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猪札幌病毒荧光定量RT-PCR检测方法建立及遗传进化分析

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病毒学报 2024年第4期 811-822页

作者：杜松舒相华姚俊袁红张雪宋春莲云南农业大学云南省畜牧兽医科学院

猪札幌病毒（Porcine sapovirus,PoSaV）是一种引起猪急性胃肠炎的肠道病毒，对于生猪养殖业造成严重威胁。PoSaV感染猪只表现出的症状与其他腹泻病毒引起的症状相似，难以区分。为了检测该病毒并了解其在猪场中的流行情况，我们建立了... 详细信息

猪札幌病毒（Porcine sapovirus,PoSaV）是一种引起猪急性胃肠炎的肠道病毒，对于生猪养殖业造成严重威胁。PoSaV感染猪只表现出的症状与其他腹泻病毒引起的症状相似，难以区分。为了检测该病毒并了解其在猪场中的流行情况，我们建立了一种PoSaV检测方法。本研究根据GenBank中GIII基因型，设计引物，优化反应条件，通过特异性评价，灵敏度和重复性检测，建立荧光定量RT-PCR方法。本试验从贵州省获取20份腹泻母猪肛拭子样品，通过RT-PCR进行检测，并进行VP1全基因扩增测序，使用MEGA7.0进行系统进化树构建和同源性分析。结果显示，建立的荧光定量RT-PCR检测方法具有较强特异性和高灵敏度，在拷贝值为1×101·μL-1时可以达到普通RT-PCR方法 100倍以上的检出限。此外，该方法具有良好的重复性和稳定性，批内变异系数与批间变异系数均小于1%；在检测猪腹泻临床样本中发现阳性率为85%(17/20)。将获得的17条VP1全基因序列与国内外14条参考毒株进行比对，结果显示：所有测序毒株与参考序列核苷酸同源性介于81.0%-99.2%，氨基酸同源性介于80.8%-97.6%，并且均与美国经典Cowden毒株亲缘性较远。所有测序毒株与YNAN、YNAN2020亲缘性较近，其中5株（GZ-VP1-3、GZ-VP1-5、GZ-VP1-6、GZ-VP1-9、GZ-VP1-11）与云南省分离株YNAN核苷酸及氨基酸同源性为99.2%、96.9%-97.6%，亲缘性最为亲近，表明可能由一个原始毒株进化而来。测序毒株均在同一分支上亲缘性较近，但核苷酸及氨基酸同源性在91.8%-100%，显示VPl基因存在一定程度变异。本研究成功建立一种PoSaV检测方法，深入分析了当前毒株的遗传变异情况，对PoSaV防控有着一定的启示作用。

关键词：猪札幌病毒荧光定量PCR VP1基因遗传进化分析

高寒区‘青引1号’燕麦种子产量对氮、磷、钾肥的响应

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草业科学 2024年第2期41卷 345-355页

作者：刘慢刘文辉刘凯强贾志锋梁国玲青海省畜牧兽医科学院青海西宁810016

为明确青藏高原高寒地区施用氮、磷、钾肥对‘青引1号’燕麦(Avena sativa‘Qingyin No.1’)种子产量的影响,本研究以‘青引1号’燕麦为研究对象,在青海省西宁市湟中区分别设置氮磷钾单施试验,其中氮肥水平为(N_(0)、N_(30)、N_(45)、N_... 详细信息

为明确青藏高原高寒地区施用氮、磷、钾肥对‘青引1号’燕麦(Avena sativa‘Qingyin No.1’)种子产量的影响,本研究以‘青引1号’燕麦为研究对象,在青海省西宁市湟中区分别设置氮磷钾单施试验,其中氮肥水平为(N_(0)、N_(30)、N_(45)、N_(60)、N_(75)、N_(90)和N_(105))、磷肥水平为(P_(0)、P_(15)、P_(30)、P_(45)、P_(60)、P_(75)和P_(90))、钾肥水平为(K_(0)、K_(10)、K_(20)、K_(30)、K_(40)、K_(50)和K_(60))。以确定最佳施肥水平,明确不同肥料对燕麦种子增产的效果,完善该品种在种子生产过程中的肥料管理技术,为青海地区燕麦种子生产中肥料的施用配比提供科学指导。结果表明:氮、磷、钾肥分别以60、60和50kg·hm^(-2)处理时种子产量最高,分别达4 358.6、6 285.0和6 729.1 kg·hm^(-2),以钾肥对燕麦种子增产效果最为明显;氮肥可显著提高燕麦小穗数、穗长和千粒重,磷肥可促进燕麦有效分蘖、粒宽和单序籽粒重增加,而钾肥则有助于有效分蘖数、粒长、粒宽、单序籽粒重和千粒重提升;氮、磷、钾肥单施水平下以粒宽和小穗数对种子产量直接效应最大,小花数和粒宽通过对其他产量性状的间接作用对种子产量产生增益效果。高寒地区‘青引1号’燕麦种子生产中,钾肥的施用可有效提高‘青引1号’燕麦种子产量。

关键词：施肥水平燕麦高寒地区通径分析氮磷钾回归分析产量性状

青海冬虫夏草不同产区土壤理化性质对微生物多样性的影响

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西南农业学报 2024年第4期37卷 824-834页

作者：贺辉陈建博王涛唐楚煜梁静曹正飞肖梦君何敏李玉玲李秀璋青海大学畜牧兽医科学院西宁810016

[目的]探究青海省冬虫夏草产区土壤理化因子和微生物之间的关系,以期为人工冬虫夏草培养基质的进一步完善提供参考。[方法]以海东市化隆回族自治县(HL)、黄南藏族自治州河南蒙古族自治县(HN)、海南藏族自治州兴海县(XH)、果洛藏族自治... 详细信息

[目的]探究青海省冬虫夏草产区土壤理化因子和微生物之间的关系,以期为人工冬虫夏草培养基质的进一步完善提供参考。[方法]以海东市化隆回族自治县(HL)、黄南藏族自治州河南蒙古族自治县(HN)、海南藏族自治州兴海县(XH)、果洛藏族自治州达日县(DR)、果洛藏族自治州玛沁县(MQ)、玉树藏族自治州杂多县(ZD)和玉树藏族自治州果青牧场(GQ)7个具有代表性的青海省冬虫夏草主产区为试验样地。分别采用重铬酸钾-外加热法、凯氏定氮法、碱熔法、酸溶法、邻菲啰啉比色法、火焰原子吸收分光光度法、火焰光度法及高碘酸钾比色法对土壤相应理化性质进行测定;微生物含量及种类采用Illumina测序技术进行测定,研究产区土壤理化性质对微生物多样性的影响。[结果]大多数土壤理化因子在各产区差异不大。微生物在各产区组成相似,其中真菌优势群落的多样性和丰富度在不同产区间存在一定差异。细菌群落中,变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和酸杆菌门(Acidobacteria)为细菌优势门,Subgroup_6、假单胞菌属(Pseudomonas)和RB41等为细菌优势属;真菌群落中,担子菌门(Basidiomycota)、子囊菌门(Ascomycota)和被孢霉门(Mortierellomycota)为真菌优势门,湿伞属(Hygrocybe)、蜡壳耳属(Sebacina)和被孢霉属(Mortierella)等为真菌优势属。产区土壤理化性质与微生物群落冗余分析结果显示,细菌放线菌门(Actinobacteria)与土壤pH、铁(Fe)元素呈极显著正相关(P<0.01),RB41、Nitrospira和Subgroup_6与全钾(TK)、全磷(TP)、有机质(OM)、锰(Mn)和钠(Na)均呈显著负相关(P<0.05);真菌被孢霉门(Mortierellomycota)与TP呈正相关,子囊菌门(Ascomycota)与TK、全氮(TN)、OM呈负相关,土壤pH与多数真菌优势属均呈正相关。[结论]进一步证实土壤理化因子和微生物之间存在明显的相关性。其中,土壤pH、OM、Na和Fe与冬虫夏草产区的多数微生物群落存在显著相关性(P<0.05),可能是影响微生物群落结构的关键驱动因子。

关键词：冬虫夏草有机质全氮全磷土壤微生物

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基于线粒体全基因组的柴达木牛母系遗传多样性、群体结构及系统发育分析

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西北农林科技大学学报(自然科学版) 2024年 1-12页

作者：魏旭东刘瑞林李瑞哲张卫忠王启辉赵海明郭卫兴许正全尕藏当周韩赟雷初朝马志杰青海大学畜牧兽医科学院青海省高原家畜遗传资源保护与创新利用重点实验室农业农村部青藏高原畜禽遗传育种重点实验室青海省格尔木市畜牧兽医站青海省格尔木市郭勒木德乡畜牧兽医站青海省格尔木市乌图美仁乡畜牧兽医站青海省都兰县宗加镇畜牧兽医站青海省乌兰县畜牧兽医站西北农林科技大学动物科技学院

【目的】从全线粒体基因组水平探究柴达木牛的母系遗传多样性、群体结构及与其他黄牛品种间的遗传关系。【方法】采用全基因组重测序技术对60头柴达木牛进行重测序,获取每个个体的线粒体全基因组全序列,并从Gen Bank下载已公布的我国5... 详细信息

【目的】从全线粒体基因组水平探究柴达木牛的母系遗传多样性、群体结构及与其他黄牛品种间的遗传关系。【方法】采用全基因组重测序技术对60头柴达木牛进行重测序,获取每个个体的线粒体全基因组全序列,并从Gen Bank下载已公布的我国5个北方黄牛品种(即蒙古牛、西藏牛、哈萨克牛、延边牛和安西牛)和2个国外培育品种(荷斯坦牛和日本和牛)的共129条线粒体全基因组相应序列进行综合分析,以揭示柴达木牛线粒体基因组遗传变异,明确其母系遗传多样性水平、群体遗传结构组成、母系遗传背景及与我国北方部分地方黄牛品种、国外培育品种间的遗传关系。【结果】(1)60头柴达木牛线粒体全基因组序列比对分析共发现346个多态位点,其中单一多态位点51个,简约信息位点295个;根据序列间核苷酸变异共确定37种单倍型(H1～H37)。遗传多样性分析显示,柴达木牛线粒体基因组单倍型多样度为(0.981 0±0.006 0),核苷酸多样度为(0.003 3±0.000 2),提示其拥有丰富的母系遗传多样性。(2)系统发育分析表明,柴达木牛拥有普通牛和瘤牛2大母系支系,且以普通牛T支系为主,拥有T1、T2、T3、T4、I1和I2共6种亚单倍型组,提示柴达木牛拥有普通牛和瘤牛血统,有两个母系起源。(3)群体遗传分化分析表明,柴达木牛与蒙古牛、西藏牛、哈萨克牛、延边牛、日本和牛遗传分化程度均很弱,而与安西牛、荷斯坦牛达到中等遗传分化程度。(4)聚类分析显示,柴达木牛与蒙古牛聚类关系最近,与西藏牛、哈萨克牛、安西牛、延边牛聚类关系相对较近,与日本和牛、荷斯坦牛聚类关系较远,其聚类结果与分化程度基本一致。【结论】柴达木牛拥有丰富的母系遗传多样性,由普通牛和瘤牛两个母系支系组成,含有T1、T2、T3、T4、I1和I2共6种亚单倍型组,推测其有2个母系起源。柴达木牛与蒙古牛亲缘关系最近,与西藏牛、哈萨克牛、延边牛、安西牛遗传关系较近,而与日本和牛、荷斯坦牛遗传关系较远。

关键词：柴达木牛 mt DNA 母系起源群体结构

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如何依法推动基层动物卫生监督执法工作

畜牧兽医科技信息 2024年第1期 96-98页

作者：朱宗林阜南县农业农村局朱寨畜牧兽医站安徽阜南236306

动物卫生监督执法工作关乎消费者的食品安全,创新和优化动物卫生监督执法管理工作,能有效提高动物性食品的质量安全。本文将详细分析基层动物卫生监督执法过程中存在的问题,并且提出相应的解决对策,以提高执法力度,更好地保障动物性食... 详细信息

动物卫生监督执法工作关乎消费者的食品安全,创新和优化动物卫生监督执法管理工作,能有效提高动物性食品的质量安全。本文将详细分析基层动物卫生监督执法过程中存在的问题,并且提出相应的解决对策,以提高执法力度,更好地保障动物性食品安全。

关键词：动物检疫卫生监管存在问题应对策略

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猪尼帕病毒的诊断、治疗和疫苗研发情况

畜牧兽医科技信息 2024年第4期 153-155页

作者：马兵祥山东省滨州市邹平市农业农村局青阳畜牧兽医站山东邹平256217

尼帕病毒病(Nipah或Nee-pa)是一种由尼帕病毒(Nipah virus)引起的人畜共患病,尼帕病毒属于副粘病毒科Henipavirus属。在人类中,该病毒导致快速发展成严重疾病,其特征可能是严重的呼吸道疾病或致命的脑炎。6月龄以下的猪感染可能会出现... 详细信息

尼帕病毒病(Nipah或Nee-pa)是一种由尼帕病毒(Nipah virus)引起的人畜共患病,尼帕病毒属于副粘病毒科Henipavirus属。在人类中,该病毒导致快速发展成严重疾病,其特征可能是严重的呼吸道疾病或致命的脑炎。6月龄以下的猪感染可能会出现呼吸道疾病和神经症状。尼帕病毒在人类和猪中的高致病性,但当下仍缺乏对抗这种病毒感染的疫苗或治疗方法,这已经引起了全世界研究人员的关注。

关键词：尼帕病毒猪治疗疫苗

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褪黑素浸种对铝胁迫下苜蓿种子萌发及幼苗抗氧化生理的影响

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草地学报 2024年第2期32卷 535-542页

作者：李启娇崔东毅段新慧刘莉许文花李庆玺郑立文任健朱丽敏马向丽云南农业大学云南昆明650201 迪庆州畜牧兽医科学研究院云南香格里拉674400

为探明外源褪黑素(Melatonin, MT)溶液浸种对铝胁迫下紫花苜蓿(Medicago sativa L.)种子萌发及幼苗生长的影响,本试验以‘WL525HQ’(耐铝)和‘三得利’(敏铝)紫花苜蓿为材料,使用不同浓度MT溶液(0,100,200,400,800μmol·L^(-1))浸种,... 详细信息

为探明外源褪黑素(Melatonin, MT)溶液浸种对铝胁迫下紫花苜蓿(Medicago sativa L.)种子萌发及幼苗生长的影响,本试验以‘WL525HQ’(耐铝)和‘三得利’(敏铝)紫花苜蓿为材料,使用不同浓度MT溶液(0,100,200,400,800μmol·L^(-1))浸种,测定铝胁迫(1 mmol·L^(-1))下种子萌发、幼苗生长、幼苗抗氧化生理等指标。结果表明,铝胁迫抑制了紫花苜蓿种子萌发及幼苗生长,MT浸种通过提高抗氧化酶活性、减少H2O2和丙二醛的积累来减轻铝胁迫给紫花苜蓿带来的氧化伤害;且随着MT溶液浓度的增加,紫花苜蓿种子发芽率、发芽势、根长、株高、生物量及根系抗氧化酶活性呈先升后降趋势,H2O2和丙二醛含量呈先降后升趋势,‘WL525HQ’的变化幅度高于‘三得利’。综合发芽指标、生长指标、抗氧化酶活性、H2O2和丙二醛含量评价不同浓度MT对苜蓿铝毒害的缓解效果表明:200μmol·L^(-1)处理效果较好,400μmol·L^(-1)次之,800μmol·L^(-1)最差。

关键词：褪黑素紫花苜蓿铝胁迫种子萌发幼苗生长

新时期山地丘陵地区发展中小规模肉牛养殖困境与建议——以贵州亚热带地区为例

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畜牧兽医科技信息 2024年第1期 80-82页

作者：汪勇张丽冉江张凯凯罗甸县农业农村局贵州罗甸550100 贵州省畜牧兽医研究所贵州罗甸550005

贵州亚热带区位于贵州南部中低海拔的亚热带地区,地理和气候独特,因海拔落差大形成高山与丘陵地形,以传统农业为主产业。随着贵州草食畜牧业发展,中小规模或是家庭牧场肉牛养殖逐渐成为该区域群众经济增长动力之一,但面临生产成本高、... 详细信息

贵州亚热带区位于贵州南部中低海拔的亚热带地区,地理和气候独特,因海拔落差大形成高山与丘陵地形,以传统农业为主产业。随着贵州草食畜牧业发展,中小规模或是家庭牧场肉牛养殖逐渐成为该区域群众经济增长动力之一,但面临生产成本高、科技支撑不足和融资难等一系列困境。本文从该地区的地理和气候特点、农村社会经济状况及肉牛高效养殖等方面入手,提出发展适度规模联合经营模式,通过政策引导与市场调控、稳定产业政策、提高科技能力等方面提出建议,希望能够为推动贵州亚热带地区肉牛业的可持续发展提供思路。

关键词：肉牛养殖亚热带地区中小规模

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规模化养殖蛋鸡鸡病预防的饲养管理策略

畜牧兽医科技信息 2024年第3期 180-182页

作者：王孝利通许县农业农村局-通许县乡镇畜牧兽医站河南通许475400

蛋鸡的规模化养殖不仅能够有效提升养殖基础设施的单位面积使用效率、降低养殖成本,还能够有效增加养殖农户的经济效益,从而为拓展养殖规模和养殖体系的构建奠定基础。但是目前规模化养殖过程中会发生复杂的蛋鸡疾病问题,因此需要饲养... 详细信息

蛋鸡的规模化养殖不仅能够有效提升养殖基础设施的单位面积使用效率、降低养殖成本,还能够有效增加养殖农户的经济效益,从而为拓展养殖规模和养殖体系的构建奠定基础。但是目前规模化养殖过程中会发生复杂的蛋鸡疾病问题,因此需要饲养技术人员能够有效针对规模化养殖过程中的饲养管理策略进行全面优化,对常见的蛋鸡疾病暴发因素进行全面分析和控制,为进一步健全规模化养殖的管理环节起到促进作用,并对推动我国的蛋鸡养殖规范化发展产生深远影响。

关键词：规模化养殖蛋鸡病预防饲养管理

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