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用UPLC-MS/MS法测定人血浆中他莫昔芬与活性代谢物吲哚昔芬的浓度及应用

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中国临床药理学杂志 2024年第1期40卷 112-116页

作者：林晓东王哲董瑶瑶陈瑞杰朱光辉温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院药学部浙江温州325000

目的建立一种快速、简便的超高效液相色谱-串联质谱联用法(UPLC-MS/MS)检测乳腺癌患者血浆中他莫昔芬及其活性代谢物吲哚昔芬的浓度。方法以乙腈为沉淀剂沉淀蛋白,用色谱柱ZORBAX Eclipse plus C_(18)(18μm,2.1 mm×50 mm)进行分离,以... 详细信息

目的建立一种快速、简便的超高效液相色谱-串联质谱联用法(UPLC-MS/MS)检测乳腺癌患者血浆中他莫昔芬及其活性代谢物吲哚昔芬的浓度。方法以乙腈为沉淀剂沉淀蛋白,用色谱柱ZORBAX Eclipse plus C_(18)(18μm,2.1 mm×50 mm)进行分离,以甲醇乙腈为流动相,以地西泮为内标物,采用电喷雾离子源、正离子多反应监测模式,检测离子通道为他莫昔芬m/z 372.0→72.1,吲哚昔芬m/z 374.0→58.2,地西泮m/z 285→192.9。结果他莫昔芬和吲哚昔芬分别在1~500 ng·mL^(-1)(R2=0.9995)、0.5~250 ng·mL^(-1)(R2=0.9999)线性关系良好;他莫昔芬及吲哚昔芬在低、中、高3个质控浓度下的日内、日间精密度均小于10%,并在低温放置及反复冻融的条件下稳定性较好。结论本实验结果表明该法符合生物样本分析要求,样品处理简便、专属性强、能够准确快速地测定人血浆中他莫昔芬和吲哚昔芬的浓度。

关键词：他莫昔芬吲哚昔芬超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)联用法血药浓度

采用RNA测序技术分析儿童呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的转录组特征

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中华预防医学杂志 2024年第1期58卷 71-80页

作者：王乐颖乐伊莎李海燕刘振伟翁婷婷陈小芳留佩宁董琳温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童呼吸科温州325027 温州医科大学基因组医学研究院温州325025 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童保健科温州325027

本研究通过对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿血白细胞进行RNA测序,探讨与发病机制及疾病严重度相关的生物学特征。本研究是一项病例对照研究,以2019年10月至2022年4月于温州医科大学附属第二医院儿童呼吸科住院临床诊断为毛细支... 详细信息

本研究通过对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿血白细胞进行RNA测序,探讨与发病机制及疾病严重度相关的生物学特征。本研究是一项病例对照研究,以2019年10月至2022年4月于温州医科大学附属第二医院儿童呼吸科住院临床诊断为毛细支气管炎,RSV抗原阳性和(或)RSV核酸阳性的87例患儿作为病例组,将病例组按病情分为轻、中、重三组,按有无特应征分为特应征组和无特应征组,选择同期40名健康体检儿童作为对照组,提取病例组和对照组儿童的全血白细胞RNA进行测序,分析数据得到差异表达基因(DEGs),再通过基因本体论(GO)注释、京都基因和基因组百科全书(KEGG)注释、蛋白质相互作用网络(PPI)构建筛选与发病机制、病情以及特应征相关的免疫生物学通路及基因。通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)构建共表达网络,寻找与疾病严重度相关的潜在生物学指标。结果显示,病例组与对照组相比DEGs共有1782个,其中上调基因1586个,下调基因196个,这些DEGs的GO通路富集显示在分子功能中主要富集在过氧化物酶活性、氧化还原酶活性等过程,在细胞学组分中主要富集在细胞质囊泡腔、分泌颗粒腔中,在生物学过程中主要富集在中性粒细胞激活参与免疫反应、中性粒细胞脱颗粒、中性粒细胞激活等过程。DEGs的KEGG富集分析显示主要富集于病毒蛋白与细胞因子及其受体的相互作用信号通路。构建PPI网络后得到CCL2、IL-10、MMP9和JUN共4个处于核心位置的基因。不同病情组与对照组比较所得DEGs主要富集在逆行内源性大麻素信号转导和细胞凋亡通路上。WGCNA分析显示与血氧饱和度相关的棕色模块与病情关系最为密切,其基因主要富集在RNA解旋酶维甲酸诱导基因-I(RIG-I)样受体信号通路上。特应征组的特异性DEGs有230个,无特应征组的特异性DEGs有444个,KEGG富集分析结果显示两组均富集到NF-κB信号通路上,特应征不会导致RSV毛细支气管炎儿童免疫反应和转录组特征发生明显改变。综上,中性粒细胞激活、脱颗粒途径以及病毒蛋白与细胞因子及细胞因子受体的相互作用信号通路参与RSV毛细支气管炎宿主的免疫反应。CCL2、IL-10、MMP9和JUN基因可能与发病相关。在RIG-I样受体、细胞凋亡及内源性大麻素相关的信号通路中可能存在与疾病严重度相关的潜在生物学标志物。

关键词：呼吸道合胞病毒毛细支气管炎疾病严重程度 RNA测序

伴有D二聚体升高的ROHHAD综合征1例并文献复习

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中华实用儿科临床杂志 2024年第7期39卷 544-546页

作者：杨蒙洁黄群佳单小鸥温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院儿童内分泌遗传代谢科温州温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院病理科温州

报告1例伴有D二聚体升高的ROHHAD综合征患儿, 并复习文献, 总结ROHHAD综合征患儿的临床特点。患儿, 男, 9岁9个月, 于2020年7月在温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院就诊。患儿从3岁开始出现体重快速增长, 体温不稳定, 易腹泻, 伴... 详细信息

报告1例伴有D二聚体升高的ROHHAD综合征患儿, 并复习文献, 总结ROHHAD综合征患儿的临床特点。患儿, 男, 9岁9个月, 于2020年7月在温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院就诊。患儿从3岁开始出现体重快速增长, 体温不稳定, 易腹泻, 伴身材矮小、性腺发育不良;实验室检查提示高钠血症、血泌乳素及二氧化碳分压升高;肿瘤病理提示左肾上腺节细胞神经瘤;多导睡眠监测提示中枢性低通气伴阻塞性呼吸暂停, 最终确诊为ROHHAD综合征, 这也是国内首例ROHHADNET报道。此外, 患儿在肾上腺肿瘤切除术前D二聚体升高, 术后降至正常, 提示ROHHAD综合征患者有血栓风险, D二聚体可能具有预测ROHHADNET肿瘤进展的价值。

关键词： ROHHAD综合征 D二聚体高凝状态神经节细胞瘤

枕颈融合术后吞咽困难评估及预测方法的研究进展

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中华骨科杂志 2024年第1期44卷 53-57页

作者：倪励斌陆逊夏威夷王向阳温州医科大学附属第二医院(育英儿童医院)骨科温州325000

枕颈融合术(occipitocervical fusion,OCF)用于治疗因各种原因(创伤、类风湿关节炎、感染、肿瘤、先天畸形和退化等)导致的颅颈交界不稳定。通过OCF可获得满意的融合率并重建枕颈稳定性。吞咽困难为OCF术后常见的并发症,严重影响患者术... 详细信息

枕颈融合术(occipitocervical fusion,OCF)用于治疗因各种原因(创伤、类风湿关节炎、感染、肿瘤、先天畸形和退化等)导致的颅颈交界不稳定。通过OCF可获得满意的融合率并重建枕颈稳定性。吞咽困难为OCF术后常见的并发症,严重影响患者术后的生活质量。对吞咽困难的评估主要采用Bazaz吞咽困难评分、吞咽生存质量量表(swallowing quality of life,SWAL-QOL)及进食评估问卷调查表-10(eating assessment tool-10,EAT-10)评分,而临床主要通过颈椎曲度相关参数(O-C2角、O-EA角、Oc-Ax角、PI角)的变化预测吞咽困难的发生。目前,临床评估及预测吞咽困难的方法很多,但最佳评估方法尚不确定。本文对OCF术后吞咽困难的评估及预测方法进行综述,显示Bazaz吞咽困难评分、SWAL-QOL评分及EAT-10评分量表评估OCF术后吞咽困难具有良好的适用性,而在OCF术中通过调整使O-C2角>-5°、O-EA角>100°、Oc-Ax角>65°、术后PI角较术前PI角增加(即dPI角)≥0°,可在一定程度上减少吞咽困难发生的概率。

关键词：寰枕关节脊柱融合术吞咽障碍

午餐和晚餐前宏量营养素干预对健康人血糖波动的影响

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营养学报 2024年

作者：潘优津余陈欣李轶灵刘宇鹏王舒然温州医科大学附属第二医院育英儿童医院温州医科大学

目的评估不同宏量营养素（蛋白质、脂肪和碳水化合物）干预对健康人血糖波动的影响，为糖尿病的预防和管理提供科学依据。方法本研究采用了单中心、开放标签、自身对照试验设计，共招募了9名健康成年志愿者，年龄为（24.44±1.67）岁。... 详细信息

目的评估不同宏量营养素（蛋白质、脂肪和碳水化合物）干预对健康人血糖波动的影响，为糖尿病的预防和管理提供科学依据。方法本研究采用了单中心、开放标签、自身对照试验设计，共招募了9名健康成年志愿者，年龄为（24.44±1.67）岁。试验采用了葡萄糖溶液、脂肪溶液、蛋白质溶液三种等能量（80kcal）干预溶液（250mL），并设等体积的水为对照，受试者在午餐和晚餐前20～25min摄入干预溶液，用动态血糖监测仪实时监测血糖波动。试验期为15d，包括引入期、各干预期和对照饮水期。观察指标包括血糖波动幅度、血糖曲线增量面积、血糖峰值时间、血糖目标范围内时间等。数据分析采用描述性统计分析以及配对t检验、独立样本t检验、Wilcoxonsign-rank检验和Kruskal-WallisH检验。结果与水对照组相比，蛋白组、脂肪组和碳水化合物组三个干预组合并（n=27）营养干预效果为：晚餐后4h血糖曲线增量面积显著降低（P=0.025），晚餐后到达血糖峰值时间显著增加（P=0.017），同时葡萄糖目标范围内时间（TIR）显著增加（P=0.001）。各组与干预前相比，蛋白组晚餐后到达血糖峰值时间显著延长（P=0.012），2h连续净交叠升糖指数（CONGA2）显著降低（P=0.035）；脂肪组TIR显著改善（P=0.010），但血糖曲线下面积（AUC）和平均血糖（MEAN）显著增加；碳水化合物组午餐后和晚餐后4h血糖曲线增量面积显著降低（P<0.001），TIR和CONGA2显著改善（P<0.05）。结论餐前营养素干预有效改善了健康人血糖波动，餐前蛋白质干预在改善血糖波动方面表现优于脂肪和碳水化合物，为糖尿病膳食预防和管理提供科学依据。

关键词：餐前干预宏量营养素血糖波动动态血糖监测

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心肺运动试验在儿童呼吸系统疾病中的应用

中华儿科杂志 2024年第6期62卷 586-589页

作者：孙欣怡徐昌富李海燕张海邻温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院儿童呼吸科温州325027

心肺运动试验(CPET)是一种整体评估心肺功能的无创工具,对于呼吸系统疾病的诊断和预后判断有重要作用。CPET的主要测量指标包括二氧化碳通气当量、氧通气当量、最大摄氧量、无氧阈、静息代谢当量等,可用于包括儿童运动性呼吸困难、囊性... 详细信息

心肺运动试验(CPET)是一种整体评估心肺功能的无创工具,对于呼吸系统疾病的诊断和预后判断有重要作用。CPET的主要测量指标包括二氧化碳通气当量、氧通气当量、最大摄氧量、无氧阈、静息代谢当量等,可用于包括儿童运动性呼吸困难、囊性纤维化、闭塞性细支气管炎、支气管肺发育不良、肺动脉高压、间质性肺疾病等疾病患儿的心肺功能、运动能力及影响因素评估,并以此为基础制订个性化的干预措施。现主要介绍CPET在儿童呼吸系统疾病中的应用进展。

关键词：支气管肺发育不良心肺运动试验囊性纤维化间质性肺疾病疾病患儿闭塞性细支气管炎无氧阈呼吸系统疾病

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哺乳类卵泡膜细胞及其干细胞的研究进展

中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 594-601页

作者：温馨方航萍刘溢佳陈浩林温州医科大学第二临床医学院妇产科温州325035 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童泌尿外科温州325000

卵泡膜细胞不仅为卵泡的完整性提供支持,还在卵泡发育、闭锁及优势卵泡选择和排卵中发挥至关重要的作用。尽管卵泡膜细胞在女性生殖过程中起到重要作用,但目前针对该类细胞发育、起源及其干细胞的相关研究非常稀少。卵泡膜干细胞的研究... 详细信息

卵泡膜细胞不仅为卵泡的完整性提供支持,还在卵泡发育、闭锁及优势卵泡选择和排卵中发挥至关重要的作用。尽管卵泡膜细胞在女性生殖过程中起到重要作用,但目前针对该类细胞发育、起源及其干细胞的相关研究非常稀少。卵泡膜干细胞的研究不仅能让我们深入了解卵泡膜细胞的募集、生长和分化过程,也能使我们尝试通过卵泡膜干细胞制备高活性的卵泡膜细胞,这对人类卵巢疾病的诊断、预防和治疗以及再生医学都具有重要的临床意义。本文就卵泡膜细胞功能、来源以及卵泡膜干细胞研究进展作一综述,同时也简单介绍单细胞测序技术在卵巢干细胞研究领域中的应用,为进一步探索卵巢卵泡发育机制、病理改变和疾病治疗等方面提供参考。

关键词：卵泡发育卵泡膜干细胞再生医学单细胞测序技术

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橙皮苷促进小鼠急性皮肤创面愈合的作用研究

中国临床药理学杂志 2024年第14期40卷 2093-2097页

作者：黄乙明陈飞飞张蓉蓉朱光辉温州医科大学附属第二医院育英儿童医院药学部浙江温州325000 温州医科大学附属台州妇女儿童医院药剂科浙江台州318000

目的研究橙皮苷对人角质形成细胞(HaCaT)和人皮肤成纤维细胞(HSF)迁移能力的影响,初步探索橙皮苷促进小鼠急性皮肤创面愈合的作用及相关机制。方法将HaCaT和HSF分为空白组(不做任何处理)、对照组(加入0.1%二甲基亚砜)和实验组(加入5.0μ... 详细信息

目的研究橙皮苷对人角质形成细胞(HaCaT)和人皮肤成纤维细胞(HSF)迁移能力的影响,初步探索橙皮苷促进小鼠急性皮肤创面愈合的作用及相关机制。方法将HaCaT和HSF分为空白组(不做任何处理)、对照组(加入0.1%二甲基亚砜)和实验组(加入5.0μg·mL^(-1)的橙皮苷),培养48 h。用细胞划痕实验检测细胞体外愈合能力,用Transwell迁移实验检测细胞迁移情况。将C57小鼠随机分为模型组和低、高剂量实验组,用手术剪剪下小鼠背部全层皮肤建立急性皮肤全层缺损创面模型。模型组给予0.5%二甲基亚砜,低、高剂量实验组分别给予10、50 mg·kg^(-1)橙皮苷溶液。用蛋白质印迹法检测β-连环蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)、角蛋白14、Ⅰ型胶原蛋白的表达情况。结果HaCaT-空白组、HaCaT-对照组和HaCaT-实验组的划痕愈合率分别为(21.05±1.10)%、(22.33±1.72)%、(41.61±2.90)%,细胞迁移数分别为(57.00±11.36)、(60.38±10.11)、(287.75±20.21)个;HSF-空白组、HSF-对照组和HSF-实验组的划痕愈合率分别为(17.82±1.62)%、(19.81±3.87)%、(64.22±1.94)%,细胞迁移数分别为(43.25±7.98)、(40.75±6.70)、(140.88±14.35)个。HaCaT-实验组的上述指标与HaCaT-空白组、HaCaT-对照组比较,HSF-实验组的上述指标与HSF-空白组、HSF-对照组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组和低、高剂量实验组β-连环蛋白表达水平分别为0.53±0.06、0.74±0.17和1.44±0.11,角蛋白14相对表达水平分别为0.33±0.06、0.54±0.07和1.26±0.16,PCNA相对表达水平分别为0.46±0.05、0.72±0.09和1.14±0.11,Ⅰ型胶原蛋白相对表达水平分别为0.52±0.03、0.77±0.05和1.28±0.13。低、高剂量实验组的上述指标与模型组相比,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论橙皮苷可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,增加HaCaT和HSF的迁移,促进小鼠急性皮肤创面愈合。

关键词：橙皮苷创面愈合 Wnt/β-catenin 人角质形成细胞人皮肤成纤维细胞

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双肺弥漫性病变伴空洞

中华结核和呼吸杂志 2024年第8期47卷 788-790页

作者：张美美林慧全多多黄晖高美玲戴威戴元荣温州医科大学附属第二医院(育英儿童医院)呼吸内科温州325000 温州医科大学附属第二医院(育英儿童医院)病理科温州325000 温州医科大学附属第二医院(育英儿童医院)神经康复科温州325000

胰腺癌肺转移患者的胸部CT表现多样,不具有特异性。已有一些文献报道胰腺癌肺转移患者的胸部CT可表现为孤立性肺结节、间质性病变、多发类圆形病变等,目前国内外极少报道胸部CT表现为双肺弥漫性病变伴空洞。本文报道1例以双肺弥漫性病... 详细信息

胰腺癌肺转移患者的胸部CT表现多样,不具有特异性。已有一些文献报道胰腺癌肺转移患者的胸部CT可表现为孤立性肺结节、间质性病变、多发类圆形病变等,目前国内外极少报道胸部CT表现为双肺弥漫性病变伴空洞。本文报道1例以双肺弥漫性病变伴空洞为首发表现的胰源性黏液腺癌肺转移,其临床表现不典型,易被误诊为肺部感染,最终通过肺穿刺活检确诊。

关键词：肺穿刺活检胰源性黏液腺癌胸部CT 肺转移孤立性肺结节首发表现胰腺癌