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槲皮素对口腔鳞癌细胞增殖凋亡等细胞生物学行为及p38/JNK MAPK信号通路的影响

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河北医学 2023年第4期29卷 535-540页

作者：胡硕红郑学彬李富杰海南省海口市中医医院口腔科海南海口570100

目的:探讨槲皮素对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及p38/JNK MAPK信号通路的影响。方法:以体外培养的口腔鳞癌Tac8113细胞为研究对象,分别设置空白对照组,槲皮素低剂量组(25μmoL/L)、高剂量组(50μmoL/L)及阳性对照组(顺铂4μg/mL... 详细信息

目的:探讨槲皮素对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及p38/JNK MAPK信号通路的影响。方法:以体外培养的口腔鳞癌Tac8113细胞为研究对象,分别设置空白对照组,槲皮素低剂量组(25μmoL/L)、高剂量组(50μmoL/L)及阳性对照组(顺铂4μg/mL)。CCK-8法检测槲皮素对口腔鳞癌Tac8113细胞增殖的影响;流式细胞仪检测槲皮素对口腔鳞癌Tac8113细胞凋亡的影响;Transwell实验检测槲皮素对口腔鳞癌Tac8113细胞迁移、侵袭的影响;WB法检测p38/JNK MAPK信号通路相关蛋白表达。结果:与空白对照组相比,槲皮素低、高剂量组及阳性对照组Tac8113细胞增殖活力、迁移数及侵袭数均下降,凋亡率增加(P0.05)。与空白对照组相比,槲皮素低、高剂量组p-p38、p-JNK及Caspase-3蛋白表达增加(P0.05)。结论:槲皮素可以降低口腔鳞癌Tac8113细胞的增殖活力、迁移和侵袭数,诱导Tac8113细胞凋亡,这可能是通过激活p38/JNK MAPK信号通路实现的。

关键词：槲皮素口腔鳞癌细胞细胞生物学行为 p38/JNK MAPK信号通路

血小板胶-胶原生物活性复合膜修复大鼠牙周骨组织缺损

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中国组织工程研究 2019年第14期23卷 2177-2182页

作者：张旭凤符起亚郑根建郭玉苏陈丹宇符方满吴慧王琳海南医学院第一附属医院口腔内科海南省海口市570102 海南省人民医院口腔科海南省海口市570311

背景:近些年,组织工程学的发展为牙周组织缺损的治疗与组织再生提供了新途径。组织工程学治疗手段包括种子细胞、支架和生长因子。血小板胶因含大量血小板生长因子,胶原常被用于支架材料的制备,故血小板胶与胶原生物活性复合膜可为缺损... 详细信息

背景:近些年,组织工程学的发展为牙周组织缺损的治疗与组织再生提供了新途径。组织工程学治疗手段包括种子细胞、支架和生长因子。血小板胶因含大量血小板生长因子,胶原常被用于支架材料的制备,故血小板胶与胶原生物活性复合膜可为缺损组织提供支架及生长因子。目的:观察血小板胶-胶原生物活性复合膜在修复大鼠牙周骨组织缺损中的作用。方法:实验选取Wistar大鼠42只(由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供)。①将胶原裁成5mm×2mm大小,抽取6只大鼠10 mL全血后,从大鼠新鲜全血中获取富血小板血浆,按一定比例加入牛凝血酶、氯化钙和胶原制成血小板胶-胶原复合膜。测定全血及富血小板血浆中血小板计数值,ELISA法测定全血及富血小板血浆中血小板衍生生长因子AB、转化生长因子β、碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的水平。②将剩余36只大鼠建立下颌牙周骨缺损模型(骨缺损大小为5 mm×2 mm,磨除牙根面牙骨质)后,随机分成2组。血小板胶-胶原组将血小板胶-胶原复合膜置于骨缺损处,而对照组不放置任何材料。2,4和8周后获取2组大鼠牙周组织标本进行苏木精-伊红染色,测定新生牙周骨率、新生牙骨质、新生牙槽骨、新生牙周膜组织高度。免疫组织化学染色观察骨形成蛋白2的表达。结果与结论:①富血小板血浆中血小板计数均值为全血的4.78倍,即全血制备成富血小板血浆后血小板数量显著上升(P 0.05),第4和第8周时,血小板胶-胶原组上述指标均显著高于对照组(P 0.05);④结果提示,血小板胶-胶原生物活性复合膜可明显促进新生牙组织再生,并伴随着骨形态发生蛋白2的表达,减小牙周组织缺损后的修复时间。

关键词：血小板胶胶原生物复合膜下颌牙周骨缺损牙组织再生富血小板血浆骨形态发生蛋白2 组织构建骨形态发生蛋白质类组织工程

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明胶海绵在腭裂修复中的应用

中国组织工程研究 2017年第18期21卷 2900-2905页

作者：胡广伟廖天安王涛王鸿海南省人民医院口腔科海南省海口市570311

背景:在腭裂修复手术中,以往多采用碘仿纱条来填塞腭裂术后两侧松驰切口及覆盖创面。临床中作者发现,采用这种方法处理的患者,术后常出现发热、食欲不振、异物感、继发性出血等并发症。为避免或减少腭裂患者术后出现以上并发症,使用明... 详细信息

背景:在腭裂修复手术中,以往多采用碘仿纱条来填塞腭裂术后两侧松驰切口及覆盖创面。临床中作者发现,采用这种方法处理的患者,术后常出现发热、食欲不振、异物感、继发性出血等并发症。为避免或减少腭裂患者术后出现以上并发症,使用明胶海绵填塞双侧松弛切口,取得了良好的临床效果。目的:对比腭裂患者修复术中创面不同处理方法对伤口愈合效果的影响。方法:根据患儿入院时间,将110例腭裂手术患儿分为2组:2013年1月至2015年12月入院腭裂患儿54例为实验组,2008年1月至2012年12月入院腭裂患儿56例为对照组。实验组采用明胶海绵填塞创面,对照组应用碘仿纱包及碘仿纱条填塞创面,评估患儿术后精神、饮食、体温、创口出血及愈合等情况。术后4周复查,测量患者松弛切口处瘢痕条索宽度。结果与结论:(1)实验组精神、饮食恢复时间和出院时间短于对照组(P<0.05);(2)实验组发热率明显低于对照组(P<0.05),且发热时间短于对照组(P<0.05);(3)实验组术后出血、恶心呕吐发生率明显低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);(4)术后4周,实验组患儿松弛切口处瘢痕条索宽度明显窄于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);(5)结果表明,明胶海绵止血可靠,术后反应轻,伤口愈合快,不影响进食,具有较好的临床应用价值。

关键词：生物材料材料相容性明胶海绵腭裂修复术碘仿纱条

不同材料支架式可摘局部义齿修复牙列缺损的生物相容性分析

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中国组织工程研究 2016年第8期20卷 1171-1176页

作者：林鸿雷王月燕卢阳海口市人民医院口腔医学中心海南省海口市570311 海口市人民医院口腔科海南省海口市570311

背景:支架式可摘局部义齿是修补牙列缺损的主要方式,其铸造材料主要有纯钛材料、钴铬合金材料及Vitallum 2000材料。目的:分析不同材料支架式可摘局部义齿修复牙列缺损的生物相容性。方法:纳入120例牙列缺损患者,年龄24-68岁,均采用支... 详细信息

背景:支架式可摘局部义齿是修补牙列缺损的主要方式,其铸造材料主要有纯钛材料、钴铬合金材料及Vitallum 2000材料。目的:分析不同材料支架式可摘局部义齿修复牙列缺损的生物相容性。方法:纳入120例牙列缺损患者,年龄24-68岁,均采用支架式可摘局部义齿进行修复,其中40例采用钴铬合金材料铸造支架式可摘局部义齿,40例采用纯钛材料铸造支架式可摘局部义齿,40例采用Vitallum 2000材料铸造支架式可摘局部义齿。随访2年,对比3组咀嚼效率、凝血情况、血栓、牙槽骨吸收、患者满意度,以及基牙牙周病及继发龋等不良反应发生率。结果与结论:1咀嚼效率与患者满意率:Vitallum 2000材料组>纯钛材料组>钴铬合金材料组(P均<0.05)。2凝血、血栓、牙槽骨吸收发生率:Vitallum 2000材料组<纯钛材料组<钴铬合金材料组(P均<0.05)。3不良反应发生率:Vitallum 2000材料组<纯钛材料组<钴铬合金材料组(P均<0.05)。4表明Vitallium 2000可摘局部义齿修复牙列缺损,可有效降低义齿性口炎、基牙牙周病及继发龋的发生率,保证舒适度、咀嚼力及语言功能。

关键词：义齿铬合金义齿,局部组织工程生物材料口腔生物材料可摘局部义齿牙列缺损生物相容性纯钛支架钴铬支架 Vitallum 2000支架

自体释氧纳米仿生支架复合软骨细胞构建颞颌关节

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中国组织工程研究 2016年第30期20卷 4469-4475页

作者：王鸿廖天安王涛符良斌胡广伟邓伟海南省人民医院口腔科海南省海口市570311

背景:将自体释氧纳米仿生支架复合软骨细胞在模拟微重力下复合培养构建的活性组织工程骨,不仅具有优良成骨的潜在特性,而且具有自体释氧功能,能有效防止早期血管化不足缺氧导致的移植失败。目的:观察自体释氧纳米仿生支架复合软骨细胞... 详细信息

背景:将自体释氧纳米仿生支架复合软骨细胞在模拟微重力下复合培养构建的活性组织工程骨,不仅具有优良成骨的潜在特性,而且具有自体释氧功能,能有效防止早期血管化不足缺氧导致的移植失败。目的:观察自体释氧纳米仿生支架复合软骨细胞修复不同类型颞颌关节髁状突骨折的效果。方法:将30只SD大鼠随机分为3组,每组10只,其中1组为正常对照,实验1组建立颞颌关节髁状突纵行骨折模型,植入自体释氧纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架与软骨细胞;实验2组建立颞颌关节髁状突横断骨折模型,植入自体释氧纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架与软骨细胞。植入后1,3,6周,采用免疫荧光法检测增殖细胞核抗原阳性细胞数,使用TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况,采用RT-PCR方法检查软骨内成骨标志物Ⅱ型胶原、促软骨形成基因、血管内皮生长因子的表达。结果与结论:(1)实验1组、实验2组不同时间点的增殖细胞核抗原阳性细胞数高于正常对照组(P<0.05),植入后3,6周的软骨细胞凋亡数低于正常对照组(P<0.05),植入后3,6周的Ⅱ型胶原、促软骨形成基因、血管内皮生长因子表达高于正常对照组(P<0.05);(2)实验1组植入后3,6周的增殖细胞核抗原阳性细胞数低于实验2组(P<0.05),植入后3周的软骨细胞凋亡数低于实验2组(P<0.05),植入后3,6周的Ⅱ型胶原、促软骨形成基因、血管内皮生长因子表达高于实验2组(P<0.05);(3)结果表明:自体释氧纳米仿生支架复合软骨细胞修复不同类型颞颌关节髁状突骨折有着一定的差异性。

关键词：纳米复合物软骨细胞下颌骨髁状突组织工程生物材料纳米材料自体释氧纳米仿生支架复合软骨细胞颞颌关节髁状突骨折不同类型骨折增殖凋亡软骨内成骨

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脂多糖可影响及调控牙髓干细胞的增殖与迁移

中国组织工程研究 2019年第29期23卷 4688-4693页

作者：冯儒学蔡仁刚解丹丹海南省干部疗养院(海南省老年病医院)口腔科海南省海口市571100 文昌市人民医院口腔科海南省文昌市571300 海南医学院第一附属医院营养科海南省海口市570102

背景:大量研究证明人牙髓干细胞是一种具有高度自我更新能力以及多向分化潜能的细胞。目的:研究脂多糖激活人牙髓干细胞后对细胞增殖及迁移的影响,并探索脂多糖对TLR4、矿化相关基因及MAPK信号通路的影响。方法:脂多糖模拟深龋时细菌入... 详细信息

背景:大量研究证明人牙髓干细胞是一种具有高度自我更新能力以及多向分化潜能的细胞。目的:研究脂多糖激活人牙髓干细胞后对细胞增殖及迁移的影响,并探索脂多糖对TLR4、矿化相关基因及MAPK信号通路的影响。方法:脂多糖模拟深龋时细菌入侵牙髓的微环境。取人牙髓组织,采用组织块酶消化法分离培养人牙髓干细胞,①以0,0.1,1,10mg/L脂多糖干预1,3,5,7d,以MTT法检测脂多糖对人牙髓干细胞增殖能力;②将第3代人牙髓干细胞分为对照组和1mg/L脂多糖处理组,以细胞免疫荧光检测牙髓干细胞中Toll样受体4的表达,以反转录PCR检测矿化相关基因碱性磷酸酶、牙本质涎磷蛋白和骨桥素mRNA表达变化;③取0.1,1,10mg/L脂多糖干预24h牙髓干细胞,以Transwell小室检测细胞的迁移能力;④以1mg/L脂多糖刺激牙髓干细胞0,15,30,60,120min,以Western blot检测促分裂原活化蛋白激酶信号通路的蛋白p38及ERK1/2的活化水平。实验方案经海南省干部疗养院伦理委员会批准(伦理审批号:20180410)。结果与结论:与对照组(0mg/L脂多糖)相比,脂多糖组细胞增殖能力均下降,人牙髓干细胞中Toll样受体4表达增加,矿化相关基因牙本质涎磷蛋白、骨桥素和碱性磷酸酶mRNA的表达水平增加,迁移细胞数量增加,且随着脂多糖作用时间的延长被激活的p-p38及p-ERK1/2蛋白表达随之增强。提示脂多糖对牙髓干细胞的增殖能力、迁移能力有不同程度影响,且Toll样受体4以及促分裂原活化蛋白激酶信号通路蛋白可能参与脂多糖调控的牙髓干细胞定向分化过程。

关键词：脂多糖人牙髓干细胞 Toll样受体4 p38 ERK1/2 牙本质涎磷蛋白mRNA、骨桥素mRNA、碱性磷酸酶mRNA

人胎儿成骨细胞系hFOB1.19在骨组织工程中的应用

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中国组织工程研究 2023年第20期27卷 3266-3273页

作者：王彦阳徐普中南大学湘雅医学院附属海口医院·海南省口腔医学中心口腔综合治疗科海南省海口市570208

背景:现阶段广泛使用的动物成骨细胞模型的生物学特性与人细胞差距较大;原代人成骨细胞分离培养难提纯、培养代次有限;骨肉瘤细胞有异常生长的风险,都不能完全满足研究需求。1995年,有研究利用猴空泡病毒40转染了人胎儿四肢细胞,筛选得... 详细信息

背景:现阶段广泛使用的动物成骨细胞模型的生物学特性与人细胞差距较大;原代人成骨细胞分离培养难提纯、培养代次有限;骨肉瘤细胞有异常生长的风险,都不能完全满足研究需求。1995年,有研究利用猴空泡病毒40转染了人胎儿四肢细胞,筛选得到一组具有分化为较早期成骨祖细胞——永生化人成骨细胞系hFOB1.19。目的:综述hFOB1.19的基本特性、培养方法及作为骨组织工程材料细胞模型的应用。方法:在中国知网、万方数据、SinoMed、PubMed、Web of Science、Medicine及Cochrane Library数据库中查找从1995年至2022年5月的相关文献,中文检索词为“人胎儿成骨细胞系1.19、人成骨细胞系、永生化细胞、猴空泡病毒40、骨组织工程、骨替代材料、生物材料研究”,英文检索词为“hFOB1.19,Human osteoblast cell line,Immortalized cells,Monkey vacuolating virus 40,Bone tissue engineering,Bone substitute materials,Biomaterials research”,筛选后得到73篇文献进行综述。结果与结论:(1)hFOB1.19在形态、表型、核型、生物学特性及分化潜能方面与体内成骨细胞高度相似,拥有快速且稳定的生长能力。(2)hFOB1.19已广泛应用于细胞黏附、增殖、分化、矿化、基因表达及蛋白合成方面,以检验骨组织工程材料的生物相容性及成骨性能。(3)hFOB1.19能够弥补动物细胞来源不同、骨肉瘤细胞异常增殖可能、原代成骨细胞分离难及传代次数少的缺点,在骨组织工程实验应用中性能稳定,增殖良好,但因培养条件特殊,细胞传代次数有限及生物安全性等方面的问题,目前在骨组织工程材料领域应用尚且不够广泛。(4)当前,骨组织工程材料发现速度快,但开发过程中缺乏系统全面的研究体系及统一的研究标准,文章总结hFOB1.19在不同研究中的应用,旨在为研究者们提供方法选择引导并推动相关标准完善。

关键词：人胎儿成骨细胞系1.19 人成骨细胞系永生化细胞猴空泡病毒40 骨组织工程骨替代材料生物材料研究

不同表面处理方法在纳米混合树脂复合材料修复中的应用

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上海口腔医学 2020年第6期29卷 591-595页

作者：李苑荟邢孔才王怡婷陶巍杨超海口市第三人民医院口腔科海南海口571100 海南省人民医院口腔科海南海口570311 海南医学院第一附属医院口腔科海南海口570100 华西口腔医院口腔科四川成都610044

目的:分析不同表面处理方法和粘接剂自酸蚀功能单体对树脂-复合材料界面即时修复粘结强度和完整性的影响。方法:采用纳米树脂复合材料制作98个树脂复合材料,随机分为A1、A2、B1、B2、C、D组,各14个试件。表面未处理的试件作为阳性对照组... 详细信息

目的:分析不同表面处理方法和粘接剂自酸蚀功能单体对树脂-复合材料界面即时修复粘结强度和完整性的影响。方法:采用纳米树脂复合材料制作98个树脂复合材料,随机分为A1、A2、B1、B2、C、D组,各14个试件。表面未处理的试件作为阳性对照组(14个试件)。A1组用Gluuma通用粘接剂系统抛光,A2组用Gluuma通用粘接剂系统抛光、喷砂,B1组用Tokuyama Bond ForceⅡ^(TM)粘结系统抛光,B2组用Tokuyama Bond ForceⅡ^(TM)抛光、喷砂C组仅经抛光样品组。D组仅做喷砂。采用与底物相同的树脂复合材料,对修复后试件进行剪切粘结强度(shear bond strength,SBS)测试,所有样本均进行电子显微镜扫描、测定表面轮廓,进行失效分析。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学处理。结果:D组修复粘结强度显著高于阴性对照组(P0.05);B2组、阳性对照组粘结强度无显著差异(P>0.05)。除喷砂、TBFⅡ外,阳性对照组粘合强度值显著高于A1、C组(P口腔卫生。

关键词：表面处理粘接剂自酸蚀功能单体树脂-复合材料界面即时修复粘结强度完整性

幽门螺杆菌感染的密度和在胃黏膜层不同深度的定植对其致病性和抗生素耐药的影响

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世界华人消化杂志 2016年第3期24卷 347-354页

作者：王莉谢会忠刘友斌王炳淑张丽媛叶长华陈桂妃符仲标刘昌江温必盛海南省农垦总医院病理科海南省海口市570311 海南省农垦总医院消化内科海南省海口市570311 海南省农垦总医院肝病科海南省海口市570311 海南省农垦总医院内镜科海南省海口市570311

目的:观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)在胃黏膜的感染密度及在胃黏膜层不同深度的分布定植对胃黏膜炎症的影响,探讨H.pylori生物膜在其致病性及对抗生素产生耐药机制中的作用.方法:组织病理学观察158例H.pylori阳性慢性... 详细信息

目的:观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)在胃黏膜的感染密度及在胃黏膜层不同深度的分布定植对胃黏膜炎症的影响,探讨H.pylori生物膜在其致病性及对抗生素产生耐药机制中的作用.方法:组织病理学观察158例H.pylori阳性慢性胃炎或消化性溃疡患者的胃黏膜病变活检标本,应用苏木精-伊红染色对胃黏膜炎症程度及活动程度分级并观察H.pylori感染密度,比较两者的相关性.应用免疫组织化学染色观察H.pylori在黏膜表面、胃小凹及浅层腺体的分布,比较胃黏膜层不同深度H.pylori定植情况及其感染密度与炎症的关系.结果:免疫组织化学染色显示H.pylori定植在胃黏膜层表面、小凹及浅层腺体.158例胃黏膜组织,黏膜表面H.pylori(+)41例、(++)38例、(+++)79例;小凹(+)29例、(++)42例、(+++)74例;浅层腺体(+)51例、(++)51例、(+++)39例.胃黏膜表面及小凹H.pylori密度与黏膜炎症程度有相关性(P0.05).158例胃黏膜组织,黏膜表面H.pylori(+)40例、(++)39例、(+++)79例;小凹(+)29例、(++)41例、(+++)74例;浅层腺体(+)48例、(++)53例、(+++)29例.胃黏膜层表面、小凹及浅层腺体H.pylori密度与胃黏膜炎症活动性均有相关性(P<0.05),H.pylori在胃黏膜层不同深度密度越高胃黏膜炎症活动程度越重.结论:H.pylori可以定植在胃黏膜层表面、小凹和浅层腺体,H.pylori感染密度与胃黏膜炎症程度有相关性.具有细菌数量(感染密度)依赖性的H.pylori生物膜可能参与了其致病性及对抗生素的耐药.

关键词：幽门螺杆菌定植感染密度生物膜致病性抗生素耐药