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当归痛风方对小鼠高尿酸血症肾病的FTIR研究

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光谱学与光谱分析 2024年第3期44卷 800-806页

作者：刘必旺路荣荣曹越王秀文赵换郝渺马晓霞马艳苗王永辉山西中医药大学傅山学院山西榆次030619 山西中医药大学基础医学院山西榆次030619 山西中医药大学中药与食品工程学院山西榆次030619 山西中医药大学附属医院药剂科山西太原030024

傅里叶变换红外光谱(FTIR)是鉴别物质和分析物质结构的有效手段,可对样品进行定性和定量分析,广泛应用于医药化工等众多领域。FTIR作为一种操作简便、实用、准确率高和费用低的鉴别方法,如今已经普遍应用于各种药品检验中,而有关其应用... 详细信息

傅里叶变换红外光谱(FTIR)是鉴别物质和分析物质结构的有效手段,可对样品进行定性和定量分析,广泛应用于医药化工等众多领域。FTIR作为一种操作简便、实用、准确率高和费用低的鉴别方法,如今已经普遍应用于各种药品检验中,而有关其应用于药理研究中还非常少,目前仅有采用红外光谱分析法对各种肿瘤组织进行研究的报道。高尿酸血症肾病是人体血尿酸升高后,过高的尿酸负荷超过肾脏的清除能力,尿酸结晶沉积于集合管、肾盂和尿道等。采用FTIR技术评价高尿酸血症肾病模型,并评价药物的药效,具有一定的可行性。该实验为探讨FTIR评价高尿酸血症肾病模型和当归痛风方疗效的科学性,将60只KM小鼠随机分为6组,正常对照组、模型组、阳性对照组和当归痛风方低、中、高组,采用氧嗪酸钾复制高尿酸血症肾病模型,灌胃当归痛风方,检测血清UA、尿液UA、血清CRE、尿液CRE、血清IL-1β和肾脏IL-1β、肾脏FTIR谱图等,并观察肾脏的病理变化。结果表明模型组各项指标与正常组比较有统计学意义(p<0.05),当归痛风方高剂量组的血清UA、血清CRE、血清IL-1β和肾脏IL-1β等与模型组比较且有统计学意义(p<0.05)。当归痛风方高剂量组肾脏的病理变化有所改善,无炎性细胞浸润,管腔内无管型,说明对肾损伤具有保护作用。各组FTIR谱有明显的差异,模型组的强度均低于正常组,阳性对照组和当归痛风方高剂量组谱接近正常组,进一步说明当归痛风方对肾损伤具有保护作用。研究表明FTIR可以作为一种简便快捷灵活经济的评价动物模型及药物疗效的方法之一,也为高尿酸血症肾病模型及有效药物的筛选提供了一个有意义的技术手段。该实验拓展了FTIR检测方法的使用范围。

关键词：高尿酸血症肾病当归痛风方尿酸肌酐傅里叶变换红外光谱仪

细胞外基质:毒蛇咬伤致局部组织损伤的治疗新靶点

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中国病理生理杂志 2024年第7期40卷 1324-1330页

作者：李玉梅杨悦易军严张仁王万春董德刚江西中医药大学研究生院江西南昌330004 江西中医药大学中医学院江西南昌330004 江西中医药大学附属医院中医外科江西南昌330006

毒蛇咬伤具有发病急、病情变化迅速、致残率及死亡率高等特点。毒素螯入对人体的影响分为全身性和局部毒化作用,目前抗蛇毒血清的普及大大降低了毒蛇咬伤的死亡率,但局部组织损伤及遗留的永久性功能障碍仍是亟待解决的问题。研究发现,... 详细信息

毒蛇咬伤具有发病急、病情变化迅速、致残率及死亡率高等特点。毒素螯入对人体的影响分为全身性和局部毒化作用,目前抗蛇毒血清的普及大大降低了毒蛇咬伤的死亡率,但局部组织损伤及遗留的永久性功能障碍仍是亟待解决的问题。研究发现,蛇毒金属蛋白酶、透明质酸酶、磷脂酶等毒素通过干扰细胞外基质(ECM)的降解和重塑参与多种局部病理效应的发生。本文对ECM与毒蛇咬伤局部组织损伤发展过程的相关机制进行综述,以期寻找有效的治疗靶点,为毒蛇咬伤所致局部组织损伤的临床研究和防治工作提供参考和思路。

关键词：毒蛇咬伤细胞外基质局部组织损伤出血肌毒性

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基于蛋白质组学探讨解毒益智方治疗AD模型小鼠的作用机制

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中药药理与临床 2024年

作者：王杰冯丽娜李云强张馨月王琦崔婷婷黎明全长春中医药大学中西医结合学院长春中医药大学中医学院长春中医药大学附属第三临床医院

目的：观察解毒益智方对AD模型小鼠学习、记忆功能改变和海马组织蛋白质组学的影响，筛选解毒益智方防治AD的差异蛋白及调控途径，探讨其可能机制。方法：将小鼠按随机数字表法分为模型对照组、解毒益智方1.78、3.56、7.12 g/kg组，另... 详细信息

目的：观察解毒益智方对AD模型小鼠学习、记忆功能改变和海马组织蛋白质组学的影响，筛选解毒益智方防治AD的差异蛋白及调控途径，探讨其可能机制。方法：将小鼠按随机数字表法分为模型对照组、解毒益智方1.78、3.56、7.12 g/kg组，另取同窝野生型C57小鼠作为正常对照组，每组各14只。各组持续灌胃给药8周后，采用Morris水迷宫对各组小鼠的记忆能力进行记录和评价；HE及IHC观察小鼠大脑皮层区神经元损伤及Aβ沉积情况；选取小鼠海马组织进行4D Label-free定量蛋白质组学测定，以Fold Chang≥1.5及≤1/1.5作为上调及下调的蛋白变化阈值，采用Max Quant和PSORTb（v3.0）软件对差异蛋白进行基因本体（GO）和KEGG等富集分析；采用Western blot法对关键差异蛋白进行验证。结果：Morris水迷宫实验表明，与正常对照组比较，模型对照组逃避潜伏期（第2、3、4、5 d）明显延长、穿越平台次数及目标象限停留时间明显降低（P<0.05），与模型对照组比较，解毒益智方各组小鼠逃避潜伏期明显降低、穿越平台次数及目标象限停留时间明显增加（P<0.05），其中解毒益智方7.12 g/kg 组最为明显（P<0.05）；HE及IHC结果表明，与正常对照组比较，模型对照组神经元损伤程度及Aβ阳性面积率明显增加（P<0.01），与模型对照组比较，解毒益智方各组小鼠神经元损伤程度及Aβ阳性面积率明显降低（P<0.01），其中解毒益智方7.12 g/kg组最为明显（P<0.01）；蛋白质组学及生物信息学分析结果显示：与模型对照组比较，解毒益智方7.12 g/kg组在生物过程（Biological Process，BP）、细胞组分（Cellular Component，CC）和分子功能（Molecular Function，MF）中的差异蛋白主要富集在脂质氧化、过氧物酶体、酰基辅酶A脱氢酶活性等，KEGG数据库中过氧化物酶体信号通路为主要富集通路，关键蛋白ABCD1及ACOX1明显上调（P<0.01）；WB结果表明，与模型对照组比较，海马中ABCD1及ACOX1蛋白表达水平明显上调，与蛋白组学结果一致（P<0.01）。结论：解毒益智方可能通过上调ABCD1和ACOX1蛋白在过氧化物酶体上的表达水平，从而促进长链/极长链脂肪酸（LCFA/VLCFA）的分解代谢过程，减少Aβ聚集来达到治疗AD的作用。

关键词：阿尔茨海默病解毒益智方蛋白质组学过氧化物酶体作用机制

生物传感器在新烟碱类农药残留检测中的应用研究进展

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食品科学 2024年第15期45卷 316-328页

作者：李瑶涂济源罗可馨廖唐斌孙忠月湖北中医药大学检验学院湖北武汉430065 湖北时珍实验室湖北武汉430065 湖北中医药大学药学院湖北武汉430065

新烟碱类杀虫剂在食品和环境样品中的超标残留严重威胁人体健康,提高新烟碱类农药残留的检测水平刻不容缓。基于生物传感器的新烟碱类农药残留物检测平台,可以实现对农药残留的快速、简单和低成本检测。本文主要总结了电化学传感器、荧... 详细信息

新烟碱类杀虫剂在食品和环境样品中的超标残留严重威胁人体健康,提高新烟碱类农药残留的检测水平刻不容缓。基于生物传感器的新烟碱类农药残留物检测平台,可以实现对农药残留的快速、简单和低成本检测。本文主要总结了电化学传感器、荧光传感器、比色传感器、电化学发光生物传感器和拉曼化学生物传感器在新烟碱类农药残留快速检测中的最新研究进展。同时,对其面临的挑战和解决方案进行了探讨,为日后生物传感器在农药残留检测方面的进一步开发和应用提供参考。

关键词：新烟碱类农药残留检测生物传感器检测技术应用

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花蕊石的本草考证及物相分析

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：魏健雄袁明洋崔红娇曹艳郑国华李娟湖北中医药大学药学院

通过查阅历代本草、医书与经典名方及现代文献，笔者对花蕊石的名称、基原、产地、品质、功效主治、炮制加工进行系统整理与本草考证。考证结果表明，清代前的本草多以“花乳石”之名记载，现以“花蕊石”为正名，另有混异品名“白云石... 详细信息

通过查阅历代本草、医书与经典名方及现代文献，笔者对花蕊石的名称、基原、产地、品质、功效主治、炮制加工进行系统整理与本草考证。考证结果表明，清代前的本草多以“花乳石”之名记载，现以“花蕊石”为正名，另有混异品名“白云石”；本草所述“淡白点”与大理岩具闪星状光泽特征一致，结合“色如硫黄”“色皆青绿”“黑点”等蛇纹石特征，推断其为蛇纹大理岩，与今用花蕊石一致，且宋代花蕊石的蛇纹石含量较高；产地以河南、陕西、山西、四川为主，江苏，浙江，河北等地亦有；历代本草对花蕊石品质评价较少，现代以整齐质坚、夹有黄绿色斑纹者为佳。花蕊石味酸、涩，性平，归肝经，具“治金疮血流，内漏目翳，下死胎，落胞衣”等功效，现以“化瘀止血”描述其功效。古代炮制方法最早为“火烧”，随后有“硫黄煅”“煅”“童便制”“醋淬”“水飞”“研”等方法，现代将其简化为明煅、醋制并新增水淬等方法。通过重量法与乙二胺四乙酸滴定法分别检测花蕊石CO32-和CaCO3含量，结果发现市售花蕊石中CaCO3质量分数处于2%～96%，结合CO32-与CaCO3含量可计算其中白云石与方解石含量，其中方解石含量越高其闪星状光泽越明显。采用拉曼光谱与X射线衍射（XRD）检测花蕊石样品粉末的物相组成，并对条纹部分进行拉曼光谱快速无损检测，结果表明花蕊石主要由白云石、方解石、蛇纹石、橄榄石、辉石等组成，条纹部分以蛇纹石为主。综上所述，2020年版《中华人民共和国药典》规定花蕊石CaCO3质量分数不小于40%，较难控制其质量，建议增加CO32-含量检测。该研究可为花蕊石的溯本清源提供科学依据，以更好地指导临床用药和资源合理利用。

关键词：花蕊石本草考证基原拉曼光谱 X射线衍射物相分析蛇纹石

基于PLA2-TRPV1/TRPA1通路探讨苓桂术甘汤对慢性支气管炎的抗炎化痰作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第14期30卷 1-9页

作者：丁薇汪文来刘珍洪陈香云何湛湛褚策袁雨露许咏琪张雨欣赵培彰杨桢赵红霞北京中医药大学中医学院北京102488 中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 北京中医药大学中医脑病研究院北京100700 四川大学华西临床医学院成都610041

目的:研究苓桂术甘汤对香烟烟雾暴露联合脂多糖(LPS)气道滴注诱导的慢性支气管炎(CB)大鼠的疗效作用机制。方法:将60只SPF级SD大鼠按体质量分层法随机分为正常组、模型组、地塞米松组(1 mg·kg^(-1))、苓桂术甘汤高、中、低剂量组(30.06... 详细信息

目的:研究苓桂术甘汤对香烟烟雾暴露联合脂多糖(LPS)气道滴注诱导的慢性支气管炎(CB)大鼠的疗效作用机制。方法:将60只SPF级SD大鼠按体质量分层法随机分为正常组、模型组、地塞米松组(1 mg·kg^(-1))、苓桂术甘汤高、中、低剂量组(30.06、15.03、7.515 g·kg^(-1))6组,每组10只。各组造模第1天、第14天分别予LPS(1 g·L^(-1))200μL气道滴注,正常组予等体积的生理盐水。除正常组外,其余各组第2~13天、15~30天予香烟烟雾暴露(10支/次/30 min,2次/d)构建大鼠CB模型。给药组分别在造模第2天连续灌胃30 d,观测大鼠精神行为状态与体质量。造模后30 d取大鼠肺组织,测定左肺湿/干质量比(W/D);苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织及支气管病理形态学变化;阿利新蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色观察支气管黏液分泌情况与杯状细胞增生程度;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中黏糖蛋白5AC(MUC5AC)、白细胞介素-13(IL-13)、白细胞介素-6(IL-6)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;免疫组化与全自动蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织中磷脂酶A2(PLA2)、热敏通道瞬时感受器电位香草素受体1(TRPV1)与瞬时感受器电位锚蛋白1(TRPA1)的表达变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠精神憔悴,弓背蜷腹,口鼻有血性分泌物,死亡率为40%,体质量增长趋势显著下降,肺支气管结构损害严重,管壁大量炎性介质与炎症细胞浸润,充血水肿与纤维增生,杯状细胞大量增生,黏液过量分泌堆积,管腔明显狭窄变形,且肺水肿显著加重(P<0.01);血清MUC5AC、IL-13、IL-6、TNF-α及肺PLA2的组织表达与蛋白表达水平显著上调(P<0.01);与模型组比较,苓桂术甘汤高、中、低3组反应灵敏,无异常行为与分泌物,死亡率低,体质量持续增长稳定,肺支气管损伤减轻,杯状细胞增生与黏液分泌减少,肺水肿显著减轻(P<0.01);血清MUC5AC、IL-13、IL-6、TNF-α及肺PLA2、TRPA1、TRPV1的组织表达与蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。结论:苓桂术甘汤可以有效减轻慢性支气管炎大鼠的肺部炎症与气道黏液高分泌状态,具有一定的抗炎化痰功效,其机制可能与PLA2-TRPV1/TRPA1通路有关。

关键词：苓桂术甘汤慢性支气管炎气道黏液高分泌炎症瞬时感受器电位(TRP)通道

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CeRNA网络在糖尿病肾病发病中的作用及其中医药调控机制研究

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辽宁中医杂志 2024年第4期51卷 10-15页

作者：江燕云徐琬梨刘瑶山东中医药大学中医学院山东济南250355

糖尿病肾病作为糖尿病的微血管并发症之一,其发病率正在逐年攀升,而有关肾脏损伤发病机制的研究虽已逐渐深入,但尚未完全阐明。竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)假说作为一种全新的基因表达调控模式,其机制是不同RNA之间... 详细信息

糖尿病肾病作为糖尿病的微血管并发症之一,其发病率正在逐年攀升,而有关肾脏损伤发病机制的研究虽已逐渐深入,但尚未完全阐明。竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)假说作为一种全新的基因表达调控模式,其机制是不同RNA之间的互作关系。作为ceRNA的环状RNA(circular RNA,circRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、假基因等分子吸附微小RNA(microRNA,miRNA),参与转录后基因表达的调控。近来研究表明,ceRNA调控网络在糖尿病肾病发生发展进程中起重要作用,而中药及其有效成分在治疗糖尿病肾病方面亦有显著优势,因此,文章将就ceRNA网络参与糖尿病肾病的发病机制及其中医药调控作用进行综述,进而为糖尿病肾病的诊断和治疗提供新的研究方向。

关键词：竞争性内源RNA 糖尿病肾病发病机制中医药

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转录因子对丹参酮类物质调控作用及机制研究进展

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药学学报 2024年第5期59卷 1218-1228页

作者：白艳红辛林林曾婷韩凤霞张永清蒲高斌陈雪刘谦山东中医药大学药学院山东济南250355 黄冈师范学院李时珍中医学院湖北黄冈438000

丹参是临床常用的活血化瘀药,主要用于心脑血管疾病的治疗,其关键活性物质丹参酮的合成和调控机制一直为研究热点。本文对近年来有关转录因子(AP2/ERF、bHLH、MYB、bZIP、WRKY等)调节丹参酮类成分生物合成的研究成果进行了归纳总结,指... 详细信息

丹参是临床常用的活血化瘀药,主要用于心脑血管疾病的治疗,其关键活性物质丹参酮的合成和调控机制一直为研究热点。本文对近年来有关转录因子(AP2/ERF、bHLH、MYB、bZIP、WRKY等)调节丹参酮类成分生物合成的研究成果进行了归纳总结,指出了丹参转录调控研究存在的问题,探讨了转录因子在丹参酮类活性成分生物合成调控中的研究方向,为进一步发现和利用丹参酮类活性物质调控功能基因提供理论依据。

关键词：转录因子丹参酮调控作用分子机制

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基于网络药理学和实验验证探讨芪术抗癌方治疗结直肠癌的作用机制

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中医杂志 2024年第4期65卷 404-413页

作者：孙若岚梁研赵凡朱诗娇万林鹭王旭殷启航尹刚唐德才南京中医药大学中医学院江苏省南京市210023 南京中医药大学药学院

目的探讨芪术抗癌方治疗结直肠癌的潜在分子机制。方法应用网络药理学对芪术抗癌方中活性成分和治疗结直肠癌的作用靶点进行分析,对芪术抗癌方治疗结直肠癌的关键靶点进行基因功能注释(GO)和京都基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。运... 详细信息

目的探讨芪术抗癌方治疗结直肠癌的潜在分子机制。方法应用网络药理学对芪术抗癌方中活性成分和治疗结直肠癌的作用靶点进行分析,对芪术抗癌方治疗结直肠癌的关键靶点进行基因功能注释(GO)和京都基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。运用分子对接预测核心活性成分与关键靶点的结合活性。通过建立结肠癌原位移植瘤模型小鼠验证网络药理学研究得出的芪术抗癌方干预结直肠癌的关键靶点。48只小鼠随机分为假手术组,模型组,5-氟尿嘧啶(5-Fu)组,芪术抗癌方低、中、高剂量组,每组8只。除假手术组外,其余各组进行结肠癌原位移植瘤造模。造模后隔天开始5-Fu组给予5-Fu 30 mg/kg,每3天1次,腹腔注射;芪术抗癌方低、中、高剂量组分别给予芪术抗癌方2.925、5.85、11.7 g/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组每天以0.1 ml/10 g生理盐水灌胃,共21天。比较各组原位瘤质量及肿瘤肝转移灶数目,HE染色观察结肠肿瘤组织的病理变化,Western blot法检测结肠肿瘤组织中非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶1(PTPN1)、黏着斑蛋白(vinculin)、整合素亚单位αν、整合素亚单位β3、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达。结果网络药理学筛选得到芪术抗癌方干预结直肠癌的核心活性成分前六位为槲皮素、山柰酚、芹菜素、木犀草素、黄芩苷元、熊果酸,其作用靶点有212个,排列前3位的环加氧酶1(PTGS1)、环加氧酶2(PTGS2)、非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶1(PTPN1),可能是芪术抗癌方治疗结直肠癌的关键靶点。这些关键靶点主要在磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路、黏着斑和黏附连接中显著富集。分子对接结果显示,除PTGS1与槲皮素、山柰酚、芹菜素的结合活性较好外(结合能≥-7.0 kcal/mol),PTGS1与木犀草素、黄芩苷元、熊果酸,PTGS2、PTPN1与6个核心活性成分均有强烈的结合活性(结合能<-7.0 kcal/mol)。实验验证结果显示,与假手术组比较,模型组小鼠结肠肿瘤组织PTPN1、vinculin、整合素亚单位αν、整合素亚单位β3蛋白表达显著升高,E-cadherin表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,芪术抗癌方高、中剂量组原位瘤质量降低,肝转移结节数减少(P<0.05),芪术抗癌方各剂量组及5-Fu组PTNP1、vinculin、整合素亚单位αν、整合素亚单位β3、E-cadherin表达水平呈现不同程度的回调,芪术抗癌方各剂量组各指标改变呈一定的剂量依赖(P<0.05)。HE染色观察到模型组肿瘤细胞核多呈分裂象,芪术抗癌方各剂量组存在不同程度的肿瘤细胞核碎裂,中、高剂量组更多。结论芪术抗癌方能够抑制结直肠癌原位瘤生长和肝转移,其作用机制可能是通过PTPN1调节了肿瘤细胞-细胞间和肿瘤细胞-细胞外基质间的黏附。

关键词：结直肠癌芪术抗癌方细胞黏附非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶1 网络药理学分子对接