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采用RNA测序技术分析儿童呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的转录组特征

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中华预防医学杂志 2024年第1期58卷 71-80页

作者：王乐颖乐伊莎李海燕刘振伟翁婷婷陈小芳留佩宁董琳温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童呼吸科温州325027 温州医科大学基因组医学研究院温州325025 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童保健科温州325027

本研究通过对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿血白细胞进行RNA测序,探讨与发病机制及疾病严重度相关的生物学特征。本研究是一项病例对照研究,以2019年10月至2022年4月于温州医科大学附属第二医院儿童呼吸科住院临床诊断为毛细支... 详细信息

本研究通过对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿血白细胞进行RNA测序,探讨与发病机制及疾病严重度相关的生物学特征。本研究是一项病例对照研究,以2019年10月至2022年4月于温州医科大学附属第二医院儿童呼吸科住院临床诊断为毛细支气管炎,RSV抗原阳性和(或)RSV核酸阳性的87例患儿作为病例组,将病例组按病情分为轻、中、重三组,按有无特应征分为特应征组和无特应征组,选择同期40名健康体检儿童作为对照组,提取病例组和对照组儿童的全血白细胞RNA进行测序,分析数据得到差异表达基因(DEGs),再通过基因本体论(GO)注释、京都基因和基因组百科全书(KEGG)注释、蛋白质相互作用网络(PPI)构建筛选与发病机制、病情以及特应征相关的免疫生物学通路及基因。通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)构建共表达网络,寻找与疾病严重度相关的潜在生物学指标。结果显示,病例组与对照组相比DEGs共有1782个,其中上调基因1586个,下调基因196个,这些DEGs的GO通路富集显示在分子功能中主要富集在过氧化物酶活性、氧化还原酶活性等过程,在细胞学组分中主要富集在细胞质囊泡腔、分泌颗粒腔中,在生物学过程中主要富集在中性粒细胞激活参与免疫反应、中性粒细胞脱颗粒、中性粒细胞激活等过程。DEGs的KEGG富集分析显示主要富集于病毒蛋白与细胞因子及其受体的相互作用信号通路。构建PPI网络后得到CCL2、IL-10、MMP9和JUN共4个处于核心位置的基因。不同病情组与对照组比较所得DEGs主要富集在逆行内源性大麻素信号转导和细胞凋亡通路上。WGCNA分析显示与血氧饱和度相关的棕色模块与病情关系最为密切,其基因主要富集在RNA解旋酶维甲酸诱导基因-I(RIG-I)样受体信号通路上。特应征组的特异性DEGs有230个,无特应征组的特异性DEGs有444个,KEGG富集分析结果显示两组均富集到NF-κB信号通路上,特应征不会导致RSV毛细支气管炎儿童免疫反应和转录组特征发生明显改变。综上,中性粒细胞激活、脱颗粒途径以及病毒蛋白与细胞因子及细胞因子受体的相互作用信号通路参与RSV毛细支气管炎宿主的免疫反应。CCL2、IL-10、MMP9和JUN基因可能与发病相关。在RIG-I样受体、细胞凋亡及内源性大麻素相关的信号通路中可能存在与疾病严重度相关的潜在生物学标志物。

关键词：呼吸道合胞病毒毛细支气管炎疾病严重程度 RNA测序

午餐和晚餐前宏量营养素干预对健康人血糖波动的影响

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营养学报 2024年

作者：潘优津余陈欣李轶灵刘宇鹏王舒然温州医科大学附属第二医院育英儿童医院温州医科大学

目的评估不同宏量营养素（蛋白质、脂肪和碳水化合物）干预对健康人血糖波动的影响，为糖尿病的预防和管理提供科学依据。方法本研究采用了单中心、开放标签、自身对照试验设计，共招募了9名健康成年志愿者，年龄为（24.44±1.67）岁。... 详细信息

目的评估不同宏量营养素（蛋白质、脂肪和碳水化合物）干预对健康人血糖波动的影响，为糖尿病的预防和管理提供科学依据。方法本研究采用了单中心、开放标签、自身对照试验设计，共招募了9名健康成年志愿者，年龄为（24.44±1.67）岁。试验采用了葡萄糖溶液、脂肪溶液、蛋白质溶液三种等能量（80kcal）干预溶液（250mL），并设等体积的水为对照，受试者在午餐和晚餐前20～25min摄入干预溶液，用动态血糖监测仪实时监测血糖波动。试验期为15d，包括引入期、各干预期和对照饮水期。观察指标包括血糖波动幅度、血糖曲线增量面积、血糖峰值时间、血糖目标范围内时间等。数据分析采用描述性统计分析以及配对t检验、独立样本t检验、Wilcoxonsign-rank检验和Kruskal-WallisH检验。结果与水对照组相比，蛋白组、脂肪组和碳水化合物组三个干预组合并（n=27）营养干预效果为：晚餐后4h血糖曲线增量面积显著降低（P=0.025），晚餐后到达血糖峰值时间显著增加（P=0.017），同时葡萄糖目标范围内时间（TIR）显著增加（P=0.001）。各组与干预前相比，蛋白组晚餐后到达血糖峰值时间显著延长（P=0.012），2h连续净交叠升糖指数（CONGA2）显著降低（P=0.035）；脂肪组TIR显著改善（P=0.010），但血糖曲线下面积（AUC）和平均血糖（MEAN）显著增加；碳水化合物组午餐后和晚餐后4h血糖曲线增量面积显著降低（P<0.001），TIR和CONGA2显著改善（P<0.05）。结论餐前营养素干预有效改善了健康人血糖波动，餐前蛋白质干预在改善血糖波动方面表现优于脂肪和碳水化合物，为糖尿病膳食预防和管理提供科学依据。

关键词：餐前干预宏量营养素血糖波动动态血糖监测

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哺乳类卵泡膜细胞及其干细胞的研究进展

中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 594-601页

作者：温馨方航萍刘溢佳陈浩林温州医科大学第二临床医学院妇产科温州325035 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童泌尿外科温州325000

卵泡膜细胞不仅为卵泡的完整性提供支持,还在卵泡发育、闭锁及优势卵泡选择和排卵中发挥至关重要的作用。尽管卵泡膜细胞在女性生殖过程中起到重要作用,但目前针对该类细胞发育、起源及其干细胞的相关研究非常稀少。卵泡膜干细胞的研究... 详细信息

卵泡膜细胞不仅为卵泡的完整性提供支持,还在卵泡发育、闭锁及优势卵泡选择和排卵中发挥至关重要的作用。尽管卵泡膜细胞在女性生殖过程中起到重要作用,但目前针对该类细胞发育、起源及其干细胞的相关研究非常稀少。卵泡膜干细胞的研究不仅能让我们深入了解卵泡膜细胞的募集、生长和分化过程,也能使我们尝试通过卵泡膜干细胞制备高活性的卵泡膜细胞,这对人类卵巢疾病的诊断、预防和治疗以及再生医学都具有重要的临床意义。本文就卵泡膜细胞功能、来源以及卵泡膜干细胞研究进展作一综述,同时也简单介绍单细胞测序技术在卵巢干细胞研究领域中的应用,为进一步探索卵巢卵泡发育机制、病理改变和疾病治疗等方面提供参考。

关键词：卵泡发育卵泡膜干细胞再生医学单细胞测序技术

伴有D二聚体升高的ROHHAD综合征1例并文献复习

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中华实用儿科临床杂志 2024年第7期39卷 544-546页

作者：杨蒙洁黄群佳单小鸥温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院儿童内分泌遗传代谢科温州温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院病理科温州

报告1例伴有D二聚体升高的ROHHAD综合征患儿, 并复习文献, 总结ROHHAD综合征患儿的临床特点。患儿, 男, 9岁9个月, 于2020年7月在温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院就诊。患儿从3岁开始出现体重快速增长, 体温不稳定, 易腹泻, 伴... 详细信息

报告1例伴有D二聚体升高的ROHHAD综合征患儿, 并复习文献, 总结ROHHAD综合征患儿的临床特点。患儿, 男, 9岁9个月, 于2020年7月在温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院就诊。患儿从3岁开始出现体重快速增长, 体温不稳定, 易腹泻, 伴身材矮小、性腺发育不良;实验室检查提示高钠血症、血泌乳素及二氧化碳分压升高;肿瘤病理提示左肾上腺节细胞神经瘤;多导睡眠监测提示中枢性低通气伴阻塞性呼吸暂停, 最终确诊为ROHHAD综合征, 这也是国内首例ROHHADNET报道。此外, 患儿在肾上腺肿瘤切除术前D二聚体升高, 术后降至正常, 提示ROHHAD综合征患者有血栓风险, D二聚体可能具有预测ROHHADNET肿瘤进展的价值。

关键词： ROHHAD综合征 D二聚体高凝状态神经节细胞瘤

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心肺运动试验在儿童呼吸系统疾病中的应用

中华儿科杂志 2024年第6期62卷 586-589页

作者：孙欣怡徐昌富李海燕张海邻温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院儿童呼吸科温州325027

心肺运动试验(CPET)是一种整体评估心肺功能的无创工具,对于呼吸系统疾病的诊断和预后判断有重要作用。CPET的主要测量指标包括二氧化碳通气当量、氧通气当量、最大摄氧量、无氧阈、静息代谢当量等,可用于包括儿童运动性呼吸困难、囊性... 详细信息

心肺运动试验(CPET)是一种整体评估心肺功能的无创工具,对于呼吸系统疾病的诊断和预后判断有重要作用。CPET的主要测量指标包括二氧化碳通气当量、氧通气当量、最大摄氧量、无氧阈、静息代谢当量等,可用于包括儿童运动性呼吸困难、囊性纤维化、闭塞性细支气管炎、支气管肺发育不良、肺动脉高压、间质性肺疾病等疾病患儿的心肺功能、运动能力及影响因素评估,并以此为基础制订个性化的干预措施。现主要介绍CPET在儿童呼吸系统疾病中的应用进展。

关键词：支气管肺发育不良心肺运动试验囊性纤维化间质性肺疾病疾病患儿闭塞性细支气管炎无氧阈呼吸系统疾病

VX765对大鼠骨关节炎和软骨细胞炎症的作用

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中国修复重建外科杂志 2024年第1期38卷 74-81页

作者：黄婉然涂君雪乔爱卿何储君温州医科大学附属第二医院育英儿童医院药学部浙江温州325000

目的研究VX765对大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)和软骨细胞炎症的影响及其作用机制。方法分离4周龄SD大鼠膝关节软骨细胞,取第3代细胞采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测不同浓度(0、1、5、10、20、50、100μmol/L... 详细信息

目的研究VX765对大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)和软骨细胞炎症的影响及其作用机制。方法分离4周龄SD大鼠膝关节软骨细胞,取第3代细胞采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测不同浓度(0、1、5、10、20、50、100μmol/L)VX765对大鼠软骨细胞活性的影响;体外构建脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导细胞炎症模型,将细胞分为对照组、LPS组、无明显细胞毒性VX765浓度1组和VX765浓度2组,行Western blot、实时荧光定量PCR和ELISA检测炎症因子TGF-β1、IL-6和TNF-α表达水平,Western blot和免疫荧光染色检测核因子E2相关的转录因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素氧化酶1(heme oxygenase 1,HO-1)表达。将32只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、OA组(B组)、OA+VX765(50 mg/kg)组(C组)和OA+VX765(100 mg/kg)组(D组),每组8只。A组仅行膝关节前内侧切口,B~D组在A组基础上横切内侧副韧带和前交叉韧带,并切除内侧半月板;术后1周,C、D组分别灌胃给药50 mg/kg和100 mg/kg VX765,A、B组给予等量生理盐水灌胃。通过HE及番红固绿染色行组织病理学检查,并通过Mankin评分进行评估;采用免疫组织化学染色技术分析基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)和Ⅱ型胶原蛋白的表达。结果CCK-8法检测示VX765浓度高于10μmol/L后细胞活力显著降低(P<0.05),选择无明显细胞毒性的4μmol/L和8μmol/L VX765进行后续实验。LPS诱导后细胞中的TGF-β1、IL-6和TNF-α表达显著高于对照组(P<0.05),而在4μmol/L和8μmol/L VX765干预后表达较LPS组显著下降(P<0.05)。Western blot和免疫荧光染色检测示VX765显著上调Nrf2通路相关分子Nrf2和HO-1的蛋白表达(P<0.05),激活Nrf2通路。大鼠膝关节组织病理学检查和免疫组织化学染色示,与B组相比,C、D组VX765处理改善了大鼠OA中关节结构损伤,减轻了炎症反应,下调MMP-13表达,增加Ⅱ型胶原蛋白的表达。结论VX765可改善大鼠OA并减轻软骨细胞的炎症反应,其潜在机制可能是通过激活Nrf2通路。

关键词： VX765 核因子E2相关的转录因子2通路骨关节炎软骨细胞大鼠

基于儿童游戏的隐喻对脑外伤恢复期患儿心理及行为的影响

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中国儿童保健杂志 2024年第5期32卷 566-571页

作者：王陈军李霞刘一苇温州医科大学附属第二医院儿童康复科

目的探讨基于儿童游戏的隐喻对脑外伤恢复期患儿心理及行为的影响，为制定针对此类患儿的基于儿儿童游戏的隐喻干预提供依据。方法选取2021年5月—2022年10月在温州医科大学附属第二医院育英儿童医院康复中心进行康复的6～12岁脑外伤... 详细信息

目的探讨基于儿童游戏的隐喻对脑外伤恢复期患儿心理及行为的影响，为制定针对此类患儿的基于儿儿童游戏的隐喻干预提供依据。方法选取2021年5月—2022年10月在温州医科大学附属第二医院育英儿童医院康复中心进行康复的6～12岁脑外伤恢复期患儿60名，随机分为试验组和对照组，每组30例。对照组给予常规护理方法，试验组给予基于儿童游戏的隐喻干预治疗方法。对比两组患儿社会生活能力评分、行为异常检出率、抑郁评分、焦虑评分、认知功能评分。结果干预前，两组患儿各项量表评分差异均无统计学意义(P>0.05)。干预后试验组婴儿-初中生社会生活能力评分(t=3.175),简易精神状态检查评分(t=5.265)和洛文斯顿作业疗法认知评定量表评分(t=7.835)均高于对照组(P儿童行为量表(CBCL)评分(Z=7.823),抑郁-问卷总分(t=6.398)和儿童焦虑性情绪障碍筛查表总分(t=6.248)均低于对照组(P儿童游戏的隐喻干预了减轻脑外伤恢复期患儿的焦虑抑郁的负性情绪，提高患儿社会生活能力，降低CBCL评分，并改善患儿的认知功能。

关键词：游戏隐喻脑外伤情绪儿童

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双肺弥漫性病变伴空洞

中华结核和呼吸杂志 2024年第8期47卷 788-790页

作者：张美美林慧全多多黄晖高美玲戴威戴元荣温州医科大学附属第二医院(育英儿童医院)呼吸内科温州325000 温州医科大学附属第二医院(育英儿童医院)病理科温州325000 温州医科大学附属第二医院(育英儿童医院)神经康复科温州325000

胰腺癌肺转移患者的胸部CT表现多样,不具有特异性。已有一些文献报道胰腺癌肺转移患者的胸部CT可表现为孤立性肺结节、间质性病变、多发类圆形病变等,目前国内外极少报道胸部CT表现为双肺弥漫性病变伴空洞。本文报道1例以双肺弥漫性病... 详细信息

胰腺癌肺转移患者的胸部CT表现多样,不具有特异性。已有一些文献报道胰腺癌肺转移患者的胸部CT可表现为孤立性肺结节、间质性病变、多发类圆形病变等,目前国内外极少报道胸部CT表现为双肺弥漫性病变伴空洞。本文报道1例以双肺弥漫性病变伴空洞为首发表现的胰源性黏液腺癌肺转移,其临床表现不典型,易被误诊为肺部感染,最终通过肺穿刺活检确诊。

关键词：肺穿刺活检胰源性黏液腺癌胸部CT 肺转移孤立性肺结节首发表现胰腺癌

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氧化应激对线粒体功能及椎间盘细胞的影响

四川大学学报（医学版） 2024年第2期55卷 249-255页

作者：周豪陈涛吴爱悯温州医科大学附属第二医院浙江省骨科学重点实验室温州325000

椎间盘退变被广泛认为是引起腰痛的主要原因之一,椎间盘细胞是椎间盘的主要细胞组成部分,其功能包括合成和分泌胶原蛋白和蛋白多糖,维持椎间盘的结构和功能稳定。此外,椎间盘细胞还参与维持椎间盘的营养代谢平衡、抗氧化和抗炎作用等生... 详细信息

椎间盘退变被广泛认为是引起腰痛的主要原因之一,椎间盘细胞是椎间盘的主要细胞组成部分,其功能包括合成和分泌胶原蛋白和蛋白多糖,维持椎间盘的结构和功能稳定。此外,椎间盘细胞还参与维持椎间盘的营养代谢平衡、抗氧化和抗炎作用等生理过程,因此椎间盘细胞在椎间盘退变中发挥重要作用。当椎间盘细胞受到氧化应激影响时,线粒体可能会受损,影响细胞的正常功能并加速退行性改变。线粒体是细胞的动力源,细胞内主要的能量生产机构,可以控制细胞内的几个重要过程,如细胞死亡。相反地,线粒体的紊乱可能与多种退行性病变的病理生理学有关。同时线粒体也是氧化还原反应的关键场所,过量的氧化应激和活性氧物质可对线粒体功能造成负面影响,这些因素可能导致线粒体的损伤和功能受损,进而引发炎症反应、线粒体DNA损伤和细胞凋亡,从而在椎间盘细胞病变过程中起到重要作用。本综述将突出探讨氧化应激与活性氧对线粒体的影响,并研究它们在椎间盘细胞的病理过程中的关键作用。同时介绍在目前的前沿治疗中,线粒体抗氧化剂和保护剂作为减缓氧化应激治疗椎间盘退变的一种潜在方法。

关键词：氧化应激活性氧线粒体功能椎间盘细胞综述