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HPLC指纹图谱结合化学模式识别和多成分定量不同产地甘松的质量评价

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中草药 2024年第3期55卷 956-968页

作者：王姿杨邢耀莹付文芮王露邓小斌庞哲崔治家邵晶甘肃中医药大学药学院西北中藏药省部共建协同创新中心甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室甘肃省中药药理与毒理学重点实验室

目的建立不同产地甘松Nardostachys jatamansi的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，并结合化学模式识别法探究不同产地甘松化学成分差异，评价不同产地、不同批次甘松药材的质量。方法采用HPLC法建立甘肃、青海、四川16批次甘松的指... 详细信息

目的建立不同产地甘松Nardostachys jatamansi的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，并结合化学模式识别法探究不同产地甘松化学成分差异，评价不同产地、不同批次甘松药材的质量。方法采用HPLC法建立甘肃、青海、四川16批次甘松的指纹图谱，并对指标成分进行含量测定。进行相似度评价结合聚类分析（cluster analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）等模式识别技术进行分析。结果 16批次甘松HPLC指纹图谱共匹配到60个共有峰，通过与对照品比对，指认出绿原酸、丁香酸、蒙花苷、甘松新酮、马兜铃酮5个色谱峰，指纹图谱相似度范围为0.943～0.999。16批次甘松样品中绿原酸、丁香酸、蒙花苷、甘松新酮、马兜铃酮含量测定变化范围分别为1.046 5～4.975 3、0.028 4～0.108 7、0.016 7～0.157 4、7.442 1～37.869 1、0.673 7～4.306 5 mg/g,5种成分在不同产地间均具有显著性差异。HCA将16批次甘松分为3类；PCA得不同批次甘松质量差异较大；经OPLS-DA筛选出了绿原酸、丁香酸、甘松新酮、马兜铃酮等31个差异成分。指纹图谱综合评价结果表明S4、S7、S10甘松样本质量较好。结论确定了绿原酸、丁香酸、甘松新酮、马兜铃酮4种指标成分作为评价甘松质量差异的潜在标志性成分，建立的甘松HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法稳定、可靠，可为甘松药材的质量控制、综合评价和临床应用的有效性提供科学依据。

关键词：甘松 HPLC 指纹图谱绿原酸丁香酸蒙花苷甘松新酮马兜铃酮化学模式识别

中药黄酮类成分干预多囊卵巢综合征HPO轴分泌紊乱的研究进展

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中华中医药学刊 2024年

作者：李泉洋吴国泰王瑞琼甘肃省中药药理与毒理学重点实验室甘肃中医药大学药学院

多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome， PCOS)是一种以内分泌异常为主要特征，以月经紊乱、不孕、多毛等为主要临床表现的生殖内分泌代谢疾病，严重影响患者的生育健康。下丘脑-垂体-卵巢轴(Hypothalamic-pituitary-ovarian axis... 详细信息

多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome， PCOS)是一种以内分泌异常为主要特征，以月经紊乱、不孕、多毛等为主要临床表现的生殖内分泌代谢疾病，严重影响患者的生育健康。下丘脑-垂体-卵巢轴(Hypothalamic-pituitary-ovarian axis， HPO轴)在PCOS中存在分泌异常，如促性腺激素释放激素(Gonadotropin Releasing Hormone， GnRH)脉冲频率异常、黄体生成素(Luteinizing Hormone， LH)/卵泡刺激素(Follicle-stimulating Hormone， FSH)比率升高、肾上腺源与卵巢源的雄激素过分泌等。近年来中药在防治PCOS中应用广泛并取得积极的疗效。黄酮类成分是中药常见的活性成分之一，其通过抗炎、抗氧化、影响自噬与凋亡等途经及调控PI3K/AKT通路、TGF-β1/Smad通路、MAPK/ERK通路等对多囊卵巢综合征HPO轴激素紊乱具有改善作用。该文系对近年来黄酮类成分治疗多囊卵巢综合征HPO轴分泌紊乱作用机制进行综述及分析，为其进一步开发和治疗PCOS提供理论参考。

关键词：多囊卵巢综合征下丘脑-垂体-卵巢轴黄酮类成分作用机制

基于网络药理学及动物实验探讨温经汤治疗多囊卵巢综合征的作用机制

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中药药理与临床 2024年第3期40卷 36-42页

作者：李泉洋王楚王文杜国辉靳英英吴国泰王瑞琼甘肃中医药大学药学院兰州730000 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室兰州730000

目的:基于网络药理学与动物实验,探讨温经汤治疗多囊卵巢综合征(Polycystic Ovarian Syndrome,PCOS)的作用机制。方法:在TCMSP、BATMAN-TCM、Gene Cards、Dis Genet数据库分别检索温经汤的主要活性成分与靶点,PCOS疾病靶点,并将药物靶... 详细信息

目的:基于网络药理学与动物实验,探讨温经汤治疗多囊卵巢综合征(Polycystic Ovarian Syndrome,PCOS)的作用机制。方法:在TCMSP、BATMAN-TCM、Gene Cards、Dis Genet数据库分别检索温经汤的主要活性成分与靶点,PCOS疾病靶点,并将药物靶点与疾病靶点取交集。运用STRING数据库进行蛋白质相互作用分析,借助Metascape平台进行基因本体GO功能富集分析和京都基因与基因组百科全书KEGG通路富集分析。通过来曲唑联合高脂饲料诱导PCOS小鼠模型,给予不同剂量温经汤干预,观察各组小鼠体质量变化,空腹血糖水平及卵巢组织病理形态;采用ELISA法与免疫组化法检测小鼠血液与卵巢组织中核心靶点和核心通路的表达。结果:温经汤筛选出活性成分253个,主要包括苯代南蛇碱、甘草酚、芍药素酮、吴茱萸碱、等,与536个疾病靶点取交集后得到118个共同靶点,核心靶点包括AKT1、TP53、STAT3、TNF、VEGFA、IL6和EGFR等;GO富集在BP中主要包括激素反应、多肽反应、促进蛋白质磷酸化、等;MF主要包括蛋白质同源二聚体活性、血红素结合蛋白和四吡咯结合等;CC主要包括核膜、侧膜及膜筏等;KEGG富集发现HIF-1、PI3K/AKT及TNF等信号通路能在温经汤治疗PCOS中起关键作用。动物实验结果显示,与正常对照组比较,模型对照组体质量变化量显著增加(P<0.01),空腹血糖含量明显增加(P<0.05),血清中IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01),卵巢组织中VEGFA表达显著上调,AKT、HIF-1α表达显著下调(P<0.01),卵巢组织中原始卵泡数量增多,卵泡颗粒细胞层数减少,卵巢指数显著降低(P<0.05);与模型对照组相比,温经汤10.14、20.28、40.56 g/kg组小鼠体质量变化量明显降低(P<0.05),血清中IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.01),卵巢组织中VEGFA表达显著下调,AKT、HIF-1α表达明显上调(P<0.05或P<0.01),卵泡颗粒细胞层厚度增加,黄体数量增多,可见各发育时期的卵泡。结论:温经汤可干预卵巢组织PI3K/AKT/HIF-1α/VEGF信号通路相关蛋白表达,减轻机体炎性反应,可能是其治疗PCOS的作用机制之一。

关键词：温经汤多囊卵巢综合征网络药理学血管内皮生长因子蛋白激酶B

龙胆总苷调控SREBP-1C/ACC1/FASN信号通路缓解酒精性肝病

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中药药理与临床 2024年

作者：曹后康杨超越张志远李波钟明利张可锋广西药物分子发现与成药性优化重点实验室桂林医学院高发病防治药理学重点实验室

目的：研究龙胆总苷对酒精性肝病（ALD）小鼠的保护作用，并基于固醇调节元件结合蛋白1c/乙酰辅酶A羧化酶1/脂肪酸合成酶（SREBP-1C/ACC1/FASN）信号通路探讨其作用机制。方法：48只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、水飞蓟素150 mg... 详细信息

目的：研究龙胆总苷对酒精性肝病（ALD）小鼠的保护作用，并基于固醇调节元件结合蛋白1c/乙酰辅酶A羧化酶1/脂肪酸合成酶（SREBP-1C/ACC1/FASN）信号通路探讨其作用机制。方法：48只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、水飞蓟素150 mg/kg组、龙胆总苷50、100、200 mg/kg组，每组8只。第1周，正常对照组小鼠灌胃蒸馏水，其余各组灌胃56%可食用酒精，同时水飞蓟素150 mg/kg组和龙胆总苷各剂量组灌胃相应药物，每天1次（10 mL/kg）；第2周，灌胃56%可食用酒精变为每天2次，每次10 mL/kg，其余操作与第1周相同。生化法检测小鼠血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）、直接胆红素（DBIL）和间接胆红素（TBIL）水平，以及肝组织中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、总胆固醇（TC）和总甘油三酯（TG）含量。苏木精-伊红染色和油红O染色观察肝组织病变并评分。蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测肝组织中SREBP-1C、ACC1、FASN蛋白和mRNA表达。结果：与正常对照组比较，模型对照组小鼠病理学评分、血清ALT、AST、ALP、γ-GT、DBIL、TBIL活力或含量和肝组织MDA、TC、TG含量显著升高，而T-SOD和GSH-PX活力显著降低（P理学评分、ALT、AST、ALP、γ-GT、DBIL、TBIL、MDA、TC和TG活力或含量显著降低，T-SOD和GSH-PX活力明显增加，且SREBP-1C、ACC1、FASN蛋白和mRNA表达明显下调（P<0.05或P<0.01）。结论：龙胆总苷能够有效缓解小鼠ALD，抑制肝组织氧化应激和脂质蓄积，其作用机制可能与抑制SREBP-1C/ACC1/FASN信号通路有关。

关键词：龙胆总苷酒精性肝病固醇调节元件结合蛋白1c/乙酰辅酶A羧化酶1/脂肪酸合成酶信号通路脂质蓄积

重型载货运营卡车司机的疲劳状况及影响因素分析

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环境与职业医学 2024年第7期41卷 789-795页

作者：张建江王少颖陈思萍刘建铃宁德师范学院医学院福建省毒物与药物毒理学重点实验室福建宁德352100 宁德师范学院医学院临床医学教研室福建宁德352100 韶关学院医学院广东韶关512005

[背景]疲劳驾驶是现代社会公路交通事故的重要诱因,重型载货运营卡车司机疲劳状况引起广泛关注。目前,我国对重型载货运营卡车司机的疲劳状况及其影响因素的研究比较薄弱。[目的]分析重型载货运营卡车司机的疲劳状况以及工作时间、失眠... 详细信息

[背景]疲劳驾驶是现代社会公路交通事故的重要诱因,重型载货运营卡车司机疲劳状况引起广泛关注。目前,我国对重型载货运营卡车司机的疲劳状况及其影响因素的研究比较薄弱。[目的]分析重型载货运营卡车司机的疲劳状况以及工作时间、失眠和职业倦怠等因素对其疲劳状况的影响。[方法]采用整群抽样的方法,于2023年7—8月选取新疆维吾尔自治区W市3个行政区的长途货运物流市场(站)的重型载货运营卡车司机为调查对象进行横断面研究。使用自行设计的问卷调查重型载货运营卡车司机的人口信息学特征和职业特征,并采用中文版《疲劳量表-14》、《阿森斯失眠量表》和《职业倦怠量表》对其疲劳、失眠和职业倦怠状况进行测量。采用Mann-Whitney U检验和Kruskal-Wallis H检验比较组间差异,Spearman相关系数分析各变量之间的相关性,以疲劳状况为应变量进行分层回归,研究各自变量对疲劳状况的影响。[结果]有效问卷311份,有效率88.86%(311/350)。调查对象的身体疲劳、脑力疲劳和疲劳总分的中位数和第25、75百分位数[M(P_(25),P_(75))]分别为3.00(2.00,4.00)、2.00(1.00,3.00)和5.00(4.00,6.00)分。分组比较结果显示,除是否吸烟外,不同年龄、婚姻状况、子女数量、文化程度、从事货运时间、日均工作时间和平均月收入组疲劳总分差异均有统计学意义(P<0.05);无睡眠障碍、可疑失眠和失眠组疲劳总分的差异有统计学意义(P<0.001);无、中度和重度职业倦怠组疲劳总分的差异亦有统计学意义(P<0.001)。失眠状况得分与身体疲劳(r_(s)=0.507)、脑力疲劳(r_(s)=0.547)和疲劳总分(r_(s)=0.618)间均呈正相关(P<0.001)。分层回归分析结果提示,子女数量增加、日均工作时间延长、失眠问题和个人成就感降低维度得分的增加与重型载货运营卡车司机疲劳状况呈正向关联(P<0.05),所建立的重型载货运营卡车司机疲劳状况的多元回归方程为:疲劳总分=7.579+0.581×子女数量+0.916×日均工作时间+0.434×失眠状况得分+0.754×个人成就感降低维度得分。[结论]重型载货运营卡车司机的疲劳状况不容乐观,子女数量增加、日均工作时间延长、失眠症状严重和个人成就感降低维度得分增加可能对其疲劳状况具有负面影响。

关键词：重型载货运营卡车司机疲劳失眠职业倦怠

PI3K/Akt信号通路调控子宫内膜异位症及中药干预作用研究进展

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中国临床药理学与治疗学 2024年第5期29卷 501-511页

作者：李泉洋郝亚芳吴国泰王瑞琼甘肃中医药大学药学院甘肃兰州730000 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室甘肃兰州730000

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是由于子宫内膜间质或者腺体异常定植到子宫腔被覆黏膜以外部位而导致的疾病。磷脂肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路参与病灶血管形成、异位组织... 详细信息

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是由于子宫内膜间质或者腺体异常定植到子宫腔被覆黏膜以外部位而导致的疾病。磷脂肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路参与病灶血管形成、异位组织细胞自噬与凋亡和迁移侵袭等过程,是调控EMs病理特性的经典通路之一。中药多组分、多靶点、多途径的特性在治疗EMs进程中优势显著,部分中药有效成分及中药复方通过干预PI3K/Akt信号通路,进而达到抑制内膜异位组织进展、减轻疼痛和缓解纤维化病变的治疗作用。该文通过阐述PI3K/Akt信号通路关键靶点与EMs的联系,归纳并总结国内外近年来中药通过调控PI3K/Akt信号通路治疗EMs的研究现状,旨在为利用中药及复方治疗EMs提供新的视角和思路。

关键词：子宫内膜异位症 PI3K/Akt信号通路中药经典方剂

LC-MS法在治疗性寡核苷酸药物检测中的应用

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药物分析杂志 2024年第7期44卷 1113-1124页

作者：李丽丽吴妮席婉琳翟宝祺李皛刘平兰宋洪涛赵芊山东绿叶制药有限公司先进药物递释系统全国重点实验室烟台264003 中国医学科学院北京协和医院临床药理学研究中心疑难重症和罕见病国家重点实验室、国家药品监督管理局药物临床研究与评价重点实验室创新药物临床PK和PD研究北京重点实验室北京100730

治疗性寡核苷酸(oligonucleotides,OGNs)药物是人工化学合成的短单链或双链核酸,长度通常为15~30个碱基对。OGNs作为一种新的治疗药物正在迅速发展,并在各种疾病领域的药物发现和开发中受到越来越多的关注。与欧美相比,除Spinraza(nusin... 详细信息

治疗性寡核苷酸(oligonucleotides,OGNs)药物是人工化学合成的短单链或双链核酸,长度通常为15~30个碱基对。OGNs作为一种新的治疗药物正在迅速发展,并在各种疾病领域的药物发现和开发中受到越来越多的关注。与欧美相比,除Spinraza(nusinersen)作为孤儿药在中国获批上市外,暂无其他OGNs药物在国内上市。国内OGNs药物开发起步较晚,仍然处于发展初期,但由于国内患者群体基数较大,需求较多,未来伴随OGNs药物开发的持续推进,以及国内企业相应技术的逐步成熟,我国OGNs药物市场有望迎来快速发展。OGNs药物由于其独特的理化性质,生物分析方法开发难度大,目前,国内关于OGNs药物定量分析方法的报道还很少。开发一种灵敏可靠的方法来表征生物样品中的OGNs是研究其药代动力学和药效学性质的关键。相对于传统的ELISA法,LC-MS法可以同时定量完整OGNs及其代谢物,特别是高分辨质谱的广泛应用不仅可以提供目标OGNs的定量信息,还可以对代谢物进行鉴定,提供碱基组成、序列结构等信息,目前已成为OGNs定量分析的首选方法。本文主要描述了LC-MS在治疗性OGNs药物检测中的应用,并阐述了其优点和局限性,最后探讨了LC-MS用于检测OGNs的发展趋势,即更低的检测水平和潜在的通用方法。

关键词：治疗性寡核苷酸药物液相色谱质谱联用杂交提取离子对试剂亲水作用液相色谱法高分辨质谱

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阿片类药物诱导瘙痒的机制研究进展

中国药理学通报 2024年

作者：马芳周培岚苏瑞斌军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室南京中医药大学药学院

瘙痒是临床使用阿片类药物镇痛的患者普遍存在的严重不良反应之一。大量研究已经阐明阿片类药物的镇痛机制,但阿片类药物诱导瘙痒的机制尚不明确,瘙痒与镇痛之间的关系也模糊不清。目前的研究发现,阿片类药物作用于μ、κ及δ阿片受体后... 详细信息

瘙痒是临床使用阿片类药物镇痛的患者普遍存在的严重不良反应之一。大量研究已经阐明阿片类药物的镇痛机制,但阿片类药物诱导瘙痒的机制尚不明确,瘙痒与镇痛之间的关系也模糊不清。目前的研究发现,阿片类药物作用于μ、κ及δ阿片受体后,直接或间接影响瘙痒关键受体——胃泌素释放肽受体的功能,进而影响瘙痒信息传递。神经介素B、神经肽Y、B型利钠肽等神经肽,以及其他受体如瞬时受体电位香草素1受体、N-甲基-D-天冬氨酸受体、5-羟色胺受体等,在吗啡诱导的瘙痒中也具有重要作用。此外,阿片类药物所致瘙痒的预防和治疗也是围手术期吗啡镇痛的难点和热点之一。因此,明确瘙痒的具体发生机制,对寻找新的研究思路及预防和治疗阿片类药物诱导的瘙痒具有重要意义。

关键词：阿片类诱导的瘙痒瘙痒与镇痛瘙痒机制阿片受体胃泌素释放肽受体瘙痒治疗

基于P38 MAPK信号通路探讨乌梅丸对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜屏障修复的作用机制

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中药药理与临床 2024年

作者：杜丽东王颖赵冠宇邵晶任远仇正英吴国泰辛蕊华中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃中医药大学药学院甘肃省中药药理与毒理学重点实验室

目的：基于p38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）信号通路探讨乌梅丸对UC模型小鼠肠黏膜屏障损伤修复的作用机制。方法：40只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、美沙拉嗪0.5 g/kg组、乌梅丸13.04、26.09 g/kg组。正常对照组小... 详细信息

目的：基于p38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）信号通路探讨乌梅丸对UC模型小鼠肠黏膜屏障损伤修复的作用机制。方法：40只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、美沙拉嗪0.5 g/kg组、乌梅丸13.04、26.09 g/kg组。正常对照组小鼠自由饮水，造模组小鼠自由饮用2%的葡聚糖硫酸钠（DSS）水溶液。造模同时，正常对照组和模型对照组灌胃生理盐水，各给药组灌胃相应药物。评价小鼠疾病活动指数（DAI）；HE染色观察结肠组织形态并评分；ELISA法检测小鼠血清二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸水平；实时荧光定量PCR法（RT-qPCR）检测结肠组织闭合蛋白1（Occludin1）、封闭蛋白1（Claudin1）、闭锁小带蛋白1（Zo1）mRNA的表达；蛋白免疫印迹法（WB）检测结肠组织Occludin1、Claudin1、ZO1和p38MAPK、细胞外信号调节激酶（ERK）、氨基末端激酶（JNK）蛋白及其磷酸化产物p-ERK、p-JNK、p-p38MAPK的表达。结果：与正常对照组比较，模型对照组小鼠造模第4 d起DAI评分、HE评分、外周血DAO、D-乳酸水平均显著升高（P<0.01）；结肠组织Occludin 1、Claudin 1、Zo1mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.01）；结肠组织p-p38MAPK/p38MAPK、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK的比值显著升高（P<0.01）。与模型对照组比较，乌梅丸各组小鼠DAI评分、HS评分均明显降低（P<0.05或P<0.01），结肠Occludin 1、Claudin 1、Zo1mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01）；结肠p-p38MAPK/p38MAPK、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK的比值显著降低（P<0.01）；乌梅丸13.04 g/kg组血清D-乳酸、乌梅丸26.09 g/kg组血清DAO、D-乳酸含量均明显降低（P<0.05或P<0.01）；结论：抑制p38MAPK信号通路蛋白磷酸化、升高紧密连接蛋白的表达可能是乌梅丸修复UC小鼠肠黏膜屏障损伤的机制之一。

关键词：乌梅丸溃疡性结肠炎 P38丝裂原活化蛋白酶信号通路肠黏膜屏障