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异功散通过调控脑水液代谢改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力

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南方医科大学学报 2024年第10期44卷 2015-2023页

作者：曾静花雷阳勇张小梅魏江平李利生中药新药创制川渝共建重点实验室国家中医药管理局中药化学三级实验室重庆市中药研究院重庆400065 遵义医科大学基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室贵州遵义563000 遵义医科大学贵州省基础药理重点实验室//药学院药理学教研室贵州遵义563000

目的观察异功散对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响,并从调控脑水液代谢系统探讨异功散抗痴呆的作用机制。方法将3月龄雄性APP/PS1转基因小鼠及同龄同背景野生型C57BL/6小鼠随机分为4组(8只/组):对照组、模型组、多奈哌齐(1.67 mg/kg)组... 详细信息

目的观察异功散对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响,并从调控脑水液代谢系统探讨异功散抗痴呆的作用机制。方法将3月龄雄性APP/PS1转基因小鼠及同龄同背景野生型C57BL/6小鼠随机分为4组(8只/组):对照组、模型组、多奈哌齐(1.67 mg/kg)组、异功散(7.5 g/kg)组。灌胃给予各组对应药物1次/d,1月后采用Morris水迷宫实验考察小鼠的学习记忆能力;HE染色观察海马皮层组织病理形态学变化;免疫组化染色、硫磺素S染色观察脑内淀粉样蛋白斑块数量变化;ELISA法检测脑组织和血清Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)含量;伊文思蓝法检测血脑屏障(BBB)通透性变化;免疫荧光共定位考察AQP4在星型胶质细胞上极化情况;Western blotting观察血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、闭锁连接蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、β-淀粉样前体蛋白(APP)、β-分泌酶(BACE1)、胰岛素降解酶(IDE)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、水通道蛋白4(AQP4)蛋白表达情况。结果与对照组比较,APP/PS1小鼠第5天的逃避潜伏期显著延长(P0.05);海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量减少且病理评分降低(P<0.01);Aβ阳性斑块减少以及硫磺素S荧光强度减弱(P<0.05);脑组织和血清Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量降低(P<0.05);维持了BBB通透性(P<0.01),RAGE蛋白表达下调(P<0.05),而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达上调(P<0.05),且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量明显增加(P<0.01)。结论异功散能够通过改善APP/PS1小鼠脑内神经细胞损伤、Aβ病变,调控脑水液代谢系统相关蛋白表达而改善学习记忆变化。

关键词：异功散痴呆症脑水液代谢系统 APP/PS1小鼠 AQP4

香叶醇通过调控Nrf2/HO-1途径调节氧化应激减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤

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中国药理学通报 2024年第3期40卷 431-439页

作者：罗佳吴宇刘京东陈莎董志重庆医科大学药学院重庆市生物化学与分子药理重点实验室重庆400016

目的研究香叶醇对脑缺血/再灌注(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)后Nrf2/HO-1信号通路的调控作用。方法随机将雄性SD大鼠分成假手术组(sham)、假手术+200 mg·kg^(-1)香叶醇组、缺血/再灌注(I/R)组、I/R+50 mg·kg^(-1)香叶醇组、I/R+100 mg·kg^(-1)香叶醇组、I/R+200 mg·kg^(-1)香叶醇组、依达拉奉组,I/R+brusatol(Nrf2抑制剂)组、I/R+200 mg·kg^(-1)香叶醇+brusatol组。大鼠在MCAO术前5 d连续腹腔注射香叶醇,术后再次腹腔注射香叶醇。假手术组和假手术+200 mg·kg^(-1)香叶醇组只分离血管不插栓线,其余组别使用线栓法建立大鼠CIRI损伤模型。通过改良神经功能评分表评定大鼠神经功能受损情况;TTC脑片染色测定大鼠脑梗死体积;HE染色观察大鼠缺血侧皮层受损情况;TUNEL凋亡染色测定大鼠皮层细胞凋亡情况;测定氧化应激相关参数;免疫组织化学染色法检测Nrf2和HO-1蛋白的表达;Western blot检测受损侧皮层组织中目的蛋白表达水平。结果与模型组相比,香叶醇给药组能明显改善大鼠神经损伤症状、减少脑梗死体积和改善大鼠脑受损皮层的损伤情况;同时减少细胞凋亡的发生;并且香叶醇干预组能明显增加大鼠右侧皮质Nrf2/HO-1蛋白的表达,降低氧化应激水平。结论香叶醇通过激活Nrf2/HO-1信号途径,改善缺血/再灌注所致的大鼠缺血性脑损伤。

关键词：脑缺血/再灌注损伤氧化应激细胞凋亡香叶醇 Nrf2 HO-1

异功散通过调控脑水液代谢改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力

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南方医科大学学报 2024年

作者：曾静花雷阳勇张小梅魏江平李利生中药新药创制川渝共建重点实验室重庆市中药研究院国家中医药管理局中药化学三级实验室重庆市中药研究院遵义医科大学基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室遵义医科大学贵州省基础药理重点实验室//药学院药理学教研室

目的观察异功散对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响，并从调控脑水液代谢系统探讨异功散抗痴呆的作用机制。方法将3月龄雄性APP/PS1转基因小鼠及同龄同背景野生型C57BL/6小鼠随机分为4组（8只/组）：对照组、模型组、多奈哌齐（1.67 mg/k... 详细信息

目的观察异功散对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响，并从调控脑水液代谢系统探讨异功散抗痴呆的作用机制。方法将3月龄雄性APP/PS1转基因小鼠及同龄同背景野生型C57BL/6小鼠随机分为4组（8只/组）：对照组、模型组、多奈哌齐（1.67 mg/kg）组、异功散（7.5 g/kg）组。灌胃给予各组对应药物1次/d,1月后采用Morris水迷宫实验考察小鼠的学习记忆能力；HE染色观察海马皮层组织病理形态学变化；免疫组化染色、硫磺素S染色观察脑内淀粉样蛋白斑块数量变化；ELISA法检测脑组织和血清Aβ1-40和Aβ1-42含量；伊文思蓝法检测血脑屏障（BBB）通透性变化；免疫荧光共定位考察AQP4在星型胶质细胞上极化情况；Western blotting观察血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）、闭锁连接蛋白1(ZO-1）、闭合蛋白（Occludin）、β-淀粉样前体蛋白（APP）、β-分泌酶（BACE1）、胰岛素降解酶（IDE）、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1）、晚期糖基化终末产物受体（RAGE）、水通道蛋白4(AQP4）蛋白表达情况。结果与对照组比较，APP/PS1小鼠第5天的逃避潜伏期显著延长（P0.05）；海马和皮层神经细胞变性或坏死细胞数量减少且病理评分降低（P<0.01);Aβ阳性斑块减少以及硫磺素S荧光强度减弱（P<0.05）；脑组织和血清Aβ1-40、Aβ1-42含量降低（P<0.05）；维持了BBB通透性（P<0.01),RAGE蛋白表达下调（P<0.05），而VE-cadherin、LRP1、ZO-1、Occludin、AQP4蛋白表达上调（P<0.05），且AQP4在GFAP阳性细胞上表达的数量明显增加（P<0.01）。结论异功散能够通过改善APP/PS1小鼠脑内神经细胞损伤、Aβ病变，调控脑水液代谢系统相关蛋白表达而改善学习记忆变化。

关键词：异功散痴呆症脑水液代谢系统 APP/PS1小鼠 AQP4

葛根芩连汤成分间自组装纳米粒改善伊立替康所致肠毒性作用研究

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中草药 2024年第12期55卷 3987-3997页

作者：吴淑洋杨晓琴成威键李敏李楠章津铭吴亿晗成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室中药材标准化教育部重点实验室四川成都611137

目的基于中药经典复方葛根芩连汤(Gegen Qinlian decoction,GQD)合煎过程中成分间相互作用,探讨其代表性成分葛根素、小檗碱、汉黄芩苷、黄芩苷、甘草酸、巴马汀体外结合形成自组装纳米粒的性能及改善伊立替康(CPT-11)所致肠毒性作用的... 详细信息

目的基于中药经典复方葛根芩连汤(Gegen Qinlian decoction,GQD)合煎过程中成分间相互作用,探讨其代表性成分葛根素、小檗碱、汉黄芩苷、黄芩苷、甘草酸、巴马汀体外结合形成自组装纳米粒的性能及改善伊立替康(CPT-11)所致肠毒性作用的药理活性,为来源于中药汤剂的活性成分间的自组装纳米粒提供参考。方法采用溶剂挥发法分别制备小檗碱-汉黄芩苷自组装纳米粒(berberine-wogonoside nanoparticles,Ber-Wog NPs)、小檗碱-葛根素自组装纳米粒(berberine-puerarin nanoparticles,Ber-Pue NPs)、黄芩苷-葛根素自组装纳米粒(baicalin-puerarin nanoparticles,Bai-Pue NPs)、黄芩苷-巴马汀自组装纳米粒(baicalin-palmatine nanoparticles,Bai-Pal NPs)、黄芩苷-甘草酸自组装纳米粒(baicalin-glycyrrhizic acid nanoparticles,Bai-GA NPs)5种组分自组装纳米粒,测定其粒径分布、多分散指数(polydispersity index,PDI)、包封率、载药量,采用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察其微观形貌,紫外光谱和傅里叶红外光谱考察成分间相互作用;考察5种组分自组装纳米粒缓解CPT-11致小鼠迟发性腹泻的药理作用。结果组分间按1∶1投药比,制备所得Ber-Wog NPs、Ber-Pue NPs、Bai-Pue NPs、Bai-Pal NPs、Bai-GA NPs的平均粒径分别为(198.09±4.64)、(216.29±5.31)、(173.53±5.46)、(185.75±3.38)、(242.10±12.30)nm;PDI分别为0.14±0.06、0.13±0.06、0.19±0.03、0.19±0.01、0.21±0.05,TEM观察均为球状纳米粒,除Ber-Wog NPs外,其余4种纳米粒包封率均较高。紫外可见吸收光谱和红外光谱提示,5种纳米粒的组装均是通过分子间非共价键作用形成;分子对接模型进一步提示,其形成机制与分子间静电相互作用或氢键相关。药效试验结果显示,制剂组可缓解小鼠体质量降低,腹泻指数降低,结肠组织炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin,IL-1β)含量降低,IL-10含量升高;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE染色)显示结肠黏膜组织病变显著缓解。结论GQD来源的几种代表性成分可高效自组装形成纳米粒,且具有类似GQD缓解CPT-11所致肠毒性作用,为研究传统中药汤剂药效物质基础形态与药效的相关性提供了新思路。

关键词：葛根芩连汤自组装纳米粒肠毒性成分互作葛根素小檗碱汉黄芩苷黄芩苷甘草酸巴马汀溶剂挥发法腹泻

吲哚衍生物的结构修饰及其抗乳腺癌作用研究进展

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药物评价研究 2024年第2期47卷 419-429页

作者：方玉秋王薪淇齐学洁段莉莉琚辉天津中医药大学中药学院天津市中药功效物质研究重点实验室天津301617

吲哚是平面杂环分子,对乳腺癌、肺癌、结肠癌等具有广泛的抗癌活性,在药物设计中发挥重要作用。从吲哚-3-甲醇及其代谢产物3,3′-二吲哚甲烷的结构修饰、吲哚骨架结构修饰、氧化吲哚衍生物及氮杂吲哚衍生物的结构修饰入手,并综合吲哚衍... 详细信息

吲哚是平面杂环分子,对乳腺癌、肺癌、结肠癌等具有广泛的抗癌活性,在药物设计中发挥重要作用。从吲哚-3-甲醇及其代谢产物3,3′-二吲哚甲烷的结构修饰、吲哚骨架结构修饰、氧化吲哚衍生物及氮杂吲哚衍生物的结构修饰入手,并综合吲哚衍生物对Lumina型乳腺癌、三阴性乳腺癌、人表皮生长因子受体2(HER-2)过表达型乳腺癌的影响,从细胞水平、乳腺癌相关蛋白、受体、经典通路、体内外药理模型建立以及相关指标的变化等方面对其抗乳腺癌作用进行系统综述,以期为抗乳腺癌新药研发提供依据。

关键词：吲哚-3-甲醇吲哚氧化吲哚氮杂吲哚乳腺癌人表皮生长因子受体2(HER-2)

基于总量统计矩分析法与分子连接性指数探讨枳实、枳壳“同源异效”的物质基础

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 161-168页

作者：袁筱吴月峰李世雄刘有志于芷芩贺福元周晋湖南中医药大学药学院中药成药性与制剂制备湖南省重点实验室中医药超分子机理与数理特征化实验室长沙410208

目的:基于总量统计矩分析法与分子连接性指数(MCI)探讨枳实与枳壳“同源异效”的物质基础。方法:查阅国内外相关文献和中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),建立枳实、枳壳的化学成分数据库,建立其超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,... 详细信息

目的:基于总量统计矩分析法与分子连接性指数(MCI)探讨枳实与枳壳“同源异效”的物质基础。方法:查阅国内外相关文献和中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),建立枳实、枳壳的化学成分数据库,建立其超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,计算指纹图谱总量统计矩及其相似度参数;根据MCI将枳实、枳壳所有成分划分为不同的成分群;计算枳实、枳壳共有成分群0~8阶(^(0)χ~^(8)χ)MCI平均值。结果:枳实与枳壳的总量零阶矩(AUCT)分别为(10.57±2.45)×10^(6)、(5.09±0.89)×10^(6)μV·s,总量一阶矩(MCRT_(T))分别为(11.57±1.58)、(12.10±1.29)min,总量二阶矩(VCRTT)分别为(24.49±2.30)、(26.49±2.54)min^(2),表明枳实与枳壳定性、定量参数都存在明显差异;筛选出新橙皮苷、橙皮苷、芸香柚皮苷等相似度高的成分作为枳实、枳壳共有潜在药效成分;筛选出枳实中非共有成分alysifolinone、欧前胡素等,枳壳中非共有成分新北美圣草苷、异樱花苷等相似度高的作为枳实、枳壳各自潜在“异效”成分;将枳实与枳壳成分群划分为六类,枳实、枳壳成分群与总成分之间的相似度分别在0.872~0.979、0.918~0.997,枳实与枳壳的生物碱类成分^(0)χ~^(8)χMCI平均值分别为3.65、3.14,黄酮类成分^(0)χ~^(8)χMCI平均值均为8.47,挥发油类成分^(0)χ~^(8)χMCI平均值分别为2.71、3.48,表明枳实与枳壳化学成分(群)MCI存在一定差异。结论:枳实与枳壳化学成分(群)不仅是含量与种类的差异,其结构特点及构效关系也存在差异,可为深入阐释枳实、枳壳“同源异效”的科学内涵提供依据。

关键词：枳实枳壳同源异效分子连接性指数(MCI) 总量统计矩指纹图谱超高效液相色谱法(UPLC) 物质基础

基于代谢组学探讨首荟通便胶囊对脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用及机制研究

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中国中药杂志 2024年

作者：韦方娇张丛慧王秀文汪琨王志康姚景春张贵民山东中医药大学药学院临沂市天然药物免疫药理毒理重点实验室鲁南制药集团股份有限公司经方与现代中药融合创新全国重点实验室

探讨首荟通便胶囊（SHTB）对大鼠脑缺血再灌注模型的保护作用及潜在机制。将大鼠随机分为假手术组、模型组、首荟通便胶囊低剂量组(0.2 g·kg-1·d-1) 、首荟通便胶囊高剂量组(0.4g·kg-1·d-1)、依达拉奉阳性药组(5.4 mg·kg-1·d-1)... 详细信息

探讨首荟通便胶囊（SHTB）对大鼠脑缺血再灌注模型的保护作用及潜在机制。将大鼠随机分为假手术组、模型组、首荟通便胶囊低剂量组(0.2 g·kg-1·d-1) 、首荟通便胶囊高剂量组(0.4g·kg-1·d-1)、依达拉奉阳性药组(5.4 mg·kg-1·d-1)，每组 12只。大鼠于术前7 d连续灌胃给药，使用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia-reperfusion injury，CIRI）模型。通过Zea-Longa 等级神经功能评分表评定大鼠神经功能受损情况；苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠脑组织病理损伤情况；2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测定大鼠脑梗死体积；酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒检测各组大鼠血清白细胞介素-6 （interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-1β （interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α （tumor necrosis factor-α，TNF-α）的水平；蛋白免疫印记（Western blot）技术检测大鼠血脑屏障以及肠道屏障相关紧密连接蛋白水平和脑组织Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4），髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）和核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白表达；超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）检测大鼠脑组织和血清代谢物的变化，挖掘出SHTB治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的潜在机制。与模型组相比，SHTB可明显缓解脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia/reperfusion injury，CIRI）大鼠脑部病理损伤，减少脑梗体积，降低血清中炎症水平；Western blot 结果显示，与模型组相比，SHTB 能够调控CIRI大鼠血脑屏障及肠道屏障相关紧密连接蛋白的表达，下调脑组织TLR4、NF-κB、MyD88蛋白表达；UPLC-MS/MS结果表明，SHTB可显著调节脂肪酸类等潜在差异代谢物的含量，血清与脑组织的共有通路涉及不饱和脂肪酸生物合成等通路。SHTB可修复肠道屏障功能，降低机体炎症水平，进而改善受损的血脑屏障，发挥保护脑神经的作用，其机制可能是通过平衡脂肪酸代谢，调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白的表达来实现。

关键词：首荟通便胶囊脑缺血再灌注血脑屏障肠道屏障炎症代谢组学

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食品工业科技 2024年

作者：陈祖德马博稷肖岩舒任庚李冰涛姜丽徐国良张启云江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心江西中医药大学药学院江西省中医病因生物学重点实验室江西省中药药理学重点实验室

目的：为快速筛选青钱柳提取物中的α-葡萄糖苷酶抑制剂，采用亲和超滤-液质联用技术结合相关性分析探究其有效成分与酶抑制活性间的关系。方法：运用大孔吸附树脂，建立青钱柳不同浓度乙醇洗脱液中相同化学成分量变化矩阵(X 矩阵)；分... 详细信息

目的：为快速筛选青钱柳提取物中的α-葡萄糖苷酶抑制剂，采用亲和超滤-液质联用技术结合相关性分析探究其有效成分与酶抑制活性间的关系。方法：运用大孔吸附树脂，建立青钱柳不同浓度乙醇洗脱液中相同化学成分量变化矩阵(X 矩阵)；分析各乙醇洗脱部位体外α-葡萄糖苷酶抑制作用，构建效应矩阵(Y矩阵)；通过偏最小二乘回归法(Partial least squares regression，PLS)预测潜在的活性成分与亲和超滤法(Affinity ultrafiltration，AUF)所筛选的化合物进行比对并通过分子对接进行验证。结果：青钱柳50%乙醇总提取物IC50值为14.8 μg/mL，经大孔树脂吸附后的10%～80%浓度乙醇洗脱液IC50为5.4～204.1 μg/mL。通过AUF法与相关性分析在正、负离子模式下共鉴定出10种青钱柳潜在的活性成分，其中鉴定出8种三萜类化合物、2种黄酮类化合物。进一步的分子对接结果表明，上述10种活性成分与α-葡萄糖苷酶对接的结合能小于-7.0 kcal·mol-1，其中熊果酸内酯的结合能最低(-10.0 kcal·mol-1)。结论：AUF与相关性分析相结合能快速筛选出青钱柳提取物中潜在的α-葡萄苷酶抑制剂，本研究结果可为进一步明确青钱柳活性成分奠定基础，为其活性成分质量控制研究、功能性食品开发的深入研究提供依据。

关键词：青钱柳亲和超滤超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(UHPLC-Q-TOF-MS/MS) 偏最小二乘回归法(PLS) 分子对接

基于氨基酸成分的淡水珍珠及海水珍珠对比分析及近红外快速检测

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中草药 2024年第10期55卷 3477-3486页

作者：张紫涵王香颖李思维李启龙甘柳霜郝二伟杜正彩侯媛媛白钢邓家刚侯小涛广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西中医药大学广西中药药效研究重点实验室广西南宁530200 农作物废弃物功能成分研究协同创新中心广西南宁530200 广西中医湿病方药理论与转化重点实验室广西南宁530200 南开大学药学院天津市分子药物研究重点实验室天津300071

目的基于关键氨基酸的含量差异,通过近红外技术实现淡水与海水珍珠的快速检测。方法采用氨基酸分析仪考察108批次海水珍珠与淡水珍珠氨基酸种类与含量差异,依据氨基酸比较分析筛选关键氨基酸。针对关键氨基酸优化近红外定量模型,确立近... 详细信息

目的基于关键氨基酸的含量差异,通过近红外技术实现淡水与海水珍珠的快速检测。方法采用氨基酸分析仪考察108批次海水珍珠与淡水珍珠氨基酸种类与含量差异,依据氨基酸比较分析筛选关键氨基酸。针对关键氨基酸优化近红外定量模型,确立近红外光谱技术珍珠快速检测模型。结果研究发现天冬氨酸(Asp)和甘氨酸(Gly)含量在淡水珍珠与海水珍珠有显著差异,且两者含量范围无交集。通过珍珠近红外光谱与Asp、Gly含量化学计量学拟合对珍珠样品进行检测,所得结果与传统的氨基酸分析技术测定结果一致。结论基于化学计量学手段对珍珠的定量分析,结果准确可靠,结合近红外光谱技术对不同基原珍珠进行快速检测,为珍珠的质量控制提供方法依据。

关键词：珍珠氨基酸定量测定近红外光谱技术快速检测