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RAGE在哮喘大鼠中的表达及罗红霉素的干预作用

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中华医学杂志 2019年第32期99卷 2542-2546页

作者：顾晓菲陈慧君陈鑫淼徐挺挺邱章伟吴立琴戴威应颂敏戴元荣温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院呼吸内科温州325027 金华市中心医院呼吸内科金华321000 温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院神经康复科温州325027 浙江大学医学院附属第二医院呼吸与危重症医学科杭州310058

目的探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)在哮喘大鼠中的表达及罗红霉素的干预作用。方法将18只雄性无特定病原体动物(SPF)级BrownNorway大鼠,按随机数字表法随机分为正常对照组、哮喘模型组、罗红霉素组各6只。通过卵白蛋白(OVA)+Al(OH)3... 详细信息

目的探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)在哮喘大鼠中的表达及罗红霉素的干预作用。方法将18只雄性无特定病原体动物(SPF)级BrownNorway大鼠,按随机数字表法随机分为正常对照组、哮喘模型组、罗红霉素组各6只。通过卵白蛋白(OVA)+Al(OH)3联合致敏,OVA雾化激发构建大鼠哮喘模型,在每次激发前30min,罗红霉素组予以罗红霉素30mg/kg灌胃,正常对照组和哮喘模型组分别用等体积生理盐水代替。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中RAGE、白细胞介素(IL)-4的浓度;HE染色法观察各组大鼠肺组织气道炎症和细胞浸润情况;Image-ProPlus图像分析软件测量并计算支气管壁厚度及平滑肌厚度;Western印迹法检测各组大鼠肺组织RAGE蛋白相对表达量。结果哮喘模型组血清和BALF中RAGE、IL-4浓度显著均高于正常对照组[(494±32)比(327±45)ng/L、(32.4±5.8)比(13.1±2.9)ng/L和(553±38)比(399±56)ng/L、(37.8±3.4)比(19.4±2.5)ng/L](均P<0.01),罗红霉素组血清和BALF中RAGE、IL-4浓度均显著低于哮喘模型组[(438±18)比(494±32)ng/L、(22.8±6.0)比(32.4±5.8)ng/L和(444±42)比(553±38)ng/L、(25.6±4.5)比(37.8±3.4)ng/L](均P<0.05);哮喘模型组支气管壁增厚,管腔狭窄,黏膜皱折明显增多,黏膜下水肿,支气管、血管周围及肺泡腔内大量炎症细胞浸润、聚集;支气管壁厚度、平滑肌厚度明显厚于正常对照组(均P<0.01),罗红霉素组气道炎症及重塑改变优于哮喘模型组(P<0.05);哮喘模型组肺组织RAGE蛋白表达显著高于正常对照组(P<0.01),罗红霉素组肺组织RAGE蛋白表达显著低于哮喘模型组(P<0.01)。各组BALF及血清中RAGE和IL-4表达呈正相关(r=0.782、0.804,均P<0.01);肺组织中RAGE与白细胞总数、嗜酸粒细胞数量及平滑肌厚度呈正相关(r=0.897、0.927、0.860,均P<0.01)。结论哮喘大鼠肺组织、血清和BALF中RAGE表达升高,且与气道炎症及气道重塑呈正相关,罗红霉素可能通过降低哮喘大鼠RAGE的表达来达到治疗哮喘的目的。

关键词：哮喘糖基化终产物,高级罗红霉素大鼠

罗红霉素对哮喘大鼠NF-κB及气道炎症的影响

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中国临床药理学与治疗学 2009年第7期14卷 748-753页

作者：颜孙舜戴元荣吴立琴夏晓东温州医学院附属第二医院呼吸内科

目的:观察罗红霉素对哮喘大鼠NF-κB、气道炎症、气道高反应性的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分成正常对照组(C组)、哮喘组(A组)、罗红霉素组(R组),每组10只。用卵白蛋白(OVA)制备哮喘大鼠模型。各组大鼠在末次激发后24 h,检测气道反... 详细信息

目的:观察罗红霉素对哮喘大鼠NF-κB、气道炎症、气道高反应性的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分成正常对照组(C组)、哮喘组(A组)、罗红霉素组(R组),每组10只。用卵白蛋白(OVA)制备哮喘大鼠模型。各组大鼠在末次激发后24 h,检测气道反应性后放血处死;ELISA测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的IL-4、IL-5、IFN-γ的浓度;免疫组化检测支气管上皮NF-κB p65活化。结果:哮喘组大鼠气道反应性高于对照组(P<0.01),罗红霉素组与哮喘组比较气道反应性下降(P<0.05);BALF中IL-4、IL-5,哮喘组含量均高于对照组(P<0.01),罗红霉素组均低于哮喘组(P<0.01),罗红霉素组BALF中IFN-γ低于对照组(P<0.01)但高于哮喘组;哮喘组大鼠支气管上皮NF-κB蛋白的活化明显高于对照组,罗红霉素组低于哮喘组(P<0.01)。支气管上皮NF-κB p65活化与BALF中的IL-4、IL-5的含量呈显著正相关(r=0.856,P<0.01;r=0.912,P<0.01);大鼠BALF中的IL-4、IL-5的含量与Raw增加25%时(PC25Raw)呈显著负相关(r=-0.713,P<0.01;r=-0.772,P<0.01),与Cdyn下降15%时(PC15Cdyn)呈显著负相关(r=-0.738,P<0.01;r=-0.818,P<0.01)。结论:罗红霉素可能部分通过抑制NF-κB活性而纠正哮喘Th1/Th2细胞因子失衡,罗红霉素降低哮喘大鼠的气道反应性可能和减少IL-4、IL-5的表达有关。

关键词：哮喘罗红霉素 NF-κB 支气管高反应性

微囊蛋白1对哮喘气道平滑肌细胞增殖的抑制机制及罗红霉素的调控作用

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中华医学杂志 2013年第34期93卷 2750-2754页

作者：曾潍贤戴元荣温州医学院附属第二医院育英儿童医院急诊科浙江省温州市325027 温州医学院附属第二医院育英儿童医院呼吸内科浙江省温州市325027

目的探讨微囊蛋白1抑制气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖的可能机制以及罗红霉素的调控作用。方法复制哮喘大鼠模型，光镜观察肺组织病理学变化，透射电镜观察各组ASMCs上微囊的结构及变化，用组织贴壁法体外培养ASMCs，实验设对照组（A组：... 详细信息

目的探讨微囊蛋白1抑制气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖的可能机制以及罗红霉素的调控作用。方法复制哮喘大鼠模型，光镜观察肺组织病理学变化，透射电镜观察各组ASMCs上微囊的结构及变化，用组织贴壁法体外培养ASMCs，实验设对照组（A组：含2．5％胎牛血清的高糖培养液处理1h）、哮喘组（B组：处理同A组）、细胞外调节蛋白激酶（ERK1／2）信号通路阻断剂PD98059组（c组：10×10μmol／L的PD98059处理1h）、罗红霉素组（D组：100mg／L的罗红霉素处理1h）、β-甲基环糊精组（E组：5μmoL／L的B甲基环糊精处理1h）；用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测各组细胞的增殖情况，Western印迹检测各组微囊蛋白1表达；逆转录（RT）-PCR和Western印迹分别检测ERK1／2mRNA、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）mRNA和磷酸化ERK1／2、MCP-1蛋白的表达。结果c、D组ASMCs增殖显著低于B组（0．68±0．15、0．63±0．13比0．96±0．14，均P〈0．05）；E组（1．26±0．11）ASMCs增殖强于B组（P〈0．05）。C、D组微囊蛋白1表达均显著高于B组（0．332±0．057、0．392±0．064比0．237±0．032，均P〈0．05）；C、D组ERKl／2蛋白表达均显著低于B组（0．241±0．017、0．268±0．007比0．346±0．009，均P〈0．01），E组（0．441±0．011）ERK1／2蛋白表达高于B组；C、D组ERKl／2mRNA表达均显著低于B组（0．277±0．043、0．338±0．026比0．591±0．022，均P〈0．01）。C、D组MCP-1蛋白表达均显著低于B组（0．198±0．015、0．286±0．019比0．482±0．026，均P〈0．01），E组（0．521±0．023）MCP-1蛋白表达较B有升高趋势；C、D组MCP-1mRNA表达均显著低于B组（0．212±0．042、0．249±0．032比0．676±0．053，均P〈0．01）。结论微囊蛋白1可能通过ERK信号通路抑制MCP-1表达，从而抑制哮喘ASMCs的增殖。罗红霉素可能上调微囊蛋白1的表达，抑制MCP-1mRNA表达和翻译，进而抑制哮喘ASMCs的增殖。

关键词：哮喘细胞质膜微囊蛋白肌细胞平滑肌细胞增殖罗红霉素

氧驱动雾化吸入布地奈德混悬液和复方异丙托溴铵溶液对慢性阻塞性肺疾病急性加重期Ⅱ型呼吸衰竭患者的影响

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中国临床药理学与治疗学 2009年第2期14卷 199-202页

作者：何剑波颜孙舜徐慧戴元荣吴成云翁海霞吴立琴温州医学院附属第二医院呼吸内科

目的:观察氧驱动雾化吸入布地奈德混悬液和复方异丙托溴铵溶液对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)Ⅱ型呼吸衰竭患者动脉血气分析指标和肺通气功能的影响,观察其副作用。方法:选择住院AECOPDⅡ型呼吸衰竭患者30例,采用氧气驱动(氧流量... 详细信息

目的:观察氧驱动雾化吸入布地奈德混悬液和复方异丙托溴铵溶液对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)Ⅱ型呼吸衰竭患者动脉血气分析指标和肺通气功能的影响,观察其副作用。方法:选择住院AECOPDⅡ型呼吸衰竭患者30例,采用氧气驱动(氧流量5L/min)雾化吸入布地奈德混悬液2mL和复方异丙托溴铵溶液2.5mL,持续约20min,分别于雾化治疗前和雾化治疗完成后半小时对该患者行动脉血气分析检测和呼气峰流速(PEF)测定,期间同时监测该患者的经皮氧饱和度、神志、呼吸、心率等变化。结果:氧驱动雾化吸入布地奈德混悬液和复方异丙托溴铵溶液后PaO2升高,PaCO2下降,PEF增加。PEF改善率与PaCO2下降值呈正相关。副作用均可以耐受。结论:氧驱动雾化吸入布地奈德混悬液和复方异丙托溴铵溶液可改善AECOPDⅡ型呼吸衰竭患者的肺通气功能,纠正其缺氧和二氧化碳潴留,具有较好的疗效和安全性。

关键词：慢性阻塞性肺疾病 Ⅱ型呼吸衰竭氧驱动雾化布地奈德混悬液复方异丙托溴铵溶液

葛根素对低氧性肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡及Kvl．5表达的影响

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中华劳动卫生职业病杂志 2011年第10期29卷 731-734页

作者：陈婵王志翊王良兴杜晓红赵晓微温州医学院附属第一医院干部病房温州325000 温州医学院附属第一医院呼吸内科温州325000 温州医学院附属第二医院急诊科温州325000

目的观察葛根素对低氧性肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖与凋亡及电压门控型钾离子通道亚型（Kvl．5）表达的影响，探讨葛根素在改善低氧性肺动脉高压与抑制肺血管重建中可能的作用机制。方法原代培养大鼠PASMCs，随机分为正常对照组（5... 详细信息

目的观察葛根素对低氧性肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖与凋亡及电压门控型钾离子通道亚型（Kvl．5）表达的影响，探讨葛根素在改善低氧性肺动脉高压与抑制肺血管重建中可能的作用机制。方法原代培养大鼠PASMCs，随机分为正常对照组（5％C0。常氧），低氧组（5％0：、5％C0：、90％N：三气培养），3个浓度葛根素十预组（在低氧组基础上分别加入终浓度为1×10^5、1×10^4、1×10^3mol／L葛根素，37℃培养24h）。采用CCK一8法和流式细胞仪检测细胞增殖情况，分光光度法检测caspase一3活力，蛋白印迹及实时定量聚合酶链反应（PCR）法分别检测Kvl．5蛋白和mRNA表达。结果与正常对照组（细胞活性：0．940±0．045，S期细胞比例：9.67％±1.28％，Caspase一3活力：0.1073±0．0113，Kv1．5蛋白：0．886±0．038，Kv1.5mRNA0.0377±0．0031）比较，低氧组细胞活性（1．296±0．034）、s期细胞比例（18．19％±1．19％）升高，Caspase-3活力（0．0664_＋0．0049）下降，Kvl．5蛋白（0.602±0.064）及mRNA（0．0108±0．0014）表达下降，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与低氧组比较，各剂量葛根素干预组细胞活性和s期细胞比例下降，Caspase-3活力升高，Kvl．5蛋白及rnRNA表达上调，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论葛根素可抑制低氧性PASMCs增殖，促进其凋亡，其作用机制可能通过上调Kvl．5表达抑制PASMCs的增殖。

关键词：葛根素低氧肌平滑血管

罗红霉素与布地奈德干粉吸入剂联用治疗哮喘的临床研究

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中国临床药理学与治疗学 2008年第2期13卷 184-187页

作者：颜雪琴吴立琴林洁夏晓东戴元荣温州医学院附属第二医院呼吸内科

目的:通过与单纯吸入布地奈德干粉吸入剂(普米克都保)组比较,观察口服罗红霉素联用布地奈德干粉吸入剂治疗哮喘的疗效及对血清可溶性IL-2受体(sIL-2R)、IL-8和血嗜酸性粒细胞(EOS)计数水平的影响。方法:选择门诊轻、中度急性发作哮喘患... 详细信息

目的:通过与单纯吸入布地奈德干粉吸入剂(普米克都保)组比较,观察口服罗红霉素联用布地奈德干粉吸入剂治疗哮喘的疗效及对血清可溶性IL-2受体(sIL-2R)、IL-8和血嗜酸性粒细胞(EOS)计数水平的影响。方法:选择门诊轻、中度急性发作哮喘患者45例,随机分组。治疗组口服罗红霉素联合吸入布地奈德干粉吸入剂,对照组吸入布地奈德干粉吸入剂,疗程4周。治疗前、治疗4周后检测肺功能、血sIL-2R、IL-8和EOS计数水平,并按临床症状记分。结果:40例完成了试验,治疗4周后临床症状记分、肺功能一秒钟用力呼气量(FEV1)、FEV1占预计值百分比(FEV1/pred%)、最大呼气流量(PEF)和PEF占预计值百分比(PEF/pred%)改善,血sIL-2R、IL-8和EOS计数水平较治疗前降低,且治疗组较对照组改善更为明显,两组副作用相似。结论:罗红霉素具有抗炎和免疫调节作用,罗红霉素与布地奈德干粉吸入剂联用可以提高疗效。

关键词：哮喘罗红霉素可溶性 IL-2受体 IL-8 嗜酸性粒细胞

黄芪对动脉粥样硬化兔骨髓内皮祖细胞生长的影响

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实用医学杂志 2011年第7期27卷 1154-1156页

作者：李蕾张怀勤尹娟范旰陈骁温州医学院附属第一医院心内科 325027 温州医学院附属第二医院呼吸内科 325027

目的:研究黄芪对冠状动脉粥样硬化模型兔骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)生长的影响,并探讨黄芪对冠心病临床治疗的可能机制。方法:建立动脉粥样硬化模型,分为正常对照组和动脉粥样硬化组,体外分离培养EPCs,通过荧... 详细信息

目的:研究黄芪对冠状动脉粥样硬化模型兔骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)生长的影响,并探讨黄芪对冠心病临床治疗的可能机制。方法:建立动脉粥样硬化模型,分为正常对照组和动脉粥样硬化组,体外分离培养EPCs,通过荧光显微镜观察细胞经乙酰化低密度脂蛋白(DiI-ac-LDL)摄取试验和荆豆凝集素(FITC-UEA-I)和体外成血管试剂matrigel观察细胞成血管功能来鉴定EPCs,检测细胞黏附能力、迁移能力及增殖能力。结果:动脉粥样硬化组兔冠状动脉可见斑块或脂纹;DiI-ac-LDL和FITC-UEA-I双染色阳性;培养6d的EPCs可见血管腔样的结构;动脉粥样硬化组EPCs的数量、黏附、迁移及增殖能力较正常对照组明显下降,差异有显著性(P<0.05)。黄芪可以一定程度上促进动脉粥样硬化组兔骨髓EPCs的数量的增加及黏附、迁移和增殖能力,并以20g/L最为明显,差异有显著性(P<0.05)。结论:黄芪治疗冠心病的作用机制可能为促进EPCs的生长。

关键词：冠状动脉疾病内皮祖细胞黄芪骨髓兔

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神经生长因子及其在支气管哮喘中的研究进展

国际呼吸杂志 2015年第3期35卷 202-205页

作者：刘丹琴颜孙舜戴元荣温州医学院附属第二医院呼吸内科 325027

支气管哮喘（简称哮喘）作为呼吸系统中呈逐年上升趋势的一种常见病，给人类社会及家庭均带来了严重的经济负担。尽管激素的使用对哮喘患者的症状有所控制，但激素敏感的出现等，使其发病率和病死率只增不减，追根溯源还是对哮喘的发病... 详细信息

支气管哮喘（简称哮喘）作为呼吸系统中呈逐年上升趋势的一种常见病，给人类社会及家庭均带来了严重的经济负担。尽管激素的使用对哮喘患者的症状有所控制，但激素敏感的出现等，使其发病率和病死率只增不减，追根溯源还是对哮喘的发病机制不完全了解所致，故完善其发病机制的研究，将开拓新的诊疗方向。随着现代分子生物学的发展，目前发现神经生长因子在哮喘的发生发展中起着核心作用，有学者提出了哮喘的“免疫-神经-内分泌网络”的概念，通过多系统的联系，使人们对哮喘的发病机制有了更深的认识，或许将开拓哮喘研究及治疗的新领域。

关键词：哮喘神经生长因子免疫-神经-内分泌网络

红霉素对哮喘大鼠外周血单个核细胞ERK/NF-κB信号通路的影响

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中国临床药理学与治疗学 2010年第4期15卷 397-402页

作者：张近波吴成云李智强戴元荣曾潍贤温州医学院附属温岭医院EICU 温州医学院附属第二医院呼吸内科温州医学院附属第一医院ICU

目的:探讨哮喘大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)ERK/NF-κB信号通路的变化及红霉素的干预作用。方法:分离培养正常对照组、哮喘组、红霉素处理组大鼠的PBMCs。分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western Blotting技术检测PBMCs ERK mRNA... 详细信息

目的:探讨哮喘大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)ERK/NF-κB信号通路的变化及红霉素的干预作用。方法:分离培养正常对照组、哮喘组、红霉素处理组大鼠的PBMCs。分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western Blotting技术检测PBMCs ERK mRNA、NF-κB mRNA、磷酸化ERK、NF-κB的表达。结果:哮喘组PBMCsERK mRNA、NF-κB mRNA、磷酸化ERK、NF-κB表达水平较正常对照组显著升高(P均<0.05),红霉素处理组PBMCs ERK mRNA、NF-κBmRNA、磷酸化ERK、NF-κB表达水平均较哮喘组显著降低(P均<0.05)。通过直线相关分析发现,PBMCs磷酸化ERK与NF-κB表达呈显著正相关(r=0.693,P<0.01)。结论:PBMCsERK/NF-κB信号通路可能参与支气管哮喘的病理生理过程,而红霉素可能通过作用于ERK/NF-κB信号通路发挥其抗炎效应。

关键词：哮喘外周血单个核细胞细胞外信号调节蛋白激酶核因子-κB 红霉素