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基于β2AR/β-arrestin2/NF-κB通路探讨预电针刺激“内关”“间使”对AD样大鼠学习记忆及蓝斑核-海马神经环路的作用机制

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北京中医药大学学报 2024年

作者：何川王丽潘小丽余超超肖娟鲁镇坤李湘钰杜艳军沈峰湖北中医药大学针灸骨伤学院湖北时珍实验室深圳市中医院广州中医药大学第四临床学院湖北省中医院

目的观察预电针对阿尔茨海默病（AD）样大鼠空间学习记忆能力、蓝斑核-海马神经环路及神经炎症的影响，探讨预电针防治AD的潜在作用机制。方法 36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、电针组、假电针组，每组9只。除正常组... 详细信息

目的观察预电针对阿尔茨海默病（AD）样大鼠空间学习记忆能力、蓝斑核-海马神经环路及神经炎症的影响，探讨预电针防治AD的潜在作用机制。方法 36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、电针组、假电针组，每组9只。除正常组外，其余各组通过腹腔注射D-半乳糖[120mg/（kg·d），连续8周]制备AD样大鼠模型。每日腹腔注射后，电针组大鼠予电针刺激“内关”“间使”，连续波，频率50Hz，电流1mA，20 min/次，每日1次，共8周。假电针组仅于“内关”“间使”位置浅刺至皮下，不通电，其余操作均与电针组同。干预结束后，以Morris水迷宫实验评估大鼠空间学习记忆能力，免疫荧光标记法检测蓝斑多巴胺β羟化酶（DBH）和c-Fos共定位去甲肾上腺素能神经元表达数、海马CA1区胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）共定位星形胶质细胞数，免疫印迹法测定大鼠海马去甲肾上腺素（NE）、β2肾上腺素受体（β2AR）、β-抑制蛋白2（β-arrestin2）、核转录因子-κB（NF-κB）、NF-κB抑制因子（IκBα）蛋白表达水平，酶联免疫吸附测定法检测海马组织TNF-α、白细胞介素-1β（IL-1β）及白细胞介素-6（IL-6）含量。结果与正常组比较，模型组大鼠平均逃避潜伏期延长，平台穿越次数和在目标象限探索时间减少（P学意义。结论预电针“内关”“间使”可缓解AD样大鼠学习记忆功能障碍，减轻蓝斑去甲肾上腺素能神经元丢失，抑制星形胶质细胞激活，保护蓝斑-海马神经环路，其作用机制可能与抑制了β2AR/β-arrestin2 /NF-κB炎性通路的激活相关。

关键词：阿尔茨海默病预电针蓝斑核 β2肾上腺素受体/β-抑制蛋白2/核转录因子-κB通路神经炎症大鼠

活血化瘀解毒方对脑缺血再灌注大鼠脑细胞自噬的影响

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时珍国医国药 2024年第1期35卷 35-38页

作者：陈佳敏陈心豪李花刘旺华湖南中医药大学中医学国内一流建设学科湖南长沙410208 中医诊断学湖南省重点实验室湖南长沙410208 数字中医药协同创新中心湖南长沙410208

目的探讨活血化瘀解毒方对脑缺血再灌注大鼠脑细胞自噬的影响。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组12只、手术组66只。手术组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞脑缺血/再灌注(MCAO)模型,假手术组仅分离血管不插栓。大鼠清醒后,进行神经功能缺... 详细信息

目的探讨活血化瘀解毒方对脑缺血再灌注大鼠脑细胞自噬的影响。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组12只、手术组66只。手术组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞脑缺血/再灌注(MCAO)模型,假手术组仅分离血管不插栓。大鼠清醒后,进行神经功能缺损(mNss)评分,手术组根据评分情况进行分层随机分组,分为模型组、依达拉奉组、活血化瘀解毒方(HXHYJDF)组、3-MA组、3-MA+HXHYJDF组,每组各12只。各组予以相应干预,7d后再次进行mNss评分,而后处死取材。通过血液流变学观察大鼠腹主动脉血(低、中、高切边下全血黏度及血浆黏度)血瘀情况;HE染色观察大鼠缺血侧脑皮质层组织病理形态变化;透射电镜观察大鼠脑缺血侧皮质层神经细胞自噬小体超微结构;Western blot法检测大鼠脑缺血侧皮质组织ATG-13(自噬相关蛋白13)、VPS34(哺乳动物中的第III类PI3 Kinase)、LC3(微管相关蛋白1轻链3)蛋白表达情况。结果 (1)与假手术组相比,模型组第1天神经功能缺损评分明显升高(P学意义(P>0.05),第7天评分均明显降低(P0.05),LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平较HXHYJDF组也有明显升高(P<0.05),而3-MA+HXHYJDF组较3-MA组ATG-13、VPS34、LC3-Ⅱ/Ⅰ表达均有不同程度的下调。结论活血化瘀解毒方可减轻脑缺血再灌注大鼠脑损伤,可能与抑制细胞自噬,下调自噬相关蛋白ATG-13、VPS34、LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平有关。

关键词：活血化瘀解毒方自噬脑缺血再灌注 ATG-13 VPS34 LC3-Ⅱ/Ⅰ

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小续命汤治疗缺血性卒中可行性探讨

河北中医 2024年第9期46卷 1549-1553页

作者：刘思民于志峰天津中医药大学研究生院天津301617 天津中医药大学中医学院中医诊断学教研室天津301617

小续命汤为《备急千金要方》中治疗中风的第一方,该方治疗中风曾盛极一时,其代表的辛温之法为汉唐时期中医治疗中风的普遍思路。小续命汤承仲景思想,组方合理,攻补兼施,运用辛温之法通阳救急、内外同治、调和营卫、温阳通经。随着现代... 详细信息

小续命汤为《备急千金要方》中治疗中风的第一方,该方治疗中风曾盛极一时,其代表的辛温之法为汉唐时期中医治疗中风的普遍思路。小续命汤承仲景思想,组方合理,攻补兼施,运用辛温之法通阳救急、内外同治、调和营卫、温阳通经。随着现代人群阳虚质占比的增多,具有温阳通阳散邪功用的小续命汤具有临床应用潜力及价值。临床研究证实小续命汤具有较好的疗效,动物实验表明小续命汤可通过多种通路治疗缺血性卒中。小续命汤可应用于阳虚寒凝型中风,需要继续探索其适应证及不良反应。

关键词：小续命汤卒中

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的疏肝和胃汤化学成分、HPLC指纹图谱、化学模式识别及含量测定研究

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中草药 2024年第7期55卷 2183-2196页

作者：袁传裕胡俊杰李娟刘焱文刘松林陈新湖北中医药大学中药资源与中药化学湖北省重点实验室湖北武汉430065

目的指认疏肝和胃汤(Shugan Hewei Decoction,SHD)主要化学成分,建立其HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别评价其质量,同时确定9种成分含量测定方法。方法通过UPLC-Q-TOF-MS/MS对SHD中化学成分进行分析;HPLC建立SHD指纹图谱及含量测定方法... 详细信息

目的指认疏肝和胃汤(Shugan Hewei Decoction,SHD)主要化学成分,建立其HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别评价其质量,同时确定9种成分含量测定方法。方法通过UPLC-Q-TOF-MS/MS对SHD中化学成分进行分析;HPLC建立SHD指纹图谱及含量测定方法;采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年版),结合层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)与正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA),寻找影响SHD质量的主要化学成分。结果从SHD中共鉴定出88个成分,包括26个黄酮类成分、27个萜类成分、18个生物碱类成分、6个香豆素类成分、6个有机酸类成分、2个苯丙素类化合物、3个其他类成分;建立了SHD的HPLC指纹图谱,确定了20个共有峰,10批样品相似度0.972~1.000。3种化学模式识别均将样品分为2类,造成主要差异的质量差异物来源于槲皮苷。建立的多成分含量测定方法耐用性良好。结论UPLC-Q-TOFMS/MS定性鉴别结合HPLC指纹图谱,可以体现SHD组分的整体特征,为其质量控制研究奠定基础。

关键词：疏肝和胃汤 HPLC-MS 裂解规律指纹图谱橘皮素黄藤素白术内酯Ⅲ 甘草酸层次聚类分析主成分分析正交偏最小二乘化法-判别分析

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艾与7个近缘种形态及挥发性成分的比较研究

植物科学学报 2024年第4期42卷 509-518页

作者：陈昌婕苗玉焕马钰洋肖闯刘大会湖北中医药大学药学院武汉430065 湖北时珍实验室武汉430065

采用目视鉴定和气相色谱仪-质谱联用(GC-MS)技术,从形态和挥发性成分方面比较艾(Artemisia argyi Lé*** Van.)和其他7个近缘种,并利用主成分分析(PCA)与聚类分析进行系统评价。结果显示,艾的植株形态与近缘种有明显的差异,具有植株高... 详细信息

采用目视鉴定和气相色谱仪-质谱联用(GC-MS)技术,从形态和挥发性成分方面比较艾(Artemisia argyi Lé*** Van.)和其他7个近缘种,并利用主成分分析(PCA)与聚类分析进行系统评价。结果显示,艾的植株形态与近缘种有明显的差异,具有植株高大、香气明显、叶厚而柔韧、茎秆被短白毛且有明显纵棱纹等特点;从挥发性成分中鉴定出28种共有成分和28种特征成分,通过PCA进一步筛选出17个差异代谢物,利用聚类分析可将各物种彼此区分。本研究结果可为艾及其近缘种的鉴定提供参考。

关键词：艾蒿属形态特征挥发性成分物种鉴定

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脂肪自噬在非酒精性脂肪性肝病防治中的作用

临床肝胆病杂志 2024年第7期40卷 1450-1458页

作者：肖智利卢晨霞周丹妮陈壮壮肖明中李晓东湖北中医药大学第一临床学院武汉430061 湖北中医药大学附属医院肝病科武汉430061 湖北省中医院肝病科中医肝肾研究及应用湖北省重点实验室武汉430061 湖北省中医药研究院武汉430074

目前非酒精性脂肪性肝病在国内外流行趋势不断上升,发病率逐年增加,已严重影响人类生命健康。脂肪自噬是分子伴侣介导的自噬,具有促进脂肪分解、维持肝细胞脂质稳态、缓解肝细胞脂肪变性等作用。脂肪自噬主要包括脂滴分解、脂滴自噬和... 详细信息

目前非酒精性脂肪性肝病在国内外流行趋势不断上升,发病率逐年增加,已严重影响人类生命健康。脂肪自噬是分子伴侣介导的自噬,具有促进脂肪分解、维持肝细胞脂质稳态、缓解肝细胞脂肪变性等作用。脂肪自噬主要包括脂滴分解、脂滴自噬和脂肪酸β氧化三个过程,受关键基因、受体、酶调控。目前中药、西药及饮食运动等干预手段在脂肪自噬研究方面取得了重要进展,为非酒精性脂肪性肝病防治策略提供了新的视角。

关键词：非酒精性脂肪性肝病自噬治疗学

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2546例新型冠状病毒奥密克戎变异株感染康复期患者流行病学调查的中医临床证候规律

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中华中医药杂志 2024年第4期39卷 2081-2086页

作者：王淼吕文亮张涵灵杨瑞华闫海琳张新悦刘之义何嘉伟黄超群王传池周姝含徐婧湖北中医药大学疫病研究所武汉430061 湖北中医药大学中医学院武汉430061 广东省新黄埔中医药联合创新研究院广州510700 湖北省中医院武汉430060 天津中医药大学天津301617

目的:分析湖北省2546例新型冠状病毒奥密克戎变异株感染康复期患者的流行病学调查结果,探讨其临床证候的规律。方法:利用“问卷星”于线上展开问卷调查,收集2022年12月1日至2023年1月31日湖北省新型冠状病毒奥密克戎变异株感染患者2546... 详细信息

目的:分析湖北省2546例新型冠状病毒奥密克戎变异株感染康复期患者的流行病学调查结果,探讨其临床证候的规律。方法:利用“问卷星”于线上展开问卷调查,收集2022年12月1日至2023年1月31日湖北省新型冠状病毒奥密克戎变异株感染患者2546例作为研究对象,采用卡方分析、因子分析等方法,分析本次新型冠状病毒感染康复期患者的主要中医临床症状、病位、病性以及患者基础疾病与康复期症状的相关性。结果:主要中医临床症状有咳嗽、乏力疲倦、食欲不振、咯痰(白痰)、恶风恶寒、味觉障碍等。病位主要在肺、脾,病性主要为虚实夹杂,包括气虚、阴虚等。高血压病患者的乏力疲倦、恶风恶寒发生率显著高于非高血压病患者(P湖北省本轮新型冠状病毒感染疫情康复期中医临床症状多与肺脾相关,病性以气虚、阴虚、湿阻为主。

关键词：新型冠状病毒感染康复期中医证候规律因子分析奥密克戎

半硫丸调控AMPK/PPARγ/GPAT3信号通路对甲减模型大鼠脂质代谢异常的保护作用

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中成药 2024年第2期46卷 611-615页

作者：曾明星陈继东向楠邹小娟湖北中医药大学基础医学院湖北武汉430065 湖北中医药大学第一临床学院湖北武汉430061 湖北省中医院(湖北中医药大学附属医院)内分泌病科湖北武汉430070

目的探讨半硫丸调控AMPK/PPARγ/GPAT_(3)信号通路,改善甲减模型大鼠脂质代谢异常的作用及其机制。方法60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、优甲乐组、半硫丸低剂量组、半硫丸高剂量组、联合用药组,每组10只,除正常组外,其余各组大... 详细信息

目的探讨半硫丸调控AMPK/PPARγ/GPAT_(3)信号通路,改善甲减模型大鼠脂质代谢异常的作用及其机制。方法60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、优甲乐组、半硫丸低剂量组、半硫丸高剂量组、联合用药组,每组10只,除正常组外,其余各组大鼠灌胃给予10 mg/kg丙硫氧嘧啶4周制备甲减模型,造模成功后干预6周,ELISA法检测血清甲状腺功能及血脂水平,RT-qPCR法检测肾周脂肪组织PPARγ、GPAT_(3)mRNA表达,Western Blot法检测肾周脂肪组织TSHR、AMPK、PPARγ、GPAT_(3)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清FT3、FT4降低(P<0.01),TSH、TG、TC、LDL-C水平升高(P<0.01),肾周脂肪组织PPARγ、GPAT_(3)mRNA表达以及TSHR、PPARγ、GPAT_(3)蛋白表达升高(P<0.01),p-AMPK蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠血清TC、LDL-C水平降低(P<0.01),优甲乐组和联合用药组TG水平降低(P<0.01),半硫丸各组肾周脂肪组织PPARγmRNA表达以及TSHR、PPARγ蛋白表达降低(P<0.01),p-AMPK蛋白表达升高(P<0.01),各给药组GPAT_(3)mRNA及蛋白表达降低(P<0.01)。结论半硫丸可能通过调控TSHR介导的AMPK/PPARγ/GPAT_(3)信号通路改善甲减导致的脂质紊乱,这种机制与优甲乐不同。

关键词：半硫丸甲减脂代谢 AMPK/PPARγ/GPAT3信号通路

针刺治疗腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜差异蛋白质组学分析

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中国组织工程研究 2024年第26期28卷 4129-4136页

作者：刘婧梁芳园李佳王华湖北中医药大学针灸骨伤学院湖北省武汉市430061

背景:肠易激综合征作为临床常见的消化功能紊乱性疾病,已成为针灸治疗的优势病种,但其作用机制尚未明确。组学技术的方法学特点与针灸作用多靶点、多层次的特点不谋而合,为揭示针灸治疗疾病的作用原理提供可能。目的:基于蛋白质组学研... 详细信息

背景:肠易激综合征作为临床常见的消化功能紊乱性疾病,已成为针灸治疗的优势病种,但其作用机制尚未明确。组学技术的方法学特点与针灸作用多靶点、多层次的特点不谋而合,为揭示针灸治疗疾病的作用原理提供可能。目的:基于蛋白质组学研究腹泻型肠易激综合征(diarrhea-irritable bowel syndrome,IBS-D)的发病机制及“标本配穴”针刺对其的治疗作用机制。方法:12只3月龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、“标本配穴”针刺组,后2组采用急性应激与慢性应激相结合的方法制备IBS-D大鼠模型;造模成功后针刺组选取双侧足三里穴、双侧内关穴及关元穴进行针刺治疗,频率为120次/min,每隔4 min行针1 min,留针15 min,每隔6 d休息1 d,共持续28 d。正常对照组和模型组大鼠不给予任何干预。通过检测大鼠腹部回撤反射(AWR)压力阈值评价大鼠内脏敏感性;使用基于高效液相色谱-串联质谱联用平台(LC-MS/MS)的非标记蛋白质组学方法进行大鼠结肠黏膜蛋白质组的测定分析;运用MaxQuant、Perseus软件和DAVID、KOBAS、VENNY、STRING在线分析工具进行蛋白质搜库、差异蛋白搜索及其他生物信息学分析;采用网络可视化软件Cytoscape3.7.1构建关联网络图。结果与结论:①IBS-D组与正常组相比有47个差异表达蛋白;差异蛋白功能分析显示,IBS-D的致病机制与能量代谢的异常加剧、结肠运动功能失衡、内脏敏感性的增加等有关;与IBS-D疾病相关的重要靶标蛋白包括:Atp5a1、Atp5c1、Idh3b、Atp2a3、Pdhb、Ppp1ca及Mapk3。②“标本配穴”针刺组与模型组相比较有61个差异表达蛋白,其中针刺逆转了IBS-D 9个差异表达蛋白的上调和9个差异表达蛋白的下调。③生物信息学分析结果表明“标本配穴”针刺对IBS-D的干预效应具有多靶点、多途径、多通路的特点,能够逆转IBS-D对正常能量代谢的损伤,同时能发挥抗氧化应激保护及抗炎的作用而达到缓痛、调节肠道失衡及肠屏障功能的治疗效果;与“标本配穴”针刺干预机制相关的重要靶点为Atp5a1、Atp5c1、Pdhb、Sars、Uqcrc2、Prdx2、Prdx4、Ppp1ca、Manf和Tmsb4x3。④该研究从整体蛋白质表达的角度初步明确了IBS-D致病的分子机制及“标本配穴”针刺对IBS-D的潜在作用机制,为“标本配穴”选穴配伍奠定了基础。

关键词：腹泻型肠易激综合征 IBS-D 标本配穴针刺蛋白质组学生物信息学分析