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基于UHPLC Q-Exactive Plus Orbitrap HRMS高分辨质谱技术的隔山消提取物化学成分分析

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中国新药杂志 2024年第5期33卷 489-498页

作者：勾健吴宗芹孟欣韦晓毅刘春花朱迪秦兰孙佳贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550001 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550001 贵州医科大学药学院贵阳550001 红云制药(贵州)有限公司凯里556000 贵州中医药大学第一附属医院贵阳550001

目的:采用UHPLC Q-Exactive Plus Orbitrap高分辨质谱(HRMS)技术建立全面、快速分析隔山消化学成分的方法,为隔山消的药效物质研究提供科学依据。方法:采用Hypersi 1 GOLD色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸... 详细信息

目的:采用UHPLC Q-Exactive Plus Orbitrap高分辨质谱(HRMS)技术建立全面、快速分析隔山消化学成分的方法,为隔山消的药效物质研究提供科学依据。方法:采用Hypersi 1 GOLD色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃。在电喷雾离子源正、负离子模式下采集数据,扫描范围m/z 100~1500 Da;喷雾电压3.5 kV(+),2.5 kV(-);鞘气流速35 arb;辅助气流速10 arb;毛细管温度320℃;辅助加热器温度350℃。依据HRMS提供的准分子离子峰及碎片离子的精确分子质量信息,结合对照品比对,相关文献报道及m/z Cloud和PUBchem数据库比对二级质谱进行鉴定。结果:从隔山消提取物中共分析出66个化合物,包括C21甾体类34个,有机酸类13个,苯乙酮类5个,香豆素类4个,生物碱类4个和其他类6个化合物,其中18个化合物为首次在隔山消中报道。结论:该方法可对隔山消化学成分进行快速、准确、全面的定性分析,为今后进一步阐明其药效物质基础和质量控制提供科学依据。

关键词： UHPLC Q-Exactive Plus Orbitrap HRMS 隔山消化学成分裂解规律

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基于物联网技术的远程裂隙灯诊断平台设计

中国医疗器械杂志 2024年第2期48卷 232-236页

作者：阙天行白思思李京儒蔡双双连霜叶志朋陈浩姜培培温州医科大学眼视光学院(生物医学工程学院) 温州市325035 温州医科大学附属眼视光医院温州市325027

为实现跨区域患者的裂隙灯诊断,提高诊断的实时性和便利性,基于物联网技术设计了远程裂隙灯诊断平台。首先分析了远程裂隙灯的可行性,其次提出了医师/服务器/设备(doctor/server/facility,D/S/F)的物联网平台架构,设计了远程裂隙灯,最... 详细信息

为实现跨区域患者的裂隙灯诊断,提高诊断的实时性和便利性,基于物联网技术设计了远程裂隙灯诊断平台。首先分析了远程裂隙灯的可行性,其次提出了医师/服务器/设备(doctor/server/facility,D/S/F)的物联网平台架构,设计了远程裂隙灯,最后测试了远程裂隙灯诊断平台的性能。该平台解决了分布式裂隙灯的通信问题,实现了多眼科专家对多区域裂隙灯的分别数控。测试结果表明,该平台远程控制延时低于20 ms,支持多位专家分别诊断多位患者。

关键词：物联网远程裂隙灯诊断平台 D/S/F架构

腐植酸负载纳米零价铁对镉污染农田水稻籽粒代谢的影响

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农业环境科学学报 2024年第4期43卷 732-740页

作者：黄鹏张静王鸿辉井江心曾燕琼陈铮刘洋之温州医科大学公共卫生与管理学院浙江温州325035 浙江省农业科学院环境资源与土壤肥料研究所农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室杭州310021 厦门大学嘉庚学院环境与工程学院福建漳州363105 浙江农林大学环境与资源学院杭州311300

为探究腐植酸负载纳米零价铁(nZVI@HA)对镉(Cd)污染修复过程中水稻籽粒营养物质合成过程的影响,本研究采用吸附络合-液相还原法制备了一种nZVI@HA材料,同时开展水稻盆栽实验,利用电感耦合等离子体质谱及超高效液相色谱质谱技术,比较研究... 详细信息

为探究腐植酸负载纳米零价铁(nZVI@HA)对镉(Cd)污染修复过程中水稻籽粒营养物质合成过程的影响,本研究采用吸附络合-液相还原法制备了一种nZVI@HA材料,同时开展水稻盆栽实验,利用电感耦合等离子体质谱及超高效液相色谱质谱技术,比较研究了nZVI@HA、纳米零价铁(nZVI)、腐植酸(HA)及nZVI与HA联合处理对Cd污染修复过程中水稻产量、籽粒中Cd含量及籽粒代谢物质组成的影响。结果表明:3组含Fe^(0)处理均可提升水稻产量、降低水稻籽粒Cd的赋存水平。尤其是在nZVI@HA作用下,水稻产量显著提升至空白组的188%、籽粒Cd含量降至0.155 mg·kg^(-1),低于我国大米Cd限量标准(0.2 mg·kg^(-1),GB 2762—2022)。代谢组学分析显示,各含Fe^(0)处理均可显著促进水稻籽粒倍他林生物合成及精氨酸和脯氨酸代谢(P1);同时Cd污染修复过程中,水稻籽粒还可通过丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,核苷酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,及甘油磷脂代谢特异性响应nZVI@HA处理。研究表明,nZVI@HA可特异性作用于水稻籽粒代谢过程,提升水稻抗性及产量。

关键词：镉腐植酸负载纳米零价铁水稻代谢组学差异代谢物

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功能化生物活性玻璃支架促眶骨再生

温州医科大学学报 2024年第9期54卷 689-700页

作者：刘治蓉任晓斌姚清清吴文灿温州医科大学眼视光学院(生物医学工程学院) 浙江温州325035 温州医科大学附属眼视光医院浙江温州325027

目的:通过金属离子掺杂增强生物活性玻璃(BG)支架诱导干细胞成骨分化功能,并在支架表面负载缺氧诱导处理的脂肪间充质干细胞外泌体(h Exo)以增强支架的新生血管、抗炎性能,最终实现眶骨缺损修复。方法:通过碱性磷酸酶(ALP)蛋白定量和PC... 详细信息

目的:通过金属离子掺杂增强生物活性玻璃(BG)支架诱导干细胞成骨分化功能,并在支架表面负载缺氧诱导处理的脂肪间充质干细胞外泌体(h Exo)以增强支架的新生血管、抗炎性能,最终实现眶骨缺损修复。方法:通过碱性磷酸酶(ALP)蛋白定量和PCR分析成骨相关基因表达实验比较骨形态发生蛋白-2(BMP2)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、hExo、Zn、Sr对兔脂肪间充质干细胞(rADSCs)成骨作用大小,找到最适成骨诱导剂并对其最佳作用浓度进行探索;将hExo负载于BG/Zn支架并对其新生血管、干细胞募集、抗炎功能进行体外探索。结果:本研究使用3D打印技术成功制备了Zn离子掺杂和hExo功能化的BG支架。体外实验结果发现Zn离子相对Sr离子可作为最适成骨掺杂剂,且将Zn离子掺杂到BG支架中的实验结果证明10 mmol/L掺杂量可显著促进ALP蛋白以及OPN、RUNX2、ALP、OCN和BMP2成骨相关基因表达(P实验,CT结果表明BG/Zn-hExo支架显著促进眶骨再生。结论:Zn离子与h Exo可作为一种安全有效的添加剂,使用它们对BG支架功能化后,可增强支架的成骨、成血管性能,实现骨组织工程移植材料的优化。

关键词：生物活性玻璃成骨分化缺氧诱导干细胞外泌体新生血管

1700 nm波段超快光纤光源开发及其在多光子成像中的应用

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激光与光电子学进展 2024年第12期61卷 1-18页

作者：仝申钟金成陈新林邱娉王科深圳大学物理与光电工程学院光电子器件与系统教育部/广东省光电子器件与系统重点实验室广东深圳518060 徐州医科大学医学信息与工程学院江苏徐州221004 中国科学院大学温州研究院浙江温州325001

多光子成像在生物医学特别是脑科学研究中应用广泛,为深层生物组织结构及动力学研究提供了非侵入性和非破坏性的成像手段。生物组织的吸收和强散射特性限制了成像深度。近年来,得益于原理及技术上的进步,多光子成像在活体生物中的成像... 详细信息

多光子成像在生物医学特别是脑科学研究中应用广泛,为深层生物组织结构及动力学研究提供了非侵入性和非破坏性的成像手段。生物组织的吸收和强散射特性限制了成像深度。近年来,得益于原理及技术上的进步,多光子成像在活体生物中的成像深度显著提高。其中,1700 nm波段激发的多光子成像显著降低组织吸收及散射,与其他激发波段相比获得了目前最大的成像深度。本文首先介绍多光子显微成像原理,并利用孤子自频移效应构建1700 nm波段飞秒脉冲光源。在此基础上,介绍1700 nm波段多光子成像在活体小鼠脑部、皮肤结构,以及血流动力学成像中的应用。最后总结分析1700 nm波段激发多光子成像目前遇到的挑战和未来发展方向。

关键词：多光子显微成像孤子自频移 1700 nm波段脑成像皮肤成像

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龟裂霉素新产生菌株的鉴定及其产量优化

微生物学通报 2024年第8期51卷 3133-3147页

作者：曹浩榄王立军冯颖赢马博洋范可强王立艳夏焕章潘国辉沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁本溪117004 中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室北京100101 中国科学院大学存济医学院北京100049 山东第一医科大学(山东省医学科学院)生物医学科学学院(省医药生物技术研究中心) 山东济南250117 中国矿业大学(北京)化学与环境工程学院北京100083

【背景】龟裂霉素(rimocidin)是一种具有广谱抗真菌活性的四烯大环内酯类化合物,对多种真菌性植物病害具有较强的防治作用,因此具有开发成农用抗生素药物的潜力。目前已经陆续发现几株链霉菌可以生产龟裂霉素,如龟裂链霉菌(Streptomyces... 详细信息

【背景】龟裂霉素(rimocidin)是一种具有广谱抗真菌活性的四烯大环内酯类化合物,对多种真菌性植物病害具有较强的防治作用,因此具有开发成农用抗生素药物的潜力。目前已经陆续发现几株链霉菌可以生产龟裂霉素,如龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus)M527,但是龟裂霉素的低产量仍限制其在农用抗生素方面的开发。【目的】系统揭示链霉菌基因组中龟裂霉素生物合成基因簇(rim基因簇)的分布及特征,发现新的龟裂霉素生产菌株,并基于基因工程等策略提高其产量。【方法】采用BLASTp在链霉菌基因组中搜索龟裂霉素已知生物合成酶的同源蛋白,进一步筛选出预测可合成龟裂霉素的基因簇及所在菌株。使用多位点序列分析方法(multi-locus sequence analysis,MLSA)评价含有龟裂霉素生物合成基因簇的菌株的进化关系。基于代谢产物分析鉴定新的龟裂霉素生产菌株,并通过筛选发酵培养基和过表达调控蛋白RimoR2来提高龟裂霉素的产量。【结果】共发掘获得36个新的含有龟裂霉素生物合成基因簇的链霉菌菌株。并通过培养基筛选、发酵及代谢产物分析等证实其中的白色链霉菌(Streptomyces albofaciens)JCM 4342能够合成龟裂霉素及其类似物CE-108。经过培养基优化的龟裂霉素产量为172.5 mg/L。此外,过表达调控蛋白RimoR2后龟裂霉素的产量较出发菌株提高了2.3倍,达到397.1 mg/L。【结论】本研究系统分析了链霉菌中龟裂霉素生物合成基因簇及其所在菌株的分布特点,并通过实验证实其中的*** JCM 4342能够合成龟裂霉素及其类似物CE-108。此外,通过基因工程方法实现了龟裂霉素产量的提高。本研究为构建更优的龟裂霉素高产菌株提供了新的元件、菌株和理论基础,将有助于推动龟裂霉素的进一步应用开发研究。

关键词：次级代谢产物龟裂霉素抗真菌链霉菌产量提高

河南省商城县2种动物发热伴血小板减少综合征病毒感染情况的调查研究

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中华疾病控制杂志 2024年第1期28卷 83-91页

作者：刘万双陈浩荣代科蒋宝贵陈津津田珅吴家红刘玮方立群贵州医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系贵阳550025 北京化工大学生命科学与技术学院制药工程学系北京100029 军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 广州医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系广州511436

目的通过开展发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)自然疫源地动物宿主感染新布尼亚病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)的调查研究,明确SFTS自然疫源地SFTSV的传播风险与影响因素,为SFTS的针对性防控提供科学依据。方法采用卫星定位技术连续跟踪商城县邱湾村、平塘村和龙头桥村3个村庄部分村民家养狗日常活动轨迹2周并采集血清样本,使用间接荧光抗体试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)法检测家养狗血清SFTSV⁃IgG抗体,使用logistic回归分析模型分析影响家养狗感染SFTSV的潜在环境影响因素;采用夹(笼)夜法和粘鼠板法对家养狗活动区域内的啮齿动物及小型哺乳动物种群进行密度调查,针对保守基因进行PCR种类鉴定,并采用荧光PCR和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测啮齿动物及小型哺乳动物SFTSV感染情况。结果通过卫星定位共追踪26条家养狗的日常活动范围信息,采集37条家养狗52份血清,SFTSV⁃IgG抗体总阳性率为59.46%;共捕获啮齿动物及小型哺乳动物419只,优势种为黄胸鼠、小家鼠、黑线姬鼠,未有SFTSV阳性标本检出;家养狗活动中心离主干道路距离远和到过林地的频次多是感染SFTSV的危险因素,家养狗活动中心离林地距离远是感染SFTSV的保护因素。结论商城县家养狗SFTSV抗体阳性率较高,感染SFTSV与生态环境相关,建议进一步扩大家养动物的种类,开展SFTSV感染情况的研究;啮齿动物的SFTSV感染率低,在SFTSV自然循环过程中的作用需进一步调查。

关键词：新布尼亚病毒蜱传疾病啮齿动物血清学危险因素血小板减少综合征发热

[PEAD-肝素-NGF]生物材料对糖尿病大鼠周围神经病变的改善作用

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中国药学杂志 2017年第11期52卷 941-947页

作者：李锐邹双刘彦隆张宏宇肖健温州医科大学药学院浙江省生物技术制药工程重点实验室浙江温州325035

目的探究新型生物材料poly(ethylene argininylaspartate diglyceride)(PEAD)-肝素-神经生长因子(PEAD-肝素-NGF)对糖尿病大鼠坐骨神经病变的作用。方法成年雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病外周神经病变(DPN)模型,随机分为模型... 详细信息

目的探究新型生物材料poly(ethylene argininylaspartate diglyceride)(PEAD)-肝素-神经生长因子(PEAD-肝素-NGF)对糖尿病大鼠坐骨神经病变的作用。方法成年雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病外周神经病变(DPN)模型,随机分为模型组、NGF治疗组及[PEAD-肝素-NGF]团聚体治疗组并给予对应的药物治疗,每周对各组进行行为学测试并在第30天将收集的坐骨神经进行HE染色及TUNEL凋亡检测。细胞水平上,将处于对数期的RSC 96大鼠雪旺细胞(SCs)培养于30 mmol·L^(-1)高糖环境下并给予NGF处理24 h,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术检测各组的凋亡情况。结果 DPN大鼠经[PEAD-肝素-NGF]团聚体治疗后,运动和感觉功能恢复良好,神经纤维节段性脱髓鞘情况改善明显并显著抑制SCs的凋亡。结论 [PEAD-肝素-NGF]团聚体治疗DPN效果显著,为该药应用于临床提供数据支持。

关键词：糖尿病周围神经病变神经生长因子雪旺细胞高糖团聚体

碱性成纤维细胞生长因子团聚体对糖尿病大鼠外周神经病变的治疗作用

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中国药理学与毒理学杂志 2017年第4期31卷 295-302页

作者：李锐邹双高征征刘彦隆张宏宇肖健温州医科大学药学院浙江省生物技术制药工程重点实验室浙江温州325035

目的探究新型生物材料碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)团聚体对糖尿病大鼠坐骨神经病变的治疗作用。方法将聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油二酯(PEAD)、肝素和bFGF按50∶10∶1(m/m/m)的比例混合,制备成bFGF团聚体。Western蛋白印迹法检测该团聚... 详细信息

目的探究新型生物材料碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)团聚体对糖尿病大鼠坐骨神经病变的治疗作用。方法将聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油二酯(PEAD)、肝素和bFGF按50∶10∶1(m/m/m)的比例混合,制备成bFGF团聚体。Western蛋白印迹法检测该团聚体中bFGF含量,ELISA法检测团聚体中bFGF释放速率。雄性SD大鼠ip给予链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,继续饲养8周使之发生外周神经病变,随机分为空载体组、bFGF治疗组和bFGF团聚体治疗组。bFGF治疗组每天im给予bFGF 200μg·kg^(-1),连续3 d;bFGF团聚体治疗组一次性im给予含等量bFGF的团聚体12.2 mg·kg^(-1);空载体组给予等体积的空载体(PEAD+肝素)。每周测量后肢足步印迹进行坐骨神经功能指数(SFI)的行为学评分。给药后第30天处死大鼠,收集两侧坐骨神经,HE染色进行病理学观察,DAPI荧光染色检测神经组织内细胞凋亡,Western蛋白印迹法检测细胞增殖标志物Ki67和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白水平。结果 PEAD、肝素和bFGF按50∶10∶1配比制备的bFGF团聚体结合bFGF良好;ELISA释放曲线结果表明,该团聚体可缓释bFGF。大鼠行为学评价和病理指标检测结果显示,与正常对照组比较,空载体组大鼠SFI显著减小(P生物材料PEAD能有效地结合bFGF并缓控其释放。该团聚体治疗糖尿病大鼠坐骨神经病变效果可能优于单纯bFGF给药。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子糖尿病外周神经病变团聚体肝素