肪自噬在非酒精性脂肪性肝病防治中的作用

临床肝胆病杂志 2024年第7期40卷 1450-1458页

作者：肖智利卢晨霞周丹妮陈壮壮肖明中李晓东湖北中医药大学第一临床学院武汉430061 湖北中医药大学附属医院肝病科武汉430061 湖北省中医院肝病科中医肝肾研究及应用湖北省重点实验室武汉430061 湖北省中医药研究院武汉430074

目前非酒精性脂肪性肝病在国内外流行趋势不断上升,发病率逐年增加,已严重影响人类生命健康。脂肪自噬是分子伴侣介导的自噬,具有促进脂肪分解、维持肝细胞脂质稳态、缓解肝细胞脂肪变性等作用。脂肪自噬主要包括脂滴分解、脂滴自噬和... 详细信息

目前非酒精性脂肪性肝病在国内外流行趋势不断上升,发病率逐年增加,已严重影响人类生命健康。脂肪自噬是分子伴侣介导的自噬,具有促进脂肪分解、维持肝细胞脂质稳态、缓解肝细胞脂肪变性等作用。脂肪自噬主要包括脂滴分解、脂滴自噬和脂肪酸β氧化三个过程,受关键基因、受体、酶调控。目前中药、西药及饮食运动等干预手段在脂肪自噬研究方面取得了重要进展,为非酒精性脂肪性肝病防治策略提供了新的视角。

关键词：非酒精性脂肪性肝病自噬治疗学

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原花青素B2通过NRF2/HO-1/xCT/GPX4轴抑制氧化应激减轻HO诱导的人少突胶质细胞的损伤

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中国药理学通报 2024年 1735-1743页

作者：刘健陈莹梁亚杰蒲萌张紫薇郑璐璐柴智肖莹马存根王青山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室神经生物学研究中心湖北省武汉市蔡甸区人民医院

目的探讨原花青素B2 （proanthocyanidins B2,PCB2）对过氧化氢（H2O2）诱导的人少突胶质细胞（MO3.13）氧化损伤和凋亡的保护作用及其机制。方法筛选H2O2和PCB2的最佳作用浓度。分为正常组、PCB2组(100 mg·L-1PCB2处理24 h)、H2O2... 详细信息

目的探讨原花青素B2 （proanthocyanidins B2,PCB2）对过氧化氢（H2O2）诱导的人少突胶质细胞（MO3.13）氧化损伤和凋亡的保护作用及其机制。方法筛选H2O2和PCB2的最佳作用浓度。分为正常组、PCB2组(100 mg·L-1PCB2处理24 h)、H2O2模型组(500μmol·L-1H2O2处理24 h)、H2O2+PCB2组(500μmol·L-1H2O2与100 mg·L-1PCB2共同处理24 h)。FRAP法检测PCB2的抗氧化能力;CCK-8法检测各组细胞存活率,LDH法进行细胞毒性检测;微量酶标法和ELISA法检测各组细胞中LDH、NO、H2O2含量以及CAT、SOD活力;免疫荧光和Western blot分别检测各组细胞中NRF2、xCT、HO-1、Ferritin、GPX4的蛋白表达水平。亚铁离子荧光探针（FerroOrange）检测细胞内亚铁离子(Fe2+)含量。结果 H2O2能诱导MO3.13氧化损伤并导致细胞铁死亡,PCB2能够减轻MO3.13氧化损伤和铁死亡;与H2O2模型组相比,PCB2干预能够明显升高MO3.13内LDH含量,降低NO、H2O2含量,提高SOD、CAT活力;上调NRF2、xCT、HO-1、Ferritin、GPX4的蛋白表达水平。结论 PCB2能够通过N RF2/HO-1/xCT/GPX4轴增强细胞抗氧化能力,减轻H2O2诱导的MO3.13氧化损伤。

关键词：原花青素B2 MO3.13 H O 氧化损伤 NRF2/HO-1/xCT/GPX4轴铁死亡

补阳还五汤治疗多发性硬化的网络药理学研究及其单体的实验验证

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中药药理与临床 2024年

作者：刘健陈莹梁亚杰李彦青肖莹王翰斌毛珍马存根王青山西国润制药有限公司山西中医药大学神经生物学研究中心/国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室湖北省武汉市蔡甸区人民医院

目的：基于网络药理学、分子对接技术和动物实验，探讨补阳还五汤治疗多发性硬化症（MS）的作用机制及其单体成分治疗效果的验证。方法：通过TCMSP、HERB数据库收集BYHWD的药物活性成分，再通过口服生物利用度（OB）≥30%、类药性（DL）... 详细信息

目的：基于网络药理学、分子对接技术和动物实验，探讨补阳还五汤治疗多发性硬化症（MS）的作用机制及其单体成分治疗效果的验证。方法：通过TCMSP、HERB数据库收集BYHWD的药物活性成分，再通过口服生物利用度（OB）≥30%、类药性（DL）≥0.18、血脑屏障透过性（BBB）≥-0.3为标准筛选有效药物活性成分；使用SwissADME和SwissTargetPrediction平台预测有效药物活性成分作用靶点，运用UniProt校正作用靶点基因名；利用GeneCards、OMIM、DisGeNET数据库获取MS的相关疾病靶点。取有效药物活性成分作用靶点和MS的相关疾病靶点做交集靶点韦恩图；使用Cytoscape3.9.1软件构建“药物-活性成分-疾病靶点基因网络图”网络图；通过Metascape数据库对交集靶点进行GO和KEGG通路富集分析，借助微生信平台将其可视化，分析得到JAK-STAT通路为补阳还五汤药物成分的关键作用通路，做“药物关键作用靶点-靶点通路图”，采用STRING11.5在线数据库和Cytoscape3.9.1软件构建蛋白质互作网络(Protein-ProteinInteractionNetworks，PPI)；结合PPI网络结果再用分子对接技术进行测试，得出小分子药物活性成分芒柄花黄素与受体蛋白能自发地结合。使用双环己酮草酰二腙（cuprizone，CPZ）诱导的髓鞘脱失模型验证活性成分FMN是否抑制髓鞘脱失。将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照组、模型对照组和芒柄花黄素组，每组10只。正常对照组小鼠给予正常饲料，模型对照组和芒柄花黄素组喂养含0.2%CPZ饲料6w，第5w开始，给药组腹腔注射芒柄花黄素治疗2w。采用高架十字迷宫试验、旷场试验评价其对小鼠行为学的影响；采用黑金染色、免疫荧光染色检测各组小鼠胼胝体区域髓鞘脱失情况和MBP、IBA1、GFAP蛋白表达的变化；采用ELISA法检测脑组织液 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10含量，微量酶标法检测LPO、GSH的含量。结果：共获得162个补阳还五汤治疗MS的关键靶点。KEGG富集分得到三条和MS有关的通路为Janus激酶（januskinase，JAK）/信号转导子和转录激活子（signaltransducerandactivatoroftranscription，STAT）信号通路、核因子κB（nuclearfactorkappaB，NF-κB）信号通路、过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferators-activatedreceptors，PPARs）信号通路，可能的主要作用通路为JAK-STAT，主要作用靶点为STAT3、STAT1、JAK2；使用分子对接技术最终筛选得到有效小分子药物单体为芒柄花黄素。动物实验证明芒柄花黄素改善了CPZ模型狂躁和焦虑的行为学表现、抑制了髓鞘脱失，降低了 CPZ模型脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6、LPO含量，升高了IL-10、GSH含量，促进了小胶质细胞（microglia，MG）活化，抑制了星形胶质细胞（astrocyte，AST）的活化。结论：本文通过网络药理学对补阳还五汤作用机制进行分析，通过分子对接预测有效单体芒柄花黄素，并首次用动物实验证明芒柄花黄素可显著改善CPZ模型的行为学、抑制髓鞘脱失，其治疗机制可能与其抑制CPZ模型的炎症反应和氧化应激、调控MG和 AST 的活化有关。

关键词：补阳还五汤多发性硬化症网络药理学 Janus激酶/信号转导子和转录激活子通路分子对接芒柄花黄素动物实验

原花青素B2通过NRF2/HO-1/xCT/GPX4轴抑制氧化应激减轻H_(2)O_(2)诱导的人少突胶质细胞的损伤

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中国药理学通报 2024年第9期40卷 1735-1743页

作者：刘健陈莹梁亚杰蒲萌张紫薇郑璐璐柴智肖莹马存根王青山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室神经生物学研究中心山西晋中030619 湖北省武汉市蔡甸区人民医院湖北武汉430100

目的探讨原花青素B2(proanthocyanidins B2,PCB2)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人少突胶质细胞(MO3.13)氧化损伤和凋亡的保护作用及其机制。方法筛选H_(2)O_(2)和PCB2的最佳作用浓度。分为正常组、PCB2组(100 mg·L^(-1) PCB2处理24 h)... 详细信息

目的探讨原花青素B2(proanthocyanidins B2,PCB2)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人少突胶质细胞(MO3.13)氧化损伤和凋亡的保护作用及其机制。方法筛选H_(2)O_(2)和PCB2的最佳作用浓度。分为正常组、PCB2组(100 mg·L^(-1) PCB2处理24 h)、H_(2)O_(2)模型组(500μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)处理24 h)、H_(2)O_(2)+PCB2组(500μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)与100 mg·L^(-1) PCB2共同处理24 h)。FRAP法检测PCB2的抗氧化能力;CCK-8法检测各组细胞存活率,LDH法进行细胞毒性检测;微量酶标法和ELISA法检测各组细胞中LDH、NO、H_(2)O_(2)含量以及CAT、SOD活力;免疫荧光和Western blot分别检测各组细胞中NRF2、xCT、HO-1、Ferritin、GPX4的蛋白表达水平。亚铁离子荧光探针(FerroOrange)检测细胞内亚铁离子(Fe^(2+))含量。结果H_(2)O_(2)能诱导MO3.13氧化损伤并导致细胞铁死亡,PCB2能够减轻MO3.13氧化损伤和铁死亡;与H_(2)O_(2)模型组相比,PCB2干预能够明显升高MO3.13内LDH含量,降低NO、H_(2)O_(2)含量,提高SOD、CAT活力;上调NRF2、xCT、HO-1、Ferritin、GPX4的蛋白表达水平。结论PCB2能够通过NRF2/HO-1/xCT/GPX4轴增强细胞抗氧化能力,减轻H_(2)O_(2)诱导的MO3.13氧化损伤。

关键词：原花青素B2 MO3.13 H_(2)O_(2) 氧化损伤 NRF2/HO-1/xCT/GPX4轴铁死亡

Wnt信号通路与肝再生的关系及其在肝脏疾病中的作用

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临床肝胆病杂志 2024年第5期40卷 1050-1056页

作者：林玉培刘晓萍罗银冰李飞燕廖莹莹莫世聪毛德文蓝艳梅广西中医药大学研究生院南宁530001 广西中医药大学第一附属医院中医临床研究重点实验室南宁530023 广西中医药大学第一附属医院广西中医药防治医学分子生物重点实验室南宁530023

Wnt信号通路在维持肝脏内稳态和肝脏再生过程中扮演重要角色,在成熟的健康肝脏中,Wnt信号通路大多是不活跃的,但在细胞更新或再生过程中,以及在某些病理条件、疾病、癌前状态和癌症中,Wnt信号通路被持续过度激活。持续的肝细胞损伤常常... 详细信息

Wnt信号通路在维持肝脏内稳态和肝脏再生过程中扮演重要角色,在成熟的健康肝脏中,Wnt信号通路大多是不活跃的,但在细胞更新或再生过程中,以及在某些病理条件、疾病、癌前状态和癌症中,Wnt信号通路被持续过度激活。持续的肝细胞损伤常常会导致慢性肝病,如肝纤维化、肝硬化及肝癌等。本文概述了Wnt信号通路的基本结构特点,详细分析了其在多种肝脏疾病病理进展所扮演的重要角色,希望为临床防治肝脏疾病提供新思路。

关键词：肝疾病肝再生 Wnt信号通路 β连环素

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桂附地黄丸改善自然衰老小鼠肠道脂质吸收功能减退的研究

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中国药学杂志 2024年第16期59卷 1513-1521页

作者：郭煜晖潘冯缘李梅唐小涵张长城童乐三峡大学健康医学院国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北省功能性消化系统疾病中医临床医学研究中心/三峡大学中医医院三峡大学基础医学院

目的探究桂附地黄丸对衰老小鼠肠道脂质吸收功能减退的改善作用及可能的作用机制。方法将26只SPF级雄性11月龄雄性C57BL/6J小鼠饲养至21月龄，随后分为衰老模型组（Model组）和桂附地黄丸给药组(GFDHW,1.17 g·kg-1),给药组小鼠采用... 详细信息

目的探究桂附地黄丸对衰老小鼠肠道脂质吸收功能减退的改善作用及可能的作用机制。方法将26只SPF级雄性11月龄雄性C57BL/6J小鼠饲养至21月龄，随后分为衰老模型组（Model组）和桂附地黄丸给药组(GFDHW,1.17 g·kg-1),给药组小鼠采用饲料给药的方法，持续给药3个月，给药期间自由饮水，Model组小鼠给予正常饲料饲养，期间自由饮水，记录各组小鼠每周的体质量变化，于24月龄时进行处理取材；9只SPF级雄性8月龄雄性C57BL/6J小鼠作为青年对照组（Con组）,适应性饲养1周后进行处理取材。取材处理前，各组小鼠禁食24h,禁食结束后各组小鼠灌胃0.2 mL橄榄油，取材处理前30 min,各组小鼠灌胃0.2 mL半固体营养液。小肠推进运动实验检测小鼠小肠运动能力；生化试剂盒检测各组小鼠血清甘油三酯（triacylglycerol, TG）、总胆固醇（total cholesterol, TC）和低密度脂蛋白（low-density lipoprotein, LDL）的含量；透射电镜观察各组肠上皮细胞中脂滴数量变化；钙钴法碱性磷酸酶染色检测各组肠道碱性磷酸酶（intestinal alkaline phosphatase, IAP）活性；苏木素-伊红（hematoxylin eosin, HE）染色观察各组肠上皮形态；免疫组织化学法检测各组小鼠小肠Olfm4、Lgr5、PCNA、Notch1、Hes1以及Villin的表达；免疫印记法（Western blot）检测各组小鼠小肠脂质吸收相关分子蛋白表达水平。结果与Con组小鼠相比，Model组小鼠体质量下降较快，小肠运动能力下降，血清TG、TC、LDL含量增加，肠上皮细胞中脂滴数量增多，GFDHW组小鼠较衰老小鼠小肠运动能力有所提升，血清TG、TC、LDL含量降低，肠上皮细胞中脂滴数量减少；HE染色Model组小鼠小肠绒毛排列紊乱、断裂，绒毛长度缩短，隐窝深度降低，隐窝数量减少，与衰老小鼠相比，GFDHW组小鼠小肠绒毛排列整齐、连续，绒毛长度增加，隐窝深度升高，隐窝数量增多；免疫组化结果显示，与Con组小鼠相比，Model组小鼠小肠Olfm4、PCNA、Notch1、Hes1、Villin蛋白表达降低，与衰老小鼠相比，GFDHW组小鼠上述指标蛋白水平升高；Western blot结果显示，与Con组小鼠相比，Model组小鼠小肠CD36、FATP4、SR-BI、ACAT2、FABP1和MTTP蛋白表达下降，与衰老小鼠相比GFDHW组小鼠上述指标蛋白水平升高。结论 GFDHW通过提高Notch1表达促使肠干细胞向吸收细胞分化以及提高脂质吸收途径中相关分子蛋白表达水平，从而改善衰老小鼠小肠脂质吸收功能。

关键词：桂附地黄丸衰老脂质吸收小肠肠吸收细胞

丁二磺酸腺苷蛋氨酸联合肝爽颗粒治疗酒精性肝病临床效果

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世界中医药 2024年第15期19卷 2319-2322,2328页

作者：南然席奇宋春荣宋粉莉刘永刚陕西中医药大学附属医院肝病医院咸阳712000

目的:观察腺苷蛋氨酸联合肝爽颗粒治疗酒精性肝病患者的临床疗效及对肝纤维化指标的影响。方法:选取2019年7月至2021年6月陕西中医药大学附属医院肝病医院收治的110例酒精性肝病患者作为研究对象,按照随机数字表法随机分为观察组和对照... 详细信息

目的:观察腺苷蛋氨酸联合肝爽颗粒治疗酒精性肝病患者的临床疗效及对肝纤维化指标的影响。方法:选取2019年7月至2021年6月陕西中医药大学附属医院肝病医院收治的110例酒精性肝病患者作为研究对象,按照随机数字表法随机分为观察组和对照组,每组55例。对照组给予酒精性肝病基础疗法结合肝爽颗粒治疗,肝爽颗粒温开水冲服,1袋/次,3次/d。观察组给予丁二磺酸腺苷蛋氨酸联合肝爽颗粒治疗,肝爽颗粒服用方案同对照组,同时注射丁二磺酸腺苷蛋氨酸1.0 g+250 mL 0.9%氯化钠注射液缓慢静脉滴注,1次/d。2组均1个月为1个疗程,治疗3个疗程。分别于治疗前后检测肝功指标[直接胆红素(DBIL)、谷氨酰转移酶(GGT)、胆汁酸(BA)]、肝纤维化指标[脯氨酸肽酶(PLD)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅰ型前胶原氨端肽原(PINP)]、炎症介质[干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、C-X-C基序趋化因子配体1(CXCL1)、可溶性血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)],记录2组患者治疗期间发生的不良反应,计算总有效率。结果:治疗后,2组患者DBIL、GGT、BA水平均较治疗前降低,且观察组DBIL、GGT、BA水平均低于对照组,差异有统计学意义(P学意义(P学意义(P学意义(P>0.05)。观察组、对照组总有效率分别为90.91%(50/55)、74.55%(41/55),观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P>0.05)。结论:丁二磺酸腺苷蛋氨酸联合肝爽颗粒治疗酒精性肝病效果显著,可改善肝功能及肝纤维化状态,降低炎症介质水平,治疗安全性较高。

关键词：酒精性肝病肝爽颗粒丁二磺酸腺苷蛋氨酸肝功能肝纤维化炎症介质

基于泛癌Bulk RNA-Seq探索不同五运六气气化体质人群肿瘤的生物学特征

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 3095-3112页

作者：唐心浩储博文李辰天一王映菲夏仲卉李梓墨田心语王聪颖陈琪郝帅陶维王建明吴勉华郑晓红南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 江苏省老龄事业发展研究会老年康养与中医药研究专委会江苏南京210024 皖南医学院微生物与免疫教研室安徽芜湖241002 国家癌症中心分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 江汉大学医学部药学系湖北武汉430056 南京中医药大学中医药文献研究所江苏南京210023 南京大学医学院附属金陵医院江苏南京210000 南京中医药大学附属南京中医院江苏南京210022 南京中医药大学太仓附属医院江苏太仓215400 南京中医药大学中医学院江苏南京210023

中医五运六气气化理论认为先天气化体质是决定后天疾病发病特征的关键因素。既往研究表明,五运六气气化体质(以下简称体质)特征与多种肿瘤的发生发展密切相关,基于中医五运六气气化理论的肿瘤分型可反映肿瘤人群的预后风险。五运六气气... 详细信息

中医五运六气气化理论认为先天气化体质是决定后天疾病发病特征的关键因素。既往研究表明,五运六气气化体质(以下简称体质)特征与多种肿瘤的发生发展密切相关,基于中医五运六气气化理论的肿瘤分型可反映肿瘤人群的预后风险。五运六气气化理论具有较高的应用于指导肿瘤精准医疗策略构建的潜力,然而目前尚未有学者对五运六气气化理论指导肿瘤分子分型与精准医疗策略构建进行研究。为揭示不同体质肿瘤人群的生物学特征差异,筛选适用于各体质人群的潜在抗肿瘤药物,助力构建源自中医原创思维的肿瘤中西医协同精准医疗策略。该研究从UCSC Xena获得了泛癌Bulk RNASeq数据,从英国生物库获得了GWAS队列数据,从eQ TLGen和GTEx V8获得了cis-eQTLs数据。研究基于泛癌Bulk RNASeq,利用机器学习法筛选各体质人群的特征表达基因,利用生物信息学手段探索各体质人群的生物学特征差异,利用孟德尔随机化进行药物靶点筛选,通过分子对接筛选适用于各体质人群的潜在抗肿瘤中药单体,并预测中药单体成药性。结果显示,泛癌队列中不同体质人群在无进展间隔期、生物学功能、免疫细胞丰度、肿瘤药物敏感性、免疫疗法响应程度等方面存在显著差异,提示五运六气气化理论可应用于指导肿瘤分子分型与肿瘤精准医疗策略制定。泛癌队列中不同体质人群的生物学功能特征,一定程度上诠释了五运六气气化理论等中医理论的生物学内涵,并为中医肿瘤临床治疗提供新思路。DMKN等5个特征基因被作为虚拟药物筛选受体,通过分子对接与类药性预测后筛选得到17-beta-estradiol、serotonine、trans-resveratrol、leinoleic acid等潜在抗肿瘤药物。以转录组测序为代表的组学技术将是揭示中医理论科学内涵的有力工具。在各类肿瘤人群中阐释不同体质的多组学特征,是五运六气气化理论应用于肿瘤分子分型与肿瘤精准医疗策略制定的基础。

关键词：泛癌五运六气肿瘤分子分型中西医结合药物虚拟筛选