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苦参碱诱导多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡及其对细胞黏附分子表达的影响

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中国实验血液学杂志 2008年第1期16卷 93-96页

作者：吴建波章圣辉韩义香熊术道叶爱芳谭映霞温州医学院附属第一医院医学科学研究所浙江温州325000

为了探讨苦参碱诱导多发性骨髓瘤(MM)RPMI8226细胞凋亡及其对细胞黏附分子表达的影响,将苦参碱与RPMI8226细胞共培育,采用CCK-8法观察细胞生长,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,PI单染色法检测细胞周期,双染色流式细胞... 详细信息

为了探讨苦参碱诱导多发性骨髓瘤(MM)RPMI8226细胞凋亡及其对细胞黏附分子表达的影响,将苦参碱与RPMI8226细胞共培育,采用CCK-8法观察细胞生长,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,PI单染色法检测细胞周期,双染色流式细胞仪检测细胞膜表面CD44、CD44v6、CD54和CD106的表达。结果表明,苦参碱对RPMI8226细胞具有明显的生长抑制作用,呈量效和时效关系;苦参碱能诱导RPMI8226细胞凋亡,其发生率随着药物浓度增加而增加;细胞周期分析显示G0/G1期细胞相对增多,S期相对减少,但G2/M期细胞数无明显改变;苦参碱作用于RPMI8226细胞48小时导致CD44和CD54表达减少,但CD44v6和CD106表达无明显改变。结论:苦参碱通过诱导凋亡和细胞周期阻滞抑制RPMI8226细胞的生长,同时降低CD44、CD54等细胞黏附分子表达。

关键词：苦参碱骨髓瘤 RPMI8226细胞细胞凋亡细胞周期细胞黏附分子

Mangiferin联合硼替佐米对Burkitt淋巴瘤恶性生物学行为的调控机制及对CXCR表达的影响

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中国实验血液学杂志 2023年第5期31卷 1394-1402页

作者：严志民刘彦权许庆林林洁刘欣朱秋平陈鑫基刘庭波连晓岚赣南医学院第一附属医院血液内科江西赣州341000 赣南医学院第一附属医院重症医学科江西赣州341000 福建医科大学附属协和医院血液病研究所福建福州350001

目的:分析芒果苷(mangiferin)联合硼替佐米对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖、侵袭、凋亡和自噬的作用及对CXC趋化因子受体家族(CXCR)表达的影响,并探究其间存在的分子机制,为Burkitt淋巴瘤基础研究与临床提供科学依据。方法:采用不同浓度... 详细信息

目的:分析芒果苷(mangiferin)联合硼替佐米对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖、侵袭、凋亡和自噬的作用及对CXC趋化因子受体家族(CXCR)表达的影响,并探究其间存在的分子机制,为Burkitt淋巴瘤基础研究与临床提供科学依据。方法:采用不同浓度Mangiferin、硼替佐米单药或联合干预Raji细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡、自噬及Akt/m TOR通路蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测CXCR家族的表达变化。结果:不同浓度Mangiferin干预Raji细胞不同时间后,可抑制Raji细胞活力,且呈浓度及时间依赖性(r=-0.682,r=-0.836);与单药组相比,Mangiferin联合硼替佐米干预Raji细胞时,细胞增殖与侵袭能力显著下降、凋亡水平显著升高(P0.05),但两药联合时可使CXCR3表达下调(P<0.05)。结论:Mangiferin联合硼替佐米能协同抑制Raji细胞增殖、侵袭,并诱导其发生自噬与凋亡,机制可能与抑制Akt/m TOR信号通路并通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bax以及使CXCR家族表达受抑等有关。

关键词：芒果苷硼替佐米 Burkitt淋巴瘤恶性生物学行为调控机制 CXC趋化因子受体

强直性脊柱炎患者外周血CD4~+调节性T细胞的变化及意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第5期28卷 445-449页

作者：章圣辉韩义香吴建波胡晓霞陈丹温州医学院附属第一医院医学科学研究所温州医学院附属第一医院风湿免疫科

目的探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血中CD4~+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的表达、功能及意义。方法采用流式细胞术检测78例AS患者和50例健康志愿者外周血中CD4~+CD25~+CD127lo/-Treg、细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)和NK细胞,采用ELISA法检测血清中β型转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平。从患者外周血单个核细胞中磁珠分选出CD4~+ CD25~+Treg细胞,混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture,MLC)分析其免疫抑制功能。结果AS活动期患者外周血中CD4~+CD25~+CD127lo/-Treg占CD4~+T淋巴细胞的百分比为(4.36±1.21)%, MLC中CD4~+CD25~+Treg抑制同种异体T淋巴细胞增殖功能低下,与其Treg分泌TGF-β减少相关, CD4~+Treg含量及功能均低于健康志愿者(P<0.05)。AS患者外周血中CD4~+CD25`+CD127lo/-Treg水平与TGF-β呈正相关,与TNF-α呈负相关。结论AS患者外周血中Treg表达水平低,且存在功能缺陷,导致体内诱导免疫耐受机能不足,可能参与AS免疫发病。

关键词：强直性脊柱炎 CD4~+CD25~+CD1271α/-调节性T细胞 CD4~+CD25~+调节性T细胞混合淋巴细胞培养 β型转化生长因子

早期一氧化氮抑制对大鼠睾丸生精功能迟发性损伤的防护作用

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中华医学杂志 2008年第24期88卷 1676-1678页

作者：林孝坤秦乐陈聪德韩义香陈肖鸣温州医学院附属育英儿童医院小儿科 325027 温州医学院附属第一医院医学科学研究所

目的研究早期局部一氧化氮（NO）抑制在大鼠单侧睾丸扭转后对侧睾丸生精功能迟发性损伤中的防护作用。方法将56只健康雄性SD大鼠，随机分为假手术组、安慰剂组、N-一甲基-L-精氨酸（L-NMMA）组和环孢素组，每组14只。建立左侧睾丸扭转... 详细信息

目的研究早期局部一氧化氮（NO）抑制在大鼠单侧睾丸扭转后对侧睾丸生精功能迟发性损伤中的防护作用。方法将56只健康雄性SD大鼠，随机分为假手术组、安慰剂组、N-一甲基-L-精氨酸（L-NMMA）组和环孢素组，每组14只。建立左侧睾丸扭转模型，并做相应的药物处理。各组大鼠分别于术后1、8周时各处死7只，即刻采集未扭转侧睾丸标本，测定睾丸组织中丙二醛水平和NO／一氧化氮合酶（NOS）含量，同时组织病理学观察以及MHC肽-四聚体复合物流式细胞仪分析。结果术后1周时L-NMMA组丙二醛值为（181±22）nmol／g、NO含量为（112±18）μmol／g、NOS含量为（9．3±1．6）U／mg、MHC肽-四聚体复合物比例为0．36±0．09，与安慰剂组比[分别为（276±31）nmol／g、（195±22）μmol／g、（13．5±2．2）U／mg、0．58．±0．10]，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；L-NMMA组对侧睾丸组织早期和晚期病理损伤较安慰剂组轻。结论抑制早期局部NO的产生，对早期对侧睾丸生精功能有一定的防护作用。

关键词：一氧化氮精索扭转精氨酸

血浆甲基化SEPT9基因在原发性肝癌患者中的表达及其临床意义

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中华肝脏病杂志 2023年第3期31卷 265-270页

作者：贺娜冯巩张粉娜郝帅李嵘赵梓琪田亚文闫红林西安医学院第一附属医院消化内科西安710006 西安医学院全科医学研究所西安710077 西安医学院西安710077

目的研究血浆甲基化SEPT9基因(mSEPT9)在原发性肝癌患者中的表达及临床意义。方法选取2016年5月至2018年10月在西安就诊393例患者资料,其中原发性肝癌组75例、肝硬化组50例、健康对照组268例。应用聚合酶链式反应荧光探针法检测3组外周... 详细信息

目的研究血浆甲基化SEPT9基因(mSEPT9)在原发性肝癌患者中的表达及临床意义。方法选取2016年5月至2018年10月在西安就诊393例患者资料,其中原发性肝癌组75例、肝硬化组50例、健康对照组268例。应用聚合酶链式反应荧光探针法检测3组外周血浆mSEPT9表达阳性率,并分析其与肝癌临床特征的相关性,同时与电化学发光法检测的甲胎蛋白阳性率进行比较。采用χ^(2)检验或连续性校正的χ^(2)检验进行统计学分析。结果实际有效样本数为367例。肝癌组64例,肝硬化组42例,健康对照组261例,其中获得肝癌病理组织者34例。血浆mSEPT9阳性率在肝癌组明显高于肝硬化与健康对照组[分别为76.6%(49/64)、35.7%(15/42)、3.8%(10/261)],差异均有统计学意义(χ^(2)=176.017,P一检测灵敏度及特异度均明显提高(分别为89.7%、特异度96.3%)。肝癌患者年龄≥50岁、临床分期Ⅱ期以上及病理示中低分化者血浆mSEPT9阳性表达较高,差异均有统计学意义(χ^(2)=6.41、9.279、6.332,P值均一定生存预测价值,故检测该基因在原发性肝癌患者无创诊断及预后评估中具有重要的临床意义,有潜在的临床应用价值。

关键词： SEPT9基因甲基化原发性肝癌诊断临床意义

榄香烯对B细胞淋巴瘤Raji细胞株的体内外抑制作用

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中国临床药理学与治疗学 2011年第8期16卷 874-879页

作者：徐希庄彦章圣辉俞康温州医学院附属第一医院血液科温州医学院附属第一医院医学科学研究所

目的:探讨榄香烯对B细胞淋巴瘤Raji细胞株的体内外作用。方法:不同浓度的榄香烯体外作用Raji细胞不同时间,CCK-8法检测增殖抑制作用,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,DAPI染色进行细胞核形态学分析,PI单染色法检测细胞周期改变;动物... 详细信息

目的:探讨榄香烯对B细胞淋巴瘤Raji细胞株的体内外作用。方法:不同浓度的榄香烯体外作用Raji细胞不同时间,CCK-8法检测增殖抑制作用,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,DAPI染色进行细胞核形态学分析,PI单染色法检测细胞周期改变;动物实验观察榄香烯体内抑瘤作用。结果:榄香烯对Raji细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;榄香烯能诱导Raji细胞凋亡,呈量效关系;DAPI染色显示榄香烯作用Raji细胞具有凋亡细胞核的特征性核形态;细胞周期分析显示G0/G1期细胞相对增多、S期和G2/M期细胞均相对减少;榄香烯明显抑制Raji细胞在SCID小鼠体内增殖。结论:榄香烯对Raji细胞具有明显的增殖抑制作用,其机制可能是通过G0/G1期阻滞导致细胞凋亡发挥效用的。

关键词：榄香烯 Raji细胞细胞凋亡动物实验

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U0126对食管鳞癌细胞迁移的影响

中国老年学杂志 2022年第19期42卷 4745-4749页

作者：刘丹辉齐博刘玉珍陈智赵宝生新乡医学院第一附属医院胸外科河南卫辉453100 新乡医学院食管癌研究所新乡医学院第一附属医院生命科学研究中心

目的探讨丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)1/2抑制剂U0126对食管鳞癌细胞迁移的影响及可能的分子机制。方法培养人食管鳞癌细胞系KYSE-150,Transwell迁移实验和划痕实验评价细胞垂直和横向迁移情况,Western印迹法检测上皮间质转化(EMT)相... 详细信息

目的探讨丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)1/2抑制剂U0126对食管鳞癌细胞迁移的影响及可能的分子机制。方法培养人食管鳞癌细胞系KYSE-150,Transwell迁移实验和划痕实验评价细胞垂直和横向迁移情况,Western印迹法检测上皮间质转化(EMT)相关标记物的蛋白表达。结果Transwell实验结果表明,与对照组相比,不同浓度U0126处理KYSE-150细胞后,细胞垂直向迁移能力明显增强(P<0.05)。细胞划痕实验结果表明,与对照组相比,不同浓度U0126处理KYSE-150细胞后,细胞水平迁移能力明显增强,除0.5μmol/L U012624 h时外,其余差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,U0126处理KYSE-150细胞后,p-ERK1/2、E-cadherin表达明显降低,β-catenin表达明显升高(P<0.05)。结论U0126以剂量依赖的方式促进KYSE-150细胞迁移,其机制可能与下调E-cadherin,上调β-catenin表达有关。

关键词： U0126-EtOH 上皮-间质转化迁移食管鳞癌细胞

慢性间歇性低氧通过Ang Ⅱ-AT1R激活PI3K/Akt促进LLC细胞迁移研究

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中华肿瘤防治杂志 2022年第16期29卷 1184-1193页

作者：赵贞李超红赵宝生刘玉珍新乡医学院第一附属医院生命科学研究中心河南新乡453100 新乡医学院第一附属医院胸外科河南新乡453100 新乡医学院食管癌研究所河南新乡453100

目的探究慢性间歇性低氧(CIH)通过血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-AngⅡ1型受体(AT1R)对小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞迁移的影响以及相关机制。方法将20只小鼠随机分为常氧对照组(10只)和CIH组(10只)。用常氧和CIH处理后的LLC细胞皮下成瘤小鼠血清配制... 详细信息

目的探究慢性间歇性低氧(CIH)通过血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-AngⅡ1型受体(AT1R)对小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞迁移的影响以及相关机制。方法将20只小鼠随机分为常氧对照组(10只)和CIH组(10只)。用常氧和CIH处理后的LLC细胞皮下成瘤小鼠血清配制成完全培养基来培养LLC细胞,检测LLC细胞形态。Transwell检测不同处理方法对LLC细胞迁移的影响;蛋白质印迹法检测LLC细胞迁移相关信号蛋白水平的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小鼠血清与LLC细胞培养基上清中AngⅡ水平。结果ELISA结果显示,CIH组小鼠血清中AngⅡ的水平升高,t=13.948,P=0.008。不同处理方法小鼠血清培养LLC细胞结果显示,CIH组小鼠血清促进LLC细胞形态由上皮样转化为间充质样。Transwell结果显示,Losartan拮抗CIH组小鼠血清对LLC细胞迁移有促进作用,CIH的主效应为F=22.667,P=0.001,Los的主效应为F=29.706,P=0.001,CIH与Los二者间存在交互拮抗效应,F=10.303,P=0.012。用AngⅡ处理LLC细胞后发现,AngⅡ促进LLC细胞形态由上皮样转化为间充质样,Transwell结果显示,AngⅡ以浓度依赖性的方式促进LLC细胞迁移,F=42.497,P=0.003。AngⅡ以及AngⅡ联合使用AT1R拮抗剂Losartan处理LLC细胞,Transwell结果显示,Losartan拮抗AngⅡ对LLC细胞迁移有促进作用,F=53.432,P一步给予LLC细胞间歇性低氧(IH)以及IH联合Losartan处理,ELISA结果显示,IH提高LLC细胞培养基上清液中AngⅡ水平,t=5.022,P<0.001;Transwell结果显示,Losartan拮抗IH对LLC细胞迁移有促进作用,IH的主效应为F=84.587,P<0.001,Los的主效应为F=92.102,P<0.001,IH与Los二者的交互拮抗效应,F=70.097,P<0.001;蛋白质印迹结果显示,Losartan拮抗IH对vimentin(F=49.382,P=0.002)、β-catenin(F=61.919,P=0.002)、MMP2(F=14.132,P<0.001)和p-Akt/Akt(F=100.038,P=0.013)水平有促进作用。结论CIH通过AngⅡ-AT1R激活PI3K/Akt信号通路促进LLC细胞迁移。

关键词：慢性间歇性低氧血管紧张素Ⅱ 血管紧张素Ⅱ1型受体 LLC细胞迁移

低氧通过上调乙酰辅酶A羧化酶1促进肺腺癌A549细胞迁移

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解剖学报 2021年第2期52卷 258-263页

作者：金家豪赵宝生刘丹辉刘玉珍新乡医学院第一附属医院新乡医学院食管癌研究所河南卫辉453100 新乡医学院第一附属医院胸外科河南卫辉453100 新乡医学院第一附属医院生命科学研究中心河南卫辉453100

目的探讨低氧通过乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)促进人肺腺癌A549细胞迁移的机制。方法低氧(5%O2)处理肺腺癌A549细胞,应用Transwell迁移实验检测细胞迁移能力,Western blotting检测ACC1表达及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达水平。结果与常... 详细信息

目的探讨低氧通过乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)促进人肺腺癌A549细胞迁移的机制。方法低氧(5%O2)处理肺腺癌A549细胞,应用Transwell迁移实验检测细胞迁移能力,Western blotting检测ACC1表达及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达水平。结果与常氧(对照组)相比,低氧处理促进了A549细胞的迁移(P0.05);补充亚油酸(LA)恢复低氧对A549细胞的促迁移作用(P<0.05)。结论低氧通过上调ACC1的表达促进肺腺癌A549细胞迁移及EMT转化。

关键词：低氧肺腺癌迁移乙酰辅酶A羧化酶1 免疫印迹法