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霍山石斛β-1,4-木糖基转移酶(IRX9)基因克隆及生物信息学分析

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中草药 2019年第5期50卷 1212-1219页

作者：周佩娜李阳蒲天珍余坤张秀桥龚玲湖北中医药大学药学院湖北武汉430065

目的克隆霍山石斛β-1,4-木糖基转移酶(IRX9)基因,并进行生物信息学、密码子偏性分析。方法根据霍山石斛转录组数据获得的IRX9基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR技术得到IRX9基因cDNA的全长序列,并进行生物信息学分析。结果霍山石斛IRX... 详细信息

目的克隆霍山石斛β-1,4-木糖基转移酶(IRX9)基因,并进行生物信息学、密码子偏性分析。方法根据霍山石斛转录组数据获得的IRX9基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR技术得到IRX9基因cDNA的全长序列,并进行生物信息学分析。结果霍山石斛IRX9基因全长1 553 bp,包含一个长度为1 047 bp的开放阅读框,编码348个氨基酸,理论相对分子质量为39 350,等电点为7.26,为不含信号肽的亲水性稳定蛋白,定位于质膜,具有多个磷酸化位点和糖基化位点。系统进化树表明,该序列与同科植物铁皮石斛的同源性最高,且具有GT-A超家族的保守区域"DXD"。密码子偏性分析表明,该基因偏好使用以A/T结尾的密码子,具有27个偏性密码子,烟草为该基因最适合的外源表达宿主。结论成功克隆IRX9基因,为从分子水平调控霍山石斛的生长发育和改善药材产量和品质提供理论基础。

关键词：霍山石斛 β-1,4-木糖基转移酶基因克隆生物信息学分析 RT-PCR

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大黄煨制前后对正常大鼠胃肠功能的影响

中国实验方剂学杂志 2019年第12期25卷 140-144页

作者：张志李听弦徐柳谢婧孔德暄王光忠湖北中医药大学药学院武汉430065

目的:探讨大黄对正常大鼠胃肠功能的影响及其作用机制,并比较其煨制前后作用差异。方法:将健康SD大鼠随机分为空白组、生大黄高、中、低剂量组(1.5,3.0,6.0 g·kg^(-1)·d^(-1))以及煨大黄高、中、低剂量组(给药剂量同生品)共7组,每组8... 详细信息

目的:探讨大黄对正常大鼠胃肠功能的影响及其作用机制,并比较其煨制前后作用差异。方法:将健康SD大鼠随机分为空白组、生大黄高、中、低剂量组(1.5,3.0,6.0 g·kg^(-1)·d^(-1))以及煨大黄高、中、低剂量组(给药剂量同生品)共7组,每组8只,连续灌胃给药10 d,通过大鼠的体质量、进食量、胃内容物残留率、小肠推进率、胃系数以及胃组织形态观察评价大黄对胃肠功能的影响;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血浆胃动素(MTL),血清胃泌素(GAS),肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素-10(IL-10)的含量,探究大黄对胃肠功能产生影响的作用机制,比较大黄煨制前后对正常大鼠胃肠功能的影响。结果:各给药组不同程度的减缓了大鼠体质量增长,抑制胃排空、小肠推进,引发炎症反应,增加胃黏膜损伤。与空白组相比,除煨大黄低、中剂量组外,其他各组大鼠胃内残留率、胃系数和TNF-α含量显著升高(P<0.05,P<0.01);IL-10含量显著降低(P<0.01);除煨大黄低剂量组外,其他各组大鼠体质量,小肠推进率,GAS和MTL含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。与等剂量生大黄组相比,煨大黄各剂量组大鼠体质量,小肠推进率,GAS,IL-10,MTL含量均有不同程度的升高;胃系数、胃内容物残留率和TNF-α含量均有不同程度的降低。结论:大黄导致胃肠功能紊乱的原因可能与其抑制胃肠激素和促进炎症细胞因子的表达有关;大黄煨制后,大黄"苦寒败胃"的作用减弱,为大黄的临床合理用药提供了实验依据。

关键词：大黄煨制胃肠运动胃肠激素炎症因子酶联免疫吸附测定法

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中医药院校实验动物学的特色创新教育

中国比较医学杂志 2024年第5期34卷 100-105页

作者：章敏刘雁云顾欣田代志杨阳湖北中医药大学实验动物中心武汉430065 湖北中医药大学基础医学院武汉430065 湖北中医药大学药学院武汉430065

实验动物学在医学生教育及培养过程中有着举足轻重的地位。中医药院校实验动物学教学除紧跟实验动物学学科发展,还应加强中医特色教育和特色创新教育,根植于提高中医传统文化素养,着眼于培养学生创新和拓展思维。通过传承教育、伦理教... 详细信息

实验动物学在医学生教育及培养过程中有着举足轻重的地位。中医药院校实验动物学教学除紧跟实验动物学学科发展,还应加强中医特色教育和特色创新教育,根植于提高中医传统文化素养,着眼于培养学生创新和拓展思维。通过传承教育、伦理教育、迁移教育、探讨教育、启发教育及延展教育等在日常教学中的体现,结合实验动物学的中医渊源、中医药研究的动物福利、动物实验中的中医理论、动物模型的中医考量、实验动物的种属选择以及新发展方向的指导引领等具体内容,旨在培养学生的科研创新能力和实践动手能力。着力于更优质的中医特色创新教育,为祖国医学的发展提供坚实保障,为传统医学的传承培养新型人才。

关键词：实验动物学中医药特色教育创新教育

黑木耳β-葡聚糖/纳米硒复合物(DNT-Se)的制备工艺优化及活性评价

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食品工业科技 2023年第21期44卷 162-170页

作者：胡程宋浩颖常聪邱振鹏郑国华孟燕湖北中医药大学药学院湖北武汉432500 湖北中医药大学中药资源与中药复方教育部重点实验室湖北武汉432500

探索黑木耳β-葡聚糖/纳米硒复合物(DNT-Se)的最佳制备条件,并探究其安全性。以多糖(DNTs)浓度、维生素C(V_(C))与亚硒酸钠配比、亚硒酸钠浓度、反应时间、反应温度作为实验因素,采用双波长比色法及马尔文粒径测定法表征DNT-Se中Se NPs... 详细信息

探索黑木耳β-葡聚糖/纳米硒复合物(DNT-Se)的最佳制备条件,并探究其安全性。以多糖(DNTs)浓度、维生素C(V_(C))与亚硒酸钠配比、亚硒酸钠浓度、反应时间、反应温度作为实验因素,采用双波长比色法及马尔文粒径测定法表征DNT-Se中Se NPs的粒径变化,以Se NPs的粒径大小为评价指标,采用单因素及正交试验设计的方法考察DNT-Se的制备工艺,并采用CCK-8法评价DNT-Se对293T人胚胎肾细胞和AML-12小鼠正常肝细胞的毒性。DNTs浓度1.0 mg/mL,维生素C与亚硒酸钠配比为6:1,亚硒酸钠浓度为1.0 mg/mL、反应时间12 h、反应温度25℃为制备DNT-Se的最佳条件。该条件下制备的DNT-Se中Se NPs的粒径大小均值为34.50 nm,细胞增殖实验结果表明,DNT-Se对293T人胚胎肾细胞和AML-12小鼠正常肝细胞在200μg/mL时细胞存活率仍高于82%,同时DNT-Se能够抑制HepG2细胞的增殖,在72 h时对HepG2细胞的IC_(50)值为42.54μg/mL。本研究成功确定了DNT-Se的最优制备工艺,所得纳米硒粒径较小、分散均匀,对肝癌细胞HepG2有抑制增殖的效果,对正常细胞无毒性,具有良好的生物安全性。

关键词：纳米硒黑木耳 β-葡聚糖工艺考察

基于产地加工与炮制一体化创新模式对清半夏制备工艺的研究

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时珍国医国药 2022年第8期33卷 1899-1903页

作者：王燕肖锟钰詹鑫郭秀丽涂济源刘艳菊湖北中医药大学药学院湖北武汉430065 长沙医学院药学院湖南长沙410219

目的筛选清半夏产地加工与炮制一体化制备工艺,探讨一体化炮制技术的合理性及可行性。方法通过对鲜半夏干燥程度和白矾浸泡时间两个因素进行考察,以水溶性浸出物含量为有效性指标,以白矾残留量以及草酸钙含量为安全性指标,采用Hassan方... 详细信息

目的筛选清半夏产地加工与炮制一体化制备工艺,探讨一体化炮制技术的合理性及可行性。方法通过对鲜半夏干燥程度和白矾浸泡时间两个因素进行考察,以水溶性浸出物含量为有效性指标,以白矾残留量以及草酸钙含量为安全性指标,采用Hassan方法进行总评归一化处理,综合评分优选清半夏产地加工炮制一体化工艺。并与传统方法比较。结果清半夏产地加工与炮制一体化最佳工艺为每100 kg去皮鲜半夏(不干燥)用8 kg白矾制备成的40 L溶液浸泡72 h,取出洗净,切厚片,干燥。该一体化工艺较传统生产工艺制备的清半夏具有降低草酸钙含量和白矾残留量、提高水溶性浸出物含量的趋势。结论优选的清半夏一体化工艺稳定,较传统生产工艺清半夏在安全性和有效性指标上有一定优势,且减少损失,降低成本。初步说明清半夏一体化工艺生产模式具有合理性和可行性。

关键词：半夏清半夏产地加工与炮制一体化炮制工艺

入侵害虫菊方翅网蝽危害艾的叶片及对艾叶品质的影响

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中国中药杂志 2023年第19期48卷 5162-5171页

作者：王梓欣王卉颖陈昌婕陈蔚林苗玉焕刘大会湖北中医药大学药学院湖北武汉430065

研究入侵害虫菊方翅网蝽对艾的危害及其对艾叶品质的影响。对湖北黄冈艾叶基地虫害危害症状进行观察,对害虫进行形态特征及分子鉴定,确定害虫种类,调查虫害发生规律及成灾机制,并采用电镜、GC-MS和HPLC检测虫害危害叶片的显微结构、挥... 详细信息

研究入侵害虫菊方翅网蝽对艾的危害及其对艾叶品质的影响。对湖北黄冈艾叶基地虫害危害症状进行观察,对害虫进行形态特征及分子鉴定,确定害虫种类,调查虫害发生规律及成灾机制,并采用电镜、GC-MS和HPLC检测虫害危害叶片的显微结构、挥发油和黄酮类成分含量。结果表明,入侵害虫菊方翅网蝽对艾可造成毁灭性危害。其主要危害艾的叶片部位,受害初期,叶面出现针点状失绿点,随危害加剧,失绿点逐渐沿着叶脉扩散并聚集成片导致叶片偏黄色,危害严重部位变成棕黄色。菊方翅网蝽在高温干旱天气下容易发生,常在夏季暴发,艾叶被取食后,显微观察到叶片正面被取食部分渐出针点状失绿点,并有菊方翅网蝽的黑色排泄物紧密附着在腺毛上形成黑色油状污斑,叶肉组织严重破坏,非腺毛被取食断裂分布杂乱并粘连成片。受害前期叶片的新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、高车前素、棕矢车菊素、异泽兰黄素含量相对于受害中期叶片显著升高,受害后期叶片中上述成分含量显著降低;艾叶挥发性成分桉油精、龙脑、松油酯、石竹素在中度受害叶片中含量显著降低,而在重度受害叶片中含量显著升高。该研究发现菊方翅网蝽对艾叶的品质有很大影响,应重点防控;生产上发现对菊方翅网蝽存在抗性的艾种质,可开展抗菊方翅网蝽的艾叶新品种选育。

关键词：艾菊方翅网蝽危害症状分子鉴定挥发油黄酮

基于UHPLC-ELSD指纹图谱及多成分含量测定比较不同产地羊胆汁质量及抗氧化活性

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中国现代应用药学 2024年第8期41卷 1066-1074页

作者：周旭香朱芊芊张丹丹罗心遥刘丹章敏叶晓川湖北中医药大学药学院中药资源与中药化学湖北省重点实验室武汉430065 湖北中医药大学中医药实验中心武汉430065

目的建立UHPLC-ELSD指纹图谱与多成分含量测定方法,比较不同产地羊胆汁的差异,并进行抗氧化活性研究,为羊胆汁的深入开发利用提供依据。方法采用UHPLC-ELSD建立21批不同产地羊胆汁指纹图谱并进行相似度分析;测定6个成分含量、DPPH及A... 详细信息

目的建立UHPLC-ELSD指纹图谱与多成分含量测定方法,比较不同产地羊胆汁的差异,并进行抗氧化活性研究,为羊胆汁的深入开发利用提供依据。方法采用UHPLC-ELSD建立21批不同产地羊胆汁指纹图谱并进行相似度分析;测定6个成分含量、DPPH及ABTS自由基清除能力、铁离子还原能力,并进行熵权TOPSIS及灰色关联度分析。结果21批羊胆汁指纹图谱共确定11个共有峰,通过与对照品比对指认出牛磺胆酸(taurocholic acid,TCA)、甘氨胆酸(glycocholic acid,GCA)、牛磺鹅脱氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)、牛磺脱氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid,TDCA)、甘氨脱氧胆酸(glycodeoxycholic acid,GDCA)、胆酸(cholic acid,CA) 6个成分,除4批样品外,指纹图谱相似度均>0.90, 21批羊胆汁冻干粉中6个成分的总含量范围为55.34%~86.08%,含量最高的TCA含量范围为34.74%~60.86%,显示6个成分含量在不同产地样品中存在较大差异;不同产地羊胆汁均具有抗氧化活性,同样也存在一定差异。以6个成分含量为变量的熵权TOPSIS分析结果显示,得分排名位于前十的为S2、S18、S16、S9、S8、S21、S1、S10、S20、S15,表明其质量较好,且来自北方地区绵羊的羊胆汁质量略优;对6个成分含量与3个抗氧化指标的灰色关联度分析结果显示,6个成分与各抗氧化指标均具有关联性,且TCA、TDCA、TCDCA关联度最高,可能是羊胆汁发挥抗氧化作用的重要成分。结论采用熵权TOPSIS及灰色关联度分析方法能有效分析不同产地羊胆汁的质量差异及抗氧化活性成分,为其质量评价提供科学依据。

关键词：羊胆汁指纹图谱含量测定抗氧化活性熵权TOPSIS 灰色关联度质量控制

虎杖一体化饮片与传统饮片活性成分及体外抗炎作用比较研究

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中国中药杂志 2022年第13期47卷 3495-3500页

作者：舒宇航朱映睿郑宇锟成焕波陈运中涂济源王光忠湖北中医药大学药学院湖北武汉430065 湖北省中西医结合医院药学部湖北武汉430021

为探究虎杖一体化饮片与传统饮片活性成分及体外抗炎作用差异,采用HPLC分别测定虎杖2种饮片中活性成分虎杖苷、白藜芦醇、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素和大黄素甲醚的含量,通过脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症模型,采用PCR测定虎... 详细信息

为探究虎杖一体化饮片与传统饮片活性成分及体外抗炎作用差异,采用HPLC分别测定虎杖2种饮片中活性成分虎杖苷、白藜芦醇、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素和大黄素甲醚的含量,通过脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症模型,采用PCR测定虎杖2种饮片60%乙醇提取物不同质量浓度(5、10μg·mL^(-1))组别中炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL^(-1)β)的mRNA水平。含量测定结果显示,虎杖一体化饮片虎杖苷和大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量均显著高于传统饮片,而白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚的含量在传统饮片中较高。抗炎结果表明,虎杖一体化饮片醇提物不同质量浓度(5、10μg·mL^(-1))均能显著地抑制LPS诱导的炎症因子IL^(-1)β和TNF-αmRNA水平的升高,而传统饮片仅对IL^(-1)β有显著抑制作用。该研究初步说明,虎杖一体化饮片中5种活性成分总含量高于传统饮片,体外抗炎活性优于传统饮片,为虎杖一体化饮片生产及应用提供了实验依据。

关键词：虎杖饮片活性成分抗炎对比研究

高良姜素自微乳大鼠在体肠吸收和体内药动学研究

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中药新药与临床药理 2021年第11期32卷 1699-1704页

作者：张欣陈曦文卢昊许汉林湖北中医药大学药学院湖北武汉430065

目的制备高良姜素自微乳,考察其在大鼠在体肠吸收特征及体内药动学行为。方法建立大鼠在体单向肠灌流实验模型,采用高效液相色谱(HPLC)法测定灌流液中高良姜素浓度,考察高良姜素自微乳在各肠段中的吸收情况,计算相关吸收参数;以高良姜... 详细信息

目的制备高良姜素自微乳,考察其在大鼠在体肠吸收特征及体内药动学行为。方法建立大鼠在体单向肠灌流实验模型,采用高效液相色谱(HPLC)法测定灌流液中高良姜素浓度,考察高良姜素自微乳在各肠段中的吸收情况,计算相关吸收参数;以高良姜素混悬液为参比制剂,利用DAS2.1软件对大鼠血浆药物浓度-时间曲线进行拟合,计算相关药代动力学参数。结果高良姜素自微乳在大鼠整个肠段都有吸收,在十二指肠、空肠、回肠和结肠中的吸收速率常数(Ka)分别为高良姜素混悬液的2.37、1.70、2.29、3.98倍,表观吸收系数(P_(app))分别为高良姜素混悬液的3.58、2.56、3.57、5.16倍。高良姜素混悬液和自微乳的C_(max)分别为0.245、0.427 mg·L^(-1),t_(max)分别为1.789、1.411 h,AUC_(0-24 h)分别为1.207、2.059 mg·h·L^(-1),高良姜素自微乳相对于混悬液的生物利用度为220%。结论相对于高良姜素混悬液,高良姜素自微乳在各肠段均有良好的吸收,且显著提高了高良姜素在大鼠体内的口服生物利用度。

关键词：高良姜素自微乳在体肠吸收药物动力学口服生物利用度大鼠