检索结果-南通市图书馆

狨猴血清中重组人5型腺病毒中和抗体滴度的测定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2016年第4期36卷 582-587页

作者：孙亚纯李婷婷王一琳张玲朱海黎诚耀南方医科大学输血医学系广东广州510515 深圳市易瑞生物技术有限公司广东深圳518101

目的构建表达荧光素酶与绿色荧光蛋白报告基因的重组人5型腺病毒r Ad5/Luc/GFP,检测血清中和抗体最佳实验方法,分析小型灵长类动物普通棉耳狨猴体内腺病毒5型中和抗体水平,为评价腺病毒载体疫苗提供实验动物基础数据。方法利用ADMax包... 详细信息

目的构建表达荧光素酶与绿色荧光蛋白报告基因的重组人5型腺病毒r Ad5/Luc/GFP,检测血清中和抗体最佳实验方法,分析小型灵长类动物普通棉耳狨猴体内腺病毒5型中和抗体水平,为评价腺病毒载体疫苗提供实验动物基础数据。方法利用ADMax包装系统,首先构建穿梭质粒p DC315-Luc-GFP,将所得的穿梭质粒和骨架质粒p BHGloxΔE1,3Cre共转染293A细胞,进行重组人5型腺病毒(r Ad5/Luc/GFP)的包装。通过3次空斑形成实验筛选出单克隆重组腺病毒,并在大量扩增单克隆腺病毒后用Cs Cl密度梯度离心法进行浓缩纯化。采用TCID50法测定纯化后病毒滴度,并挑选进行中和实验的最优病毒滴度。将合适病毒滴度的r Ad5/Luc/GFP与狨猴血清混合预孵育后感染293A细胞,分别采用化学发光法及流式细胞术,对14只普通棉耳狨猴血清中腺病毒5型中和抗体进行检测。结果 PCR、酶切和测序结果均表明穿梭质粒p DC315-Luc-GFP构建成功;GFP检测结果证明重组人5型腺病毒r Ad5/Luc/GFP包装扩增成功,病毒滴度可达6.9×1011.5PFU/m L。两种不同方法检测检测14只狨猴的中和抗体结果一致性较好(P<0.05,Kappa=0.811),化学发光法或流式细胞术检测阳性狨猴比率分别为28.6%(4/14)或21.4%(3/14),化学发光法检测得其中2只狨猴中和抗体滴度为1/16,另2只为1/32,而流式细胞术检测得滴度均为1/16。结论化学发光法是一种快速,准确,适用于多物种的方法,其灵敏度略高于以GFP为报告基因的流式细胞术(7.2%)。普通棉耳狨猴体内Ad5血清阳性率较低,有望应用基于此型或其他型别腺病毒作为载体进行基因治疗和基因疫苗研究。

关键词：普通棉耳狨猴腺病毒5型荧光素酶绿色荧光蛋白中和试验

膜分离技术用于葡萄籽中低聚原花青素分离纯化的工艺研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品工业 2011年第1期32卷 68-70页

作者：陈文良李良华张孝友深圳劲创生物技术有限公司深圳518057

研究膜分离技术分离纯化葡萄籽中低聚原花青素的工艺过程。采用微滤、超滤的膜分离过程,对葡萄籽中低聚原花青素进行分离和提纯。相比于传统的以热浓缩为主的工艺方法,工艺过程引入膜分离的高新技术,工艺简单、高效,耗能少,产品的质量... 详细信息

研究膜分离技术分离纯化葡萄籽中低聚原花青素的工艺过程。采用微滤、超滤的膜分离过程,对葡萄籽中低聚原花青素进行分离和提纯。相比于传统的以热浓缩为主的工艺方法,工艺过程引入膜分离的高新技术,工艺简单、高效,耗能少,产品的质量指标接近国外高端产品,适于产业化的规模应用。同时,采用膜通量及原花青素浓度为考察指标,对超滤过程进行试验探索。结果表明,在1.0 MPa的操作压力下,采用10万道尔分子量规格的膜为最佳选择。具有较大的膜通透性,产品的截留率低(6.2%),且产品中的低聚原花青素的含量较高。

关键词：低聚原花青素膜分离技术

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于能量耗散的岩石损伤特性及其模型研究

煤炭技术 2025年第1期44卷 27-31页

作者：张尧王斌李建华贵州警察学院贵阳550005 煤炭科学技术研究院有限公司北京100013 深圳大学土木与交通工程学院广东深圳518061

为有效预防岩体高能级工程地质灾害的发生,基于能量耗散理论,提出考虑预设围压效应的耗散能函数表达式,推导由威布尔分布函数、能量耗散函数构成的考虑预设围压效应的损伤变量应力-应变数学表达式,构建基于修正后能量耗散函数的煤岩损... 详细信息

为有效预防岩体高能级工程地质灾害的发生,基于能量耗散理论,提出考虑预设围压效应的耗散能函数表达式,推导由威布尔分布函数、能量耗散函数构成的考虑预设围压效应的损伤变量应力-应变数学表达式,构建基于修正后能量耗散函数的煤岩损伤本构模型。结果表明:不同试验围压下煤岩能量变化随轴向应变的增加其演化模式相似,煤岩的能量转化在不同的损伤变形破坏阶段呈阶段性变化;不同围压条件下煤岩损伤变量的变化趋势随轴向应变的增大总体上呈指数增长,均经历了从缓慢增长到快速增长阶段;所构建的基于修正后能量耗散函数的损伤本构模型与试验值具有较高的匹配度,能够较为准确地表征煤岩损伤变形特性;煤岩变形破坏过程中的能量储存及耗散与其损伤状态密切相关,表征煤岩损伤劣化程度的损伤变量与能量耗散之间总体上呈幂函数增长趋势。

关键词：煤岩能量特征变形破坏损伤特性本构模型

α-L-鼠李糖苷酶AnRhaE在毕赤酵母中的表达及应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品与发酵工业 2021年第3期47卷 25-30,35页

作者：叶德晓黄佳俊卢宇靖林育成李慧灵谭景航周金林佛山市汇腾生物技术有限公司广东佛山528225 广东金骏康生物技术有限公司广东佛山528225

α-L-鼠李糖苷酶对天然产物之间的转化具有重要的作用和应用价值。该研究采用毕赤酵母表达α-L-鼠李糖苷酶AnRhaE,构建pPIC9K-AnRhaE表达载体,电转化至毕赤酵母GS115和KM71H中,经诱导表达,SDS-PAGE电泳显示GS115更有利于生产AnRhaE酶。A... 详细信息

α-L-鼠李糖苷酶对天然产物之间的转化具有重要的作用和应用价值。该研究采用毕赤酵母表达α-L-鼠李糖苷酶AnRhaE,构建pPIC9K-AnRhaE表达载体,电转化至毕赤酵母GS115和KM71H中,经诱导表达,SDS-PAGE电泳显示GS115更有利于生产AnRhaE酶。AnRhaE酶在45~55℃时酶活力高,最适温度为55℃,对pH的耐受范围较广,pH 4.5~pH 8时酶活性稳定,最适pH为5。AnRhaE能水解α-1,2、α-1,6和2个鼠李糖苷连接的底物,包括柚苷二氢查耳酮、柚苷、芦丁、新橙皮苷、橙皮苷和朝藿定C等天然产物,但是AnRhaE对α-1,2糖苷键连接的底物具有较高的活性,而对α-1,6糖苷键连接的底物活性较差,对朝藿定C的活性较好,能将朝藿定C完全水解生成淫羊藿苷,因此AnRhaE酶在天然产物之间的转化具有较好的应用价值和前景。

关键词： α-L-鼠李糖苷酶 AnRhaE 毕赤酵母异源表达生物催化天然产物

金属螯合亲和层析法纯化抗乙肝核心抗原单克隆抗体

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物工程学报 2009年第10期25卷 1572-1578页

作者：祝骥易喻吴银飞朱克寅梅建凤陈建澍应国清浙江工业大学药学院杭州310014 艾博生物医药(杭州)有限公司杭州310018 杭州博林生物技术有限公司杭州310018

采用金属螯合亲和层析法,纯化了小鼠腹水来源的抗乙肝核心抗原单克隆抗体,对上样缓冲液的pH和离子强度、洗脱液种类和洗脱方式进行优化。结果表明,采用降低pH分步洗脱时,最佳上样缓冲液为pH8.0,20mmol/LPB+0.5mol/LNaCl,抗体在pH5.0被... 详细信息

采用金属螯合亲和层析法,纯化了小鼠腹水来源的抗乙肝核心抗原单克隆抗体,对上样缓冲液的pH和离子强度、洗脱液种类和洗脱方式进行优化。结果表明,采用降低pH分步洗脱时,最佳上样缓冲液为pH8.0,20mmol/LPB+0.5mol/LNaCl,抗体在pH5.0被洗脱下来,抗体回收率80%,纯度85%。采用咪唑浓度梯度洗脱时,最佳的上样缓冲液为pH8.0,20mmol/LPB+5mmol/L咪唑,抗体纯度大于95%,回收率65%;在上样缓冲液中不添加NaCl而添加少量的咪唑,更有利于抗体分离。以上洗脱方式都能较好地保持mAb的生物学活性,为该抗体的应用提供了必要的实验基础。

关键词：金属螯合亲和层析单克隆抗体乙肝核心抗原小鼠腹水

NK及CAR-NK细胞在肿瘤过继免疫治疗中的运用现状及研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国新药杂志 2017年第15期26卷 1806-1813页

作者：徐道俊段清堂刘馨云南沃森生物技术股份有限公司昆明650106 玉溪嘉和生物技术有限公司玉溪653100

NK细胞及CAR-NK细胞作为肿瘤过继免疫细胞治疗技术之一,展现出细胞毒性能力强、经济、off-the-self(现成的)、容易规模化制备的特点,特别在实体瘤临床运用中展现出很好的疗效。文章主要对NK及CAR-NK细胞在肿瘤过继免疫治疗中的运用现状... 详细信息

NK细胞及CAR-NK细胞作为肿瘤过继免疫细胞治疗技术之一,展现出细胞毒性能力强、经济、off-the-self(现成的)、容易规模化制备的特点,特别在实体瘤临床运用中展现出很好的疗效。文章主要对NK及CAR-NK细胞在肿瘤过继免疫治疗中的运用现状及研究进展进行了综述。

关键词： NK细胞嵌合抗原受体修饰的NK细胞肿瘤过继免疫治疗临床研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

甜菜夜蛾人工饲料及饲养技术研究

昆虫知识 2001年第5期38卷 383-386页

作者：李腾武杨崇珍何将绪杨红峰王兴林深圳瑞德丰农药有限公司

研究了人工继代繁殖甜菜夜蛾饲料配方及饲养方法 ,测定了各虫态发育历期、幼虫死亡率、化蛹率、羽化率、蛹畸形率及不同世代蛹重。采用改进的饲料配方饲养的深圳种群 ,第 2代幼虫死亡率、化蛹率、蛹畸形率、羽化率分别为 7 8% ,97 3 % ,... 详细信息

研究了人工继代繁殖甜菜夜蛾饲料配方及饲养方法 ,测定了各虫态发育历期、幼虫死亡率、化蛹率、羽化率、蛹畸形率及不同世代蛹重。采用改进的饲料配方饲养的深圳种群 ,第 2代幼虫死亡率、化蛹率、蛹畸形率、羽化率分别为 7 8% ,97 3 % ,2 7%和 93 8% ,第 2 ,5 ,9,1 2代平均单头蛹重分别为 1 1 9 7± 1 6 1 ,98 3± 1 1 4,94 3± 1 2 6和 82 4± 9 6mg,平均单雌产卵量分别为 1 1 3 7 2± 63 3 ,684 5± 5 3 7,45 6 9± 40 2和 3 91 7± 45 6粒。人工饲养的甜菜夜蛾 ,卵、幼虫、蛹、雌性成虫的发育历期分别为 2 5～3 5 ,1 0～ 1 2 5 ,7～ 8 5和 8～ 1 4天 ,完成一个世代需要 2 1～ 2 5天。

关键词：甜菜夜蛾人工饲料继代饲养技术虫态

不同pH与蛋白含量的胶原海绵植入缺损骨组织部位的疗效及安全性考察

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物医学工程学杂志 2012年第6期29卷 1125-1130页

作者：佟刚雷静钟翠红蔡伟信林雪微广州创尔生物技术有限公司广州510663

手术构建家兔桡骨3mm完全缺损的骨折模型,在骨缺损部位植入不同pH及蛋白含量的胶原海绵,各组动物于术后进行体温测量、血常规、血清抗体、X光片及组织病理检查,考察胶原海绵的疗效和安全性。结果发现胶原海绵具有良好的安全性,但在血常... 详细信息

手术构建家兔桡骨3mm完全缺损的骨折模型,在骨缺损部位植入不同pH及蛋白含量的胶原海绵,各组动物于术后进行体温测量、血常规、血清抗体、X光片及组织病理检查,考察胶原海绵的疗效和安全性。结果发现胶原海绵具有良好的安全性,但在血常规、血清抗体水平、病理等方面,随着pH及胶原含量变化会呈现轻微的改变,表明不同pH胶原海绵对组织无明显的安全性影响,低pH条件在一定程度上可促进缺损组织愈合,但会影响血常规及血清抗体水平;而低含量组海绵的安全性更佳。

关键词：胶原海绵 pH 蛋白含量疗效安全性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

卷积法在体内外相关性研究中的应用

药学学报 2009年第1期44卷 19-24页

作者：岳鹏上海华谊生物技术有限公司上海200235

本文介绍了体内外相关性和卷积法/反卷积法的概念及原理,阐述了采用卷积法使用Excel根据制剂的药代动力学数据计算其在体内释放行为的策略及方法,并用于体内外相关性研究。该法用数学软件对药代动力学数据进行拟合以弥补缺失的数据点,... 详细信息

本文介绍了体内外相关性和卷积法/反卷积法的概念及原理,阐述了采用卷积法使用Excel根据制剂的药代动力学数据计算其在体内释放行为的策略及方法,并用于体内外相关性研究。该法用数学软件对药代动力学数据进行拟合以弥补缺失的数据点,在假设输入函数基本符合威布尔规律的前提下,在Excel中根据卷积法原理以试错法的方式确定拟合度最佳的输入函数(威布尔函数)参数,最后以拟合度最佳的输入函数作为制剂的体内释放行为与体外释放数据进行相关性研究。在实例中不仅详细说明了该法的应用,并且通过与隔室模型法和反卷积法的比较证明此方法简单有效,可以作为体内外相关性研究的有力工具。

关键词：卷积法体内外相关性 Excel