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吉非替尼对哮喘C57BL/6小鼠气道炎症和气道重塑的影响及作用机制

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中华医学杂志 2024年第20期104卷 1860-1867页

作者：吴立琴郑锐李飞静王美艳鲁春方乐彤张亚利戴元荣温州医科大学附属第二医院(育英儿童医院)呼吸与危重症医学科温州浙江省台州市第一人民医院呼吸与危重症医学科台州浙江省萧山区第一人民医院呼吸与危重症医学科杭州温州医科大学药学院化学生物学研究中心温州

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂吉非替尼对哮喘C57BL/6小鼠气道炎症和气道重塑的作用, 并分析其作用机制。方法用随机数字法将雄性6～8周龄C57BL/6小鼠分为A组(对照组)、B组(哮喘组)、C组(哮喘+20 mg/kg吉非替尼组)、D组(哮喘+40... 详细信息

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂吉非替尼对哮喘C57BL/6小鼠气道炎症和气道重塑的作用, 并分析其作用机制。方法用随机数字法将雄性6～8周龄C57BL/6小鼠分为A组(对照组)、B组(哮喘组)、C组(哮喘+20 mg/kg吉非替尼组)、D组(哮喘+40 mg/kg吉非替尼组)和E组(40 mg/kg吉非替尼组), 每组7只。分别于第0、14天腹腔内注射卵清蛋白(OVA)及Al(OH)3[20 μg OVA+2 mg Al(OH)3溶于0.2 ml生理盐水]混合液0.2 ml致敏;B、C、D组分别于第25至31天开始雾化吸入1% OVA溶液8 ml激发哮喘, 1次/d, 每次约40 min, 连续雾化7 d。C、D组每次雾化激发前半小时灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMCNa)溶解的吉非替尼0.2 ml, E组仅同时给予0.5% CMCNa溶解的吉非替尼0.2 ml。A组和B组灌胃给予等量的0.5% CMCNa。末次激发24 h后, 收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)进行总细胞计数及嗜酸性粒细胞计数, ELISA检测各组小鼠血清总IgE、BALF及肺组织匀浆中白细胞介素(IL)-4、IL-5和IL-13水平;检测肺组织中IL-4、IL-5和IL-13的mRNA表达水平;免疫组化、Western印迹实验检测肺组织中EGFR等指标的表达水平。结果 B组小鼠血清总IgE水平, BALF中总细胞计数、嗜酸性粒细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平, 肺组织中EGFR的磷酸化及下游激活水平均高于A组(均P0.05)。结论吉非替尼可能通过抑制EGFR磷酸化, 影响下游Erk和Akt的活化, 进而缓解哮喘小鼠气道炎症和气道重塑。

关键词：哮喘吉非替尼气道炎症气道重塑小鼠

内质网相关降解系统通过Ca调控肝细胞线粒体能量代谢活性

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中国生物化学与分子生物学报 2024年

作者：蒋贝尔张峰白永凤吴麒胡亚兵温州医科大学附属衢州医院呼吸与危重症医学科温州医科大学附属衢州医院精准医学中心徐州医科大学基础医学院生理学教研室

肝细胞含有丰富的内质网和线粒体，两者以相互作用的方式调控肝细胞生命活动，但相互作用的机制尚未完全阐明。内质网中存在一套高度保守的蛋白质质量控制系统，即内质网相关降解（endoplasmic reticulum associated degradation， ERA... 详细信息

肝细胞含有丰富的内质网和线粒体，两者以相互作用的方式调控肝细胞生命活动，但相互作用的机制尚未完全阐明。内质网中存在一套高度保守的蛋白质质量控制系统，即内质网相关降解（endoplasmic reticulum associated degradation， ERAD）。最新研究发现，ERAD可通过线粒体相关膜性结构（mitochondria associated membranes， MAMs）调控脂肪细胞线粒体功能，但在肝细胞中，关于ERAD与线粒体之间的相互作用及机制目前仍不明确。本研究选用HepG2作为细胞模型，通过化学药物诱导和基因敲除2种方法构建ERAD功能障碍肝细胞模型。采用荧光标记、流式分析和免疫印迹等技术手段，探究ERAD在肝细胞线粒体中的作用。结果发现，ERAD功能障碍会降低HepG2肝细胞线粒体膜电位和ATP水平（P＜0.01）；而且，ERAD功能障碍还会破坏HepG2细胞内质网与线粒体Ca2+稳态，当减少内质网Ca2+释放时，可改善线粒体能量代谢功能（P＜0.05）。这些发现在ERAD功能障碍小鼠原代肝细胞中得到进一步验证。上述结果表明，ERAD在肝细胞内质网与线粒体相互作用中具有重要的调控作用，增强ERAD功能可能提升肝细胞线粒体活性，为线粒体功能障碍相关疾病提供新的研究思路。

关键词：肝细胞细胞器相互作用内质网相关降解线粒体功能钙离子

神经源性和白三烯依赖性炎症在上下气道过敏性疾病中的作用研究

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浙江医学 2024年第16期46卷 1711-1718,I0003,I0004页

作者：涂志坚徐淑瑶金萧俞炜王诗佳蔡畅温州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科 325000

目的探讨神经源性和白三烯依赖性炎症在上下气道过敏性疾病中的作用。方法选择雌性BALB/c小鼠39只,采用随机数字表法将小鼠分为单纯上气道变应性疾病(SU)小鼠、单纯下气道变应性疾病(SL)小鼠、联合上下气道变应性疾病(CUL)小鼠各12只和... 详细信息

目的探讨神经源性和白三烯依赖性炎症在上下气道过敏性疾病中的作用。方法选择雌性BALB/c小鼠39只,采用随机数字表法将小鼠分为单纯上气道变应性疾病(SU)小鼠、单纯下气道变应性疾病(SL)小鼠、联合上下气道变应性疾病(CUL)小鼠各12只和对照组小鼠3只。将SU、SL和CUL小鼠再分为模型组、神经肽P物质受体拮抗剂干预(NI)组、白三烯受体拮抗剂干预(LI)组和神经肽P物质受体拮抗剂与白三烯受体拮抗剂混合干预(NLI组),每组3只,合计12组,均给予腹腔注射致敏液400μL,并分别予以鼻腔、气管及鼻腔与气管联合滴入激发液建立相应动物模型。9个药物干预组再分别予神经肽P物质受体拮抗剂、孟鲁司特钠及受体拮抗剂与孟鲁司特钠联合行药物干预。分组后第33天对13组小鼠灌注获得鼻腔灌洗液(NLF)和肺泡灌洗液(BALF),随后过量麻醉处死并取出鼻黏膜和肺组织。采用HE染色观察小鼠鼻黏膜和肺组织嗜酸性粒细胞浸润情况,免疫组化检测小鼠鼻黏膜和肺组织中半胱氨酸白三烯受体1(CysLTR1)和神经肽P物质受体(NPR)的表达水平。采用ELISA法评估NLF和BALF中半胱氨酸白三烯(CysLTs)、神经营养因子和神经递质的水平。结果与对照组比较,SU-模型组、CUL-模型组在鼻黏膜和肺组织均可见嗜酸性粒细胞明显浸润,而SL-模型组在肺组织中可见嗜酸性粒细胞浸润,NPR和CysLTR1在3个模型组的鼻黏膜和肺组织中表达水平高于对照组。在NLF中,SU-模型组、CUL-模型组CysLTs、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经激肽A(NKA)、神经激肽B(NKB)和神经肽P物质(NP)水平高于对照组,SU-NI组、SU-LI组、SU-NLI组CysLTs、BDNF、NGF、CGRP、NKA和NP水平低于SU-模型组,SU-NLI组CGRP、NP水平低于SU-NI组、SU-LI组,SL-模型组小鼠NP水平高于对照组,SL-NI组、SL-LI组和SL-NLI组NP水平低于SL-模型组,CUL-NI组、CUL-LI组和CUL-NLI组BDNF和NGF水平低于CUL-模型组,CUL-LI组和CUL-NLI组CGRP和NKA水平低于CUL-模型组,CUL-NLI组NKA水平低于CUL-LI组,CUL-NI组、CUL-LI组和CUL-NLI组NKB低于CUL-模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在BALF中,SL-模型组、CUL-模型组CysLTs水平高于对照组,SL-模型组NGF、CGRP、NKA、NP水平高于对照组,CUL-模型组CGRP水平高于对照组,SL-NI组、SL-LI组和SL-NLI组CysLTs、NGF、CGRP、NKA和NP水平均低于SL-模型组,SL-NLI组CysLTs水平低于SL-NI组和SL-LI组,CUL-NI组、CUL-LI组和CUL-NLI组的CGRP水平低于CUL-模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在过敏性疾病中,上气道炎症可以通过神经源性炎症和白三烯依赖性炎症引起下气道炎症,而下气道炎症几乎不能影响上气道。NP受体或白三烯受体的拮抗作用有助于缓解气道炎症性疾病。

关键词：哮喘过敏性鼻炎半胱氨酸白三烯神经源性炎症

汉黄芩素通过调控miR-451/PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路改善低氧诱导的肺动脉高压

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温州医科大学学报 2024年第3期54卷 173-183页

作者：吴佩亮王良兴黄晓颖温州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科浙江温州325015

目的:评价汉黄芩素对低氧诱导的肺动脉高压(HPH)的保护作用及其相关分子机制。方法:在体内采用成年雄性野生型C57BL/6小鼠建立HPH模型,将小鼠随机分为3组:对照组(N)、低氧(H+Saline)组、低氧+汉黄芩素(H+w)组。造模3周后,使用压力传感... 详细信息

目的:评价汉黄芩素对低氧诱导的肺动脉高压(HPH)的保护作用及其相关分子机制。方法:在体内采用成年雄性野生型C57BL/6小鼠建立HPH模型,将小鼠随机分为3组:对照组(N)、低氧(H+Saline)组、低氧+汉黄芩素(H+w)组。造模3周后,使用压力传感器系统采集小鼠血流动力学指标;肺小动脉管壁直径/管总直径(WT/TT)、肺小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)来评估肺动脉结构重塑;基于网络药理学方法筛选汉黄芩素作用于HPH潜在靶点及分子信号通路。在体外采用小鼠肺动脉平滑肌细胞(MPASMCs),将细胞分为5组:常氧(N)组、低氧(H+PBS)组、低氧+低剂量汉黄芩素(H+40μmol/L w)组、低氧+高剂量汉黄芩素(H+80μmol/L w)组、低氧+高剂量汉黄芩素+740Y-P(H+80μmol/L w+740Y-P)组。N组在常氧(5%CO_(2),21%O_(2),74%N2,37℃)环境中培养48 h,H+PBS、H+40μmol/L w、H+80μmol/L w、H+80μmol/L w+740Y-P组在低氧(5%CO_(2),3%O_(2),92%N2,37℃)环境中培养48 h。通过CCK-8、Ed U法检测评估细胞增殖能力,Transwell和伤口愈合/划痕实验用于检测评估细胞迁移能力,Western blot检测PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路的主要蛋白(P-PI3K、PI3K、P-AKT、AKT、RXRA、Bcl-2)的表达,并利用PI3K通路激活剂740Y-P进行功能回补实验;RT-q PCR检测汉黄芩素对miR-451表达水平的影响,Western blot检测汉黄芩素对PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2通路上游调控因子CAB39和MIF表达的影响。结果:与对照组相比,低氧组MPASMCs的增殖、迁移能力以及小鼠右心室压力(RVSP)显著增加(P<0.05),肺动脉结构发生显著重构,经汉黄芩素干预后MPASMCs的增殖、迁移能力以及小鼠RVSP显著下降(P<0.05),肺动脉结构重塑得到显著改善。与对照组相比,低氧组中PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT、RXRA、Bcl-2表达显著升高;与低氧组相比,汉黄芩素干预组中PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路相关的蛋白表达水平显著下调(P<0.05);功能回补实验证实在缺氧条件下,激活PI3K通路能够显著削弱汉黄芩素对MPASMCs增殖抑制效应。与对照组相比,低氧组中CAB39和MIF表达水平显著上升,miR-451表达水平显著减少(P<0.05);与低氧组相比,汉黄芩素干预组中CAB39和MIF表达水平显著下降,miR-451表达水平显著上升(P<0.05);miR-451 inhibitor干预能够部分逆转汉黄芩素对MPASMCs增殖和迁移能力的抑制效应(P<0.05)。结论:汉黄芩素可能通过上调mi R-451的表达靶向调控CAB39和MIF进而抑制PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路,抑制低氧诱导的MPASMCs的增殖和迁移、改善HPH小鼠右心室压力和肺动脉结构重塑,最终缓解肺动脉高压。

关键词：汉黄芩素 PI3K/AKT/RXRA/BCL2通路 miR-451 肺动脉高压

以反晕征为主要CT表现的肺栓塞临床及影像特点分析

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温州医科大学学报 2024年第2期54卷 146-150,155页

作者：黄盛晶周昌盛张霖卢璐张小宇温州医科大学附属苍南医院呼吸与危重症医学科浙江温州325800 温州医科大学附属苍南医院放射科浙江温州325800

目的:分析以反晕征(RHS)为主要影像学表现的肺栓塞(PE)患者的临床及影像学特点,提高对这一影像征象的认识。方法:收集2016年1月至2023年4月温州医科大学附属苍南医院经CT肺动脉造影(CTPA)检查确诊的以RHS为主要CT表现的PE住院患者15例,... 详细信息

目的:分析以反晕征(RHS)为主要影像学表现的肺栓塞(PE)患者的临床及影像学特点,提高对这一影像征象的认识。方法:收集2016年1月至2023年4月温州医科大学附属苍南医院经CT肺动脉造影(CTPA)检查确诊的以RHS为主要CT表现的PE住院患者15例,对其临床资料和影像学特点进行回顾性分析和总结。结果:15例以RHS为主要CT表现的PE患者,临床症状主要表现为胸痛和呼吸困难,但仍有半数以上患者合并发热、咳嗽咳痰等症状,且出现白细胞、CRP升高,故有11例患者被误诊为肺炎并给予抗感染治疗。影像分析结果显示,15例患者共有16个RHS病灶,其中14例患者为单发病灶,1例患者可见2个RHS病灶。所有RHS病灶均位于下肺胸膜下,右下肺10个,左下肺6个;RHS病灶形态多为椭圆形(12/16),还可见楔形(2/16)及驼峰样改变(2/16),病灶长轴平行于胸膜;RHS中心为低密度的磨玻璃阴影,周围绕以边界尚光整的实性环,同时11例患者合并少量胸腔积液。经规范化抗凝治疗3个月以上,肺部RHS病灶均有吸收好转,部分残留少许纤维条索影,胸腔积液减少消失。结论:PE患者的RHS病灶多位于胸膜下,下肺多见,单发为主,病灶形态多为椭圆形,长轴平行于胸膜,同时常合并有少量胸腔积液。以RHS为主要CT表现的PE患者易被误诊为肺炎,对于具有上述影像特征的患者需警惕PE的可能。

关键词：肺栓塞反晕征肺梗死体层摄影术,X线计算机

小青龙汤联合布地奈德治疗支气管肺炎风寒袭肺证临床研究

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新中医 2024年第5期56卷 5-10页

作者：温霞朱明力温州医科大学附属平阳医院呼吸与危重症医学科浙江温州325400 温州医科大学附属平阳医院中医科浙江温州325400

目的:观察小青龙汤联合布地奈德治疗支气管肺炎风寒袭肺证的临床疗效。方法:选择支气管肺炎患者92例,按随机数字表法分为观察组和对照组各46例。对照组采用布地奈德治疗,观察组在对照组基础上联合小青龙汤治疗,2组均治疗4周。评价2组临... 详细信息

目的:观察小青龙汤联合布地奈德治疗支气管肺炎风寒袭肺证的临床疗效。方法:选择支气管肺炎患者92例,按随机数字表法分为观察组和对照组各46例。对照组采用布地奈德治疗,观察组在对照组基础上联合小青龙汤治疗,2组均治疗4周。评价2组临床疗效,比较2组治疗前后中医证候积分、肺功能指标、血清炎症因子水平、免疫功能指标变化,统计2组治疗期间的不良反应。结果:观察组总有效率为95.56%,高于对照组80.43%(P0.05)。结论:小青龙汤联合布地奈德治疗支气管肺炎风寒袭肺证可促进症状缓解,改善患者肺功能及免疫功能,抑制血清炎症因子表达,安全可靠。

关键词：支气管肺炎风寒袭肺证小青龙汤肺功能中医证候免疫功能炎症因子不良反应

ICU护士呼吸机相关性肺炎预防措施知信行及影响因素调查

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中华全科医学 2024年第5期22卷 863-866页

作者：黄其东郑雷雷张其霞卫庆陈瑜温州医科大学附属第一医院330病区重症医学科浙江温州325000 温州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科温州医科大学附属第一医院护理部

目的了解浙江省某三级甲等医学重症监护病房护士呼吸机相关性肺炎的知识、态度、行为现状及其影响因素,为提高重症监护病房护士对呼吸机相关性肺炎的护理技能提升提供理论依据。方法于2023年5月,采用自制调查问卷整群抽取浙江省某三级... 详细信息

目的了解浙江省某三级甲等医学重症监护病房护士呼吸机相关性肺炎的知识、态度、行为现状及其影响因素,为提高重症监护病房护士对呼吸机相关性肺炎的护理技能提升提供理论依据。方法于2023年5月,采用自制调查问卷整群抽取浙江省某三级甲等医院重症监护病房全部护士148名进行调查。结果浙江省某三级甲等医院ICU护士VAP知识在知识维度得分为(16.16±1.82)分,在态度维度得分为(100.01±13.86)分,在行为维度得分为(31.33±4.28)分。多元线性回归分析结果显示,在知识维度方面,管理岗相较于责任岗与知识得分呈正相关关系(P医院重症监护病房护士呼吸机相关性肺炎的知识处于较高水平,但态度和行为水平仍有待提升。建议增加呼吸机相关性肺炎预防措施相关知识的教育工作。

关键词：呼吸机相关性肺炎 ICU护士认知行为

基于健康行为改变整合理论的健康教育对慢性心力衰竭患者心功能、运动耐力及护理满意度的影响

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中华健康管理学杂志 2024年第6期18卷 451-456页

作者：徐利萍张小芳徐慧霞罗建温州医科大学附属衢州医院(衢州市人民医院)护理部衢州324003 温州医科大学附属衢州医院(衢州市人民医院)心血管内科衢州324003 温州医科大学附属衢州医院(衢州市人民医院)重症医学科衢州324003

目的分析基于健康行为改变整合理论的健康教育对慢性心力衰竭患者心功能、运动耐力及护理满意度的影响。方法本研究为随机对照试验,选取2020年6月至2022年12月温州医科大学附属衢州医院收治的130例慢性心力衰竭患者为研究对象,根据随机... 详细信息

目的分析基于健康行为改变整合理论的健康教育对慢性心力衰竭患者心功能、运动耐力及护理满意度的影响。方法本研究为随机对照试验,选取2020年6月至2022年12月温州医科大学附属衢州医院收治的130例慢性心力衰竭患者为研究对象,根据随机数字表法分为对照组和试验组(各65例)。对照组给予常规护理,试验组在对照组基础上应用基于健康行为改变整合理论的健康教育,主要包括健康评估、健康宣教、行为干预、心理支持等,两组患者干预时间均为4周。采用独立样本t检验、χ^(2)检验及Mann-Whitney U检验比较两组患者干预前后心功能改善效果、血浆脑钠肽(BNP)、心脏超声指标[左心射血分数(LVEF)、左心室体积指数(LVMI)及左室舒张末期内径(LVEDD)]、运动耐力[最大摄氧量(VO2max)、最大功率、力竭时间]差异,并统计两组患者的护理满意度,分析基于健康行为改变整合理论的健康教育对慢性心力衰竭患者心功能、运动耐力及护理满意度的影响。结果干预前两组各项指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。干预后,试验组BNP、LVMI及LVEDD水平均显著低于对照组[(572.87±89.72)比(680.46±104.32)mg/L、(140.74±9.54)比(151.91±11.52)g/m2、(77.62±4.32)比(80.31±5.57)mm],且显著低于干预前[(963.41±228.69)mg/L、(170.33±12.61)g/m2、(90.10±6.77)mm],试验组LVEF、VO2max、最大功率、力竭时间及护理满意度均显著高于对照组[54.55%±3.80%比52.16%±4.18%、(16.77±2.82)比(15.61±3.15)ml·kg-1·ml-1、(88.91±7.13)比(85.72±8.24)W、(13.47±1.62)比(12.00±1.56)min、95.4%比84.6%],且显著高于干预前[50.11%±4.22%、(14.03±3.26)ml·kg-1·ml-1、(81.42±6.46)W、(10.02±0.82)min](均P<0.05)。结论基于健康行为改变整合理论的健康教育有利于改善慢性心力衰竭患者的心功能及运动耐力,提升护理满意度。

关键词：慢性心力衰竭健康行为改变整合理论健康教育心功能运动耐力

血清淀粉样蛋白A在病毒性肺炎的严重程度及预后中的应用价值

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温州医科大学学报 2024年第3期54卷 199-204页

作者：熊雪芳钟莹孙德彬温州医科大学附属第五医院(丽水市中心医院)呼吸与危重症医学科浙江丽水323300

目的:探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)在病毒性肺炎的严重程度分级及重症组患者预后评估中的临床应用价值。方法:选取2022年12至2023年6月丽水市中心医院收治的250例病毒性肺炎住院患者,将患者分为非重症和重症两组,比较两组之间SAA、CRP、降... 详细信息

目的:探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)在病毒性肺炎的严重程度分级及重症组患者预后评估中的临床应用价值。方法:选取2022年12至2023年6月丽水市中心医院收治的250例病毒性肺炎住院患者,将患者分为非重症和重症两组,比较两组之间SAA、CRP、降钙素原(PCT)水平,以及白细胞总数、中性粒细胞比例的差异,利用ROC曲线评估各项指标在识别重症患者中的价值。根据生存结局将重症患者分为生存组与非生存组,比较两组之间五项指标水平的差异,利用ROC曲线评估有差异的指标在重症患者中的预后价值。结果:重症组患者SAA、CRP、PCT水平,以及白细胞总数、中性粒细胞比例均显著高于非重症组,差异有统计学意义(P重症病毒性肺炎患者的识别效能最优。多因素Logistic回归分析显示,年龄≥88.5岁、SAA≥226.05 mg/L、中心粒细胞比例≥88.75%是重症病毒性肺炎发生的危险因素。非生存组患者SAA、PCT水平显著高于生存组,差异有统计学意义(P重症与重症的效能较CRP、PCT、白细胞总数、中性粒细胞比例更优,可作为一种辅助评估病毒性肺炎严重程度的敏感指标,在评估重症患者的预后中也有一定的应用价值。

关键词：血清淀粉样蛋白A 病毒性肺炎 C-反应蛋白降钙素原