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微生物快速检测技术的临床应用

微生物快速检测技术的临床应用

三将丹体外抗HIV感染的活性研究及其机制探索

2019年浙江省医学会医学微生物与免疫学分会学术大会

作者：周铁丽温州医科大学附属第一医院温州医科大学检验医学院生命科学院

＜正＞～～

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来源： cnki会议评论

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第1期34卷 6-9页

作者：贲银银李亮助张晓燕徐建青温州医科大学检验医学院、生命科学院 325035 上海市公共卫生临床中心上海 201508

目的研究三将丹体外抗HIV感染的活性及潜在机制。方法用蒸馏法从三将丹中抽提出主要活性成分，在细胞水平采用3种亚型的HIV假病毒（B亚型、C亚型、CRF01_AE亚型）对其体外抗病毒感染的活性进行评价。进一步研究三将丹对HIV宿主免疫细胞... 详细信息

目的研究三将丹体外抗HIV感染的活性及潜在机制。方法用蒸馏法从三将丹中抽提出主要活性成分，在细胞水平采用3种亚型的HIV假病毒（B亚型、C亚型、CRF01_AE亚型）对其体外抗病毒感染的活性进行评价。进一步研究三将丹对HIV宿主免疫细胞表面受体以及细胞因子分泌能力的影响，以探寻其可能的抗病毒机制。最后采用4种不同来源的细胞系（上皮细胞Caco-2细胞，TZM细胞，肝来源细胞Huh7细胞，淋巴细胞Jurkat—T细胞）对三将丹进行细胞水平的安全性评价。结果三将丹在1．6ms／ml和0．16mg／ml的浓度时能够很好地抑制HIV假病毒对细胞的感染，当浓度为0．16mg／ml时的抑制率为30．9％（B亚型）、36．6％（C亚型）以及65．0％（CRF01_AE亚型）。而当浓度为1．6mg／ml时，抑制率上升为96．4％（B亚型）、97．4％（C亚型）以及99．5％（CRF01_AE亚型），且不对宿主细胞造成毒性，同时三将丹能够抑制TZM-bl细胞表面CIM、CXCR4以及CCR5的表达，且三将丹能够诱导T细胞分泌IL-2。结论三将丹在体外能够在不对宿主细胞造成毒性的情况下，抑制HIV假病毒的感染，同时还能够促进诱导T细胞分泌IL-2，对免疫细胞具有一定的调理作用，这可能与三将丹抗HIV的活性机制有关。

关键词：三将丹 HIV 抗病毒安全性免疫调理

ELISA抑制法检测动物组织中α1,3-Gal抗原

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药物分析杂志 2015年第10期35卷 1729-1735页

作者：陆艳单永强邵安良曾碧新徐丽明温州医科大学检验医学院生命科学院温州325035 中国食品药品检定研究院北京100050

目的:用人工合成的Gal/BSA抗原对骨髓瘤细胞的Gal抗原表位数进行赋值;再用骨髓瘤细胞作为参照品,建立并优化单克隆特异性抗体M86检测动物组织中α1,3-Gal(Gal)抗原的ELISA抑制法。应用优化后的方法,检测猪和小鼠组织Gal抗原表位数。方法... 详细信息

目的:用人工合成的Gal/BSA抗原对骨髓瘤细胞的Gal抗原表位数进行赋值;再用骨髓瘤细胞作为参照品,建立并优化单克隆特异性抗体M86检测动物组织中α1,3-Gal(Gal)抗原的ELISA抑制法。应用优化后的方法,检测猪和小鼠组织Gal抗原表位数。方法:将待测物抗原(Gal-BSA系列稀释液、SP2/0细胞及待检组织样品)与M86特异性抗体反应后离心,取含有M86剩余抗体的上清液;再与Gal-BSA包被的固相抗原反应,计算出待测样品和标准曲线样品的M86结合抑制率;之后绘制相应的质量浓度-结合抑制率曲线,再根据曲线拟合公式计算其50%结合抑制时的质量浓度;进而计算Gal抗原表位数。结果:各结合抑制曲线相关性较好,R2>0.95。SP2/0骨髓瘤细胞Gal抗原数为每个细胞6.19×108个;利用优化了的方法检测猪的冻干组织抗原含量趋势为:肺>肾>脾>心>腹膜>心包膜>肝组织>皮肤;小鼠的新鲜湿组织抗原含量趋势为:心>肺>脾>肾>肝。结论:应用骨髓瘤细胞作为参照品,所建立的M86抗体ELISA抑制法检测动物组织的Gal抗原含量具有较好的敏感性和特异性,为进一步建立该方法规范性的行业标准奠定了基础。

关键词：动物源性生物材料免疫排斥反应靶抗原检测 Gal抗原 M86特异性抗体 ELISA抑制法

铬天青法检测尿毒症患者血清总铁结合力的干扰分析

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中国卫生检验杂志 2018年第17期28卷 2123-2125页

作者：倪莉高玲佳丁红香徐晓杰朱丽丹徐晓媛温州医科大学附属第二医院检验医学学科浙江温州325608 温州医科大学检验医学院生命科学院浙江温州325608

目的探究铬天青法检测尿毒症患者TIBC的影响因素及其纠正方法。方法严格按照NCCLS推荐的EP10-A和EP9-A2研究方案,选取TIBC低值和高值水平样品各1例用于铬天青法和亚铁嗪法批内精密度检测;采用40例非尿毒症患者样品验证两法之间可比性;将... 详细信息

目的探究铬天青法检测尿毒症患者TIBC的影响因素及其纠正方法。方法严格按照NCCLS推荐的EP10-A和EP9-A2研究方案,选取TIBC低值和高值水平样品各1例用于铬天青法和亚铁嗪法批内精密度检测;采用40例非尿毒症患者样品验证两法之间可比性;将100例尿毒症患者标本经原倍、稀释2倍、稀释3倍处理后用铬天青法检测TIBC,3组检测结果分别与亚铁嗪法原倍测定结果作偏倚分析。结果铬天青法与亚铁嗪法批内变异系数均小于卫生部室间质评TIBC总允许误差的1/4(3.43%);两法检测非尿毒症患者血清TIBC时结果差异无统计学意义(P>0.05);偏倚分析结果显示,铬天青法检测尿毒症患者标本TIBC存在不同程度负偏倚[平均偏差>-6.85%,大于卫生部室间质评TIBC总允许偏倚的1/2(±6.85%)];稀释2倍后铬天青法检测结果与亚铁嗪法原倍测定结果未见明显偏倚(平均偏差为3.48%,小于卫生部室间质评TIBC总允许偏倚的1/2(±6.85%)),且差异无统计学意义(P>0.05);而稀释3倍后铬天青法测定结果存在明显正偏倚(平均偏差为39.03%)。结论铬天青法检测尿毒症患者血清TIBC时存在不同程度负偏倚,对于尿毒症标本临床可采用亚铁嗪法或样本稀释2倍后采用铬天青法测定。

关键词：总铁结合力尿毒症铬天青法亚铁嗪法

循环miR-152对前列腺癌生化复发早期预测的研究

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中华男科学杂志 2017年第7期23卷 603-608页

作者：陈军锋廖于峰马建波茅奇峰贾广成董学君温州医科大学检验医学院浙江温州325035 温州医科大学生命科学院浙江温州325035 宁波市第二医院检验科浙江宁波315010 宁波市第二医院泌尿外科浙江宁波315010

目的:探讨循环微小RNA 152(miR-152)对前列腺癌生化复发早期预测的价值。方法:收集将要进行前列腺癌手术的患者66例(生化复发组:35例,术后2年内生化复发;未生化复发组:31例,术后2年内未生化复发),另择年龄相匹配的31例健康男性作为健康... 详细信息

目的:探讨循环微小RNA 152(miR-152)对前列腺癌生化复发早期预测的价值。方法:收集将要进行前列腺癌手术的患者66例(生化复发组:35例,术后2年内生化复发;未生化复发组:31例,术后2年内未生化复发),另择年龄相匹配的31例健康男性作为健康对照组。用qRT-PCR法检测前列腺癌患者和健康对照组的循环miR-152表达水平。应用ROC曲线分析循环miR-152对前列腺癌早期生化复发的诊断价值。分析复发组循环miR-152表达水平与临床病理参数(年龄、术前PSA水平、Gleason积分、临床分期、骨转移)之间的相关性。结果:循环miR-152在前列腺癌术后患者(未生化复发及生化复发)与健康对照组的表达差异有统计学意义(t=-5.212,P=0.001)。前列腺癌术后生化复发组患者循环miR-152的表达量较未生化复发组患者低,差异有统计学意义(t=-5.727,P=0.001)。循环miR-152对前列腺癌术后生化复发早期预测的ROC曲线下面积(AUC)为0.906(95%CI,0.809~0.964),灵敏度和特异度分别为91.4%、80.6%。循环miR-152表达水平与Gleason积分、临床分期、有无生化复发和骨转移相关(P均0.05)。结论:循环miR-152表达水平在前列腺癌术后生化复发患者中显著降低,可能成为前列腺癌生化复发早期预测的分子标志物。

关键词：前列腺癌微小RNA 152 血清PSA 生化复发

趋化因子CXCL14在SLE患者外周血单个核细胞中的表达及启动子甲基化分析

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中国应用生理学杂志 2017年第3期33卷 197-201页

作者：王金丹黄茜茜叶璐璐范超凡郭刚强徐玲娟薛向阳盛秀胜温州医科大学检验医学院、生命科学院浙江温州325035 温州医科大学第二临床医学院浙江温州325035 温州医科大学微生物学和免疫学教研室分子病毒与疫苗研究所热带医学研究所浙江温州325035 金华市中医医院检验科浙江金华321017 金华职业技术学院医学院浙江金华321017

目的:分析趋化因子CXCL14在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其启动子甲基化特征。方法:收集28例SLE患者和20名健康人外周血单个核细胞(PBMC)标本,抽提细胞中RNA,逆转录后,以GAPDH为内参,通过定量PCR检测PBMC中... 详细信息

目的:分析趋化因子CXCL14在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其启动子甲基化特征。方法:收集28例SLE患者和20名健康人外周血单个核细胞(PBMC)标本,抽提细胞中RNA,逆转录后,以GAPDH为内参,通过定量PCR检测PBMC中CXCL14的表达,统计分析CXCL14表达水平与SLE各种临床资料的相关性,探讨PBMC中CXCL14表达与SLE的关系,通过重亚硫酸盐修饰的全基因组DNA用以BSP测序来明确不同标本中CXCL14启动子中甲基化位点的甲基化率。结果:CXCL14在SLE患者和正常人PBMC中的表达量存在显著差异(P<0.05)。与健康人PBMC中CXCL14的含量相比较,CXCL14在SLE患者PBMC中表达量显著降低。与进一步CXCL14表达水平与SLE各种临床资料的相关性分析显示,CXCL14表达水平与SSB抗体(干燥综合征B抗体)、蛋白尿及血小板计数相关。与SSB抗体阴性SLE患者比较,SSB抗体阳性患者CXCL14表达水平更低(P<0.05);与蛋白尿阴性SLE患者相比,蛋白尿阳性患者CXCL14表达水平更低(P<0.05);而血小板升高患者的CXCL14表达水平更高(P<0.05)。CXCL14表达水平与SLE活动、肾损害指标、抗ds-DNA、C反应蛋白(CRP)、补体C3水平等指标未见显著相关性。CXCL14启动子区甲基化分析显示,SLE患者Cp G岛甲基化明显高于正常对照。结论:PBMC中低表达的CXCL14与SLE发生发展相关,其启动子区Cp G岛过度甲基化是SLE患者CXCL14低表达的重要机制。

关键词：系统性红斑狼疮趋化因子 CXCL14 甲基化

基于E6/E7基因检测高危型人乳头瘤病毒感染新方法的构建

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检验医学与临床 2018年第21期15卷 3171-3174,3178页

作者：王俭谢旺凯李婷吕诗卉倪超薛向阳陈向敏陈俊温州医科大学第一临床医学院浙江温州325035 温州医科大学第二临床医学院浙江温州325035 温州医科大学基础医学院浙江温州325035 温州医科大学检验医学院/生命科学院浙江温州325035

目的建立一种基于E6/E7基因的高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染检测的新方法,并评价其效应。方法设计中国人群中流行的7种HPV高危型别的E6/E7特异性引物,建立E6/E7多重聚合酶链式反应(PCR)法。对68份宫颈肿瘤标本和150份宫颈脱落细胞标本分... 详细信息

目的建立一种基于E6/E7基因的高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染检测的新方法,并评价其效应。方法设计中国人群中流行的7种HPV高危型别的E6/E7特异性引物,建立E6/E7多重聚合酶链式反应(PCR)法。对68份宫颈肿瘤标本和150份宫颈脱落细胞标本分别采用不同方法进行HPV检测,评价新建立的方法。结果 68份宫颈肿瘤组织中,E6/E7多重PCR法检测阳性48份(70.59%),流式荧光杂交法检测阳性27份(39.71%),2种检测结果差异有统计学意义(P0.05)。结论所建立的基于HPV E6/E7基因的多重PCR方法检测高危型HPV感染情况具有特异性和灵敏性,且与目前临床上主流的流式荧光杂交法检测结果存在高度相近性,但价格便宜,操作简便,可推广适用于临床早期筛查。

关键词：人乳头瘤病毒高危型多重聚合酶链反应流式荧光杂交法

体液piRNA作为疾病潜在生物标志物的研究进展

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检验医学 2022年第8期37卷 782-786页

作者：邬燕倩俞翀沈鹭郑浩然洪叶挺杭州医学院检验医学院生物工程学院浙江杭州311300 浙江省人民医院泌尿外科浙江杭州310014 温州医科大学检验医学院生命科学院浙江温州325035

PIWI蛋白相互作用RNA(piRNA)是一类可以沉默转座子及调控mRNA翻译的新型非编码小RNA。piRNA主要参与生殖细胞的发育和精子的发生,与肿瘤等疾病的发生、发展也密切相关。在特定疾病状态下,体液中的piRNA会出现差异表达,具有作为新型生物... 详细信息

PIWI蛋白相互作用RNA(piRNA)是一类可以沉默转座子及调控mRNA翻译的新型非编码小RNA。piRNA主要参与生殖细胞的发育和精子的发生,与肿瘤等疾病的发生、发展也密切相关。在特定疾病状态下,体液中的piRNA会出现差异表达,具有作为新型生物标志物的潜力。文章就体液piRNA作为各种疾病潜在的生物标志物的研究进展作一综述。

关键词： PIWI蛋白相互作用RNA 体液生物标志物

论高校公共课程设置的价值取向——以艺术类课程为例

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温州医科大学学报 2017年第6期47卷 466-468,F0003页

作者：贺佳玥赵国靖吴蕾蕾温州大学教师教育学院浙江温州325035 温州医科大学药学院浙江温州325035 温州医科大学检验医学院生命科学院浙江温州325035

近年来,国家对高校素质教育课程的设置和综合性原则提出了更高的要求。我国高校尤其是理工科高校素质教育艺术类课程的设置以及师资力量均不足,建议借鉴美国高校艺术类课程设置的经验,从课程主体、目标、教学方法以及基本原则入手,调整... 详细信息

近年来,国家对高校素质教育课程的设置和综合性原则提出了更高的要求。我国高校尤其是理工科高校素质教育艺术类课程的设置以及师资力量均不足,建议借鉴美国高校艺术类课程设置的经验,从课程主体、目标、教学方法以及基本原则入手,调整高校艺术素质教育的价值取向。

关键词：高校素质教育艺术类课程设置价值取向